本发明涉及包虫自然感染抗体检测技术领域，具体为一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒。
背景技术：
包虫病是棘球绦虫的幼虫寄生在人体所致的一种人兽共患寄生虫病。呈现地方性，称之地方性寄生虫病；在流行区带有职业性损害的特点，被列为某些人群的职业病；从全球范围讲，为少数民族或宗教部落所特有的一种常见病和多发病。包虫病是棘球绦虫的蚴虫(棘球蚴，包虫)寄生于人体组织所致的人兽共患慢性寄生虫病。包虫病是由棘球属虫种的幼虫所致的疾病，虫种有细粒棘球颖虫、多房棘球绦虫、伏氏棘球绦虫和少节棘球绦虫。其形态、宿主和分布地区略有不同，以细粒棘球绦虫最为常见。
现有的家畜包虫诊断方法主要是采用免疫学检测试剂盒检测感染动物血液中的抗包虫抗体，但由于包虫病基因工程开始大量广泛使用，传统的抗体检测试剂无法区分疫苗免疫抗体和自然感染产生的抗体，这就为家畜包虫病的诊断带来了新的困难和问题，为此，我们提出了一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒。
技术实现要素：
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，解决了现有的家畜包虫诊断方法，包虫病基因工程开始大量广泛使用，抗体检测试剂无法区分疫苗免疫抗体和自然感染产生抗体的问题。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液20-30mmol/l、缓冲液90-110mmol/l、dna序列液0.03-0.05mmol/l、显色液a0.2-0.4mmol/l；试剂b：hyd稀释液20-30mmol/l、hyd酶结合物0.5-0.7mmol/l、缓冲液90-110mmol/l、显色液b0.1-0.3mmol/l。
优选的，所述其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液20mmol/l、缓冲液90mmol/l、dna序列液0.03mmol/l、显色液a0.2mmol/l；试剂b：hyd稀释液20mmol/l、hyd酶结合物0.5mmol/l、缓冲液90mmol/l、显色液b0.1mmol/l。
优选的，所述其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液25mmol/l、缓冲液100mmol/l、dna序列液0.04mmol/l、显色液a0.3mmol/l；试剂b：hyd稀释液25mmol/l、hyd酶结合物0.6mmol/l、缓冲液100mmol/l、显色液b0.2mmol/l。
优选的，所述其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液30mmol/l、缓冲液110mmol/l、dna序列液0.05mmol/l、显色液a0.4mmol/l；试剂b：hyd稀释液30mmol/l、hyd酶结合物0.7mmol/l、缓冲液110mmol/l、显色液b0.3mmol/l。
优选的，所述试剂a中的缓冲液ph值为7.0-7.4，且试剂b中的缓冲液ph值为7.0-7.4。
优选的，所述试剂a中的dna序列液其分子数为3000-5000。
优选的，所述试剂b中的hyd酶结合物为spg纯化的包虫囊液抗原。
优选的，快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其检测方法具体包括以下步骤：
s1、样本采取：采取动物血清或者血浆样本，然后将血清或者血浆样本分成两份置于试管内，在一份血清或者血浆样本加入试剂a，在另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水，摇匀试管进行观察；
s2、疫苗免疫抗体去除：经过s1后，试剂a中的dna序列液与动物血清或者血浆样本中的疫苗免疫抗体相识别，在显色液a的作用下试管显示淡红色，另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水后，无明显变化呈红色；
s3、自然感染抗体检测：经过s2后，在加入试剂a的动物血清或者血浆样本试管中加入试剂b，此时试剂b中的hyd酶结合物与包虫自然感染抗体特异性结合，在显色液b的作用下试管显示暗紫色，检测出包虫自然感染抗体，如试管仍然显示淡红色，则未检测出包虫自然感染抗体。
(三)有益效果
本发明提供了一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒。与现有技术相比，具备以下有益效果：该快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，通过在其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液20-30mmol/l、缓冲液90-110mmol/l、dna序列液0.03-0.05mmol/l、显色液a0.2-0.4mmol/l；试剂b：hyd稀释液20-30mmol/l、hyd酶结合物0.5-0.7mmol/l、缓冲液90-110mmol/l、显色液b0.1-0.3mmol/l，s1、样本采取：采取动物血清或者血浆样本，然后将血清或者血浆样本分成两份置于试管内，在一份血清或者血浆样本加入试剂a，在另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水，摇匀试管进行观察；s2、疫苗免疫抗体去除：经过s1后，试剂a中的dna序列液与动物血清或者血浆样本中的疫苗免疫抗体相识别，在显色液a的作用下试管显示淡红色，另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水后，无明显变化呈红色；s3、自然感染抗体检测：经过s2后，在加入试剂a的动物血清或者血浆样本试管中加入试剂b，此时试剂b中的hyd酶结合物与包虫自然感染抗体特异性结合，在显色液b的作用下试管显示暗紫色，检测出包虫自然感染抗体，如试管仍然显示淡红色，则未检测出包虫自然感染抗体，通过试剂a中的dna序列液与疫苗免疫抗体相识别，经过显色液a进行显色，再利用试剂b中的hyd酶结合物与包虫自然感染抗体特异性结合，配合显色液b进行显色，能有选择的检测自然感染产生的抗体，而避免疫苗免疫抗体的干扰，能做到快速、简便、准确的鉴别诊断包虫病的感染，有效的避免了抗体检测试剂无法区分疫苗免疫抗体和自然感染产生抗体的问题。
附图说明
图1为本发明的包虫自然感染抗体检测流程图；
图2为本发明实施例1-3检测时间对比表图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1-2，本发明实施例提供一种技术方案：一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，具体包括以下实施例：
实施例1
其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液20mmol/l、缓冲液90mmol/l、dna序列液0.03mmol/l、显色液a0.2mmol/l；试剂b：hyd稀释液20mmol/l、hyd酶结合物0.5mmol/l、缓冲液90mmol/l、显色液b0.1mmol/l。
本发明中，试剂a中的缓冲液ph值为7.0，且试剂b中的缓冲液ph值为7.0。
本发明中，试剂a中的dna序列液其分子数为3000。
本发明中，试剂b中的hyd酶结合物为spg纯化的包虫囊液抗原。
本发明中，快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其检测方法具体包括以下步骤：
s1、样本采取：采取动物血清或者血浆样本，然后将血清或者血浆样本分成两份置于试管内，在一份血清或者血浆样本加入试剂a，在另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水，摇匀试管进行观察；
s2、疫苗免疫抗体去除：经过s1后，试剂a中的dna序列液与动物血清或者血浆样本中的疫苗免疫抗体相识别，在显色液a的作用下试管显示淡红色，另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水后，无明显变化呈红色；
s3、自然感染抗体检测：经过s2后，在加入试剂a的动物血清或者血浆样本试管中加入试剂b，此时试剂b中的hyd酶结合物与包虫自然感染抗体特异性结合，在显色液b的作用下试管显示暗紫色，检测出包虫自然感染抗体，如试管仍然显示淡红色，则未检测出包虫自然感染抗体。
实施例2
其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液25mmol/l、缓冲液100mmol/l、dna序列液0.04mmol/l、显色液a0.3mmol/l；试剂b：hyd稀释液25mmol/l、hyd酶结合物0.6mmol/l、缓冲液100mmol/l、显色液b0.2mmol/l。
本发明中，试剂a中的缓冲液ph值为7.2，且试剂b中的缓冲液ph值为7.2。
本发明中，试剂a中的dna序列液其分子数为4000。
本发明中，试剂b中的hyd酶结合物为spg纯化的包虫囊液抗原。
本发明中，快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其检测方法具体包括以下步骤：
s1、样本采取：采取动物血清或者血浆样本，然后将血清或者血浆样本分成两份置于试管内，在一份血清或者血浆样本加入试剂a，在另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水，摇匀试管进行观察；
s2、疫苗免疫抗体去除：经过s1后，试剂a中的dna序列液与动物血清或者血浆样本中的疫苗免疫抗体相识别，在显色液a的作用下试管显示淡红色，另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水后，无明显变化呈红色；
s3、自然感染抗体检测：经过s2后，在加入试剂a的动物血清或者血浆样本试管中加入试剂b，此时试剂b中的hyd酶结合物与包虫自然感染抗体特异性结合，在显色液b的作用下试管显示暗紫色，检测出包虫自然感染抗体，如试管仍然显示淡红色，则未检测出包虫自然感染抗体。
实施例3
其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液30mmol/l、缓冲液110mmol/l、dna序列液0.05mmol/l、显色液a0.4mmol/l；试剂b：hyd稀释液30mmol/l、hyd酶结合物0.7mmol/l、缓冲液110mmol/l、显色液b0.3mmol/l。
本发明中，试剂a中的缓冲液ph值为7.4，且试剂b中的缓冲液ph值为7.4。
本发明中，试剂a中的dna序列液其分子数为5000。
本发明中，试剂b中的hyd酶结合物为spg纯化的包虫囊液抗原。
本发明中，快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其检测方法具体包括以下步骤：
s1、样本采取：采取动物血清或者血浆样本，然后将血清或者血浆样本分成两份置于试管内，在一份血清或者血浆样本加入试剂a，在另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水，摇匀试管进行观察；
s2、疫苗免疫抗体去除：经过s1后，试剂a中的dna序列液与动物血清或者血浆样本中的疫苗免疫抗体相识别，在显色液a的作用下试管显示淡红色，另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水后，无明显变化呈红色；
s3、自然感染抗体检测：经过s2后，在加入试剂a的动物血清或者血浆样本试管中加入试剂b，此时试剂b中的hyd酶结合物与包虫自然感染抗体特异性结合，在显色液b的作用下试管显示暗紫色，检测出包虫自然感染抗体，如试管仍然显示淡红色，则未检测出包虫自然感染抗体。
对比试验
采用实施例1-3所述的快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒进行对比实验，具体试验过程如下：
选取100个动物的血清或者血浆样本，分为4组，每组100个正常人的血清样本，检测试剂盒分别采用高、中、低剂量组进行检测，如图2可知，实施例2采用的剂量比例所达到的效果优于其他两种，快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒的检测时间最短，因此为最佳的比例搭配；其余两种皆可。
综上所述，通过试剂a中的dna序列液与疫苗免疫抗体相识别，经过显色液a进行显色，再利用试剂b中的hyd酶结合物与包虫自然感染抗体特异性结合，配合显色液b进行显色，能有选择的检测自然感染产生的抗体，而避免疫苗免疫抗体的干扰，能做到快速、简便、准确的鉴别诊断包虫病的感染，有效的避免了抗体检测试剂无法区分疫苗免疫抗体和自然感染产生抗体的问题。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
1.一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其特征在于：其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液20-30mmol/l、缓冲液90-110mmol/l、dna序列液0.03-0.05mmol/l、显色液a0.2-0.4mmol/l；试剂b：hyd稀释液20-30mmol/l、hyd酶结合物0.5-0.7mmol/l、缓冲液90-110mmol/l、显色液b0.1-0.3mmol/l。
2.根据权利要求1所述的一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其特征在于：所述其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液20mmol/l、缓冲液90mmol/l、dna序列液0.03mmol/l、显色液a0.2mmol/l；试剂b：hyd稀释液20mmol/l、hyd酶结合物0.5mmol/l、缓冲液90mmol/l、显色液b0.1mmol/l。
3.根据权利要求1所述的一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其特征在于：所述其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液25mmol/l、缓冲液100mmol/l、dna序列液0.04mmol/l、显色液a0.3mmol/l；试剂b：hyd稀释液25mmol/l、hyd酶结合物0.6mmol/l、缓冲液100mmol/l、显色液b0.2mmol/l。
4.根据权利要求1所述的一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其特征在于：所述其原料按重量分包括：试剂a：hyd稀释液30mmol/l、缓冲液110mmol/l、dna序列液0.05mmol/l、显色液a0.4mmol/l；试剂b：hyd稀释液30mmol/l、hyd酶结合物0.7mmol/l、缓冲液110mmol/l、显色液b0.3mmol/l。
5.根据权利要求1-4所述的一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其特征在于：所述试剂a中的缓冲液ph值为7.0-7.4，且试剂b中的缓冲液ph值为7.0-7.4。
6.根据权利要求1-4所述的一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其特征在于：所述试剂a中的dna序列液其分子数为3000-5000。
7.根据权利要求1-4所述的一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其特征在于：所述试剂b中的hyd酶结合物为spg纯化的包虫囊液抗原。
8.根据权利要求1-4任意一项所述的一种快速检测动物包虫自然感染抗体的试剂盒，其特征在于：其检测方法具体包括以下步骤：
s1、样本采取：采取动物血清或者血浆样本，然后将血清或者血浆样本分成两份置于试管内，在一份血清或者血浆样本加入试剂a，在另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水，摇匀试管进行观察；
s2、疫苗免疫抗体去除：经过s1后，试剂a中的dna序列液与动物血清或者血浆样本中的疫苗免疫抗体相识别，在显色液a的作用下试管显示淡红色，另一份血清或者血浆样本加入蒸馏水后，无明显变化呈红色；
s3、自然感染抗体检测：经过s2后，在加入试剂a的动物血清或者血浆样本试管中加入试剂b，此时试剂b中的hyd酶结合物与包虫自然感染抗体特异性结合，在显色液b的作用下试管显示暗紫色，检测出包虫自然感染抗体，如试管仍然显示淡红色，则未检测出包虫自然感染抗体。
技术总结