本发明涉及一种用于痛风的治疗和防治的组合物。更具体地说，本发明涉一种含枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物的用于痛风的治疗和防治的组合物。
背景技术：
痛风是一种单钠尿酸盐（monosodiumurate,msu）沉积所致的晶体相关性疾病，与嘌呤代谢紊乱及（或）尿酸排泄减少所致的高尿酸血症直接相关，属于代谢性风湿病范畴。痛风发作时患者会出现剧烈疼痛，被称为“痛中之王”，临床上表现为急性发作性关节肿痛，常伴有血尿酸水平升高。最新流行病学资料显示痛风的发病率在世界范围内呈逐年上升趋势，受种族、基因、年龄、性别、饮食、职业、环境和受教育程度等多因素影响。来自中国风湿病数据中心的数据显示，在痛风发作期间，有79％的患者会因疼痛和需住院治疗而不能坚持正常工作，严重影响患者的工作和生活质量，给患者及社会带来极大的精神压力和经济负担，故对痛风发病机制的研究以及开发有效的预防与治疗药物尤其重要。
尿酸为人体内嘌呤代谢的最终产物。血液中的尿酸含量随嘌呤分解与尿酸排泄速率之间的平衡而变化。数年来，高尿酸血症已与痛风相关联或认为高尿酸血症与痛风相同，但目前已鉴别尿酸作为大量代谢和血液动力学异常的标记。血液中的高尿酸含量诱发痛风，且通常与诸如肌肉痉挛、局部肿胀、炎症、关节疼痛、肌肉疲劳、压迫感和心肌梗塞的症状相关。
已使用多种商业化药物来治疗痛风，例如苯溴马隆(benzbromarone，urinorm)、丙磺舒(probenecid)、别嘌醇(allopurinol)、布可隆(bucolome)、辛可芬(cinchophan)和秋水仙碱(colchicine)。这些药物通过(例如)抑制尿酸形成，移除过量尿酸，作用于肾以帮助消除尿酸，抑制黄嘌呤氧化酶将黄嘌呤转化为尿酸的活性和加速尿酸排泄而起作用。然而，已知这些药物具有肝脏毒性，且引起多种副作用，诸如尿结石、胃肠阻塞、黄疸和贫血。未报导这些药物能够快速降低个体血液中的尿酸含量。
已知一些二肽适用于降低血液中的尿酸含量。举例来说，中国台湾专利第i280136号(中国台湾专利申请案第092114798号)揭示一种用于降低个体体内尿酸的组合物，其包含有效量的一或多种由组氨酸或其功能等效物和丙氨酸或其功能等效物组成的二肽。中国台湾专利中提及的例示性二肽包括肌肽(carnosine)、鹅肌肽、脱羧基肌肽(carcinine)和蛇肌肽(ophidine)。其仅教示每天经口投与组合物以提供约8mg至约50mg，优选约10mg至约45mg的量的二肽，但未揭示或提出通过投与二肽可快速降低个体血液中的尿酸含量的任何途径。鹅肌肽(β-丙氨酰基-1-甲基-l-组氨酸)为高度稳定的二肽，其具有约7.1的pk值，且在低ph值(<3.0)下保持完整。鹅肌肽天然存在于脊椎动物的骨骼肌组织和脑组织中，且由β-丙氨酸与1-甲基-l-组氨酸之间的肽键形成(参见托卡契夫卡雅(tolkachevskaya)，nf.1929.生理学化学杂志(zphysiolchem.)185：28-32.)。1938年，报导鹅肌肽为一种理想的生理酸碱缓冲剂。由于其生理酸碱缓冲能力，鹅肌肽可有效消除通过改变生物系统的ph值而促进的脂质过氧化作用。对于罹患痛风的酸血症个体来说，投与充当酸碱缓冲剂的鹅肌肽有助于调整血液的ph值，且有利于降低血液中的尿酸含量。应了解，快缩肌纤维缓冲能力中的40％由处于移动相中的二肽提供，而快缩肌纤维缓冲能力的剩余部分由基本上处于固定相中的肌蛋白提供(参见贝特-史密斯(bate-smith)，ec.1938，“精确的肌肉缓冲：蛋白质、磷酸盐和肌肽(thebufferingofmuscleinrigour：protein，phosphateandcarnosine.)，”生理学杂志(jphysiol.)92：336-43.)。此表明在高度结构化的肌细胞中，局部酸碱梯度由移动相的缓冲辅助作用和固定相的缓冲抑制作用而组成。此外，鹅肌肽具有各种抗氧化特性且适用作自由基净化剂或金属螯合剂。长期罹患炎症的个体通常具有较高的活体内自由基浓度。投与充当自由基净化剂的鹅肌肽有利于消除自由基。鹅肌肽也可有效抑制由铁、血红蛋白、脂质过氧化酶和单态氧促进的脂质过氧化作用(参见巴比扎也夫ma(babizhayevma)等人，1994，“l肌肽(β-丙氨酰基-l-组氨酸)和脱羧基肌肽(β-丙氨酰基组胺)充当具有羟基自由基净化和脂质过氧化酶活性的天然抗氧化剂(l-carnosine(beta-alanyl-l-histidine)andcarcinine(beta-alanylhistamine)actasnaturalantioxidantswithhydroxyl-radical-scavengingandlipid-peroxidaseactivities)，”生物化学杂志(biochemj.)304(pt2)：509-516和科恩r.(kohenr.)等人，1988，“存在于肌肉和大脑中的肌肽、高肌肽和鹅肌肽的抗氧化活性(antioxidantactivityofcarnosine，homocarnosine，andanserinepresentinmuscleandbrain)，”美国国家科学院院刊(procnatlacadsciusa.)85(9)：3175-3179.)。此外，鹅肌肽可改善由疲劳引起的活体内氧化应力，且增强生物体内的氧自由基吸收能力。鹅肌肽也可充当中枢组胺能神经系统中的递质的前体。经由鹅肌肽中所含的组氨酸的代谢，鹅肌肽可有效调整中枢神经系统中的组织胺浓度，降低血液中的皮质醇浓度且使疲劳缓解(参见阿维w(aoiw.)等人，2006，“运动和功能性食品(exerciseandfunctionalfoods.)，”营养学杂志(nutrj.)5：15-22和美国专利第6,680,294号)。然而，未报导用于治疗痛风的包含鹅肌肽的市售药物具有快速降低个体血液中的尿酸含量的功效。对研制一种可快速降低个体血液中的尿酸含量，由此治疗痛风且减轻与血液中高尿酸含量相关的症状的新药仍存在需要。
目前，对于痛风还没有完全根治的办法，只能通过药物干预缓解病情。痛风的药物干预包括降尿酸治疗和抗炎治疗。用于降尿酸、防治痛风的有效药物，由于其严重的不良反应、依从性差、价格昂贵等原因，导致全球范围内痛风的药物干预效果仍不容乐观。因此，探索价优易得、不良反应小、治疗依从性好、安全有效、可长期使用的抗痛风药物成为该领域亟待解决的必然需要。
技术实现要素：
发明内容本发明者已意外发现，投与含枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物的组合物可快速降低个体血液中的尿酸含量，较好地治疗和防治痛风。
因此，本发明涉及一种用于快速降低个体血液中的尿酸含量的医药组合物，其包含枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物。
本发明进一步涉及一种包含本发明的医药组合物和指示将该组合物投与个体以提供该组合物的标签和/或包装插页的包装。
此外，本发明涉及利用枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物在制造用以快速降低个体血液中的尿酸含量的药物中的用途，其中所述药物包含枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物。
【具体实施方式】
具体实施方式在第一方面中，本发明提供一种用于快速降低个体血液中的尿酸含量的医药组合物，其包含枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物。本发明的医药组合物可快速降低个体血液中的尿酸含量，由此治疗痛风和/或改善与血液中高尿酸含量相关的症状。
在第二方面中，本发明提供一种包装，其包含本发明的医药组合物和指示将组合物投与个体以提供枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物的标签和/或包装插页。本发明的包装适用于快速降低个体血液中的尿酸含量，由此治疗痛风和/或改善与血液中高尿酸含量相关的症状。
在第三方面中，本发明提供一种利用枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物在制造能够快速降低个体血液中的尿酸含量的药物中的用途，其中所述药物包含枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物。所述药物可快速降低个体血液中的尿酸含量，由此治疗痛风和/或改善与血液中高尿酸含量相关的症状。
在本申请案中，术语“快速降低血液中尿酸含量”意谓在投与本发明的医药组合物1小时内，个体血液中的尿酸含量的降低量为约0.5至约10mg/dl，较佳地5至约10mg/dl。术语“个体”是指哺乳动物，优选为人类。此外，术语“与高尿酸含量相关的症状”是指(例如)肌肉痉挛、局部肿胀、炎症、关节疼痛、肌肉疲劳、压迫感、心肌梗塞或其组合。
用于本发明的枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸，其比例为1：0.5～1.5：0.1～0.8（摩尔比），优选为1：0.8～1.2：0.4～0.6（摩尔比），更优选为1：0.9～1.1：0.45～0.55（摩尔比），最优选为1：1：0.5（摩尔比），其优选实施例为枸橼酸钾（一水和物）：枸橼酸钠（二水和物）：枸橼酸（一水和物）=1.46：1.4：1（重量比）。它们的作用是符合生理性离子配比，碱化尿液，减少尿中钙离子浓度，提高尿液中结晶抑制因子（枸橼酸盐）浓度。用于溶解尿酸结石和防止新结石形成，作为胱氨酸结石和胱氨酸病的维持治疗。枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸的总用量以每一剂量大于约50mg至约6000mg、优选约100mg至约3500mg、更优选约1000mg至2500mg的量投与个体。枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸的总用量为整个医药组合物的总重量的1-60%（重量比），较佳地5-50%（重量比），更佳地10-40%（重量比）。
鹅肌肽是天然的一类重要的组氨酸二肽，其具有显著的降尿酸、抗氧化、抗衰老等功能，具有抑制尿酸的双重作用：一是抑制尿酸产生，二是促进尿酸排泄。在食品工业中己有广泛的应用。研究表明，深海鱼或家畜家禽的肌肉中含有一定量的鹅肌肽。
用于本发明的氨酸呤（鹅肌肽）可为天然存在的鹅肌肽或合成鹅肌肽。在本发明中，将鹅肌肽以每一剂量大于约5mg至约600mg、优选约50mg至约500mg、更优选约150mg至250mg的量投与个体，以达成快速降低个体血液中的尿酸含量的功效。氨酸呤（鹅肌肽）的用量为整个医药组合物的总重量的0.1-40%（重量比），较佳地1-35%（重量比），更佳地5-30%（重量比）。
樱桃系蔷薇科(rosaceae)李属(prunus)果树，广泛种植于世界各地，在中国的山东、辽宁、四川、北京等省市也有栽植。。樱桃的活性成分主要为花色苷、花青素、褪黑素、槲皮素、异槲皮素等，其中以花色苷和花青素含量最高。已有的研究表明，樱桃果实具有镇痛、抗炎、抗氧化、降尿酸、抗痛风、抗肿瘤、降血糖、降血脂、眼科保健等药理作用。
用于本发明的樱桃提取物应含花青素10%（wt/wt）以上和/或槲皮素和/或异槲皮素5%（wt/wt）以上，较佳地花青素的含量为30%（wt/wt）及槲皮素和/或异槲皮素的含量为5%（wt/wt）。樱桃提取物的用量以每一剂量大于约5mg至约2500mg、优选约30mg至约1500mg、更优选约100mg至1000mg的量投与个体，樱桃提取物的用量为整个医药组合物的总重量的0.1-50%（重量比），较佳地1-45%（重量比），更佳地5-40%（重量比）。
用于本发明的樱桃提取物获得的方法优选用下列的提取方法：
a、将500克樱桃果实处理洁净后放入匀浆机内搅拌10分钟得到樱桃果浆，将所述的樱桃果浆放入离心机内，在4～8℃、5000～10000转/分的条件下，经离心处理15分钟，然后取出上清液，并将所述的上清液进行真空抽滤，去除所述的上清液中的残余果渣，得到樱桃果汁提取液；
b、将600～1000毫升的树脂用600～1000毫升的丙酮浸泡16～24小时，将所述的树脂装入玻璃柱中，先用洁净水清洗至ph值＝7，再用1200～2000毫升的氢氧化钠溶液清洗，而后用洁净水将所述的树脂清洗至ph值＝7，然后再用1200～2000毫升的盐酸溶液清洗，而后再用洁净水将所述的树脂清洗至ph值＝7，所述的氢氧化钠溶液的浓度是1～3摩尔/升，所述的盐酸溶液的浓度是1～3摩尔/升；
c、将樱桃果汁提取液移入所述的玻璃柱中，然后用10倍于所述树脂体积的洁净水冲洗树脂，使其ph值＝7；
d、将吸附于树脂中的物质用80％乙醇溶液(含1～5％抗坏血酸)以8～15毫升/分钟的速度抽提，得到红色乙醇溶液，将所述的乙醇溶液放入旋转蒸发器，在40～60℃的温度下抽真空浓缩(真空度为-0.1兆帕)，得到水溶液，将浓缩后的水溶液经过低压冻干得到所述的樱桃提取物，该樱桃提取物是具有吸湿性的深红色粉末的物质。
本发明的医药组合物和药物可通过此项技术中已知的任何常规方法来制备。除活性成份枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物外，本发明的医药组合物和药物还可包含医药学上或生理学上可接受的赋形剂。合适的医药学上可接受的赋形剂包括(但不限于)糊精-麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露糖醇、淀粉、微晶纤维素、羧甲基纤维素、滑石粉和硬脂酸镁。
本发明的医药组合物和药物可调配为适当剂型，诸如药片、散剂、颗粒剂、胶囊、液体和悬浮液，以供用于各种投药途径。本发明的医药组合物和药物可经由任何合适途径、优选经由口腔或非经肠途径来投与。任何已知的包装和印刷方法均可用于制备本发明的包装。
【实施例】
实施例1-1
组合物1-1配方（1个单剂量）:
枸橼酸钾（一水和物）1.46g,枸橼酸钠（二水和物）1.4g,枸橼酸（一水和物）1g，氨酸呤（鹅肌肽）0.15g，樱桃提取物0.5g(含花青素150mg、槲皮素30mg)，乳糖5g,香精0.1g。
对照例1-1
组合物1-2配方（1个单剂量）:
枸橼酸钾（一水和物）1.46g,枸橼酸钠（二水和物）1.4g,枸橼酸（一水和物）1g，氨酸呤（鹅肌肽）0.15g，乳糖5g,香精0.1g。
对照例1-2
组合物1-3配方（1个单剂量）:
枸橼酸钾（一水和物）1.46g,枸橼酸钠（二水和物）1.4g,枸橼酸（一水和物）1g，樱桃提取物0.5g(同实施例1，含花青素150mg、槲皮素30mg)，乳糖5g,香精0.1g。
对照例1-3
组合物1-4配方（1个单剂量）:
氨酸呤（鹅肌肽）0.15g，樱桃提取物0.5g(同实施例1，含花青素150mg、槲皮素30mg)，乳糖5g,香精0.1g。
实施例2-1
组合物2-1配方（1个单剂量）:
枸橼酸钾（一水和物）1.1g,枸橼酸钠（二水和物）1.6g,枸橼酸（一水和物）0.7g，氨酸呤（鹅肌肽）0.3g，樱桃提取物（ⅰ ⅱ）（其中，（ⅰ）0.1g含花青素95mg,（ⅱ）0.05g含槲皮素47mg），乳糖10g,香精0.1g。
实施例2-2/对照例2-1
组合物2-2配方（1个单剂量）:
枸橼酸钾（一水和物）1.1g,枸橼酸钠（二水和物）1.6g,枸橼酸（一水和物）0.7g，氨酸呤（鹅肌肽）0.3g，樱桃提取物（ⅰ）0.1g(同实施例2-1，含花青素95mg)，乳糖10g,香精0.1g。
实施例2-3/对照例2-2
组合物2-3配方（1个单剂量）:
枸橼酸钾（一水和物）1.1g,枸橼酸钠（二水和物）1.6g,枸橼酸（一水和物）0.7g，氨酸呤（鹅肌肽）0.3g，樱桃提取物（ⅱ）0.05g(同实施例2-1，含槲皮素47mg)，乳糖10g,香精0.1g。
实施例2-4/对照例2-3
组合物2-4配方（1个单剂量）:
枸橼酸钾（一水和物）1.1g,枸橼酸钠（二水和物）1.6g,枸橼酸（一水和物）0.7g，氨酸呤（鹅肌肽）0.3g，樱桃提取物（ⅲ）0.15g(含花青素5mg，槲皮素1mg)，乳糖10g,香精0.1g。
实施例3-1
组合物3-1配方（共20个单剂量）:
枸橼酸钾26.2g,枸橼酸钠24g,枸橼酸氢7.2g,氨酸呤（鹅肌肽）5g，樱桃提取物3g，日落黄6mg,柠檬油0.2ml,水100ml。
上述樱桃提取物获得的方法为下列的提取方法：
a、将500克樱桃果实处理洁净后放入匀浆机内搅拌10分钟得到樱桃果浆，将所述的樱桃果浆放入离心机内，在4～8℃、8000转/分的条件下，经离心处理15分钟，然后取出上清液，并将所述的上清液进行真空抽滤，去除所述的上清液中的残余果渣，得到樱桃果汁提取液；
b、将800毫升的树脂用800毫升的丙酮浸泡16～24小时，将所述的树脂装入玻璃柱中，先用洁净水清洗至ph值＝7，再用1500毫升的氢氧化钠溶液清洗，而后用洁净水将所述的树脂清洗至ph值＝7，然后再用1500毫升的盐酸溶液清洗，而后再用洁净水将所述的树脂清洗至ph值＝7，所述的氢氧化钠溶液的浓度是2摩尔/升，所述的盐酸溶液的浓度是2摩尔/升；
c、将樱桃果汁提取液移入所述的玻璃柱中，然后用10倍于所述树脂体积的洁净水冲洗树脂，使其ph值＝7；
d、将吸附于树脂中的物质用80％乙醇溶液(含3％抗坏血酸)以8～15毫升/分钟的速度抽提，得到红色乙醇溶液，将所述的乙醇溶液放入旋转蒸发器，在50℃的温度下抽真空浓缩(真空度为-0.1兆帕)，得到水溶液，将浓缩后的水溶液经过低压冻干得到所述的樱桃提取物，该樱桃提取物是具有吸湿性的深红色粉末的物质(每10g含花青素7550mg、槲皮素540mg)。
实施例3-2/对照例3-1
除樱桃提取物获得的方法中的抗坏血酸用等量的甲酸代替外，其他均同实施例3-1（包括组合物配方（共20个单剂量））。
测试例
在此项经口投药测试中，测试28名患有慢性高尿酸血症的自愿成人个体(28岁至53岁的14名男性和14名女性)。所述个体停止其正常药物治疗至少7天。所述个体血液中的平均尿酸含量大于9.5mg/dl。将所述个体随机分为4组，每一组包含7名个体，分别服用实施例或对照例的1个单剂量。1小时后，测量个体血液中的尿酸含量。
结果展示于表1中。
表1-1：经口投与1小时后对血液中的尿酸含量的影响
表1-2：经口投与1小时后对血液中的尿酸含量的影响
表1-3：经口投与1小时后对血液中的尿酸含量的影响
1.一种用于治疗痛风和/或改善与血液中高尿酸含量相关的症状的医药组合物，其包含枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物，所述樱桃提取物含花青素10%（wt/wt）以上和槲皮素和/或异槲皮素5%（wt/wt）以上。
2.根据权利要求1的医药组合物，所述樱桃提取物含花青素30%（wt/wt）以上和槲皮素和/或异槲皮素5%（wt/wt）以上。
3.根据权利要求1的医药组合物，所述樱桃提取物含花青素50%（wt/wt）以上和槲皮素和/或异槲皮素10%（wt/wt）以上。
4.根据权利要求1的医药组合物，所述樱桃提取物含花青素70%（wt/wt）以上和槲皮素和/或异槲皮素20%（wt/wt）以上。
5.根据权利要求1的医药组合物，所述樱桃提取物的用量以每一剂量大于约5mg至约2500mg的量投与个体，或所述樱桃提取物的用量为整个医药组合物的总重量的0.1-50%（重量比）。
6.根据权利要求1的医药组合物，所述的枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸，其比例为1：0.5～1.5：0.1～0.8（摩尔比），或所述的枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸的总用量以每一剂量50mg至6000mg，或所述的枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸的总用量为整个医药组合物的总重量的1-60%（重量比）。
7.根据权利要求1的医药组合物，所述的氨酸呤（鹅肌肽）以每一剂量大于约5mg至约600mg的量投与个体，或所述的氨酸呤（鹅肌肽）用量为整个医药组合物的总重量的0.1-40%（重量比）。
8.根据权利要求1的医药组合物，所述樱桃提取物获得的方法选用下列的提取方法：
a、将500克樱桃果实处理洁净后放入匀浆机内搅拌10分钟得到樱桃果浆，将所述的樱桃果浆放入离心机内，在4～8℃、5000～10000转/分的条件下，经离心处理15分钟，然后取出上清液，并将所述的上清液进行真空抽滤，去除所述的上清液中的残余果渣，得到樱桃果汁提取液；
b、将600～1000毫升的树脂用600～1000毫升的丙酮浸泡16～24小时，将所述的树脂装入玻璃柱中，先用洁净水清洗至ph值＝7，再用1200～2000毫升的氢氧化钠溶液清洗，而后用洁净水将所述的树脂清洗至ph值＝7，然后再用1200～2000毫升的盐酸溶液清洗，而后再用洁净水将所述的树脂清洗至ph值＝7，所述的氢氧化钠溶液的浓度是1～3摩尔/升，所述的盐酸溶液的浓度是1～3摩尔/升；
c、将樱桃果汁提取液移入所述的玻璃柱中，然后用10倍于所述树脂体积的洁净水冲洗树脂，使其ph值＝7；
d、将吸附于树脂中的物质用含1～5％抗坏血酸的80％乙醇溶液以8～15毫升/分钟的速度抽提，得到红色乙醇溶液，将所述的乙醇溶液放入旋转蒸发器，在40～60℃的温度下抽真空浓缩，得到水溶液，将浓缩后的水溶液经过低压冻干得到所述的樱桃提取物，该樱桃提取物是具有吸湿性的深红色粉末的物质。
9.一种利用枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物在制造能够快速降低个体血液中的尿酸含量的药物中的用途，其中所述药物包含枸橼酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸、氨酸呤（鹅肌肽）及樱桃提取物，所述樱桃提取物含花青素10%（wt/wt）以上和槲皮素和/或异槲皮素5%（wt/wt）以上。
10.一种包含根据权利要求1至8的医药组合物和指示将该组合物投与个体以提供该组合物的标签和/或包装插页的包装。
技术总结