本发明涉及一种预防及治疗女性生殖道炎症的药物，尤其是一种可维持阴道ph≤4.5的酸性环境、具有较强的缓冲能力及杀菌效果且无刺激的防治阴道炎症的外用生物制剂及其制备方法。
背景技术：
女性生殖道感染（reproductivetractinfection,rti）主要为妇女生殖系统出现的感染性疾病，是由于寄生虫、病毒、细菌、真菌、衣原体等多种病原微生物引起的疾病。正常女性生殖道菌群主要以革兰阳性乳酸杆菌为优势菌，乳酸杆菌在酸性环境下分解阴道黏膜上皮内的糖原产生乳酸，同时产生过氧化氢及乳酸菌素，可有效抑制致病菌的滋生繁殖。研究表明，维持阴道ph≤4.5、保证阴道微生物菌群结构的平衡是维持女性生殖道健康的重要因素。
目前，已有用于治疗阴道炎症的凝胶剂，即将治疗病菌的药物与空白凝胶混合制成，具有良好的附着滞留性。现有凝胶剂所用药物有抗生素、中药提取物或抗菌肽三种。抗生素抗菌效果最好，但是存在着破坏阴道的自洁功能，导致阴道内正常菌群失调的问题；中药提取物亦具有很好的疗效，但是其ph为7.5左右，不仅会影响革兰阳性乳酸杆菌等优势菌的生长，对阴道的自洁功能有一定的影响，而且对皮肤较为刺激，有时产生皮肤红肿等副作用；抗菌肽ph为3.8左右，利于阴道自洁，但抗菌效果相对较弱。
技术实现要素：
本发明是为了现有技术所存在的上述技术问题，提供一种可维持阴道ph≤4.5的酸性环境、具有较强的缓冲能力及杀菌效果且无刺激的防治阴道炎症的外用生物制剂及其制备方法。
本发明的技术解决方案是：一种防治阴道炎症的外用生物制剂，由以下质量百分比的原料组成：苦参提取物1~5%、茯苓提取物1~5%、当归提取物0.1~2%、野菊花提取物0.1~2%、白百合花提取物0.1~2%、北美金缕梅提取物0.1~2%、金盏花提取物0.1~2%、1,3-丁二醇1~10%、羟乙基纤维素0.1~2%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物0.1~2%、乙二胺四乙酸二钠0.1~2%以及抗菌肽0.1~10%，水余量。
一种上述防治阴道炎症的外用生物制剂的制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：
a.将1,3-丁二醇、羟乙基纤维素、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、水加入到容器中搅拌溶解均匀；将容器加热至85℃，加入乙二胺四乙酸二钠，恒温搅拌30min，得空白凝胶；
b.将空白凝胶搅拌降温至45℃，加入苦参提取物、茯苓提取物、当归提取物、野菊花提取物、白百合花提取物、北美金缕梅提取物、金盏花提取物及抗菌肽搅拌均匀；紫外照射30min即可。
本发明是将中药提取物、抗菌肽及凝胶原料合理配比，ph值为3.8~4.4且缓冲能力强，即可维持阴道ph≤4.5的酸性环境，为革兰阳性乳酸杆菌等优势菌的生长创造良好的环境，提高阴道的自洁功能，药物有效成分易于被皮肤黏膜吸收且无刺激，提高了杀菌效果，可用于预防及治疗女性生殖道炎症。
具体实施方式
实施例1：
本发明的一种防治阴道炎症的外用生物制剂，由以下质量百分比的原料组成：苦参提取物2.5%、茯苓提取物2.5%、当归提取物0.4%、野菊花提取物0.4%、白百合花提取物0.4%、北美金缕梅提取物0.4%、金盏花提取物0.4%、1,3-丁二醇6%、羟乙基纤维素0.2%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物0.75%、乙二胺四乙酸二钠0.3%以及抗菌肽（biomapas）2.1%，水余量。
制备方法按照如下步骤进行：
a.将1,3-丁二醇、羟乙基纤维素、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、水加入到容器中搅拌溶解均匀；将容器加热至85℃，加入乙二胺四乙酸二钠，恒温搅拌30min，得空白凝胶；
b.将空白凝胶搅拌降温至45℃，加入苦参提取物、茯苓提取物、当归提取物、野菊花提取物、白百合花提取物、北美金缕梅提取物、金盏花提取物及抗菌肽搅拌均匀；紫外照射30min即可。
所用原料来源如下：
苦参提取物、茯苓提取物、当归提取物、野菊花提取物、白百合花提取物、北美金缕梅提取物及金盏花提取物等购于北京云之清水科技有限公司；抗菌肽（biomapas）购于广州华瑜生物科技有限公司；1,3-丁二醇购于北京诚志欣源科技发展有限公司；羟乙基纤维素购于北京西雅克商贸有限公司；丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、乙二胺四乙酸二钠购于沈阳永洁洗化原料有限公司。
实施例2：
本发明的防治阴道炎症的外用生物制剂，由以下质量百分比的原料组成：苦参提取物1%、茯苓提取物5%、当归提取物0.1%、野菊花提取物2%、白百合花提取物0.1%、北美金缕梅提取物2%、金盏花提取物0.1%、1,3-丁二醇2%、羟乙基纤维素1%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物1%、乙二胺四乙酸二钠1%以及抗菌肽10%，水余量。
制备方法及原料来源同实施例1。
实施例3：
本发明的防治阴道炎症的外用生物制剂，由以下质量百分比的原料组成：苦参提取物5%、茯苓提取物1%、当归提取物2%、野菊花提取物0.1%、白百合花提取物2%、北美金缕梅提取物0.1%、金盏花提取物2%、1,3-丁二醇8%、羟乙基纤维素2%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物2%、乙二胺四乙酸二钠2%以及抗菌肽8%，水余量。
制备方法及原料来源同实施例1。
实验例
一．本发明ph值及缓冲能力测定
1.本发明实施例1所得防治阴道炎症的外用生物制剂置于22℃恒温箱中，相对湿度50%时，测量ph值为4.13。
2.将本发明实施例1的防治阴道炎症的外用生物制剂溶于蒸馏水中，分别加入强酸和强碱为0.060mol和0.070mol，测定其ph值，测量三次取平均值，测定结果为4.13。
说明本发明具有较强的缓冲能力，可以维持阴道ph≤4.5，预防阴道炎。
二．本发明用于阴道炎的临床观察
1．观察对象
以自愿为原则，选择500例作为观察对象，平均分为实施例1组、空白凝胶组、对照组1、对照组2、对照组3。跟据临床症状、体征和白带常规检查结果，每组将病例分为非特异性阴道炎（阴道清洁度iii、iv度）40例，滴虫性阴道炎25例，霉菌性阴道炎35例，年龄均为25~49岁，已婚，非月经期，非怀孕期，均未用过其他药物治疗。
2．症状与体征
四种阴道炎均有不同程度的白带增多、外阴瘙痒或灼热感。妇科检查：阴道黏膜有不同程度的充血，阴道内分泌物多。其中滴虫性阴道炎分泌物呈泡沫样黄绿色稀液。霉菌性阴道炎分泌物呈豆渣样或干酪样。非特异性阴道炎分泌物呈脓性或淡血水样。
3.治疗方法
各组使用方法及使用量均相同，各组使用药物如下：
实施例1组：本发明实施例1所得防治阴道炎症的外用生物制剂。
空白凝胶组：本发明实施例1方法步骤1所得空白凝胶，ph值为7。
对照组1：按照本发明实施例1的方法制备而成，与实施例1所不同的是由以下质量百分比的原料组成：苦参提取物2.8%、茯苓提取物2.8%、当归提取物0.7%、野菊花提取物0.7%、白百合花提取物0.7%、北美金缕梅提取物0.7%、金盏花提取物0.7%、1,3-丁二醇6%、羟乙基纤维素0.2%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物0.75%及乙二胺四乙酸二钠0.3%，水余量，ph值7.2。
对照组2：按照本发明实施例1的方法制备而成，与实施例1所不同的是由以下质量百分比的原料组成：1,3-丁二醇6%、羟乙基纤维素0.2%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物0.75%、乙二胺四乙酸二钠0.3%及抗菌肽（biomapas）9.1%，水余量，ph值3.5。
对照组3：壳聚糖妇科凝胶（外购）。
采用阴道上药法：临睡前取仰卧位，膝盖弯曲，利用戴手指套的手指将药物轻轻插入阴道深部子宫颈处，抽出手指套，弃去。每晚一次，5~7d为一个疗程，治疗1~2个疗程。于停药后2d或者下次月经干净后检查阴道分泌物。记录用药前后症状、体征、实验室检查白带常规检查结果。
4．治疗效果
治愈：临床症状、体征消失，特异性阴道炎阴道分泌物检查清洁度在i~ii度，白带常规检查病原体转阴。好转：临床症状、体征部分消失，特异性阴道炎阴道分泌物检查清洁度在i~ii度，白带常规检查病原体转阴。无效：临床症状、体征无改变，特异性阴道炎阴道分泌物检查清洁度在iii~iv度，白带常规检查病原体仍为阳性。
5．结果分析如表1.
表1
三.本发明生物制剂抑菌实验研究
将本发明实施例1、对照组1、2、3对大肠杆菌（escherichiacoli）8099、金黄色普通球菌（staphylococcusaureus）atcc6538、白色念珠菌（candidaalbicans）atcc10231进行抑制实验，存活菌结果如表2。
对照组1、2、3所用药物同实验2。
表2
四、本发明对阴道黏膜刺激反应实验
实验动物：家兔6只，雌性，体重1500~2000g，分为本发明实施例1组和对照组组，供应全价颗粒饲料喂养，饲养环境：温度23.1~25.5℃，湿度45~59.4%，单笼饲养。
实验方法：将家兔仰面固定，暴露出会阴和阴道口。将导管（长度8cm左右的儿童用导尿管与5ml的注射器连接）湿润后轻柔地插入阴道（4cm）并用注射器缓慢注入2ml本发明生物制剂，抽出导管。对照组动物用生理盐水做同样处理。
24h后，采用气栓法处死动物，剖腹取出完整阴道，纵向剖开，肉眼观察是否有充血、水肿等现象，然后放入10%福尔马林溶液中固定48h，选取阴道的两端和中间3各部位的组织制片，he染色，进行组织病理学检查。
结果评价方法：将组织病理学检查结果进行评分。将实验组3只家兔3个部位的刺激反应积分相加后，再除以观察总数（家兔数×3），得出实验组阴道黏膜刺激反应的平均积分。对照组评分方法同上。
实验结果如下表3。
表3
注：平均积分=3只动物3个部位的刺激反应积分相加/观察总数（动物数×3）；刺激指数=本发明组平均积分—对照组平均积分。
结果表明，本发明的防治阴道炎症的外用生物制剂对家兔阴道黏膜的刺激指数为0，阴道黏膜刺激反应强度为无阴道黏膜刺激性。
1.一种防治阴道炎症的外用生物制剂，其特征在于由以下质量百分比的原料组成：苦参提取物1~5%、茯苓提取物1~5%、当归提取物0.1~2%、野菊花提取物0.1~2%、白百合花提取物0.1~2%、北美金缕梅提取物0.1~2%、金盏花提取物0.1~2%、1,3-丁二醇1~10%、羟乙基纤维素0.1~2%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物0.1~2%、乙二胺四乙酸二钠0.1~2%以及抗菌肽0.1~10%，水余量。
2.一种如权利要求1所述防治阴道炎症的外用生物制剂的制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：
a.将1,3-丁二醇、羟乙基纤维素、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、水加入到容器中搅拌溶解均匀；将容器加热至85℃，加入乙二胺四乙酸二钠，恒温搅拌30min，得空白凝胶；
b.将空白凝胶搅拌降温至45℃，加入苦参提取物、茯苓提取物、当归提取物、野菊花提取物、白百合花提取物、北美金缕梅提取物、金盏花提取物及抗菌肽搅拌均匀；紫外照射30min即可。
技术总结