本发明涉及医用植入制剂领域，特别涉及载药可注射植入原位水凝胶。
背景技术：
癌症(恶性肿瘤)是严重威胁人类健康的重大疾病，具有高发病率和致死率。目前临床上常用的治疗手段主要包括手术、化疗和放疗。根据肿瘤大小以及病理分期，手术往往作为一线治疗方案。肿瘤手术切除后，肿瘤的原位复发及转移率较高，大约有70％的患者最终因复发、转移导致治疗失败，所以术后常采取放疗、化疗等方法抑制肿瘤复发与转移。放疗以及全身化疗的方式一般会造成严重毒副作用，降低患者的生活质量。因此需要一种新的给药方式提高药物疗效，减轻毒副作用。
在病灶部位进行局部给药相对于全身给药方式，可能提高病灶部位的药物浓度，减少药物的全身分布，从而提高疗效和降低毒副作用。局部给药可能使药物在病灶部位长时间滞留，可做到一次植入后长时间释药和起效，避免频繁给药，提高了患者耐受性。局部给药剂型主要包括膜剂、纺丝、泡沫、水凝胶等。水凝胶一般呈现三维网状结构，生物相容性好，适合药物装载与释放，适合药物类型广泛，包括小分子药物、蛋白、核酸等。原位凝胶是流动的液体在一定条件下转变为不流动的凝胶，一般包括温度敏感型原位凝胶、离子敏感型原位凝胶。但这些环境敏感型的原文凝胶由液体转变凝胶的速度较慢，一般为数分钟；在体积较大时，全部凝胶化速度可能更小。
技术实现要素：
本发明公开了一种载药可注射植入原位水凝胶，其特征是采用化学键交联方式在注射部位原位形成，有注射空腔形状自适应性，凝胶在空腔内滞留时间长，药物可控释。
本发明采用的化学键交联方式是基于希夫碱反应。该反应形成的原位水凝胶具有多种优势，包括(1)希夫碱反应条件温和，在人体生理状态下可发生反应，不需要额外催化剂，反应产物除凝胶外，仅生成水，是绿色化学反应；(2)希夫碱具有ph敏感性，在肿瘤、炎症等弱酸性条件下不稳定，降解后有利于药物释放；(3)希夫碱是不稳定共价键，呈现断裂与形成的动态平衡，使凝胶具有自愈性，可增加在注射部位的滞留时间。
本发明所述的载药可注射植入原位水凝胶的制备过程中，希夫碱反应反应的速度和凝胶强度可通过凝胶前体材料中醛基和氨基的含量以及凝胶前体材料的浓度控制，其中所述的凝胶前体材料浓度选自1％～20％，优选自2％～10％。
本发明所述的载药可注射植入原位水凝胶，其制备步骤如下：
(1)凝胶前体材料包括醛基化前体材料和氨基化前体材料的制备；
(2)通过共价键或非共价键方式装载药物或细胞；
(3)将载药的两种或两种以上的凝胶前体混合后，得到载药可注射原位水凝胶。
在上述步骤中，凝胶前体材料的初始材料为高分子化合物，选自合成高分子化合物、多糖类高分子化合物、蛋白类高分子化合物，优选的是多糖类高分子化合物。合成高分子化合物选自聚乙二醇peg、聚乳酸pla、聚己内酯pcl、聚乳酸-羟基乙酸共聚物plga、聚乙烯醇pva、聚醚酰亚胺pei、聚丙烯酰胺paam。多糖类高分子化合物选自透明质酸、壳聚糖、海藻酸钠、淀粉、葡聚糖、纤维素、硫酸软骨素，优选自透明质酸、壳聚糖、海藻酸钠。蛋白类高分子化合物选自纤维蛋白、胶原蛋白、蚕丝蛋白、球蛋白、明胶。
当多糖类高分子化合物作为凝胶前体材料的初始材料时，进行醛基化和氨基化修饰得到凝胶前体材料，混合后胶凝形成稳定的凝胶。胶凝时间可以通过醛基和氨基的修饰度及前体溶液的浓度调整。
本发明所述的凝胶前体材料中醛基化凝胶前体材料优选的是醛基化多糖，其制备方法选自醛基化合物直接修饰法、高碘酸钠氧化法。醛基化合物直接修饰法是将醛基化合物和多糖直接混合反应得到。醛基化合物选自对氨基苯甲醛、对羧甲苯甲醛、对羟基苯甲醛、间氨基苯甲醛、间溴苯甲醛、2，4-羟基苯甲醛、3，4-羟基苯甲醛、邻氨苯甲醛、1-氰基苯甲醛、癸烯醛、4-碘苯乙醛、对氨基苯乙醛、氨基乙醛、3-氨基呋喃-2-甲醛、4-羟基戊醛，优选自对氨基苯甲醛、对羧甲苯甲醛、对羟基苯甲醛。高碘酸钠氧化法是将高碘酸钠和多糖在溶液中混合，高碘酸钠氧化多糖分子中的邻二醇基团得到双醛多糖；双醛多糖的醛基修饰度与高碘酸钠浓度、高碘酸钠与邻二醇基团的摩尔比、反应温度、氧化时间相关。在高碘酸钠氧化法中，高碘酸浓度选自0.2％～2％，优选自0.5％～1％；高碘酸钠与邻二醇基团的摩尔比选自0.5～5，优选自0.5～2；反应温度为20℃～40℃，优选自25℃～30℃；氧化时间为2小时～24小时，优选自6小时～12小时。
本发明所述的凝胶前体材料中氨基化凝胶前体材料优选的是氨基化多糖，其制备方法选自氨基化合物修饰法、肼基化合物修饰法、天然氨基多糖衍生物。氨基化合物修饰法是用酰化反应将氨基化合物与多糖连接，得到氨基化多糖，其中氨基化合物选自乙二胺、己二胺、十二烷二胺、2-氨基丁酸、二氨基苯甲酸、二氨基己酸、6-氨基氨基酸，优选自乙二胺、己二胺、2-氨基丁酸。肼类化合物修饰法是用酰化反应将肼类化合物与多糖连接，得到氨基化多糖，其中肼基化合物选自己二酸二酰肼、丁二酸二酰肼、4-肼基苯甲酸肼、二肼基乙烷，优选的是己二酸二酰肼。天然氨基多糖衍生物选自壳聚糖、糖胺聚糖、壳聚糖衍生物、糖胺聚糖衍生物。壳聚糖为水溶性壳聚糖。壳聚糖衍生物选自羧甲基壳聚糖、羧乙基壳聚糖、壳聚糖盐酸盐、壳聚糖季铵盐、壳聚糖乳酸盐、壳聚糖谷氨酸盐、壳聚糖硫酸酯，优选自羧甲基壳聚糖、羧乙基壳聚糖。糖胺聚糖衍生物选自脱乙酰透明质酸、脱乙酰硫酸软骨素、脱乙酰硫酸皮肤素、脱乙酰硫酸角质素。
凝胶前体材料的初始材料为多糖类高分子化合物时，多糖类高分子化合物的分子量选自100kda～1600kda，优选自500kda～1000kda。该分子量范围的凝胶前体材料具有合适的流动性，方便推注和混合，凝胶前体材料交联形成的凝胶具有合适的强度，在体内空腔处易保留。
本发明所述的载药可注射植入原位水凝胶，装载药物或细胞，用于体内各种部位的注射，进行疾病治疗、预防和再生。适用范围选自但不限制于骨关节炎的治疗和预防、肿瘤治疗、肿瘤术后的原位复发的预防、结核病治疗、口腔疾病治疗、眼科疾病治疗、神经疾病治疗、泌尿科疾病治疗、心血管疾病治疗、组织再生、神经再生。
本发明所述的载药可注射植入原位水凝胶，其中装载的药物可以是各种临床上正在使用的药物或确定具有活性但还未在临床上使用的药物。药物的类型不受限制，具体可选自抗细菌药物、抗真菌药物、抗结核病药物、抗肿瘤药物、解热镇痛药物、中枢神经系统药物，以及生物技术类药物。抗细菌药物选自青霉素、氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林钠、替卡西林、舒他西林、美洛西林钠、阿洛西林钠、羧苄西林钠、磺苄西林钠、呋布西林钠、奈夫西林、双氯西林、甲氧西林、匹美西林、头孢氨苄、头孢唑林钠、头孢羟氨苄、头孢拉定、头孢呋辛钠、头孢呋辛酯、头孢克洛、头孢曲松钠、头孢哌酮钠、头孢他啶、头孢美唑、头孢地尼、头孢西丁钠、头孢替安、头孢尼西钠、头孢雷特赖氨酸盐、头孢磺啶钠、头孢匹胺钠、头孢沙定、头孢拉宗钠、氨曲南、美罗培南、卡那霉素、阿米卡星、新霉素、利维霉素、巴龙霉素、四环素、林可霉素、土霉素、多西环素、米诺环素、金霉素、交沙霉素、麦白霉素、罗他霉素、乙酰螺旋霉素、去甲万古霉素、奈啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、氟罗沙星、莫希沙星、甲硝唑、替硝唑。抗真菌药选自两性霉素b、咪康唑、酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、克霉唑、益康唑、特比萘芬、灰黄霉素、环吡酮胺、制霉菌素、奈替芬。抗结核病药物选自异烟肼、对氨基水杨酸钠、利福平、利福定、利福喷丁、利福霉素、链霉素、乙胺丁醇、乙硫异烟肼、吡嗪酰胺。抗肿瘤药物选自紫杉醇、多西他赛、阿霉素、柔红霉素、表柔比星、米托蒽醌、顺铂、卡铂、奥沙利铂、喜树碱、羟基喜树碱、依托泊苷、替尼泊苷、伊立替康、吉西他滨、卡莫斯汀、尼莫司汀、环磷酰胺、丝裂霉素、博来霉素、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、巯嘌呤、吉非替尼、厄洛替尼、曲妥珠单抗、利妥昔单抗、西妥昔单抗。解热镇痛抗炎药物选自乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、吡罗昔康、美洛昔康、尼美舒利、双氯芬酸钠、萘普生、布洛芬、酮布芬、芬布芬、洛索洛芬。镇痛药物选自吗啡、芬太尼、美沙酮、曲马多、地佐辛、罗通定、辣椒素。生物技术类药物选自多肽蛋白类药物、核酸类药物、疫苗，具体包括细胞因子、单克隆抗体、sirna、microrna、寡核苷酸、反义核酸。细胞因子选自粒细胞集落刺激因子g-csf、神经生长因子、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、干扰素、白介素。这些药物根据其本身性质还可以制备成环糊精包合物、脂质体、纳米粒、乳剂等制剂形状后再加入凝胶前体中。
由这些药物制备得到相应药物可注射植入原位水凝胶，如青霉素可注射植入原位水凝胶、头孢氨苄可注射植入原位水凝胶、头孢呋辛酯可注射植入原位水凝胶、美罗培南可注射植入原位水凝胶、卡那霉素可注射植入原位水凝胶、阿米卡星可注射植入原位水凝胶、土霉素可注射植入原位水凝胶、环丙沙星可注射植入原位水凝胶、莫希沙星可注射植入原位水凝胶、甲硝唑可注射植入原位水凝胶、两性霉素b可注射植入原位水凝胶、氟康唑可注射植入原位水凝胶、特比萘芬可注射植入原位水凝胶、灰黄霉素可注射植入原位水凝胶、异烟肼可注射植入原位水凝胶、利福平可注射植入原位水凝胶、利福霉素可注射植入原位水凝胶、链霉素可注射植入原位水凝胶、紫杉醇可注射植入原位水凝胶、多西他赛可注射植入原位水凝胶、阿霉素可注射植入原位水凝胶、柔红霉素可注射植入原位水凝胶、顺铂可注射植入原位水凝胶、羟基喜树碱可注射植入原位水凝胶、依托泊苷可注射植入原位水凝胶、甲氨蝶呤可注射植入原位水凝胶、5-氟尿嘧啶可注射植入原位水凝胶、阿糖胞苷可注射植入原位水凝胶、吉非替尼可注射植入原位水凝胶、曲妥珠单抗可注射植入原位水凝胶、乙酰水杨酸可注射植入原位水凝胶、吲哚美辛可注射植入原位水凝胶、布洛芬可注射植入原位水凝胶、吗啡可注射植入原位水凝胶、曲马多可注射植入原位水凝胶、神经生长因子可注射植入原位水凝胶、干扰素可注射植入原位水凝胶。
本发明所述的载药可注射植入原位水凝胶，其中装载的细胞可以是各种干细胞。
本发明所述的载药可注射植入原位水凝胶，其中装载药物的方式包括共价键结合方式和物理包裹方式，其中共价键结合方式涉及的共价键选自碳酸酯键、磷酸酯键、酰胺键、亚胺键、二硫键、硫醚、硫酯、肟、苯硼酸酯键，优选自酯键、酰胺键、亚胺键、肟、二硫键。
本发明所述的载药可注射植入原位水凝胶，其体内植入方式是直接将凝胶前体材料注射到体内方式植入，注射方式选自凝胶前体材料混合后快速注射、双管注射装置直接注射。
载药可注射植入原位水凝胶用于肿瘤术后空穴的填充，有显著防止肿瘤复发的效果，对身体创伤性较小。由于手术切除后身体部分组织后的空腔往往具有不规则性，利用原位水凝胶的流动性可以快速充满空腔，与切除肿瘤后的边缘组织紧密接触，更好地消除残余肿瘤细胞。
下面通过一些实施例和实验例进一步说明本发明。
附图说明
图1.醛基化透明质酸合成路线图.用高碘酸钠将透明质酸中的邻二醇结构特异性氧化成醛基结构。
图2.醛基化透明质酸核磁氢谱
图3.醛基化透明质酸红外光谱.ha指透明质酸，ha-cho指醛基化透明质酸。
图4.载药可注射植入原位水凝胶的胶凝过程。两种凝胶前体材料(醛基化透明质酸及羧甲基壳聚糖)混合后即可迅速发生胶凝固化。
图5.载药可注射植入原位水凝胶的冷冻脆断并冻干后扫描电镜照片
图6.阿霉素和吉西他滨及两药联合对4t1细胞增殖的抑制作用.双药联合指的是阿霉素和吉西他滨联合给药。
图7.体内药效考察过程示意图
图8.活体成像系统考察术后、治疗情况
图9.小鼠肿瘤复发后体积变化情况.肿瘤体积超过20mm3即认为肿瘤复发。
图10.第24天治疗结束后的生物发光考察肿瘤肺转移情况
图11.治疗结束后解剖肿瘤及心肺组织免疫组化及病理考察.肿瘤组织ki67及tunel染色，肺、心he染色。
具体实施方式
实施例1、异烟肼可注射植入原位水凝胶
取1g分子量为500kda的透明质酸钠溶于100ml水，加入等摩尔量的高碘酸钠，避光，在室温下搅拌2h，然后加入1ml乙二醇，继续搅拌1h，反应液用水透析3天，冻干后得到醛基化透明质酸，用磷酸盐缓冲液溶解得到20mg/ml醛基化透明质酸，加入1g异烟肼，搅拌均匀作为醛基化前体材料，等体积的20mg/ml羧甲基壳聚糖溶液作为氨基化前体材料，两种前体材料混合后，迅速注射到体内空腔中，得到异烟肼可注射植入原位水凝胶。
图1是醛基化透明质酸合成路线图，图2是醛基化透明质酸核磁氢谱，图3是醛基化透明质酸红外光谱，图4是可注射植入原位水凝胶的胶凝过程，图5是可注射植入原位水凝胶的冷冻脆断并冻干后扫描电镜照片。
实施例2、莫希沙星可注射植入原位水凝胶
用edc/nhs催化法，将己二酸二酰肼一端与透明质酸通过酰胺键连接，透析纯化后冻干得到氨基化透明质酸作为氨基化前体材料，通过高碘酸钠氧化法制备得到醛基化透明质酸作为醛基化前体材料，上述浓度均为20mg/ml的醛基化透明质酸及氨基化透明质酸的磷酸盐缓冲液等体积混合，并加入莫希沙星，得到含10mg/ml莫希沙星的混合溶液，迅速注射到体内空腔中，得到莫希沙星可注射植入原位水凝胶。
实施例3、紫杉醇可注射植入原位水凝胶
用高碘酸钠氧化法制备醛基化海藻酸钠作为醛基化前体材料，经透析纯化后冻干，加入磷酸盐缓冲液制备得到30mg/ml醛基化海藻酸钠溶液，加入紫杉醇搅拌均匀，得到含10mg/ml紫杉醇的醛基化海藻酸钠溶液，与等体积的20mg/ml羧乙基壳聚糖磷酸盐缓冲液溶液用两个注射器同时注射进体内空腔中，得到紫杉醇可注射植入原位水凝胶。
实施例4、神经生长因子可注射植入原位水凝胶
用edc/nhs催化法，将对氨基苯甲醛与透明质酸通过酰胺键连接，得到醛基化透明质酸作为醛基化前体材料，经透析纯化后冻干，加入磷酸盐缓冲液制备得到20mg/ml醛基化透明质酸溶液，加入神经生长因子搅拌均匀，得到含0.1mg/ml神经生长因子的醛基化透明质酸溶液，与等体积的20mg/ml羧乙基壳聚糖磷酸盐缓冲液溶液用两个注射器同时注射进体内空腔中，得到神经生长因子可注射植入原位水凝胶。
实施例5、阿霉素/吉西他滨可注射植入原位水凝胶
用高碘酸钠氧化得到的醛基化透明质酸作为醛基化前体材料，用磷酸盐缓冲液溶解得到80mg/ml的醛基化透明质酸溶液，8mg/ml阿霉素溶液在搅拌条件下滴加至醛基化透明质酸溶液中，在37℃避光条件下搅拌12h，得到透明质酸-阿霉素共聚物溶液；另取盐酸吉西他滨及羧甲基壳聚糖用磷酸盐缓冲液溶解得到含2mg/ml吉西他滨和20mg/ml羧甲基壳聚糖的溶液，上述两种溶液等体积用两个注射器同时注射进体内空腔中，得到阿霉素/吉西他滨可注射植入原位水凝胶。
实验例1、阿霉素/吉西他滨可注射植入原位水凝胶抗肿瘤复发作用
以下实验例证明阿霉素与吉西他滨对细胞杀伤具有协同作用，实施例5中的阿霉素/吉西他滨可注射植入原位水凝胶能够抑制肿瘤术后复发。
样品：阿霉素、吉西他滨、实施例5中的阿霉素/吉西他滨可注射植入原位水凝胶(简称阿霉素/吉西他滨凝胶)、根据实施例5步骤制备的不含药物的空白凝胶、根据实施例5步骤制备的只含阿霉素的阿霉素可注射植入原位水凝胶(简称阿霉素凝胶)、根据实施例5步骤制备的只含吉西他滨的吉西他滨可注射植入原位水凝胶(简称吉西他滨凝胶)。
(1)阿霉素、吉西他滨体外对细胞的抑制作用
实验过程：通过4t1细胞验证阿霉素、吉西他滨的体外抑制肿瘤细胞的作用。收集对数生长期的4t1细胞，以每孔3000细胞的密度接种于96孔板，细胞培养贴壁后，以系列浓度梯度阿霉素、吉西他滨单独或联合给药作用于细胞，继续培养48h后，向培养板中加入10％的cck-8溶液，继续孵育2h，酶标仪检测450nm处的吸光度并计算细胞活力以及联合给药指数。
实验结果：通过计算发现，阿霉素以及吉西他滨均能明显抑制4t1细胞的生长，且呈浓度依赖性，两药联合治疗指数＜1，显示出明显的协同作用。图6是阿霉素和吉西他滨及两药联合对4t1细胞增殖的抑制作用。
(2)阿霉素/吉西他滨可注射植入原位水凝胶对小鼠乳腺癌术后复发的抑制作用
实验过程：体外培养荧光素酶标记的4t1细胞(4t1-luc)，以每只5×105个细胞接种到balb/c雌性小鼠背部皮下，肿瘤生长至100mm3左右，肿瘤位置侧面皮肤开口锐性剥离肿瘤，保留肿瘤周围的皮肤确保残留肿瘤细胞导致肿瘤复发，通过小动物活体成像验证了残留肿瘤细胞，成功建立肿瘤术后复发模型。小鼠随机分为6组：模型组；空白凝胶组；吉西他滨凝胶组(5mg/kg)；阿霉素凝胶组(10mg/kg)；阿霉素/吉西他滨凝胶组(吉西他滨5mg/kg、阿霉素10mg/kg)；阿霉素/吉西他滨溶液组。肿瘤切除第二天进行治疗，凝胶制剂组均在肿瘤手术空穴原位注射给药，溶液组通过尾静脉注射给药，治疗一次后观察肿瘤复发情况。每三天称量体重，观察是否有肿瘤复发并测量复发肿瘤的体积，肿瘤体积＝长径×短径2×0.5。在治疗后第12天与24天通过活体成像考察肿瘤复发及肺转移情况。治疗24天后结束实验，麻醉后处死小鼠，解剖取出肿瘤组织及主要器官，福尔马林固定后，脱水制作蜡块，切片后进行he、ki67及tunel染色，考察肿瘤抑制情况。图7是体内药效考察过程示意图。
实验结果：4t1-luc细胞接种12天后，肿瘤生长至100mm3，进行手术切除，小动物活体成像实验验证了术后残余肿瘤细胞的存在，说明小鼠术后复发模型的成功建立。治疗后第12天，通过小动物活体成像发现，除阿霉素/吉西他滨凝胶组外，其余各组均有肿瘤复发。治疗后第24天，模型组小鼠死亡两只，此时阿霉素/吉西他滨凝胶组切除肿瘤部位荧光值与小鼠背部皮肤基底值一致，没有出现复发现象，说明阿霉素/吉西他滨凝胶组完全抑制了肿瘤的复发，复发率为0％。通过与手术切除后残余细胞的荧光值对比，高于该荧光值的认为肿瘤复发，低于该荧光值的认为肿瘤未复发，结果发现模型组与空白凝胶组复发率为100％，吉西他滨凝胶组复发率为67％，阿霉素凝胶组复发率为33％，阿霉素/吉西他滨溶液组复发率为83％。肿瘤手术空穴注射阿霉素/吉西他滨凝胶后，能够将药物直接释放于残留肿瘤细胞周围，提高药物浓度且长时间缓释，两种药物的协同作用增加了对肿瘤细胞的杀伤，因此阿霉素/吉西他滨凝胶完全抑制了肿瘤的复发。图8是活体成像系统考察术后、治疗情况。
肿瘤体积同样可以作为术后复发的标准，当复发肿瘤体积超过20mm3后，即被认为肿瘤复发。根据肿瘤体积判定的肿瘤复发率与荧光标准判定的肿瘤复发率一致。另外，模型组与空白凝胶组的复发肿瘤生长速度较快，说明无药物治疗的肿瘤迅速生长。小鼠体重没有明显变化，说明了载药凝胶的安全性。肿瘤的远端转移同样是肿瘤治疗的关键问题，通过小鼠活体成像发现肺是肿瘤转移的主要器官。除了阿霉素/吉西他滨凝胶组外，其余各组均有不同程度的肺转移，模型组有4只发生了肺转移，空白凝胶组有3只发生肺转移，吉西他滨凝胶组有2只发生肺转移，阿霉素组有1只发生肺转移，阿霉素/吉西他滨溶液组有2只发生肺转移，阿霉素/吉西他滨凝胶完全抑制了肿瘤的肺转移。图9是小鼠肿瘤复发后体积变化情况.肿瘤体积超过20mm3即认为肿瘤复发。图10是24天治疗结束后的生物发光考察肿瘤肺转移情况。
病理及免疫组化染色同样显示出不同药物的治疗效果，由于阿霉素/吉西他滨凝胶组没有肿瘤复发，没有能够对肿瘤组织进行染色。ki67，tunel染色均证明阿霉素凝胶组具有较强的抑制肿瘤生长的效果。图11是治疗结束后解剖肿瘤及心肺组织免疫组化及病理考察。
综上所述，阿霉素/吉西他滨凝胶完全抑制了乳腺癌的术后复发以及肺转移，究其原因，局部植入载药可注射植入原位水凝胶能够提高药物在手术空穴的浓度，两种药物的协同作用提升对残余肿瘤细胞的杀伤，另外凝胶降解后释放出的透明质酸-药物共聚物增加肿瘤细胞对药物的吞噬，提高药效。
1.一种载药可注射植入原位水凝胶，其特征是采用化学键交联方式在注射部位原位形成。
2.如权利要求1所述的载药可注射植入原位水凝胶，采用的化学键交联方式是基于希夫碱反应。
3.如权利要求1所述的载药可注射植入原位水凝胶，采用的化学键交联方式是基于希夫碱反应，并且希夫碱反应反应的速度和凝胶强度可通过凝胶前体材料中醛基和氨基的含量以及凝胶前体材料的浓度控制，其中所述的凝胶前体材料浓度选自1％～20％。
4.如权利要求1所述的载药可注射植入原位水凝胶，其制备步骤如下：
(1)凝胶前体材料包括醛基化前体材料和氨基化前体材料的制备；
(2)通过共价键或非共价键方式装载药物或细胞；
(3)将载药的两种或两种以上的凝胶前体混合后，得到载药可注射原位水凝胶。
在上述步骤中，凝胶前体材料的初始材料为高分子化合物，选自合成高分子化合物、多糖类高分子化合物、蛋白类高分子化合物。
5.如权利要求4所述的载药可注射植入原位水凝胶，凝胶前体材料的初始材料为多糖类高分子化合物，进行醛基化和氨基化修饰得到凝胶前体材料，混合后胶凝形成稳定的凝胶。
6.如权利要求4和5所述的载药可注射植入原位水凝胶，凝胶前体材料的初始材料为多糖类高分子化合物，分子量选自100kda～1600kda。
7.如权利要求1所述的载药可注射植入原位水凝胶，装载药物或细胞，用于体内各种部位的注射，进行疾病治疗、预防和再生。
8.如权利要求1所述的载药可注射植入原位水凝胶，装载药物的方式包括共价键结合方式和物理包裹方式。
9.如权利要求1所述的载药可注射植入原位水凝胶，其体内植入方式是直接将凝胶前体材料注射到体内方式植入，注射方式选自凝胶前体材料混合后快速注射、双管注射装置直接注射。
10.如权利要求1所述的载药可注射植入原位水凝胶，是阿霉素/吉西他滨可注射植入原位水凝胶，制备如下：用高碘酸钠氧化得到的醛基化透明质酸作为醛基化前体材料，用磷酸盐缓冲液溶解得到80mg/ml的醛基化透明质酸溶液，8mg/ml阿霉素溶液在搅拌条件下滴加至醛基化透明质酸溶液中，在37℃避光条件下搅拌12h，得到透明质酸-阿霉素共聚物溶液：另取盐酸吉西他滨及羧甲基壳聚糖用磷酸盐缓冲液溶解得到含2mg/ml吉西他滨和20mg/ml羧甲基壳聚糖的溶液，上述两种溶液等体积用两个注射器同时注射进体内空腔中，得到阿霉素/吉西他滨可注射植入原位水凝胶。
技术总结