本发明属于天然药物化学领域，涉及已知化合物的分离制备方法，具体涉及一种从中药材白术中制备化合物bz-92的方法。
背景技术：
化合物bz-92是一种具有如下化学结构的天然产物：
研究发现，化合物bz-92具有多种药理活性。
但是，现有技术对化合物bz-92分离制备的研究较少。为了扩充化合物bz-92的分离原料选择和分离纯化工艺，特提出本发明。
白术为菊科多年生草本植物，别名浙术、冬术、于术等，以根茎入药，具有止汗、安胎、燥湿利水、健脾益气的功效，是中医药方中最为常用的一味药，有“十药九术”之说。目前，我国已经有相当大规模的白术种植产业，白术资源极其丰富。
目前尚没有以白术为原料制备化合物bz-92的方法。
技术实现要素：
本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种从中药材白术中制备化合物bz-92的方法。
本发明上述目的通过如下技术方案实现：
一种分离制备化合物bz-92的方法，化合物bz-92的化学结构如下，以中药材白术为分离原料；
进一步地，分离制备步骤包括：
步骤s1，将中药材白术粉碎，用醇水溶液提取，提取液浓缩得粗浸膏；
步骤s2，将步骤s1所得粗浸膏用适量水混悬，用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯萃取液，浓缩得乙酸乙酯萃取物浸膏；
步骤s3，将步骤s2所得乙酸乙酯萃取物浸膏先用正相硅胶柱层析分离，监测洗脱液中的化合物bz-92，合并含有化合物bz-92的洗脱液得到化合物bz-92富集物；再将该化合物bz-92富集物用反相硅胶柱层析分离，监测洗脱液中的化合物bz-92，合并含有化合物bz-92的洗脱液，浓缩干燥即得化合物bz-92。
更进一步地，步骤s1中所述醇水溶液为95％乙醇。
更进一步地，步骤s3中正相硅胶柱层析的洗脱溶剂为二氯甲烷-甲醇混合溶剂，混合溶剂中二者体积比及洗脱量依次为：500:1，6个柱体积；100:1，4个柱体积；50:1，6个柱体积。
更进一步地，正相硅胶柱层析的监测方法为薄层层析法。
更进一步地，步骤s3中反相硅胶柱层析的洗脱溶剂为85％甲醇，等度洗脱。
更进一步地，反相硅胶柱层析的监测方法为hplc法。
有益效果：
本发明首次以白术为原料分离制备化合物bz-92，充分发挥了白术资源丰富的优势。现有技术没有报道过白术中含有化合物bz-92，也没有报道过白术所在菊科中其它植物含有化合物bz-92。本发明在化合物bz-92的制备方面取得了突破性成果。
附图说明
图1为化合物bz-921hnmr谱(400mhz,氘代氯仿)；
图2为化合物bz-9213cnmr谱和dtpt135谱(100mhz,氘代氯仿)。
具体实施方式
下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。
实施例1：化合物bz-92的制备和结构确证
制备方法包括如下步骤：
步骤s1，将中药材白术2kg粉碎，用95％乙醇浸泡提取(5lx3次)，合并提取液，加压浓缩，得粗浸膏200g；
步骤s2，将步骤s1所得粗浸膏用2l水混悬，用乙酸乙酯萃取(2lx3次)，收集乙酸乙酯萃取液，浓缩得乙酸乙酯萃取物浸膏；
步骤s3，取步骤s2所得乙酸乙酯萃取物浸膏(100g)应用正相硅胶柱层析依次用二氯甲烷:甲醇＝500:1(6个柱体积)、100:1(4个柱体积)、50:1(6个柱体积)洗脱，根据tlc分析合并含有化合物bz-92的洗脱液浓缩得到化合物bz-92富集物fr3；再将该化合物bz-92富集物fr3(5.0g)用反相硅胶柱层析以85％甲醇水等度洗脱，hplc监测洗脱液中的化合物bz-92，合并含有化合物bz-92的洗脱液，浓缩干燥即得bz-92(约200mg，纯度98％)。
结构确证：hr-esi-ms显示[m h] 为m/z221.1563，结合核磁特征可得分子式为c15h24o，不饱和度为4。核磁共振氢谱数据δη(ppm,cdcl3,400mhz):η-1α(1.32,m)，η-1β(1.58,m)，h-2α(1.23,m)，h-2β(1.36,m)，h-3α(2.38，brd,j＝13.0hz)，h-3β(2.1l,m)，h-5(2.11,brt，j＝11.0hz)，h-6α(1.90,m)，h-6β(2.01,m)，h-8(5.67,dd,j＝7.0,3.0hz)，h-9α(1.60，m)，h-9β(1.65，m)，h-12(1.36,s)，h-13(1.37,s)，h-14(0.69,s)，h-15α(4.61,brs)，h-15β(4.82,brs)；核磁共振碳谱数据δc(ppm，cdcl3,100mhz):41.8(ch2，1-c)，23.6(ch2,2-c)，37.2(ch2,3-c)，150.3(c,4-c)，44.9(ch,5-c)，24.4(ch2,6-c)，142.4(c,7-c)，116.9(ch，8-c)，41.6(ch2,9-c)，34.1(c,10-c)，72.9(c,11-c)，29.0(ch3，12-c)，29.0(ch3,13-c)，17.2(ch3,14-c)，106.3(ch2,15-c)。图1为化合物bz-921hnmr谱(400mhz,氘代氯仿)；图2为化合物bz-9213cnmr谱和dtpt135谱(100mhz,氘代氯仿)。确证其化学结构如下：
本发明首次以白术为原料分离制备化合物bz-92，充分发挥了白术资源丰富的优势。现有技术没有报道过白术中含有化合物bz-92，也没有报道过白术所在菊科中其它植物含有化合物bz-92。本发明在化合物bz-92的制备方面取得了突破性成果。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。
1.一种分离制备化合物bz-92的方法，化合物bz-92的化学结构如下，其特征在于：以中药材白术为分离原料；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，分离制备步骤包括：
步骤s1，将中药材白术粉碎，用醇水溶液提取，提取液浓缩得粗浸膏；
步骤s2，将步骤s1所得粗浸膏用适量水混悬，用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯萃取液，浓缩得乙酸乙酯萃取物浸膏；
步骤s3，将步骤s2所得乙酸乙酯萃取物浸膏先用正相硅胶柱层析分离，监测洗脱液中的化合物bz-92，合并含有化合物bz-92的洗脱液得到化合物bz-92富集物；再将该化合物bz-92富集物用反相硅胶柱层析分离，监测洗脱液中的化合物bz-92，合并含有化合物bz-92的洗脱液，浓缩干燥即得化合物bz-92。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤s1中所述醇水溶液为95％乙醇。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤s3中正相硅胶柱层析的洗脱溶剂为二氯甲烷-甲醇混合溶剂，混合溶剂中二者的体积比及洗脱量依次为：500:1，6个柱体积；100:1，4个柱体积；50:1，6个柱体积。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：正相硅胶柱层析的监测方法为薄层层析法。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤s3中反相硅胶柱层析的洗脱溶剂为85％甲醇，等度洗脱。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：反相硅胶柱层析的监测方法为hplc法。
技术总结