本发明涉及稳定可控释药物载体的制备方法，具体是利用含有活性氧(ros)响应性的硫缩酮键单体、10-羟基喜树碱以及聚乙二醇(peg)聚合并搭载地塞米松(dex)制备得到的稳定可控释药物。
背景技术：
肿瘤的治疗已有一个多世纪的历史。随着手术、放疗技术及化疗的发展，癌症的疗效有了明显的提高。其中手术、化疗方案与技术的改进，以及化疗药物从非特异杀伤到近10年来靶向药物的问世，使肿瘤治疗从单一到综合、从单元到多元的结合有了明显的进步。对于化学药物疗法来说，准确的设计和高载药量是设计高效癌症纳米药物的两个关键点。使用药物递送系统作为常用方法，如常见的纳米颗粒、脂质体、胶束介导的药物递送系统，很难达到临床应用的要求。使用药物分子直接构建递送平台(聚药平台)是精确控制成分和分子结构的有效方法。
对于目前市场上常见的抗癌药物如10-羟基喜树碱(hcpt)的改性及应用报道有很多，中国专利cn106750254b通过对结构改造，提高了hcpt的水溶性；改善了hcpt的药代动力学性质；利用肿瘤微环境的特点，并且实现了ph响应性释放药物纳米粒子，具有控释效果；中国专利cn106496542b公开了一种谷胱甘肽敏感的两亲性聚乙二醇-羟基喜树碱偶联物，同样利用了肿瘤微环境的特点，实现了gsh响应性释放药物。这类的设计通过化学键载药，改善了水溶性，但是其制备步骤复杂繁琐，不利于低成本大批量制备。
技术实现要素：
因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中的载药量低、副作用大且仅用于单一hcpt药物输送以至于无法实现与其他药物联合治疗的缺陷，从而提供一种稳定可控释药物的制备方法，该可控药物载体可应用于各种治疗方案，解决了hcpt、dex水溶性差、hcpt载药量低且不可控、与其他药物共同递送的问题，并且在dex的协同治疗下有明显的提升。
本发明还提供了所述稳定可控释药物的制备方法。
为解决上述问题，本发明采用如下技术方案：
一种稳定可控释药物，包括载体聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱，所述的聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱负载有或不负载地塞米松，地塞米松占聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)的质量分数为(9.7-0)％；
所述的聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱由含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱和具有亲水性的聚乙二醇通过酯化反应形成。
所述稳定可控释药物为粒径80-100nm的纳米颗粒。
所述地塞米松为聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)包覆药物后的9.7wt％，其中10-羟基喜树碱含量为聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)的16.8wt％，即10-羟基喜树碱在载体结构质量中所占的比重为16.8％。一种所述稳定可控释药物的制备方法，包括下述步骤：
s1、将含有活性氧(ros)响应性特性的硫缩酮单体加入无水二氯甲烷中，充分搅拌，再加入三光气以及4-二甲氨基吡啶，在氮气氛围下搅拌即得氯甲酰化的含硫缩酮单体，通过3000转每分钟离心获得上清液，时间不低于5分钟；
s2、将10-羟基喜树碱溶于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)或二甲亚砜中，再加入所述步骤s1制备得到的氯甲酰化的硫缩酮单体，反应24-36小时，将反应产物溶液转移至透析袋在超纯水中透析24小时，冷冻干燥得到具有ros响应性的含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱；
s3、将步骤s2的产物溶于四氢呋喃中，加入二环己基碳二亚胺和4-二甲氨基吡啶，加入羧基化聚乙二醇，反应24小时，反应产物溶液转移至透析袋在超纯水中透析24小时，冷冻干燥得到聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱，其重均分子量为(13000-15000)；
s4、将步骤s3的制备得到的聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱与地塞米松按照质量比为1：(0-1)溶于二甲亚砜或四氢呋喃中，由于地塞米松不溶于四氢呋喃，故不搭载地塞米松时选取容易除去的四氢呋喃作为溶剂，其中聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)与二甲亚砜或四氢呋喃的质量比为1:100，充分溶解后向超纯水中逐滴滴加，搅拌均匀后，使用透析袋在超纯水中透析，即得搭载地塞米松的纳米颗粒，所述二甲亚砜与超纯水的体积比为1:10。
所述步骤s1中所述的三光气以及4-二甲氨基吡啶，用量分别为硫缩酮单体摩尔量的4倍。
所述的步骤s2中氯甲酰化的含硫缩酮单体与10-羟基喜树碱的投料摩尔比为1:(1.2-1)，成本原因优选1:1。
所述步骤s3中加入的羧基化聚乙二醇peg与所述氯甲酰化的硫缩酮单体的投料摩尔比为2:1，二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶和羧基化聚乙二醇按照(1.5-1):(1.5-1):1的摩尔比进行投料。
所述步骤s4中如不包覆地塞米松时选取四氢呋喃为溶剂，则不需要透析除去，静置在通风橱24小时即可除去。
所述的制备方法是在温度为20-30℃的条件下进行。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明稳定可控释药物包括载体聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱，所述的聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱负载有或不负载地塞米松；优选负载有地塞米松。所述的载体是由含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱和聚乙二醇通过缩聚形成的聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱，即所述的聚10-羟基喜树碱的两端修饰有亲水性的peg。制备过程是将聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱与地塞米松溶于二甲亚砜或四氢呋喃中，充分溶解后向超纯水中逐滴滴加，搅拌均匀后，使用透析袋在超纯水中透析，即得搭载地塞米松的纳米颗粒。在水溶液中利用亲疏水性将疏水性药物dex包覆在疏水内部形成纳米颗粒，载体两端的亲水性聚乙二醇与水相接触，将整个载体链折叠使中间的疏水药物部分远离水相，多个上述形态的载体链聚集形成纳米颗粒。
这种方案的设计可以通过调控疏水的hcpt药物链分子量控制hcpt的载药，如控制疏水hcpt药物链分子量为5000，其载体整体分子量为15000，则药物链占总体分子量33.3％；疏水hcpt药物分子量为4000，其载体整体分子量为14000，则药物链占总体分子量28.6％，实现了通过化学键载hcpt并且具有ros响应性释放完整的hcpt分子功能，同时搭载dex用于协同治疗。
本发明利用含有活性氧(ros)响应性的硫缩酮键单体和10-羟基喜树碱以及聚乙二醇(peg)聚合并搭载地塞米松(dex)制备稳定可控药物载体的方法，涉及生物医用材料技术领域。这种以hcpt药物单体聚合成载体的一部分，其稳定性更好，在肿瘤微环境中可以实现活性氧控制释放，在与地塞米松的协同作用下，增加hcpt的治疗效果。本发明方法操作简易，原料来源丰富，所得纳米颗粒具有载药量高、分散性好、可控性好等优点。可从控制疏水药物段的分子量控制hcpt的含量，针对不同治疗方案来控制药物量。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是实施例1中的合成路线示意图；
图2是实施例1所得的未负载地塞米松的载体的透射电镜图；
图3是实施例1所得的未载地塞米松的纳米颗粒的海拉细胞(hela)和小鼠胚胎成纤维细胞(nih3t3)毒性；
图4是实施例2所得稳定可控释药物的透射电镜图；
图5是实施例2所得的稳定可控释药物的hela细胞和nih3t3毒性；
图6是实施例3所得的无ros响应性且未载地塞米松的纳米颗粒的hela细胞和nih3t3毒性；
图7是实施例1实施例2实施例3的所有纳米颗粒与单一10-羟基喜树碱与地塞米松细胞毒性；
图8是为10-羟基喜树碱在48小时内有无ros响应性纳米颗粒的释放量测试；
图9是地塞米松在48小时内有无ros响应性纳米颗粒的释放量测试。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细描述。
本发明提供了一种稳定可控释药物,所述的稳定可控释药物包括载体和负载在载体上地塞米松，地塞米松为载体质量的(9.7-0)％；所述的载体是由含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱和聚乙二醇通过缩聚形成的嵌段共聚物。
其制备方法是先将含有硫缩酮的单体的两个羟基氯甲酰化，在无水和氮气保护的条件下，与hcpt聚合形成疏水的药物链，将药物链通过乙醚沉淀出来，通过酯化反应与羧基化peg反应，制成两端是peg中间是疏水药物的三嵌段聚合物，再将此嵌段聚合物与dex共同溶解在dmso中，将溶液均匀分散在超纯水中，分散均匀后通过透析除去dmso溶剂，得到载dex的三嵌段聚合物胶束。其反应方程式如下：
实施例1
本实施例所述稳定可控释药物载体的制备方法如下：
s1、将472毫克三光气与196毫克4-二甲氨基吡啶溶于10毫升无水二氯甲烷中，加入78.5毫克硫缩酮单体2,2'-[(1-甲基亚乙基)双(硫)]二[乙醇]，在氮气保护下，30摄氏度反应24小时后，3000转/分钟离心5分钟，取上层清液为含有氯甲酰化的硫缩酮单体的二氯甲烷溶液；本实施例中所述的三光气以及4-二甲氨基吡啶，用量分别为硫缩酮单体摩尔量的4倍。
s2、将175毫克10-羟基喜树碱溶于5毫升dmf中，在氮气环境下将离心得到的步骤s1制备的全部上层清液滴加进去，在30摄氏度下反应30小时后，使用截留分子量为5000的透析袋在超纯水中透析24小时，得到ros响应性的含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱，其具有疏水性特点；本实施例中氯甲酰化的含硫缩酮单体与10-羟基喜树碱的投料摩尔比为1:1.2。
s3、取步骤s2的产物8毫克含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱溶于10毫升四氢呋喃中，加入1.3毫克二环己基碳二亚胺和0.7毫克4-二甲氨基吡啶，加入20毫克分子量为5000的羧基化peg，30℃下反应24小时后，使用截留分子量为7000的透析袋在超纯水中进行透析24小时，冷冻干燥后得到聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱；
本实施例中加入的羧基化聚乙二醇(peg)与所述含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱的投料摩尔比为2:1，二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶和羧基化聚乙二醇按照1:1:1的摩尔比进行投料。
s4、将步骤s3所得产物取10毫克溶于1毫升四氢呋喃中，搅拌的同时向10毫升超纯水中逐滴滴加，滴加完毕后置于通风橱24小时待四氢呋喃挥发完全，即得到未搭载dex的80-100nm的纳米颗粒。搅拌至浑浊均匀的溶液状态。本实施例中聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱和地塞米松的质量比1:0。
上述整体合成路线由附图1所示，所得纳米颗粒由jeoljsm-6390lv型透射电镜测得粒径如附图2所示，由图2可以看出透射电镜下的纳米颗粒粒径在80-100nm，粒径大小易于进入细胞。未搭载dex的纳米颗粒通过mtt法测试细胞毒性，结构如图3所示，图3说明未载地塞米松的载体对癌细胞的毒性比正常细胞大，在同样的药物浓度下对癌细胞的杀伤率更大。
由于dmf沸点高不易通过旋转蒸发除去，且温度过高会对药物结构造成一定的破坏，透析可以提高产物纯度，可以除去小分子副产物。
实施例2
本实施例所述稳定可控释药物的制备方法如下：
s1、将944毫克三光气与392毫克4-二甲氨基吡啶溶于15毫升无水二氯甲烷中，加入157毫克2,2'-[(1-甲基亚乙基)双(硫)]二[乙醇]，在氮气保护下，20摄氏度反应24小时后，3000转/分钟离心5分钟，取上层清液备用；本实施例中所述的三光气以及4-二甲氨基吡啶，用量分别为硫缩酮单体摩尔量的4倍。
s2、将292毫克10-羟基喜树碱溶于10毫升dmf中，在氮气环境下将离心得到的清液滴加进去，在20摄氏度下反应24小时后，使用截留分子量为5000的透析袋在超纯水中透析48小时，得到疏水的含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱；本实施例中氯甲酰化的含硫缩酮单体与10-羟基喜树碱的投料摩尔比为1:1。
s3、取16毫克含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱溶于10毫升四氢呋喃中，加入2毫克二环己基碳二亚胺，和1毫克4-二甲氨基吡啶加入40毫克分子量为5000的羧基化peg，20摄氏度下反应24小时后，使用截留分子量为7000的透析袋在超纯水中进行透析24小时，冷冻干燥后得到产物；
本实施例中加入的羧基化聚乙二醇(peg)与所述含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱的投料摩尔比为2:1，二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶和羧基化聚乙二醇按照1.5:1.5:1的摩尔比进行投料。
s4、将所得产物取10毫克与10毫克dex溶于1毫升二甲亚砜中，搅拌的同时向10毫升超纯水中逐滴滴加，搅拌12小时后，使用截留分子量为5000的透析袋在超纯水中透析24小时，即得搭载dex的80-100nm的纳米颗粒。本实施例中，聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱和地塞米松的投料质量比1：1。
所得纳米颗粒由jeoljsm-6390lv型透射电镜测得粒径如附图4所示，由图4可以看出透射电镜下的纳米颗粒粒径在80-100nm，粒径大小易于进入细胞。地塞米松为聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)包覆药物后的9.7wt％，其中10-羟基喜树碱含量为聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)的16.8wt％，即10-羟基喜树碱在载体结构质量中所占的比重为16.8％。，搭载dex的纳米颗粒通过mtt法测试细胞毒性，结构如图5所示，图5说明负载地塞米松的载体对癌细胞的毒性比正常细胞大，在同样的药物浓度下对癌细胞的杀伤率更大。
实施例3
本实施例所述稳定可控释药物的制备方法如下：
s1、将944毫克三光气与392毫克4-二甲氨基吡啶溶于15毫升无水二氯甲烷中，加入157毫克2,2'-[(1-甲基亚乙基)双(硫)]二[乙醇]，在氮气保护下，20摄氏度反应24小时后，3000转/分钟离心5分钟，取上层清液备用；本实施例中所述的三光气以及4-二甲氨基吡啶，用量分别为硫缩酮单体摩尔量的4倍。
s2、将350毫克10-羟基喜树碱溶于10毫升dmf中，在氮气环境下将离心得到的清液滴加进去，在20摄氏度下反应24小时后，使用截留分子量为5000的透析袋在超纯水中透析48小时，得到疏水的含含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱；本实施例中氯甲酰化的含硫缩酮单体与10-羟基喜树碱的投料摩尔比为1:1.2。
s3、取16毫克含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱溶于10毫升四氢呋喃中，加入2毫克二环己基碳二亚胺，和1毫克4-二甲氨基吡啶加入40毫克分子量为5000的羧基化peg，20摄氏度下反应24小时后，使用截留分子量为7000的透析袋在超纯水中进行透析24小时，冷冻干燥后得到产物；
本实施例中加入的羧基化聚乙二醇(peg)与所述含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱的投料摩尔比为2:1，二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶和羧基化聚乙二醇按照1.5:1.5:1的摩尔比进行投料。
s4、将所得产物取10毫克与10毫克dex溶于1毫升二甲亚砜中，搅拌的同时向10毫升超纯水中逐滴滴加，搅拌12小时后，使用截留分子量为5000的透析袋在超纯水中透析24小时，即得搭载dex的80-100nm的纳米颗粒。本实施例中，聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱和地塞米松的投料质量比1：1。
实施例4
本实施例所述稳定可控释药物的制备方法如下：
s1、将944毫克三光气与392毫克4-二甲氨基吡啶溶于15毫升无水二氯甲烷中，加入132毫克1,7-庚二醇，在氮气保护下，30摄氏度反应24小时后，3000转/分钟离心5分钟，取上层清液备用；本实施例中所述的三光气以及4-二甲氨基吡啶，用量分别为硫缩酮单体摩尔量的4倍。
s2、将292毫克10-羟基喜树碱溶于10毫升dmf中，在氮气环境下将离心得到的清液滴加进去，在30摄氏度下反应36小时后，使用截留分子量为5000的透析袋在超纯水中透析24小时，得到疏水的含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱；本实施例中氯甲酰化的含硫缩酮单体与10-羟基喜树碱的投料摩尔比为1:1。
s3、取16毫克含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱溶于10毫升四氢呋喃中，加入2毫克二环己基碳二亚胺，和1毫克4-二甲氨基吡啶加入40毫克分子量为5000的羧基化peg，30摄氏度下反应24小时后，使用截留分子量为7000的透析袋在超纯水中进行透析24小时，冷冻干燥后得到产物；
本实施例中加入的羧基化聚乙二醇(peg)与所述含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱的投料摩尔比为2:1，二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶和羧基化聚乙二醇按照1.5:1.5:1的摩尔比进行投料。
s4、将所得产物取10毫克溶于1毫升四氢呋喃中，搅拌的同时向10毫升超纯水中逐滴滴加，滴加完毕后置于通风橱24小时待四氢呋喃挥发完全，即得到没有ros响应性的未搭载dex的80-100nm的纳米颗粒。本实施例中聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱和地塞米松的质量比1:0。
没有ros响应性的未搭载dex的纳米颗粒通过mtt法测试细胞毒性如附图6所示，图6说明使用1,7-庚二醇代替硫缩酮单体的没有ros响应性的载体对癌细胞的毒性和正常细胞都比较小，不具有ros响应性无法实现控制释放药物进行治疗。
实施例1实施例2实施例3的所有纳米颗粒与单一hcpt与dex细胞毒性如附图7所示，图7说明通过mtt法测试细胞毒性，用于验证载地塞米松药物的载体效果，图中可以说明载地塞米松的载体对hela细胞的毒性最大，在50-100微克每毫升浓度范围内，相比较单纯的hcpt药物、地塞米松药物、没有ros响应性的载体、具有ros响应性未载地塞米松的载体，其中具有ros响应性载地塞米松的载体其细胞存活率最低，对于hela肿瘤细胞和nih3t3正常细胞的毒性相比，nih3t3的毒性普遍偏低，在相同浓度下，具有ros响应性载地塞米松的载体对肿瘤细胞的毒性更大，对正常细胞的毒性较小。
实施例5
本实施例所述稳定可控释药物的制备方法如下：
s1、将944毫克三光气与392毫克4-二甲氨基吡啶溶于15毫升无水二氯甲烷中，加入132毫克1,7-庚二醇，在氮气保护下，30摄氏度反应24小时后，3000转/分钟离心5分钟，取上层清液备用；本实施例中所述的三光气以及4-二甲氨基吡啶，用量分别为硫缩酮单体摩尔量的4倍。
s2、将292毫克10-羟基喜树碱溶于10毫升dmf中，在氮气环境下将离心得到的清液滴加进去，在30摄氏度下反应30小时后，使用截留分子量为5000的透析袋在超纯水中透析24小时，得到疏水的含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱；本实施例中氯甲酰化的含硫缩酮单体与10-羟基喜树碱的投料摩尔比为1:1。
s3、取16毫克含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱溶于10毫升四氢呋喃中，加入1毫克二环己基碳二亚胺，和1毫克4-二甲氨基吡啶加入40毫克分子量为5000的羧基化peg，30摄氏度下反应24小时后，使用截留分子量为7000的透析袋在超纯水中进行透析24小时，冷冻干燥后得到产物；
本实施例中加入的羧基化聚乙二醇peg与所述含硫缩酮单体的聚10-羟基喜树碱的投料摩尔比为2:1，二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶和羧基化聚乙二醇按照1.5:1.5:1的摩尔比进行投料。
s4、将所得产物取10毫克与10毫克dex溶于1毫升二甲亚砜中，搅拌的同时向10毫升超纯水中逐滴滴加，搅拌12小时后，使用截留分子量为5000的透析袋在超纯水中透析24小时，即得没有ros响应性的搭载dex的80-100nm的纳米颗粒。本实施例中聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱和地塞米松的质量比1:1。
附图8为10-羟基喜树碱在48小时内有无ros响应性纳米颗粒的释放量测试；附图9为地塞米松在48小时内有无ros响应性纳米颗粒的释放量测试。
图8说明48小时内10-羟基喜树碱的药物释放率，在10小时内的释放效率最高，药物释放率可达60％，在48小时内可以完全释放，而无ros响应性的对照组则无法释放出药物。
图9说明48小时内地塞米松的药物释放率，在10小时内的药物释放率可达85％，在48小时内科完全释放，无ros响应性的对照组的药物释放较为缓慢，由于是利用亲疏水包覆在纳米颗粒内部，会随着时间缓慢释放出来。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
1.一种稳定可控释药物，其特征在于，包括载体聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)，所述的聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)负载有或不负载地塞米松，地塞米松占聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)的质量分数为(9.7-0)％；
所述的聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)由含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱和具有亲水性的聚乙二醇通过酯化反应形成。
2.根据权利要求1所述的稳定可控释药物，其特征在于，所述稳定可控释药物为粒径80-100nm的纳米颗粒。
3.根据权利要求2所述的稳定可控释药物，其特征在于，所述地塞米松为聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)包覆药物后的9.7wt％，其中10-羟基喜树碱含量为聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)的16.8wt％，即10-羟基喜树碱在载体结构质量中所占的比重为16.8％。
4.一种权利要求1所述的稳定可控释药物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
s1、将含有活性氧(ros)响应性特性的硫缩酮单体加入无水二氯甲烷中，充分搅拌，再加入三光气以及4-二甲氨基吡啶，在氮气氛围下搅拌即得氯甲酰化的含硫缩酮单体，通过3000转每分钟离心获得上清液。所述的三光气以及4-二甲氨基吡啶，用量分别为硫缩酮单体摩尔量的4倍，即三光气：4-二甲氨基吡啶：氯甲酰化的含硫缩酮单体的摩尔比为4:4:1；
s2、将10-羟基喜树碱溶于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)或二甲亚砜中，再加入所述步骤s1制备得到的氯甲酰化的硫缩酮单体，反应24-36小时，将反应产物溶液转移至透析袋在超纯水中透析24小时，冷冻干燥得到具有ros响应性的含硫缩酮的聚10-羟基喜树碱；
s3、将步骤s2的产物溶于四氢呋喃中，加入二环己基碳二亚胺和4-二甲氨基吡啶，加入羧基化聚乙二醇，反应24小时，反应产物溶液转移至透析袋在超纯水中透析24小时，冷冻干燥得到聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱，其重均分子量为(13000-15000)；
s4、将步骤s3的制备得到的聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱与地塞米松按照质量比为1：(0-1)溶于二甲亚砜或四氢呋喃中，由于地塞米松不溶于四氢呋喃，故不搭载地塞米松时选取容易除去的四氢呋喃作为溶剂，其中聚乙二醇修饰的聚10-羟基喜树碱(载体)与二甲亚砜或四氢呋喃的质量比为1:100，充分溶解后向超纯水中逐滴滴加，搅拌均匀后，使用透析袋在超纯水中透析24小时，即得搭载地塞米松的纳米颗粒，所述二甲亚砜与超纯水的体积比为1:10。
5.根据权利要求4所述稳定可控释药物的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中所述的三光气以及4-二甲氨基吡啶，用量分别为硫缩酮单体摩尔量的4倍。
6.根据权利要求4所述稳定可控释药物的制备方法，其特征在于，所述的步骤s2中氯甲酰化的含硫缩酮单体与10-羟基喜树碱的投料摩尔比为1:(1.2-1)。
7.根据权利要求4所述稳定可控释药物的制备方法，其特征在于，所述步骤s3中加入的羧基化聚乙二醇peg与所述氯甲酰化的硫缩酮单体的投料摩尔比为2:1，二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶和羧基化聚乙二醇按照(1.5-1):(1.5-1):1的摩尔比进行投料。
8.根据权利要求4所述稳定可控释药物的制备方法，其特征在于，所述步骤s4中如不包覆地塞米松时选取四氢呋喃为溶剂，则不需要透析除去，静置在通风橱24小时即可除去。
9.根据权利要求4所述稳定可控释药物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法是在温度为20-30℃的条件下进行。
技术总结