本发明涉及一种皮肤修复复合肽冻干制剂及其制备方法，适用于医药、个人护理等领域。
背景技术：
敏感性皮肤(sensitiveskin，ss)特指皮肤在生理或病理条件下发生的一种高反应状态，主要发生于面部，临床表现为受到物理、化学、精神等因素刺激时皮肤易出现灼热、刺痛、瘙痒及紧绷感等主观症状，伴或不伴红斑、鳞屑、毛细血管扩张等客观体征。敏感性皮肤在世界各国均有较高的发生率，由于调查方法不同，各地报道的发生率差异较大，欧洲为25.4％～89.9％，澳洲约为50％。女性发病率普遍高于男性，美洲女性为22.3％～50％，亚洲女性为40％～55.98％，我国女性约为36.1％。随着环境污染日益加重和精神压力增加等，其发生率逐渐升高，越来越受到人们的重视。敏感肌肤往往存在炎症和皮肤屏障受损两个方面。目前市面上存在含三肽-1铜和三肽-1的冻干制剂，但其复方设计上都忽略了抗炎及抗氧化这些重要诉求，
技术实现要素：
本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种皮肤修复复合肽冻干制剂，是从皮肤炎症、抗氧化、屏障修复三方面机制进行配方设计，进行三种功效肽的复配，其中棕榈酰三肽-8和乙酰基二肽-1鲸蜡酯具有高效抑制炎症作用，提高皮肤愉悦感的作用，谷胱甘肽和肌肽具有高效的抗氧化和清除自由基的作用，三肽-1铜和三肽-1具有促进胶原蛋白生成，加速瘢痕修护作用，达到抑制炎症和修复皮肤屏障的作用。
本发明的另外一个目的是提供一种皮肤修复复合肽冻干制剂的制备方法，通过温度工艺摸索，保证制剂稳定有效。
实现上述目的一种技术方案是：一种皮肤修复复合肽冻干制剂，包括以下重量份的组份：
水930份～980份；
复合肽1.652份～15.11份；
赋形剂10份～50份；
所述复合肽由抗炎肽、抗氧化肽和修复皮肤屏障肽复配组成。
上述的一种皮肤修复复合肽冻干制剂，其中，所述赋形剂采用甘露糖醇、普鲁兰多糖和山梨醇中的一种或者多种。
上述的一种皮肤修复复合肽冻干制剂，其中，所述抗炎肽采用0.001份～0.1份棕榈酰三肽-8和/或0.001份～0.01份乙酰基二肽-1鲸蜡酯；
所述抗氧化肽采用0.5份～3份的谷胱甘肽和/或1份～5份的肌肽；
所述屏障修复肽采用0.1～5份的三肽-1铜和0.05份～2份的三肽-1。
本发明还提供了一种上述皮肤修复复合肽冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：
s1，冻干液制备步骤，具体包括以下工序：
s11，将水加热后投入水锅中，进行降温；
s12，当所述水锅中水的温度降到65℃时，停止降温，将抗炎肽投入所述水锅，待抗炎肽完全溶解后开始继续降温；
s13，当所述水锅中水的温度降至45℃后，将屏障修复肽和赋形剂分别投入所述水锅，搅拌均匀；
s14，当所述水锅中的所有物料溶解完全成均一溶液后，出料制得冻干液。
s2，冻干步骤，具体包括以下工序：：
s21，将灌装至瓶内和半加塞的冻干液放入冻干机内，启动冻干机，设置60分钟内从室温预冷至-50℃，并维持240分钟，真空度为0mbar，将冻干液冻实；
s22，分四个阶段将冻实的冻干液从-50℃升温至-25℃，每一阶段升温5℃，升温速率为0.17℃/min，每个阶段均维持240分钟，每个阶段的真空度为0.05mbar；
s23，再分四个阶段将经过工序s22处理的冻干液从-25℃升温至-5℃，每一阶段升温5℃，升温速率为0.5℃/min，所述四个阶段一一对应地维持240分钟、180分钟、180分钟和90分钟，每个阶段的真空度均为0.10mbar；
s24，最后分五个阶段将经过工序s23处理的冻干液从-5℃升温至20℃即得到皮肤修复复合肽冻干制剂，每一阶段升温5℃，升温速率为0.17℃/min，所述五个阶段一一对应地维持180分钟、120分钟、120分钟、90分钟、90分钟，每个阶段的真空度均为为0.15mbar。
采用本发明的皮肤修复复合肽冻干制剂及其制备方法的技术方案，从皮肤炎症、抗氧化、屏障修复三方面机制进行配方设计，进行三种功效肽的复配，其中棕榈酰三肽-8和乙酰基二肽-1鲸蜡酯具有高效抑制炎症作用，提高皮肤愉悦感的作用，谷胱甘肽和肌肽具有高效的抗氧化和清除自由基的作用，三肽-1铜和三肽-1具有促进胶原蛋白生成，加速瘢痕修护作用，达到抑制炎症和修复皮肤屏障的作用。本发明的皮肤修复复合肽冻干制剂具备优秀速溶性能，且能保持低温5度1周不被微生物污染。
附图说明
图1为豚鼠切伤口后用修复复合肽冻干制剂进行涂抹处理5天后采集的皮肤切片图；
图2为豚鼠切伤口后用100万iuegf冻干粉溶液进行涂抹处理5天后采集的皮肤切片图；
图3为豚鼠切伤口后不做任何处理5天后采集的皮肤切片图；
图4为未进行切伤口的正常豚鼠皮肤的皮肤切片图；
图5为豚鼠切伤口后所采集的皮肤切片图。
具体实施方式
为了使本技术领域的技术人员能更好地理解本发明的技术方案，下面结合附图对其具体实施方式进行详细地说明：
表1
按照表1中的配方制备实施例1～5的皮肤修复复合肽冻干制剂，表1中，棕榈酰三肽-8和/或乙酰基二肽-1鲸蜡酯为抗炎肽；谷胱甘肽和/或肌肽为抗氧化肽；三肽-1铜和三肽-1为屏障修复肽。甘露糖醇、普鲁兰多糖和山梨醇为赋形剂。
皮肤修复复合肽冻干制剂的制备方法包括以下步骤：
s1，冻干液制备步骤，具体包括以下工序：
s11，将水加热后投入水锅中，进行降温；
s12，当所述水锅中水的温度降到65℃时，停止降温，将抗炎肽投入所述水锅，待抗炎肽完全溶解后开始继续降温；
s13，当所述水锅中水的温度降至45℃后，将屏障修复肽和赋形剂分别投入所述水锅，搅拌均匀；
s14，当所述水锅中的所有物料溶解完全成均一溶液后，出料制得冻干液。
s2，冻干步骤，具体包括以下工序：：
s21，将灌装至瓶内和半加塞的冻干液放入冻干机内，启动冻干机，设置60分钟内从室温预冷至-50℃，并维持240分钟，真空度为0mbar，将冻干液冻实；
s22，分四个阶段将冻实的冻干液从-50℃升温至-25℃，每一阶段升温5℃，升温速率为0.17℃/min，每个阶段均维持240分钟，每个阶段的真空度为0.05mbar；
s23，再分四个阶段将经过工序s22处理的冻干液从-25℃升温至-5℃，每一阶段升温5℃，升温速率为0.5℃/min，所述四个阶段一一对应地维持240分钟、180分钟、180分钟和90分钟，每个阶段的真空度均为0.10mbar；
s24，最后分五个阶段将经过工序s23处理的冻干液从-5℃升温至20℃即得到皮肤修复复合肽冻干制剂，每一阶段升温5℃，升温速率为0.17℃/min，所述五个阶段一一对应地维持180分钟、120分钟、120分钟、90分钟、90分钟，每个阶段的真空度均为为0.15mbar。
本发明的皮肤修复复合肽冻干制剂，三肽-1铜俗称蓝铜肽，是由甘氨酸、组氨酸、赖氨酸(ghk)和二价铜离子的络合物，该物质是在1970年科学家在血清中发现的，铜是维持身体机能所需的微量元素，在皮肤组织上有抗氧化、促进胶原增生、协助伤口愈合的功能。铜离子单独是无法穿透皮肤屏障的，连接到三肽上，形成铜肽，在治疗伤口和皮肤损伤方面非常有效，不但可减少疤痕组织生成，同时能刺激皮肤自行愈合。
三肽-1是由甘氨酸、组氨酸、赖氨酸组成的三肽，具有促进胶原蛋白生成的作用。
棕榈酰三肽-8由组氨酸、苯丙氨酸、精氨酸组成的三肽的棕榈酰形式的化合物，具有抑制il-8(白介素-8)、tnf-α(肿瘤坏死因子)等炎症因子，减少炎症反应的作用。
肌肽由β-丙氨酰和-l-组氨酸组成，天然存在人体中，具有清除自由基、抗氧化、抗糖化等功效。
谷胱甘肽为还原型，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成组成，存在于几乎身体的每一个细胞之中。并且广泛存在于动植物和微生物之中，是生物体内最重要的非蛋白巯基化合物之一，能够清除自由基、能够螯合重金属等内外毒素，防止皮肤色素沉着，防止新的黑色素形成并减少其氧化等功效。
乙酰基二肽-1鲸蜡酯由酪氨酸和精氨酸经酰基修饰后形成，具有降低炎症反应，减轻皮肤热感，提高肌肤愉悦感等功效。
甘露糖醇、普鲁兰多糖、山梨醇是常用的药用辅料，常用做片剂等的填充剂，在冻干针剂中用作载体，在悬浮剂中可作增稠剂，在本发明中是用于冻干制剂中的赋形剂。
本发明的皮肤修复复合肽冻干制剂的制备方法，棕榈酰三肽-8常温水溶性不佳，通过工艺摸索，确定其在60-65℃下能够溶解完全，且不影响活性物活性。
稳定性考察测试：
对实施例1～5的皮肤修复复合肽冻干制剂进行稳定性考察，直接在各个温度下观察冻干瓶中的粉体。结果如表2所示：
表2
从表2的结果可以看出：实施例1-4稳定性良好，实施例5未通过稳定性考察，问题可能是三肽-1铜和三肽-1含量过高。
小鼠疤痕修复测试：
对实施例2的皮肤修复复合肽冻干制剂和100万iuegf冻干粉溶液进行小鼠疤痕修复测试，实验方法如下：
试验动物：豚鼠(雌/雄)本院实验动物使用许可证号：syxk(沪)2014-0018
上海甲干生物科技有限公司生产许可证号：scxk(沪)2015-0005
试验条件：实验室温度：20～25℃相对湿度：60～70％
试验方法：选健康白色豚鼠15只，分实验组、对照组，每组实验设置三只豚鼠，剃去每只动物背部脊柱二侧5cm×5cm左右范围的被毛，用手术刀作无菌操作，在两侧皮肤作“一”字形切口(以渗血为度)后，两侧皮肤作“一”字形切口一一对应地涂抹实施例2的皮肤修复复合肽冻干制剂和100万iuegf冻干粉溶液。每天1次，连续5天后处死动物，解剖，取皮肤切口试验区作病理切片，进行组织学观察。
图1为豚鼠切伤口后用修复复合肽冻干制剂进行涂抹处理5天后采集的皮肤切片图，由图可知，豚鼠手术伤口基本恢复。
图2为豚鼠切伤口后用100万iuegf冻干粉溶液进行涂抹处理5天后采集的皮肤切片图，由图可知，豚鼠手术伤口基本恢复。
图3为豚鼠切伤口后不做任何处理5天后采集的皮肤切片图，由图可知，豚鼠手术伤口未恢复。
图4为未进行切伤口的正常豚鼠皮肤的皮肤切片图，由图可知，进行切口实验前豚鼠皮肤完整。
图5为豚鼠切伤口后所采集的皮肤切片图，由图可知，在切口实验后，豚鼠皮肤屏障破坏严重。
参阅图1至图5，实施例2的皮肤修复复合肽冻干制剂用于小鼠疤痕修复，手术伤口基本恢复，且没有出现任何炎症浸润，修复效果等同或者优于100万iuegf冻干粉效果。验证了本发明的皮肤修复复合肽冻干制剂具有抑制炎症和恢复皮肤屏障的作用。
本发明的皮肤修复复合肽冻干制剂针对皮肤炎症、抗氧化、屏障修复三个方面进行设计和复配，来解决敏感肌肤皮肤不适的问题，本发明从敏感肌肤病症出发，进行了三种功效的肽的复配，并且进行了工艺探索，解决了抗炎肽榈酰三肽-8和乙酰基二肽-1鲸蜡酯室温不溶解的问题，使其能够溶解于冻干预配液中，且不析出，保证了后续的冻干工艺顺利开展。
综上所述，本发明的皮肤修复复合肽冻干制剂，从皮肤炎症、抗氧化、屏障修复三方面机制进行配方设计，进行三种功效肽的复配，其中棕榈酰三肽-8和乙酰基二肽-1鲸蜡酯具有高效抑制炎症作用，提高皮肤愉悦感的作用，谷胱甘肽和肌肽具有高效的抗氧化和清除自由基的作用，三肽-1铜和三肽-1具有促进胶原蛋白生成，加速瘢痕修护作用，达到抑制炎症和修复皮肤屏障的作用。本发明的皮肤修复复合肽冻干制剂的制备方法，通过温度工艺摸索，保证制剂稳定有效，使得皮肤修复复合肽冻干制剂具备优秀速溶性能，且能保持低温5度1周不被微生物污染。
本技术领域中的普通技术人员应当认识到，以上的实施例仅是用来说明本发明，而并非用作为对本发明的限定，只要在本发明的实质精神范围内，对以上所述实施例的变化、变型都将落在本发明的权利要求书范围内。
1.一种皮肤修复复合肽冻干制剂，其特征在于，包括以下重量份的组份：
水930份～980份；
复合肽1.652份～15.11份；
赋形剂10份～50份；
所述复合肽由抗炎肽、抗氧化肽和修复皮肤屏障肽复配组成。
2.如权利要求1所述的一种皮肤修复复合肽冻干制剂，其特征在于，所述赋形剂采用甘露糖醇、普鲁兰多糖和山梨醇中的一种或者多种。
3.如权利要求1所述的一种皮肤修复复合肽冻干制剂，其特征在于，所述抗炎肽采用0.001份～0.1份棕榈酰三肽-8和/或0.001份～0.01份乙酰基二肽-1鲸蜡酯；
所述抗氧化肽采用0.5份～3份的谷胱甘肽和/或1份～5份的肌肽；
所述屏障修复肽采用0.1～5份的三肽-1铜和0.05份～2份的三肽-1。
4.如权利要求1所述的一种皮肤修复复合肽冻干制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1，冻干液制备步骤，具体包括以下工序：
s11，将水加热后投入水锅中，进行降温；
s12，当所述水锅中水的温度降到65℃时，停止降温，将抗炎肽投入所述水锅，待抗炎肽完全溶解后开始继续降温；
s13，当所述水锅中水的温度降至45℃后，将屏障修复肽和赋形剂分别投入所述水锅，搅拌均匀；
s14，当所述水锅中的所有物料溶解完全成均一溶液后，出料制得冻干液。
s2，冻干步骤，具体包括以下工序：：
s21，将灌装至瓶内和半加塞的冻干液放入冻干机内，启动冻干机，设置60分钟内从室温预冷至-50℃，并维持240分钟，真空度为0mbar，将冻干液冻实；
s22，分四个阶段将冻实的冻干液从-50℃升温至-25℃，每一阶段升温5℃，升温速率为0.17℃/min，每个阶段均维持240分钟，每个阶段的真空度为0.05mbar；
s23，再分四个阶段将经过工序s22处理的冻干液从-25℃升温至-5℃，每一阶段升温5℃，升温速率为0.5℃/min，所述四个阶段一一对应地维持240分钟、180分钟、180分钟和90分钟，每个阶段的真空度均为0.10mbar；
s24，最后分五个阶段将经过工序s23处理的冻干液从-5℃升温至20℃即得到皮肤修复复合肽冻干制剂，每一阶段升温5℃，升温速率为0.17℃/min，所述五个阶段一一对应地维持180分钟、120分钟、120分钟、90分钟、90分钟，每个阶段的真空度均为为0.15mbar。
技术总结