本发明涉及肿瘤治疗相关领域，具体为一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗。
背景技术：
纤维肉瘤是一种起源于间质细胞的恶性肿瘤，主要由纤维细胞及其产生的纤维、梭形细胞等构成。纤维肉瘤是一种具有高侵袭性的软组织肉瘤，它们可以侵入局部组织，并进一步转移到身体远处。肺是纤维肉瘤最常见的转移部位，其次是骨骼系统、淋巴结、脑、皮下组织等。骨的纤维肉瘤是罕见的原发性恶性肿瘤。纤维肉瘤可发生于全身各处有纤维组织的部位，病程为几周到几十年不等，并且可在任何年龄进行，没有显著性的特征。纤维肉瘤细胞的形态相对单一，呈人字形结构。与其他软组织肉瘤相比，纤维肉瘤的复发率更高。
肿瘤免疫治疗是放疗、化疗和手术治疗之外的另一种治疗肿瘤的方法，虽然目前这种方法还只处于ⅰ期和ⅱ期临床研究阶段，但它已被公认为是最具前景的肿瘤治疗方法。因此开发一种免疫激活能力强、抗原谱广泛、制备工艺简单的疫苗，成为亟待解决的问题。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗，复合疫苗包括肿瘤细胞液、蛋白提取物与免疫激活剂。
作为本发明一种优选的技术方案，免疫激活剂为cpg或氢氧化铝佐剂。
作为本发明一种优选的技术方案，上述一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗的制备方法，包括如下步骤：
s1：制备肿瘤细胞液；
s2：将s1中制得的肿瘤细胞液和免疫激活剂进行物理混合，物理混合制得预选液；
s3：制备蛋白提取物；
s4：将蛋白提取物与预选液混合处理后制得复合疫苗，蛋白提取物与预选液比例为1-2∶7-10。
作为本发明一种优选的技术方案，s3中蛋白提取物的制备包括如下步骤：步骤a：从健康群体样本中筛选具有抗肿瘤样本，抗肿瘤样本为样本中除骨髓以外的任一血液；步骤b：采集抗肿瘤样本中的单核细胞和血浆，并从血浆中提取其内的蛋白质，得到蛋白质预提取物；步骤c：培养单核细胞，将其培养成免疫细胞培养物，并从培养物中提取蛋白质；步骤d：将提取到的预提取物与蛋白质混合得到蛋白提取物。
作为本发明一种优选的技术方案，s1中肿瘤细胞液的制备包括如下步骤：步骤a：选取新鲜肿瘤组织并进行原代细胞培养；步骤b：用处理溶剂处理原代细胞，处理后得到细胞液与细胞碎片混合物；步骤c：将细胞液置入离心设备内进行离心操作，离心后经浓缩得到细胞浓缩液；步骤d：将细胞浓缩液用放射线灭活，灭活后得到肿瘤细胞液。
作为本发明一种优选的技术方案，步骤b中处理溶剂为次氯酸。
作为本发明一种优选的技术方案，步骤b中溶剂处理前需要对细胞进行清洗。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的复合型疫苗包括肿瘤细胞液部分与蛋白提取物部分，其中肿瘤细胞液采用放疗技术灭活，在保证肿瘤细胞免疫原性的情况下，使肿瘤细胞丧失活性，避免使用过程中诱导肿瘤的发生；而蛋白提取物部分采用培养物提取浓缩，得到抗肿瘤因子如il-1家族等。本发明制备工艺简单，便于规模化生产可以显著抑制肿瘤生长，同时可以很好的对肿瘤易感人群起到预防保健的作用。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：本发明提供一种技术方案：一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗，复合疫苗包括肿瘤细胞液、蛋白提取物与免疫激活剂。
在本实施例中，免疫激活剂为cpg。
上述一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗的制备方法，包括如下步骤：
s1：制备肿瘤细胞液；
s2：将s1中制得的肿瘤细胞液和免疫激活剂进行物理混合，物理混合制得预选液；
s3：制备蛋白提取物；
s4：将蛋白提取物与预选液混合处理后制得复合疫苗，蛋白提取物与预选液比例为1∶7。
在本实施例中，s1中肿瘤细胞液的制备包括如下步骤：步骤a：选取新鲜肿瘤组织并进行原代细胞培养；步骤b：用处理溶剂处理原代细胞，处理后得到细胞液与细胞碎片混合物；步骤c：将细胞液置入离心设备内进行离心操作，离心后经浓缩得到细胞浓缩液；步骤d：将细胞浓缩液用放射线灭活，灭活后得到肿瘤细胞液。
在本实施例中，s3中蛋白提取物的制备包括如下步骤：步骤a：从健康群体样本中筛选具有抗肿瘤样本，抗肿瘤样本为样本中除骨髓以外的任一血液；步骤b：采集抗肿瘤样本中的单核细胞和血浆，并从血浆中提取其内的蛋白质，得到蛋白质预提取物；步骤c：培养单核细胞，将其培养成免疫细胞培养物，并从培养物中提取蛋白质；步骤d：将提取到的预提取物与蛋白质混合得到蛋白提取物。
在本实施例中，步骤b中处理溶剂为次氯酸。
在本实施例中，步骤b中溶剂处理前需要对细胞进行清洗。
实施例2：
s1：制备肿瘤细胞液；
s2：将s1中制得的肿瘤细胞液和免疫激活剂进行物理混合，物理混合制得预选液；
s3：制备蛋白提取物；
s4：将蛋白提取物与预选液混合处理后制得复合疫苗，蛋白提取物与预选液比例为1∶9。
在本实施例中，s1中肿瘤细胞液的制备包括如下步骤：步骤a：选取新鲜肿瘤组织并进行原代细胞培养；步骤b：用处理溶剂处理原代细胞，处理后得到细胞液与细胞碎片混合物；步骤c：将细胞液置入离心设备内进行离心操作，离心后经浓缩得到细胞浓缩液；步骤d：将细胞浓缩液用放射线灭活，灭活后得到肿瘤细胞液。
在本实施例中，s3中蛋白提取物的制备包括如下步骤：步骤a：从健康群体样本中筛选具有抗肿瘤样本，抗肿瘤样本为样本中除骨髓以外的任一血液；步骤b：采集抗肿瘤样本中的单核细胞和血浆，并从血浆中提取其内的蛋白质，得到蛋白质预提取物；步骤c：培养单核细胞，将其培养成免疫细胞培养物，并从培养物中提取蛋白质；步骤d：将提取到的预提取物与蛋白质混合得到蛋白提取物。
实施例3：
s1：制备肿瘤细胞液；
s2：将s1中制得的肿瘤细胞液和免疫激活剂进行物理混合，物理混合制得预选液；
s3：制备蛋白提取物；
s4：将蛋白提取物与预选液混合处理后制得复合疫苗，蛋白提取物与预选液比例为1∶5。
在本实施例中，s1中肿瘤细胞液的制备包括如下步骤：步骤a：选取新鲜肿瘤组织并进行原代细胞培养；步骤b：用处理溶剂处理原代细胞，处理后得到细胞液与细胞碎片混合物；步骤c：将细胞液置入离心设备内进行离心操作，离心后经浓缩得到细胞浓缩液；步骤d：将细胞浓缩液用放射线灭活，灭活后得到肿瘤细胞液。
在本实施例中，s3中蛋白提取物的制备包括如下步骤：步骤a：从健康群体样本中筛选具有抗肿瘤样本，抗肿瘤样本为样本中除骨髓以外的任一血液；步骤b：采集抗肿瘤样本中的单核细胞和血浆，并从血浆中提取其内的蛋白质，得到蛋白质预提取物；步骤c：培养单核细胞，将其培养成免疫细胞培养物，并从培养物中提取蛋白质；步骤d：将提取到的预提取物与蛋白质混合得到蛋白提取物。
本发明的复合型疫苗包括肿瘤细胞液部分与蛋白提取物部分，其中肿瘤细胞液采用放疗技术灭活，在保证肿瘤细胞免疫原性的情况下，使肿瘤细胞丧失活性，避免使用过程中诱导肿瘤的发生；而蛋白提取物部分采用培养物提取浓缩，得到抗肿瘤因子如il-1家族等。本发明制备工艺简单，便于规模化生产可以显著抑制肿瘤生长，同时可以很好的对肿瘤易感人群起到预防保健的作用。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
1.一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗，其特征在于，所述复合疫苗包括肿瘤细胞液、蛋白提取物与免疫激活剂。
2.根据权利要求1所述的一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗，其特征在于，所述免疫激活剂为cpg或氢氧化铝佐剂。
3.根据权利要求1-2任一所述的一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
s1：制备肿瘤细胞液；
s2：将s1中制得的肿瘤细胞液和免疫激活剂进行物理混合，物理混合制得预选液；
s3：制备蛋白提取物；
s4：将蛋白提取物与预选液混合处理后制得复合疫苗，蛋白提取物与预选液比例为1-2∶7-10。
4.根据权利要求3所述的一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗的制备方法，其特征在于，所述s3中蛋白提取物的制备包括如下步骤：步骤a：从健康群体样本中筛选具有抗肿瘤样本，抗肿瘤样本为样本中除骨髓以外的任一血液；步骤b：采集抗肿瘤样本中的单核细胞和血浆，并从血浆中提取其内的蛋白质，得到蛋白质预提取物；步骤c：培养单核细胞，将其培养成免疫细胞培养物，并从培养物中提取蛋白质；步骤d：将提取到的预提取物与蛋白质混合得到蛋白提取物。
5.根据权利要求3所述的一种治疗纤维肉瘤的抗肿瘤新型复合疫苗的制备方法，其特征在于，所述s1中肿瘤细胞液的制备包括如下步骤：步骤a：选取新鲜肿瘤组织并进行原代细胞培养；步骤b：用处理溶剂处理原代细胞，处理后得到细胞液与细胞碎片混合物；步骤c：将细胞液置入离心设备内进行离心操作，离心后经浓缩得到细胞浓缩液；步骤d：将细胞浓缩液用放射线灭活，灭活后得到肿瘤细胞液。
技术总结