本发明涉及生物医药及临床诊断技术领域，更具体的说是涉及一种基于含钒钼杂多酸叶酸化合物负载在c3n4上所形成的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合物替代肌氨酸氧化酶/过氧化氢氧化酶双重模拟物的合成方法以及同时显色检测h2o2和肌氨酸的技术。
背景技术：
前列腺癌(pca)严重困扰着男性患者，在初期检测中经常用方法有包括直肠指检、直肠超声、前列腺穿刺活检、电子计算机断层扫描(ct)和多重内反射(mir)等，这些检测手段价格昂贵、操作复杂，同时对患者造成极大的心理负担以及生理伤害，还会导致对病情的误判或过度治疗，发展一种高效便捷、快速的具有人文关怀的方法迫在眉睫。sreekumar组最早发现肌氨酸(n-甲基甘氨酸)能有效的感应到pca癌细胞的侵入，可以确定癌细胞的生长行为。通过分析病人血液和尿液的肌氨酸浓度的变化，可以准确判断pca癌细胞的生长阶段。因此，肌氨酸成为一种有效且准确的生物标记物来进行pca的临床诊断，当血液或尿液中肌氨酸浓度高于5μm(0.17ppm)时，可以作为pca早期判断依据。
目前，肌氨酸检测方法包括光谱测定法、同位素内标法、荧光时间衰减光谱法等，都存在着操作困难、费时、测试费用偏高等问题。显色免疫分析作为一种分析方法，具有分析过程简单快速、成本低、现象直观容易判断等优点。其原理是利用抗原和抗体的特异性结合反应并通过颜色的变化来检测各种物质(如药物、激素、蛋白质、微生物、癌细胞等)。其中，显色免疫分析由于具有分析过程简便快捷、实用性强、灵敏度高、成本低和直接通过反应过程中颜色的变化进行检测等优点，在众多领域都引起了广泛的关注，发展出酶联免疫法(elisa)、化学发光免疫、免疫芯片法以及胶体金层析法。其中elisa法是通过酶标记物的酶催化3，3-，5，5-四甲基联苯胺(tmb)发生氧化显色反应(无色到蓝色)来判断被测物的含量，常用的标记酶有辣根过氧化物酶(hrp)、碱性磷酸酯酶(ap)和β-d半乳糖苷酶(gal)，采用的氧化剂包括空气和过氧化氢。elisa法操作方便、检测迅速、一次检测样品量大、价廉。但生物酶易受外界温度、体系ph值的影响而变性，且制备、纯化及储存耗时长、价格昂贵、过程复杂，同时样品处理复杂、干扰严重。因此，高效hrp模拟酶的合成越来越受到人们的关注，同时替代h2o2使用环境更友好的氧化剂如氧气更加具有挑战性和实用性。
多酸(heteropolyacids，hpas)是一类具有强氧化性多核金属-氧簇合物。hpas表现出强氧化催化活性，在催化o2、h2o2等氧化剂氧化有机底物的反应中有重要的应用。最早将多酸用于检测的是1887年osmond合成了12-磷钼杂多酸盐(h3pmo12o40)并利用分光光度法测定po43-的含量，其作用原理是生成黄色的h3pmo12o40在可见区有吸收峰。随后含钼的12-硅钼酸、12-锗钼酸、12-砷钼酸均被用于分光光度法检测无机非金属元素、金属离子、药物分子以及蛋白质等，而利用多酸的氧化还原催化性能对于物质的检测目前报道很少。
因此，如何提供一种条件温和，灵敏度及稳定性优异的用于快速检测前列腺癌标记物的材料是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供了一种基于含钒钼杂多酸叶酸化合物负载在c3n4上所形成的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合材料及其合成方法，以及替代肌氨酸氧化酶/过氧化氢氧化酶双重模拟物同时显色检测h2o2和肌氨酸的技术。
为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料，所述复合材料是含有叶酸及钒、钼多酸/氧化石墨烯的复合材料，所述复合材料的通式为：
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)
其中，fa为叶酸分子，n表示多酸的担载量，为任意大于零的数值。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料中，所述复合材料选自
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(5wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(15wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(20wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(25wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(30wt％)中的任意一种。
上述技术方案的有益效果是：具体操作过程中可以根据多酸担载量的多少，确定检测时复合材料的用量。
本发明还公开了所述叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法，包括以下步骤：
(1)将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于蒸馏水中，得到多酸溶液和叶酸溶液；
(2)在搅拌的条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后滴加叶酸溶液，得到混合液；
(3)将步骤(2)得到的混合液进行超声处理，高速离心分离出固体，用蒸馏水洗涤3-6次至没有游离的多酸和叶酸，即得复合材料。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法中，(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4的质量比为1:6：(4-25)，进一步优选为1:6:20。
上述技术方案的有益效果是：以上比例可以保证叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料中保证叶酸和钼钒多酸以一个分子的形式存在并高效地担载在c3n4上。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法中，步骤(1)中，(nh4)5h6pmo4v8o40和蒸馏水的质量比为1：(30-40)，进一步优选为1:30；叶酸和蒸馏水的质量比为1：(30-40)，进一步优选为1:30。
上述技术方案的有益效果是：以上比例可以有效保证叶酸和多酸的浓度适当的以一个分子的形式存在并高效地担载在c3n4上。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法中，步骤(2)中，所述搅拌速度为50-200rpt，进一步优选为50rpt。
上述技术方案的有益效果是：搅拌速度对复合物的合成过程中多酸的担载量产生影响，若搅拌速度太慢多酸担载量小，太快会破坏c3n4的片状结构。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法中，所述叶酸溶液的滴加速度为10滴/min；
上述技术方案的有益效果是：若叶酸溶液的滴加速度过快会造成多酸和叶酸的复合物不沉积在c3n4上；过慢会造成多酸和叶酸之间不反应，导致多酸直接担载在c3n4上，不能形成叶酸修饰的复合材料。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法中，步骤(3)中，所述超声时间为6-24h，进一步优选为24h，超声频率在20-40khz。
上述技术方案的有益效果是：若超声频率大于40khz或者超声时间过长均会破坏c3n4的片层结构；而低于20khz会降低多酸在c3n4上的担载量。
本发明还公开了所述叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料在前列腺癌标记物快速检测中的应用，所述复合材料催化肌氨酸产生h2o2，同时催化3,3-，5,5-四甲基联苯胺同步显色检测h2o2和肌氨酸。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料在前列腺癌标记物快速检测中的应用中，所述检测方法包括以下步骤：
(1)取前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入显色剂3,3-，5,5-四甲基联苯胺溶液、蒸馏水以及钼钒多酸/c3n4复合材料，得到混合溶液；
(2)将步骤(1)得到的混合溶液在室温下培育4min后测定吸光度，确定肌氨酸和h2o2的浓度。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料在前列腺癌标记物快速检测中的应用中，步骤(1)中取前列腺癌症病人的尿液1ml，过滤后加入0.8mm的显色剂3,3-，5,5-四甲基联苯胺溶液100μl、蒸馏水100μl以及钼钒多酸/c3n4复合材料0.02-0.100mg，得到混合溶液。
优选的，在上述一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料在前列腺癌标记物快速检测中的应用中，所述复合材料对h2o2的检测线性范围为0.007-17ppm，最低检出限为0.01ppm；肌氨酸检测线性范围为0.0002-0.136ppm，最低检出限为0.0004ppm。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料，具有以下优点：
(1)本发明得到的叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料对h2o2和肌氨酸同时显色免疫检测，条件温和、灵敏度高、显色反应快，同时活性高于生物酶，稳定性高，可以长期储存，具有优异的性能；
(2)本发明得到的叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料是一种无机多酸纳米酶，可以同时替代过氧化氢酶和肌氨酸氧化酶完成对肿瘤细胞的靶向检测，降低了检测的成本，同时无机多酸纳米酶制备方法简单、成本低于生物酶。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1附图为(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)检测h2o2浓度范围标准曲线；
图2附图为(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)检测肌氨酸浓度范围标准曲线；
图3附图为本发明(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)复合材料对显色吸光度的影响；
图4附图为本发明的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合材料催化肌氨酸生成过氧化氢氧在tmb存在下的显色过程。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种基于含钒钼杂多酸叶酸化合物负载在c3n4上所形成的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合材料及其合成方法，以及替代肌氨酸氧化酶/过氧化氢氧化酶双重模拟物同时显色检测h2o2和肌氨酸的技术。
本发明提供的含钒钼杂多酸叶酸化合物负载在c3n4上所形成的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合物的合成方法如下：
按质量比1：6：4-25秤取(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4，将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于质量比为1：30–40的蒸馏水中，在50-200rpt的搅拌条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后以10滴/min的速度滴加叶酸溶液；将得到的混合液在20-40khz的条件下超声处理6-24h，高速离心分离出固体，并用蒸馏水洗涤3-6次，保证没有游离的多酸和叶酸，即得到(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合材料。
用本发明提供的一种可以显色免疫检测的多酸模拟物(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合材料，催化肌氨酸产生h2o2同时催化3,3-，5,5-四甲基联苯胺(tmb)同步显色检测h2o2和肌氨酸的方法如下：
配制1000μl模拟溶液:包括0.8mm的tmb和0.02-0.1mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合材料催化剂，加入一定浓度的肌氨酸，将混合溶液在室温(25℃)下培育4min，进行紫外检测，在625nm处出现tmb氧化产物的特征峰。
参见图1和图2，以(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)复合材料催化剂为例，在标准线上查找相应的肌氨酸和h2o2浓度，最终得到h2o2的检测线性范围为0.007-17ppm，最低检出限为0.01ppm；肌氨酸检测线性范围为0.0002-0.136ppm，最低检出限为0.0004ppm。
模拟尿液中检测肌氨酸：
取一定量的水95％，尿素1.8％，尿酸0.05％，无机盐1.1％(包括氯化钠、氯化钾，氯化镁和羟基磷酸钙共占1.1％)配制10ml模拟尿液。取100μl模拟尿液，加入100μltmb(0.8mm)溶液和100μl蒸馏水以及0.02-0.1mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合材料催化剂，加入0.0002-0.136ppm的肌氨酸，室温下(25℃)下培育4min后测定其吸光度，并确定肌氨酸的浓度。
实际尿液的检测：
取医院患前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入100μltmb(0.8mm)溶液和100μl蒸馏水以及0.02-0.1mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)复合催化剂，室温下(25℃)下培育4min后测定其吸光度，并确定h2o2和肌氨酸的浓度。
下面通过具体实施例对本发明的上述技术方案进行说明。
实施例1
按质量比1：6：20秤取(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4，将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于质量比为1：30的蒸馏水中，在50rpt的搅拌条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后以10滴/min的速度滴加叶酸溶液。将得到的混合液在30khz的频率下超声处理24h，高速离心分离出固体，并用蒸馏水洗涤3次，保证没有游离的多酸和叶酸，得到固体(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)，复合材料的产率为80％。
将实施例1制备得到的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)复合材料用于检测病人尿液中肌氨酸的浓度，方法如下：
取医院患前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入100μltmb(0.8mm)溶液和100μl蒸馏水以及0.04mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)复合材料催化剂，室温下(25℃)下培育4min后测定其吸光度，确定肌氨酸的浓度。发现其尿液中含有19.7±0.523μm的肌氨酸。
具体的，(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)复合材料对吸光度的影响参见图3，在(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)复合材料催化剂使用量从0.01mg提高到0.12mg时，紫外吸光度会不断提高，到0.04mg时已经可以得到好的测试结果，继续提高用量对活性影响不大，从经济角度出发选择0.04mg作为最佳复合材料添加量。
实施例2
按质量比1：6：25秤取(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4，将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于质量比为1：30的蒸馏水中，在100rpt的搅拌条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后以10滴/min的速度滴加叶酸溶液。将得到的混合液在频率在20khz的频率下超声处理6h，高速离心分离出固体，并用蒸馏水洗涤3次，保证没有游离的多酸和叶酸，得到固体(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(5wt％)，复合材料的产率为84％。
将实施例2制备得到的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(5wt％)复合材料用于检测病人尿液中肌氨酸的浓度，方法如下：
取医院患前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入100μltmb(0.8mm)溶液和100μl蒸馏水以及0.10mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(5wt％)复合材料催化剂，室温下(25℃)下培育4min后测定其吸光度，确定肌氨酸的浓度。发现其尿液中含有19.7±0.437μm的肌氨酸。
实施例3
按质量比1：6：17秤取(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4，将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于质量比为1：30的蒸馏水中，在150rpt的搅拌条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后以10滴/min的速度滴加叶酸溶液。将得到的混合液在频率为25khz的条件下超声10h，高速离心分离出固体，并用蒸馏水洗涤3次，保证没有游离的多酸和叶酸，得到固体(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(15wt％)，复合材料的产率为80％。
将实施例3制备得到的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(15wt％)复合材料用于检测病人尿液中肌氨酸的浓度，方法如下：
取医院患前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入100μltmb(0.8mm)溶液和100μl蒸馏水以及0.06mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(15wt％)复合材料催化剂，室温下(25℃)下培育4min后测定其吸光度，确定肌氨酸的浓度。发现其尿液中含有19.6±0.496μm的肌氨酸。
实施例4
按质量比1：6：14秤取(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4，将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于质量比为1：40的蒸馏水中，在200rpt的搅拌条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后以10滴/min的速度滴加叶酸溶液。将得到的混合液在频率为35khz的条件下超声处理15h，高速离心分离出固体，并用蒸馏水洗涤3次，保证没有游离的多酸和叶酸，得到固体(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(20wt％)，复合材料的产率为78％。
将实施例4制备得到的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(20wt％)复合材料用于检测病人尿液中肌氨酸的浓度，方法如下：
取医院患前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入100μltmb(0.8mm)溶液和100μl蒸馏水以及0.05mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(20wt％)复合材料催化剂，室温下(25℃)下培育4min后测定其吸光度，确定肌氨酸的浓度。发现其尿液中含有19.9±0.398μm的肌氨酸。
实施例5
按质量比1：6：10秤取(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4，将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于质量比为1：40的蒸馏水中，在150rpt的搅拌条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后以10滴/min的速度滴加叶酸溶液。将得到的混合液在频率为20khz的条件下超声20h，高速离心分离出固体，并用蒸馏水洗涤3次，保证没有游离的多酸和叶酸，得到固体(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(25wt％)，复合材料的产率为78％。
将实施例5制备得到的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(25wt％)复合材料用于检测病人尿液中肌氨酸的浓度，方法如下：
取医院患前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入100μltmb(0.8mm)溶液和100μl蒸馏水以及0.03mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(25wt％)复合材料催化剂，室温下(25℃)下培育4min后测定其吸光度，确定肌氨酸的浓度。发现其尿液中含有19.5±0.614μm的肌氨酸。
实施例6
按质量比1：6：4秤取(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4，将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于质量比为1：40的蒸馏水中，在200rpt的搅拌条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后以10滴/min的速度滴加叶酸溶液。将得到的混合液在频率为40khz的条件下超声23h，高速离心分离出固体，并用蒸馏水洗涤3次，保证没有游离的多酸和叶酸，得到固体(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(30wt％)，复合材料的产率为84％。
将实施例6制备得到的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(30wt％)复合材料用于检测病人尿液中肌氨酸的浓度，方法如下：
取医院患前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入100μltmb(0.8mm)溶液和100μl蒸馏水以及0.02mg的(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(30wt％)复合材料催化剂，室温下(25℃)下培育4min后测定其吸光度，确定肌氨酸的浓度。发现其尿液中含有19.9±0.458μm的肌氨酸。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
1.一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料，其特征在于，所述复合材料是含有叶酸及钒、钼多酸/氧化石墨烯的复合材料，所述复合材料的通式为：
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(nwt％)
其中，fa为叶酸分子，n表示多酸的担载量。
2.根据权利要求1所述的一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料，其特征在于，所述复合材料选自
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(5wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(10wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(15wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(20wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(25wt％)
(fa)6(nh4)5pmo4v8o40/c3n4(30wt％)中的的任意一种。
3.一种权利要求1-2任一项所述的叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将(nh4)5h6pmo4v8o40和叶酸分别溶于蒸馏水中，得到多酸溶液和叶酸溶液；
(2)在搅拌的条件下将c3n4加入多酸溶液中，然后滴加叶酸溶液，得到混合液；
(3)将步骤(2)得到的混合液进行超声处理，高速离心分离出固体，用蒸馏水洗涤至没有游离的多酸和叶酸，即得复合材料。
4.根据权利要求3所述的一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法，其特征在于，(nh4)5h6pmo4v8o40、叶酸和c3n4的质量比为1:6：(4-25)。
5.根据权利要求3所述的一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，(nh4)5h6pmo4v8o40和蒸馏水的质量比为1：(30-40)；叶酸和蒸馏水的质量比为1：(30-40)。
6.根据权利要求3所述的一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述搅拌速度为50-200rpt；所述叶酸溶液的滴加速度为10滴/min；
步骤(3)中，所述超声时间为6-24h，超声频率为20-40khz。
7.一种权利要求1-2任一项所述的叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料在前列腺癌标记物快速检测中的应用，其特征在于，所述复合材料催化肌氨酸产生h2o2，同时催化3,3-，5,5-四甲基联苯胺同步显色检测h2o2和肌氨酸。
8.根据权利要求7所述的一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料在前列腺癌标记物快速检测中的应用，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
(1)取前列腺癌症病人的尿液，过滤后加入显色剂3,3-，5,5-四甲基联苯胺溶液、蒸馏水以及钼钒多酸/c3n4复合材料，得到混合溶液；
(2)将步骤(1)得到的混合溶液在室温下培育4min后测定吸光度，确定肌氨酸的浓度。
9.根据权利要求8所述的一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料在前列腺癌标记物快速检测中的应用，其特征在于，步骤(1)中取前列腺癌症病人的尿液1ml，过滤后加入0.8mm的显色剂3,3-，5,5-四甲基联苯胺溶液100μl、蒸馏水100μl以及钼钒多酸/c3n4复合材料0.02-0.100mg，得到混合溶液。
10.根据权利要求7所述的一种叶酸修饰的钼钒多酸/c3n4复合材料在前列腺癌标记物快速检测中的应用，其特征在于，所述复合材料对h2o2的检测线性范围为0.007-17ppm，最低检出限为0.01ppm；肌氨酸检测线性范围为0.0002-0.136ppm，最低检出限为0.0004ppm。
技术总结