本发明涉及化学药物的纯化技术领域，尤其是涉及一种13c美沙西汀的纯化方法及制备方法。
背景技术：
13c美沙西汀作为肝功能检测诊断试剂，其合成方法有很多，主要由以下四种合成路线。
路线1：
路线2：
路线3：
路线4：
不同合成方法得到的粗品含不同的杂质。杂质的存在，在药物临床使用时，对人体有害，而如何针对不同的合成路线对13c美沙西汀进行纯化以去除杂质是急需解决的问题。
有鉴于此，特提出本发明。
技术实现要素：
本发明的第一目的在于提供13c美沙西汀的纯化方法，其能够高效去除13c美沙西汀粗品中的杂质。
本发明的第二目的在于提供13c美沙西汀的制备方法，对制备得到的13c美沙西汀粗品进行上述纯化处理，能够进一步提高13c美沙西汀的纯度。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
13c美沙西汀粗品溶解于溶剂中，与离子树脂、活性炭混合处理后，固液分离收集液体；
将所述液体除溶处理后，进行重结晶。
本发明的13c美沙西汀的纯化方法，使用离子树脂与活性炭对粗品进行处理，脱杂脱色，能够有效去除13c美沙西汀合成过程中引入的杂质，提高纯化后产品的纯度。
在本发明一优选实施方式中，所述离子树脂包括强酸性阳离子树脂、强碱性阴离子树脂、弱酸性阳离子树脂和弱碱性阴离子树脂中的任一种或多种。更优选的，所述离子树脂包括弱酸性阳离子树脂和弱碱性阴离子树脂；所述弱酸性阳离子树脂和弱碱性阴离子树脂的质量比为1﹕(1～2)。
在本发明一优选实施方式中，所述离子树脂的粒径为0.40～0.70mm。
在本发明一优选实施方式中，所述离子树脂包括d113、d301、732和717中的任一种或多种。
采用上述特定的离子树脂，能够对13c美沙西汀粗品实现高脱色脱杂效果，纯化得到的13c美沙西汀产品颜色好，收率和纯度高，适合于工业化生产。
在本发明一优选实施方式中，所述离子树脂在使用前进行预处理；所述预处理的方法包括具体的，所述预处理的额方法包括：将离子树脂依次进行水洗、碱洗、水洗、酸洗和水洗。其中，所述碱洗的步骤包括：采用质量分数为5％～10％的氢氧化钠水溶液浸泡后洗涤；所述酸洗的步骤包括：采用质量分数为1％～2％的盐酸水溶液浸泡后洗涤。
在本发明一优选实施方式中，所述混合处理的条件包括：温度为-15～80℃，时间为5～9h。优选的，所述混合处理的条件包括：温度为30～80℃，时间为6～8h。
在本发明一优选实施方式中，所述13c美沙西汀粗品、离子树脂和活性炭的质量比为1﹕(0.5～3)﹕(0.1～2)，优选为1﹕(1～1.5)﹕(0.9～1.5)。
如在不同实施方式中，13c美沙西汀粗品和离子树脂的质量比可以为1﹕0.5、1﹕0.8、1﹕1、1﹕1.2、1﹕1.5、1﹕1.8、1﹕2、1﹕2.2、1﹕2.5、1﹕2.8、1﹕3等等；13c美沙西汀粗品和活性炭的质量比可以为1﹕0.1、1﹕0.5、1﹕0.9、1﹕1、1﹕1.2、1﹕1.5、1﹕1.6、1﹕2等等。具体的，13c美沙西汀粗品、离子树脂和活性炭的质量比可以为1﹕1.2﹕1、1﹕1.6﹕1.6、1﹕1.5﹕1.2等等。
在本发明一优选实施方式中，所述溶剂包括乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醇、甲醇、甲苯中的一种或多种，优选为乙酸乙酯。
在本发明一优选实施方式中，所述13c美沙西汀粗品与所述溶剂的用量比例为1g﹕(2～5)ml。
在本发明一优选实施方式中，所述重结晶采用的溶剂包括二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇、甲醇、异丙醇、叔丁醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、甲酸甲酯、乙酸叔丁酯、甲苯、乙腈、四氢呋喃和水中的任一种或两种组合。
在本发明一优选实施方式中，所述13c美沙西汀粗品是通过13c对甲苯磺酸甲酯与对乙酰氨基酚反应制备得到的。
上述制备方法对应的是路线2中的合成方式。路线2中，主要反应有13c甲醇与对甲苯磺酰氯在碱性环境下产生13c对甲苯磺酸甲酯，然后再与碱化的对乙酰氨基酚反应生成13c美沙西汀粗品。这一反应路线中，粗品颜色呈深黄色至深褐色，杂质较多。13c美沙西汀粗品的主要杂质有起始物料对乙酰氨基酚、中间体13c对甲苯磺酸甲酯、杂质n-(4-甲氧基苯基)-n-甲基乙酰胺、杂质n-(4-羟基苯基)-n-甲基乙酰胺、杂质对乙酰氨基苯乙醚、13c对甲苯磺酸乙酯、降解产物对氨基苯甲醚等。其中13c对甲苯磺酸甲酯和13c对甲苯磺酸乙酯为基因毒性杂质，对人体毒性较高，在临床使用时对人体有害。
本发明针对该路线制备得到的13c美沙西汀粗品进行纯化，先使用离子树脂、活性炭配合脱杂脱色，再进行重结晶，能够极大的提高得到的13c美沙西汀产品的收率及纯度，同时能够脱除颜色。
本发明还提供了一种13c美沙西汀的制备方法，包括采用上述任一种所述的纯化方法对13c美沙西汀粗品进行纯化处理。
当所述13c美沙西汀粗品是通过13c对甲苯磺酸甲酯与对乙酰氨基酚反应制备得到的时，其能够进一步提高得到的13c美沙西汀产品的纯度和收率。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明的13c美沙西汀的纯化方法，使用离子树脂与活性炭对粗品进行处理，脱杂脱色，能够有效去除13c美沙西汀合成过程中引入的杂质，提高纯化后产品的纯度；尤其可针对通过13c对甲苯磺酸甲酯与对乙酰氨基酚反应制备得到的13c美沙西汀粗品，能够极大的去除其中的杂质，提高产物的收率和纯度，对13c美沙西汀的研发和应用具有重要的意义。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1的13c美沙西汀粗品的液相色谱图；
图2为本发明实施例1纯化后得到的13c美沙西汀产品的液相色谱图。
具体实施方式
下面将结合附图和具体实施方式对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，但是本领域技术人员将会理解，下列所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明各实施例中对13c美沙西汀的纯度的检测使用高效液相色谱法进行，检测条件如下：
色谱柱：色谱柱kromasil(100-5-c184.6*250mm或效能相当的色谱柱)；
流速：0.8ml·min-1；
检测波长：233nm；
柱温：35℃；
进样量：5μl；
流动相：磷酸盐缓冲水溶液/乙腈(v/v)＝80/20。
实施例采用的离子树脂均依次采用水洗、碱洗、水洗、酸洗和水洗；其中，碱洗的步骤包括：采用质量分数为5％的氢氧化钠水溶液浸泡后洗涤；酸洗的步骤包括：采用质量分数为1％的盐酸水溶液浸泡后洗涤。
实施例1
本实施例的13c美沙西汀粗品的制备方法，包括如下步骤：
(1)称量400g氢氧化钠固体，搅拌下完全溶于2000ml纯水中，得到氢氧化钠的水溶液。将500g对甲基苯磺酰氯、100g无水13c甲醇、1100.0ml无水四氢呋喃加入反应釜中，搅拌完全溶解，加入上述氢氧化钠的水溶液，控温25℃左右反应1小时。
(2)步骤(1)反应完毕后，加入200ml水淬灭反应，然后再加入800ml纯水、1000ml乙酸乙酯搅拌后，静置分层，收集有机相依次用稀氢氧化钠水溶液、饱和氯化钠水溶液搅拌洗涤，干燥，浓缩得到13c对甲苯磺酸甲酯。
(3)将制备得到的13c对甲苯磺酸甲酯650.0g，加入2000ml无水四氢呋喃溶解，得到中间体溶液。反应釜中加入8000ml无水四氢呋喃、900g对乙酰胺基酚，开始搅拌溶解，加入180g氢化钠固体，搅拌均匀后，滴加上述配制的中间体溶液，滴毕继续反应2-6小时，反应结束后，缓慢加入水淬灭反应，加入乙酸乙酯分液，收集有机相依次用氢氧化钠水溶液、纯水、饱和食盐水洗涤一次，干燥、浓缩得到淡黄色13c美沙西汀粗品。粗品纯度88.1％，主要杂质为对乙酰氨基酚等。
采用上述方法制备得到的13c美沙西汀粗品的液相色谱图如图1所示。
本实施例提供了13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
取上述制备得到的13c美沙西汀粗品50g，用常温乙酸乙酯150ml完全溶解后，加入活性炭50g、经预处理的阳离子弱酸性d113型交换树脂20g、经预处理的阴离子弱碱性d301型树脂40g，加热至回流保持7h，降温，过滤浓缩得到固体。固体中加入乙酸乙酯升温至回流溶清，溶解后缓慢冷却至0～10℃，保温析晶4.5～5.5小时，减压过滤，滤饼用20ml冷(0～-5℃)的乙酸乙酯淋洗。将过滤后的滤饼在减压干燥箱中，于55±5℃条件下，真空干燥7±0.5h得42g白色固体粉末13c美沙西汀，收率84％。
采用上述方法纯化得到的13c美沙西汀产品的液相色谱图如图2所示。其中，图1和图2检测条件相同，检测仪器略有不同，因而保留时间略有差别。
实施例2
本实施例的13c美沙西汀粗品参考实施例1的制备方法，制备得到的13c美沙西汀粗品的纯度为88.1％，主要杂质为对乙酰氨基酚等。
本实施例提供了13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
取上述制备得到的13c美沙西汀粗品50g，用常温乙酸乙酯150ml完全溶解后，加入活性炭80g、经预处理的阳离子弱酸性732型交换树脂30g、经预处理的阴离子弱碱性717型树脂50g，加热至回流保持7±0.5h，降温，过滤缩得到固体。固体中加入乙酸乙酯升温至回流溶清，溶解后缓慢冷却至0～10℃，保温析晶5小时，减压过滤。将过滤后的滤饼在减压干燥箱中，于55±5℃条件下，真空干燥7±0.5h得41g白色固体粉末13c美沙西汀，收率82％。
实施例3
本实施例的13c美沙西汀粗品参考实施例1的制备方法，制备得到的13c美沙西汀粗品的纯度为88.1％，主要杂质为对乙酰氨基酚等。
本实施例提供了13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
取上述制备得到的13c美沙西汀粗品50g，用常温乙酸乙酯150ml完全溶解后，加入活性炭60g、经预处理的阳离子弱酸性d113型交换树脂25g、经预处理的阴离子弱碱性717型树脂50g，加热至回流保持7±0.5h，降温，过滤浓缩得到固体。固体中加入乙酸乙酯升温至回流溶清，溶解后缓慢冷却至0～10℃，保温析晶5小时，减压过滤。将过滤后的滤饼在减压干燥箱中，于55±5℃条件下，真空干燥7±0.5h得42g白色固体粉末13c美沙西汀，收率84％。
实施例4
本实施例的13c美沙西汀粗品参考实施例1的制备方法，制备得到的13c美沙西汀粗品的纯度为88.1％，主要杂质为对乙酰氨基酚等。
本实施例提供了13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
取上述制备得到的13c美沙西汀粗品50g，用常温乙酸乙酯150ml完全溶解后，加入活性炭100g、经预处理的阳离子弱酸性d113型交换树脂25g、经预处理的阴离子弱碱性d301型树脂50g，加热至回流保持7±0.5h，降温，过滤浓缩得到固体。固体中加入乙酸乙酯升温至回流溶清，溶解后缓慢冷却至0～10℃，保温析晶5小时，减压过滤。将过滤后的滤饼在减压干燥箱中，于55±5℃条件下，真空干燥7±0.5h得39.2g白色固体粉末13c美沙西汀，收率78.4％。
实施例5
本实施例的13c美沙西汀粗品参考实施例1的制备方法，制备得到的13c美沙西汀粗品的纯度为88.1％，主要杂质为对乙酰氨基酚等。
本实施例提供了13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
取上述制备得到的13c美沙西汀粗品50g，用常温乙酸乙酯150ml完全溶解后，加入活性炭50g、经预处理的阳离子弱酸性d113型交换树脂50g、经预处理的阴离子弱碱性d301型树脂100g，加热至回流保持7±0.5h，降温，过滤浓缩得到固体。固体中加入乙酸乙酯升温至回流溶清，溶解后缓慢冷却至0～10℃，保温析晶5小时，减压过滤。将过滤后的滤饼在减压干燥箱中，于55±5℃条件下，真空干燥7±0.5h得37.6g白色固体粉末13c美沙西汀，收率75.2％。
实施例6
本实施例的13c美沙西汀粗品参考实施例1的制备方法，制备得到的13c美沙西汀粗品的纯度为88.1％，主要杂质为对乙酰氨基酚等。
本实施例提供了13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
取上述制备得到的13c美沙西汀粗品50g，用常温乙酸乙酯150ml完全溶解后，加入活性炭50g、经预处理的阳离子弱酸性d113型交换树脂60g，加热至回流保持7±0.5h，降温，过滤缩得到固体。固体中加入乙酸乙酯升温至回流溶清，溶解后缓慢冷却至0～10℃，保温析晶5小时，减压过滤。将过滤后的滤饼在减压干燥箱中，于55±5℃条件下，真空干燥7±0.5h得43g白色固体粉末13c美沙西汀，收率86％。
实施例7
本实施例的13c美沙西汀粗品参考实施例1的制备方法，制备得到的13c美沙西汀粗品的纯度为88.1％，主要杂质为对乙酰氨基酚等。
本实施例提供了13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
取上述制备得到的13c美沙西汀粗品50g，用常温乙酸乙酯150ml完全溶解后，加入活性炭50g、经预处理的阴离子弱碱性d301型树脂60g，加热至回流保持7±0.5h，降温，过滤缩得到固体。固体中加入乙酸乙酯升温至回流溶清，溶解后缓慢冷却至0～10℃，保温析晶5小时，减压过滤。将过滤后的滤饼在减压干燥箱中，于55±5℃条件下，真空干燥7±0.5h得41.5g白色固体粉末13c美沙西汀，收率83％。
比较例1
比较例1的13c美沙西汀粗品参考实施例1的制备方法，制备得到的13c美沙西汀粗品的纯度为88.1％，主要杂质为对乙酰氨基酚等。
比较例1提供了13c美沙西汀的纯化方法，包括如下步骤：
取实施例1中制备得到的13c美沙西汀粗品50g，用常温乙酸乙酯150ml完全溶解后，加入活性炭50g，加热至回流保持7±0.5h，降温，过滤浓缩得到固体。固体中加入乙酸乙酯升温至回流溶清，溶解后缓慢冷却至0～10℃，保温析晶5小时，减压过滤。将过滤后的滤饼在减压干燥箱中，于55±5℃条件下，真空干燥7±0.5h得41g淡黄色固体粉末13c美沙西汀，收率82％。
比较例2
比较例2参考实施例1的纯化方法，区别在于，不加入活性炭。制备得到43g淡黄色固体粉末13c美沙西汀，收率86％。
实验例1
为了对比说明本发明各实施例和比较例的纯化方法得到的13c美沙西汀产品的纯度等，对粗品和得到的13c美沙西汀产品的杂质情况及纯度进行检测，测试结果见表1和表2。
表113c美沙西汀粗品和纯化后产品的杂质及纯度测试结果
表213c美沙西汀粗品和纯化后产品的纯度及颜色测试结果
本发明的13c美沙西汀的纯化方法，使用离子树脂与活性炭对粗品进行处理，脱杂脱色，能够有效去除13c美沙西汀合成过程中引入的杂质，提高纯化后产品的纯度；尤其可针对通过13c对甲苯磺酸甲酯与对乙酰氨基酚反应制备得到的13c美沙西汀粗品，能够极大的去除其中的杂质，提高产物的收率和纯度。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
1.13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
13c美沙西汀粗品溶解于溶剂中，经过离子树脂、活性炭混合处理后，固液分离收集液体；
将所述液体除溶处理后，进行重结晶。
2.根据权利要求1所述的13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，所述离子树脂包括强酸性阳离子树脂、强碱性阴离子树脂、弱酸性阳离子树脂和弱碱性阴离子树脂中的任一种或多种。
3.根据权利要求1所述的13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，所述离子树脂的粒径为0.40～0.70mm；
优选的，所述离子树脂包括d113、d301、732和717中的任一种或多种。
4.根据权利要求1所述的13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，所述离子树脂在使用前进行预处理；所述预处理的方法包括将离子树脂进行碱洗和酸洗；
优选的，将离子树脂依次进行水洗、碱洗、水洗、酸洗和水洗。
5.根据权利要求1所述的13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，所述混合处理的条件包括：温度为-15～80℃，时间为5～9h；
优选的，所述混合处理的条件包括：温度为30～80℃，时间为6～8h。
6.根据权利要求1-5任一项所述的13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，所述13c美沙西汀粗品、离子树脂和活性炭的质量比为1﹕(0.5～3)﹕(0.1～2)；
优选的，所述13c美沙西汀粗品、离子树脂和活性炭的质量比为1﹕(1～1.5)﹕(0.9～1.5)。
7.根据权利要求1所述的13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，所述溶剂包括乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醇、甲醇、甲苯中的一种或多种；
优选的，所述13c美沙西汀粗品与所述溶剂的用量比例为1g﹕(2～5)ml。
8.根据权利要求1所述的13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，所述重结晶采用的溶剂包括二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇、甲醇、异丙醇、叔丁醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、甲酸甲酯、乙酸叔丁酯、甲苯、乙腈、四氢呋喃和水中的任一种或两种组合。
9.根据权利要求1所述的13c美沙西汀的纯化方法，其特征在于，所述13c美沙西汀粗品是通过13c对甲苯磺酸甲酯与对乙酰氨基酚反应制备得到的。
10.13c美沙西汀的制备方法，其特征在于，包括采用权利要求1-9任一项所述的纯化方法对13c美沙西汀粗品进行纯化处理。
技术总结