本发明涉及蛋白质稠密的液体营养组合物领域。本发明尤其涉及用于治疗和/或预防与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症、特别是涉及营养不良和肌肉质量损失的病症的组合物。
背景技术：
肌肉质量和肌肉力量的损失极大地降低了老年人和患者的活动能力和生活质量，因为他们丧失了进行日常活动的能力。此外，肌肉损失损害恢复，导致更多的并发症、感染、住院时间更长甚至死亡。将下降的储备能力(导致残疾和其他不利的健康结果的风险增加)定义为虚弱。当肌肉质量、力量和身体机能低于临界临床水平时，将它称为少肌症。由于衰老和/或久坐的生活方式或由于分解代谢危机(如创伤、感染、疾病、住院治疗和固定)，这种肌肉质量和力量的下降可以是逐渐下降。
营养不良(营养不足(蛋白质能量营养不良、定量营养不良)或者定性营养不良(对某些成分(如蛋白质)有选择性))会严重导致肌肉质量损失(或肌肉下降、萎缩)、少肌症和虚弱的发展。几种常见疾病(包括癌症、aids、充血性心力衰竭、慢性阻塞性肺病等)可能导致肌肉损失(或萎缩)加速，甚至导致肌肉消耗、恶病质。
肌肉质量损失因蛋白质合成与蛋白质降解之间的正常平衡的变化而发生。提供足够的必需氨基酸可以帮助使肌肉组织再生，因为必需氨基酸(包括亮氨酸)可以有助于肌肉合成和肌肉质量保存。因此，导致持续的高氨基酸血症(即血浆中氨基酸、尤其是必需氨基酸(包括亮氨酸)的浓度升高)的营养品在刺激有需要的少肌症、虚弱和/或营养不良的老年人或患者的肌肉蛋白质合成中是必需的。
尽管每种肌肉消耗的情况的特征在于其导致肌肉损失的一种或多种特定机制和途径，但是经常发生分解代谢因子(如糖皮质激素、细胞因子和氧化应激)的增加。现在已经非常确定这些因子对食物摄入后参与刺激肌肉合成代谢的氨基酸或胰岛素信号传导途径具有潜在的有害作用。即使理论上覆盖了合成代谢因子(例如氨基酸)的要求(即，正常营养素可用性符合健康受试者的推荐饮食蛋白质允许量)，这些信号传导改变也会导致肌肉的“合成代谢抗性”。关于合成代谢阈值概念的综述，参见dardavet等人(thescientificworldjournal[世界科学杂志]第2012卷，269531(2012))，其中描述到合成代谢抗性可以部分通过促进最大合成代谢和蛋白质保留所需的肌肉“合成代谢阈值”的增加来解释。因为肌肉“合成代谢阈值”较高，所以合成代谢刺激(包括氨基酸血症)不再能够达到合成代谢阈值，从而通常的营养素摄入降低了肌肉合成代谢。可能的营养策略则是增加合成代谢因子(尤其是必需氨基酸，包括亮氨酸)的摄入，以达到新的“合成代谢阈值”。
由于必需氨基酸和亮氨酸信号传导缺陷，衰老与餐后肌肉蛋白质合成的活化受损相关。因此，所谓的合成代谢阈值较高。换句话说，与年轻人相比，在老年人和患者的情况下，开始蛋白质合成所需的“亮氨酸阈值”较高。在这种情况下刺激肌肉蛋白质合成将需要摄取使得能够达到升高的血浆亮氨酸水平合成代谢阈值的蛋白质(phillipssm(2017)front.nutr.[营养学前沿]4∶13)。
有几种方法增加氨基酸对骨骼肌的可用性：增加蛋白质的摄入，在饮食中补充一种或几种游离氨基酸，或者当在消化道中消化时，根据其氨基酸组成和理化特性选择蛋白质来源。
本领域已知乳清蛋白富含亮氨酸(约12克/100克蛋白质)，因此是用于增加血液中必需氨基酸浓度的优选蛋白质来源。据此，wo2011/112695列出了乳清蛋白的许多健康益处，其中包括在儿童、成人或老年人中增强肌肉发育和建设以及肌肉维持。us2011/250310还披露到与诸如维生素d等活性成分结合的乳清组合物可以帮助改善老年人的肌肉骨骼健康。
然而，由于在高浓度下的热稳定性问题，对于将小份量(其对于老年和/或营养不良的患者和虚弱的老年人通常是优选选择)例如作为小口液体应用来说，将乳清蛋白用作蛋白质来源是不可行的。
此问题尤其在ep2249666中得到了解决，该专利涉及耐贮存的(uht)液体肠组合物，这些组合物具有增加量的蛋白质/单位体积(11-18g/100ml)，同时提供足够低的粘度以允许该组合物易于口服或通过管饲食用。根据ep2249666，这通过提供包含胶束酪蛋白和酪蛋白酸盐的组合物来实现，其中70-90wt％的所述蛋白质是胶束酪蛋白，并且其中胶束酪蛋白和酪蛋白酸盐的合并的量是总蛋白质的至少95重量％，并且所述蛋白质包含小于或等于5wt％的乳清蛋白，使包含基于总蛋白质的70-90wt％胶束酪蛋白、基于总蛋白质的至少95重量％的酪蛋白和酪蛋白酸盐和基于总蛋白质的小于或等于5wt％的乳清蛋白的所述组合物经受热灭菌。
然而，诸位发明人观察到，根据ep2249666的蛋白质稠密的低粘度组合物具有以下缺点：其在胃ph值下形成蛋白质凝结物，因此显示出降低的消化性。因此，它们用于增加血液中必需氨基酸浓度的用途(例如在治疗和/或预防与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症中)受到限制。
因此，本发明的目的是开发一种改善的低粘度的小量液体营养组合物，该组合物具有高蛋白质含量(＞10g/100ml)，是耐贮存的(经uht处理)并且在上胃肠道中不会凝结。具体而言，诸位发明人试图提供一种蛋白质稠密的液体组合物，其可用于治疗性或预防性治疗肌肉质量和/或力量损失，例如与营养不良和肌肉质量损失相关的病症。有利地，该组合物可以用于预防或减少上胃肠道中的凝结；增加胃排空速率；增强蛋白质消化，和/或增加游离的必需氨基酸(优选地亮氨酸)的血清浓度。优选地，该组合物显示出与乳清蛋白基本上相同水平的胃排空、胃消化速率。
技术实现要素：
出人意料地发现，通过提供一种热处理液体高蛋白质组合物满足了这些目标中的至少一些目标，该热处理液体高蛋白质组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度(dh)的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。更具体地，本文使用胃模拟模型证明，胶束酪蛋白和水解的乳清蛋白的这种组合允许与乳清蛋白相当的胃排空和消化，但是比如ep2249666中教导的参考胶束酪蛋白和酪蛋白酸盐来源快得多。总的来说，胶束酪蛋白和水解的乳清的共混物允许在小份体积中获得高浓度(＞10g/100ml)的高质量蛋白质(与例如水解的胶原相比)，并且允许显示出已知在治疗和/或预防与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症中有益的快速且高质量的氨基酸谱。
因此，在一方面，本发明提供了一种包含至少10g蛋白质/100ml组合物的热处理液体营养组合物，该热处理液体营养组合物用于治疗和/或预防与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的dh的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。
更具体地，本发明提供了一种包含至少10g蛋白质/100ml组合物的热处理液体营养组合物，该热处理液体营养组合物用于治疗和/或预防受试者的与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的dh的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内，其中该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。特别地，该受试者患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症(osteosarcopenia)，更特别地患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降和/或少肌症。
在另一方面，本发明涉及一种包含至少10g蛋白质/100ml组合物的热处理液体营养组合物，该热处理液体营养组合物用于以下任何一种或多种，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的dh的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内：在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；b)增加胃排空速率；c)增强蛋白质消化；d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度。具体而言，该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。更特别地，该受试者患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症，优选地患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降和/或少肌症。
本发明还涉及如本文披露的组合物用于以下任何一种或多种的用途：在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；b)增加胃排空速率；c)增强蛋白质消化；d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度。通常，这些后面的用途并非出于对人体或动物体进行治疗的目的。因此，本发明涉及一种用于以下任何一种或多种的非治疗性方法：在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；b)增加胃排空速率；c)增强蛋白质消化；d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度；该非治疗性方法包括向该受试者施用热处理液体高蛋白质组合物的步骤，该热处理液体高蛋白质组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。
在仍另一个实施例中，本发明涉及一种如本文披露的组合物，用于在受试者、优选地老年受试者、处于患病状态的受试者、正在从疾病状态中恢复的受试者或营养不良的受试者中增加必需氨基酸的血清浓度以克服合成代谢抗性的方法。
本领域没有披露或建议用于根据本发明使用的组合物或根据本发明的方法。
wo2013/133727涉及酪蛋白组合物，其用于在摄取组合物后增加胃排空速率。据披露消耗了约10％至约100％的钙、具有小于约1％的水解度并且具有未修饰的磷酸化模式的酪蛋白在施用的约15至约60分钟内能够将受试者中游离亮氨酸的血清浓度增加至与乳清蛋白基本上相同的水平。wo2013/133727教导了不使用胶束酪蛋白，更不用说胶束酪蛋白与水解的乳清的组合。此外，在非常高的蛋白质浓度下，wo2013/133727的组合物在热处理后将太粘。
wo2016/174651涉及包含胶束酪蛋白和水解的乳清蛋白的组合的液体高蛋白质组合物及其制备方法。它总体上教导了其各种营养用途。然而，重要的是，它没有解决消化性/凝结特性，并且没有教导或建议本发明的涉及治疗和/或预防与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症的用途。
本发明还涉及一种热处理液体高蛋白质组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是水解的乳清蛋白，其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的比率在40∶60至90∶10的范围内，并且其中该组合物呈至多100ml、优选地至多80ml的单位份量的形式，并且其中所述单位份量包含至少15g的蛋白质、优选地至少18g的蛋白质。
具体实施方式
如本说明书和权利要求书中所使用的动词“包含”(“tocomprise”)及其词形变化以其非限制性意义使用，以意指包括该词之后的项，但是不排除未特别提及的项。
另外，通过不定冠词“一个/一种”(“a”或“an”)指代要素并不排除存在多于一个/一种要素的可能性，除非上下文明确要求存在一个/一种并且仅一个/一种要素。因此，不定冠词“一个/一种”(“a”或“an”)通常意指“至少一个/一种”。
在本文使用术语“约”以指示允许与引用值有一定偏差。此偏差的大小尤其取决于确定引用值的方法的精确度，通常在引用值的±10％的范围内，更特别地在±5％的范围内。
如本文所用的术语“营养组合物”是指包含蛋白质、碳水化合物和脂肪中的一种或多种的营养组合物。该营养组合物可以包含其他组分，例如维生素和矿物质。可以将营养组合物配制成完全营养品，并且潜在地用作营养的唯一来源。可替代地，该营养组合物可以呈食品补充剂的形式。
本文中的术语“肠营养组合物”是指可以经肠(即口服或通过管)向人施用的营养组合物。肠营养组合物的实例包括饮饲和管饲。
本文中的术语“热处理营养组合物”是指已经进行了热处理的营养组合物。本文中的术语“热处理”是指在升高的温度下的处理，旨在增加所述营养组合物的保质期。热处理的实例包括灭菌和uht(超热处理或超高温加工)。
本文中的术语“耐贮存的”是指储存稳定性。关于微生物腐坏和像乳液分层、凝胶化、沉淀等物理缺陷，如果营养组合物在环境温度下稳定储存一定时间，则它是耐贮存的。当在环境温度(20℃)下在密封包装中储存时，在包装后营养组合物优选地具有至少一个月、更优选地至少3个月、甚至更优选地至少6个月、最优选地至少12个月的储存稳定性。
液体营养组合物
本发明涉及液体营养组合物的特定用途，该液体营养组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的比率在40∶60至90∶10的范围内。
可以将用于根据本发明使用的营养组合物或用于根据本发明方法的营养组合物配制成完全营养品，并且潜在地用作有需要的人的营养的唯一来源。可替代地，该营养组合物可以呈食品补充剂的形式。
在优选的实施例中，用于根据本发明使用的营养组合物或用于根据本发明方法的营养组合物具有1.5kcal/ml或更高(6.28kj/ml或更高)、更优选地2.0kcal/ml或更高(8.37kj/ml或更高)、甚至更优选地2.5kcal/ml或更高(10.46kj/ml或更高)的能量密度。进一步优选的是，该营养组合物的能量密度是3.5kcal/ml或更高(14.64kj/ml或更高)，例如应用于营养不足、营养不良的患者和虚弱的老年人。
在优选的实施例中，配制该组合物以便以小单位份量为受试者提供高剂量的易于消化的蛋白质，并且有利地该组合物具有小口饮料或“蛋白质丸(proteinshot)”的形式。
例如，该液体营养组合物具有包含至少12g的蛋白质、优选地至少15g的蛋白质、更优选地至少18g的蛋白质的单位份量，和/或其中该液体营养组合物具有至多125ml、优选地至多100ml、更优选地至多80ml的单位份体积。这些组合物有利地用于补充营养不良的患者和少肌症和/或虚弱的老年人和/或有肌肉损失风险的老年人的饮食(定性地)。
在一个实施例中，该单位份量包含至少12g的蛋白质、优选地至少15g的蛋白质、更优选地至少18g的蛋白质，并且具有至多125ml的单位份体积。
在另一个实施例中，该单位份量包含至少12g的蛋白质、优选地至少15g的蛋白质、更优选地至少18g的蛋白质，并且具有至多100ml的单位份体积。
在又另一个实施例中，该单位份量包含至少12g的蛋白质、优选地至少15g的蛋白质、更优选地至少18g的蛋白质，并且具有至多80ml的单位份体积。
因此，本发明还提供了一种热处理液体高蛋白质组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是水解的乳清蛋白，其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的比率在40∶60至90∶10的范围内，并且其中该组合物呈至多100ml、优选地至多80ml的单位份量的形式，并且其中所述单位份量包含至少15g的蛋白质、优选地至少18g的蛋白质。
组合物的用途
基于与如本文披露的包含胶束酪蛋白和水解的乳清的共混物的组合物的胃排空和消化性相关的独特且有益的特性，本领域技术人员将认识并且理解其多种多样的可能的(治疗)用途。
在一方面，本发明提供了一种用于治疗和/或预防与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症的组合物。此方法可以是完整的人或动物的治疗或非治疗用途。
还提供了一种用于以下任何一种或多种的组合物：
在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；
b)增加胃排空速率；
c)增强蛋白质消化；
d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度。
在另一方面，提供了一种非治疗性方法，用于以下任何一种或多种：
在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；
b)增加胃排空速率；
c)增强蛋白质消化；
d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度，
该方法包括向该受试者施用热处理液体高蛋白质组合物的步骤，该热处理液体高蛋白质组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。
优选地，将该组合物用于在受试者中增加必需氨基酸的血清浓度以克服合成代谢抗性。在一个具体的实施例中，在施用后约60分钟内，该组合物使受试者中的亮氨酸血清浓度增加至高于250微摩尔/升、优选地高于300微摩尔/升。
该受试者可以是老年受试者(也称为老年人受试者)或处于患病状态的受试者。在根据本发明的用于所述用途的组合物和根据本发明的方法的优选实施例中，该受试者是老年人受试者、优选地年龄在50岁或以上的年老的受试者。例如，用于如本文披露使用的组合物优选地由年龄在50岁或以上的年老的受试者施用或食用。
在用于根据本发明使用的组合物或根据本发明的方法的一个实施例中，该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或是营养不良的受试者。
例如，该受试者、任选地老年人受试者患有瘦体重下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症。
具体而言，本发明因此提供了一种用于治疗和/或预防受试者的与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症的组合物，其中该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。更特别地，该受试者患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症，优选地患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降和/或少肌症。
本发明还提供了一种用于以下任何一种或多种的组合物：
在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；
b)增加胃排空速率；
c)增强蛋白质消化；
d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度，
其中该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。更特别地，该受试者患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症，优选地患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降和/或少肌症。
本发明还涉及一种用于以下任何一种或多种的治疗性方法：
在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；
b)增加胃排空速率；
c)增强蛋白质消化；
d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度，
该方法包括向该受试者施用热处理液体高蛋白质组合物的步骤，该热处理液体高蛋白质组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。
具体而言，该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。更特别地，该受试者患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症，优选地患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降和/或少肌症。
还提供了一种用于治疗和/或预防受试者的与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症的治疗性方法，该方法包括向该受试者施用热处理液体高蛋白质组合物的步骤，该热处理液体高蛋白质组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。
具体而言，该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。更特别地，该受试者患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症，优选地患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降和/或少肌症。
肌肉消耗是指肌肉质量的逐渐损失和/或是指肌肉(包括控制运动的骨骼肌或随意肌、控制心脏(心肌病的)的心肌和平滑肌)的逐渐弱化和退化。慢性肌肉消耗是慢性病症(即长时间持续存在)，其特征在于肌肉质量逐渐损失、肌肉弱化和退化。
蛋白质分解代谢的发生是由于异常高的蛋白质降解率、异常低的蛋白质合成率或两者的组合。肌肉蛋白质分解代谢(无论是由高蛋白质降解程度还是由低蛋白质合成程度引起的)会导致肌肉质量下降和肌肉消耗。
肌肉消耗与慢性、神经、遗传或感染性病理、疾病、病情或病症相关。这些包括肌营养不良症，如杜氏肌营养不良症和肌强直性营养不良；肌肉萎缩，如脊髓灰质炎后肌肉萎缩(ppma)；肌肉消耗病症，如心脏恶病质、aids恶病质和癌症恶病质、营养不良、麻风病、糖尿病、肾病、慢性阻塞性肺病(copd)、癌症、终末肾衰竭、气肿、骨软化症、hiv感染、aids和心肌病。
在一个具体的实施例中，该受试者受到选自由以下组成的组的病症的影响：年龄相关的消耗、与长期住院治疗相关的消耗、与肌肉废用相关的消耗、与肌肉固定相关的消耗、与化学疗法或长期类固醇使用相关的消耗及其组合。
在另一个具体的实施例中，本发明提供了一种用于治疗或预防少肌症的组合物。少肌症是与衰老相关的骨骼肌质量和力量的退化性损失。这种肌肉质量的损失是骨骼肌中蛋白质合成急剧减少的结果，这破坏了维持肌肉质量所需的蛋白质合成与蛋白质降解之间的正常平衡。因为许多老年人由于食欲不振而面临食物摄入减少的问题，所以少肌症可能会严重影响老年人的生活。已知少肌症与虚弱综合征相关，虚弱综合征是主要由于骨骼肌和骨骼的衰老相关的损失和功能障碍的标志或症状的集合。由于少肌症引起的骨骼肌损失可能会导致老年人的许多问题，包括活动能力和敏捷性问题以及由于葡萄糖利用和代谢和胰岛素抵抗能力降低引起的潜在的高血糖症。尽管优选地应当在(抗阻)运动后食用所述的营养干预，并且作为康复计划的一部分，但是在运动不是恰当对抗少肌症的可行的替代方案的情况下，可以将本发明中披露的组合物有利地用于对抗老年人的少肌症及其相关问题。
根据本发明，受试者理想地每天食用至少一个分量单位的蛋白质稠密的液体营养组合物，并且在一些实施例中，他或她每天可以食用两个、三个或甚至更多个分量。理想地，将每个分量作为单一的未分开的剂量(在本文中也称为“分量单位”)施用，尽管该分量也可以分成在一天中要两次或更多次服用的两个或更多个部分的或分开的分量。本披露的用途包括连续的日复一日施用以及周期性或有限的施用，尽管通常希望连续的日复一日施用。用于本披露的用途的组合物优选地每天至少应用一次，其中连续维持每天施用持续至少3天，包括至少5天、包括至少1个月、包括至少6周、包括至少8周、包括至少2个月、包括至少6个月，期望持续至少约18-24个月，期望作为长期、连续、每天的饮食补充剂。
蛋白质
用于根据本发明使用的蛋白质稠密的营养组合物和用于本发明方法的蛋白质稠密的营养组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物。该营养组合物中存在的总蛋白质(即存在的所有蛋白质的组合)也可以称为营养组合物的“蛋白质部分”。因此，该营养组合物包含10g或更多/100ml组合物的蛋白质部分。在优选的实施例中，该组合物包含至少11g/100ml组合物、更优选地至少12g/100ml组合物的蛋白质部分。最优选地，该组合物包含至少15g(像16g或更多、17g或更多)的蛋白质/100ml组合物的蛋白质部分。在具体的方面，该组合物包含10-20g蛋白质/100ml组合物，优选地12-20g、更优选地15-20g/100ml组合物。
在一个实施例中，胶束酪蛋白和水解的乳清蛋白的合并的量是该营养组合物的总蛋白质部分的至少70wt％、优选地至少75重量％。进一步优选的是，基于蛋白质的总重量，胶束酪蛋白和水解的乳清蛋白一起构成蛋白质的至少85wt.％、至少85wt.％、至少90wt.％或多达95wt.％。
在用于根据本发明的用途的蛋白质稠密的组合物中和在用于本发明方法的蛋白质稠密的营养组合物中，例如蛋白质稠密的医学营养产品或蛋白质丸，该蛋白质部分优选地提供该组合物总能量含量的至少20％。例如，该蛋白质部分提供该组合物总能量含量的至少25％或至少30％。在一方面，例如当该组合物是蛋白质丸或类似产品时，由该蛋白质部分提供能量含量的至少50％或至少60％。在一个实施例中，该蛋白质部分提供全部或几乎全部(即高达90％、高达95％、高达98％或甚至100％)的该组合物总能量含量。例如，该蛋白质提供该组合物总能量含量的60％至100％，优选地65％至98％、70％至98％、70％至95％。
鲜乳含有约2.6g酪蛋白/100ml，并且几乎所有的酪蛋白都以酪蛋白胶束的形式存在(walstra等人，“dairyscienceandtechnology[乳品科学与技术]”，第2版，crcpress[crc出版社]2006)。胶束酪蛋白也可以称为天然胶束酪蛋白。然而，如在鲜乳中包含的胶束酪蛋白中的胶束的性质在加工过程中可能会改变，而酪蛋白实际上不会失去其胶束结构。在本发明的上下文中，术语“胶束酪蛋白”是指如存在于鲜乳中的天然胶束酪蛋白，但是也指代如下胶束酪蛋白，其中胶束结构和/或组成可能不同于如存在于鲜乳中的胶束结构和/或组成。相比之下，已经失去其胶束结构(例如通过酸沉淀)的酪蛋白在本文中称为“酪蛋白酸盐”。
从乳中浓缩胶束酪蛋白的过程(例如通过过滤)是本领域已知的，并且胶束酪蛋白的几种来源是可商购获得的。基于干物质，胶束酪蛋白分离物(mci)通常包含约80wt.％或更多的蛋白质。基于蛋白质干物质，mci通常包含约90wt.％或更多的胶束酪蛋白(优选地约95wt.％)，其余部分损害乳清蛋白和非蛋白氮。在乳蛋白浓缩物(mpc)和乳蛋白分离物(mpi)中，在很大程度上保留了约80∶20的胶束酪蛋白与乳清的天然比率。通常，基于干物质，mpc包含约80wt.％蛋白质，并且mpi包含85wt.％或更多蛋白质。
胶束酪蛋白的特别优选的来源是mci。mci尤其可从包括菲仕兰坎皮纳domo公司(frieslandcampinadomo)(荷兰阿默斯福特)在内的几家供应商商购获得。
如上所述，该营养组合物中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白。在优选的实施例中，至少45wt.％的蛋白质、更优选地至少50wt.％、甚至更优选地至少55wt.％、最优选地至少60wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白。换句话说，基于该蛋白质部分的总重量，该营养组合物的蛋白质部分包含40wt.％或更多的胶束酪蛋白，优选地基于该蛋白质部分的总重量，包含45wt.％或更多、更优选地50wt.％或更多、甚至更优选地55wt.％或更多、最优选地60wt.％或更多的胶束酪蛋白。
进一步优选的是，90wt.％或更少、更优选地85wt.％或更少(例如80wt.％或更少、75wt.％或更少或70wt.％或更少)的蛋白质是胶束酪蛋白。换句话说，基于该蛋白质部分的总重量，优选的是，该营养组合物的蛋白质部分包含90wt.％或更少、优选地85wt.％或更少(例如80wt.％或更少、75wt.％或更少或70wt.％或更少)的胶束酪蛋白。
在根据本发明的营养组合物中和在用于本发明方法的营养组合物中的至少10wt.％的蛋白质是水解的乳清蛋白。优选地，至少15wt.％、更优选地多于15wt.％(例如15.5wt.％或16wt.％)的蛋白质是水解的乳清蛋白。在进一步优选的实施例中，至少20wt.％、更优选地至少25wt.％、最优选地至少30wt.％的蛋白质是水解的乳清蛋白。换句话说，基于该蛋白质部分的总重量，该营养组合物的蛋白质部分包含10wt.％或更多的水解的乳清蛋白，优选地基于该蛋白质部分的总重量，包含15wt.％或更多、更优选地多于15wt.％(例如15.5wt.％或16wt.％)的水解的乳清蛋白。更优选地，基于该蛋白质部分的总重量，该营养组合物的蛋白质部分包含20wt.％或更多(例如25wt.％或更多或30wt.％或更多)的水解的乳清蛋白。进一步优选的是，60wt.％或更少、优选地小于50wt.％(例如45wt.％或更少或40wt.％或更少)的蛋白质是水解的乳清蛋白。
本文中的术语“水解的乳清蛋白”是指已经以旨在破坏肽键的方式加工和/或处理的乳清蛋白。因此，术语“水解的乳清蛋白”是指至少被轻度水解的乳清蛋白。可以通过例如用一种或多种酶和/或用酸或碱处理完整的蛋白质进行有意水解。
乳清蛋白水解程度的量度是“水解度”(dh)。将水解度定义为在水解过程中已经裂解的蛋白质中肽键总数的百分比。如本领域已知的(adler-nissen，j.agr.foodchem.[农业与食品化学杂志]1979，27(6)，1256)，可以例如通过三硝基苯磺酸(tnbs)方法确定蛋白质的水解度。当使乳清蛋白经受水解过程时，在经历水解过程之前，乳清蛋白的来源可能已经包含一定量(少量)的肽部分。针对乳清蛋白来源中肽部分的这种存在校正如本文所述的水解度的值，换句话说，针对乳清蛋白的自然水解度校正水解度的值。因此，本文中的水解度与经由有意水解过程获得的另外的水解相关。
乳清蛋白中的主要蛋白质是α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。基于总蛋白质，乳清蛋白包含约18wt.％的α-乳白蛋白和约50wt.％的β-乳球蛋白。乳清蛋白中的另外的蛋白质包括血清白蛋白和免疫球蛋白。应当理解，如本文所用的术语水解的乳清蛋白也指代其中例如α-乳白蛋白或β-乳球蛋白至少部分被水解的乳清蛋白。因此，水解的乳清蛋白仍可以包含完整的蛋白质。如上所述，术语“水解的乳清蛋白”是指已经以旨在破坏肽键的方式加工和/或处理的乳清蛋白。此定义包括以旨在优先破坏构成乳清蛋白的一种蛋白质中的肽键而使其他蛋白质基本上完整的方式处理乳清蛋白。因此，术语水解的乳清蛋白还指代已经以旨在破坏β-乳球蛋白中的肽键而使α-乳清蛋白完全或部分完整的方式处理的乳清蛋白，并且还指代已经以旨在破坏α-乳白蛋白中的肽键而使β-乳球蛋白完全或部分完整的方式处理的乳清蛋白。
在用于根据本发明使用的营养组合物中和在用于本发明方法的营养组合物中，该水解的乳清蛋白具有5％或更高的水解度。更优选地，水解度是5.5％或更高，甚至更优选地是6％或更高，还甚至更优选地是7％或更高。最优选地，水解度是8％或更高。在此实施例中，进一步优选的是，水解度是40％或更低、优选地35％或更低、更优选地30％或更低、最优选地25％或更低。优选的是，该乳清蛋白的水解度在5％至25％的范围内，例如在7％-15％的范围内。如上所述，针对乳清蛋白来源(即，用于制备水解的乳清蛋白的乳清蛋白)的天然水解度校正如本文所用的水解度。
在该营养组合物的另一个特定的实施例中，基于该水解的乳清蛋白中的总蛋白质，该水解的乳清蛋白包含40wt.％或更少的完整的蛋白质、优选地30wt.％或更少的完整的蛋白质、更优选地20wt.％或更少的完整的蛋白质、甚至更优选地15wt.％或更少的完整的蛋白质、还甚至更优选地10wt.％或更少的完整的蛋白质。
用于制造水解的乳清蛋白的方法是本领域已知的。可以例如通过使乳清蛋白浓缩物(wpc)、乳清蛋白分离物(wpi)、血清蛋白浓缩物(spc)或血清蛋白分离物(spi)经受酶水解过程来制备水解的乳清蛋白。可替代地，可以通过乳清蛋白的酸或碱水解来制备水解的乳清蛋白。wpc、wpi、spc和spi可以通过本领域已知的方法获得，如加工甜乳清或酸乳清、超滤或微滤方法。
基于干物质，乳清蛋白浓缩物(wpc)通常包含约35wt.％至约80wt.％的蛋白质。基于干物质，乳清蛋白分离物(wpi)通常包含约85wt.％或更多的蛋白质。基于干物质，血清蛋白浓缩物(spc)通常包含约60wt.％的蛋白质。基于干物质，血清蛋白分离物(spi)通常包含约85wt.％的蛋白质。
水解的乳清蛋白可从几家供应商商购获得。水解的乳清蛋白的合适来源的实例包括菲仕兰坎皮纳domo公司(荷兰阿默斯福特)的hyvital水解的乳清蛋白系列的产品，例如hyvitalwheyetd100、hyvitalwheyetd110、hyvitalwheyetd120、hyvitalwhey8016、hyvitalwhey8022和hyvitalwheyha300；以及尤其可从凯瑞公司(kerry)(爱尔兰)、阿拉公司(arla)(丹麦)和恒天然公司(fonterra)(新西兰)获得的水解的乳清蛋白产品。
根据本发明，在用于本文所披露使用的组合物或用于本文所披露的方法的组合物中，胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的比率按重量计在40∶60至90∶10的范围内。在示例性实施例中，胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比例如在40∶60至88∶12、或40∶60至85∶15、或40∶60至82∶18、或40∶60至80∶20、或40∶60至78∶22、或40∶60至75∶25或40∶60至70∶30的范围内。优选地，胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的比率在54∶46至90∶10的范围内、更优选地在56∶44至90∶10的范围内、甚至更优选地在48∶52至90∶10的范围内。在此实施例中，进一步优选的是，胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的比率在40∶60至80∶20的范围内，例如在54∶46至80∶20的范围内、更优选地在56∶44至80∶20的范围内、甚至更优选地在48∶52至80∶20的范围内。如果胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的比率在58∶42至77∶23的范围内，例如在58∶42至75∶25的范围内、更优选地在60∶40至75∶25的范围内、甚至更优选地在60∶40至70∶30的范围内，则可以获得非常好的结果。
除了胶束酪蛋白、乳清蛋白和水解的乳清蛋白之外，该蛋白质部分还可以包含一种或多种另外的蛋白质。该另外的蛋白质可以例如选自由以下组成的组：完整的或水解的酪蛋白酸盐、完整的或水解的植物蛋白、完整的或水解的藻类蛋白和水解的胶原。
本文中的术语酪蛋白酸盐是指失去其胶束结构的酪蛋白。优选地，该酪蛋白酸盐(如果存在)选自由酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钾和酪蛋白镁组成的组，更优选地选自由酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钾和酪蛋白酸钠组成的组。
植物蛋白可以按其来源进行分组，并且包括来源于油料种子、块茎、干豆、谷类、玉米、绿叶植物、豆类等的蛋白质。油料种子蛋白的实例包括大豆蛋白、卡诺拉蛋白、油菜籽蛋白等。谷类蛋白的实例包括小麦蛋白、大米蛋白和奎奴亚藜蛋白。干豆种子蛋白的实例是豌豆蛋白，并且块茎(马铃薯)蛋白的实例是马铃薯糖蛋白。绿叶植物蛋白的实例包括源自菠菜、羽衣甘蓝等的蛋白质。本文中的术语水解的胶原还指代水解的明胶。
该一种或多种另外的蛋白质(如果存在)可以选自由以下组成的组：完整的或水解的酪蛋白酸盐、完整的或水解的植物蛋白、完整的或水解的藻类蛋白和水解的胶原。
例如，该一种或多种另外的蛋白质(如果存在)选自由以下组成的组：完整的或水解的酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钾、酪蛋白酸镁、大豆蛋白、卡诺拉蛋白、油菜籽蛋白、小麦蛋白、大米蛋白、奎奴亚藜蛋白、豌豆蛋白、玉米蛋白、水解的胶原和水解的明胶。在一方面，在用于根据本发明使用的组合物中和在用于根据本发明方法的组合物中的酪蛋白仅以胶束酪蛋白的形式存在。因此，在一个实施例中，该组合物不包含完整的或水解的酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钾、酪蛋白酸钠和/或酪蛋白镁。
基于该营养组合物中蛋白质的总重量，该一种或多种另外的蛋白质(如果存在)构成该蛋白质的50wt.％或更少、优选地小于50wt.％。进一步优选的是，基于该营养组合物中蛋白质的总重量，该一种或多种另外的蛋白质构成该蛋白质的45wt.％或更少，更优选地40wt.％或更少、35wt.％或更少、30wt.％或更少、25wt.％或更少、20wt.％或更少、15wt.％或更少、10wt.％或更少或5wt.％或更少。
在可替代的具体的实施例中，胶束酪蛋白、乳清蛋白和水解的乳清蛋白是该组合物的唯一蛋白质组分。
优选地，除了胶束酪蛋白和水解的乳清作为主要或唯一蛋白质组分之外，用于根据本发明使用的组合物和用于根据本发明方法的组合物还包含一种或多种游离氨基酸和/或其代谢物。在一个实施例中，该氨基酸是三种必需的支链氨基酸(bcaa；亮氨酸、缬氨酸和异亮氨酸)中的一种或多种或其代谢物。在优选的实施例中，使用富含亮氨酸的水解的乳清蛋白。例如，用于本发明的水解的乳清蛋白包含至少12％的亮氨酸，优选地至少14％、更优选地至少15％的亮氨酸。可替代地，它富含游离亮氨酸和/或亮氨酸代谢物。
特别优选的是使用亮氨酸和/或亮氨酸代谢物。例如，该组合物包含亮氨酸代谢物，优选地β-羟基-β-甲基丁酸盐(hmb)。此类组合物特别适用于克服合成代谢抗性的方法。在一个实施例中，该组合物包含按重量计从约0.1％至约8％的hmb。在特定的方面，该组合物每份包含0.2-2ghmb。hmb的游离酸形式非常适用于包含胶束酪蛋白和水解的乳清的组合物，与钙盐形式相比，hmb的游离酸形式可以在更短的时间内达到更高的血浆浓度。
该营养组合物可以但不必须包含脂肪和/或碳水化合物。在一个实施例中，该组合物还包含脂肪，并且在另一个实施例中，该组合物还包含碳水化合物。在又另一个实施例中，该组合物还包含脂肪和碳水化合物。适用于根据本发明的营养组合物的脂肪和碳水化合物在下面更详细地描述。
该碳水化合物(如果存在)优选地提供该组合物总能量含量的5％至50％，并且该脂肪(如果存在)优选地提供该组合物总能量含量的5％至50％。
碳水化合物
该碳水化合物可以由单一来源或由多于一种来源的碳水化合物提供。该碳水化合物可以是简单或复杂的碳水化合物或其混合物。适用于本发明的营养组合物的碳水化合物是本领域技术人员已知的。合适的碳水化合物的实例更详细地描述于例如wo2013/025104、wo2014/099795和wo2009/072885。
脂肪
该脂肪可以是动物脂肪或植物脂肪或其组合。优选地，该脂肪(如果存在)是植物来源的。合适的脂肪是本领域技术人员已知的，并且更详细地描述于例如wo2013/025104、wo2014/099795和wo2009/072885。适用于该营养组合物的脂肪来源的非限制性实例包括乳脂或乳脂部分、食品级椰子油、分级椰子油、大豆油、玉米油、橄榄油、菜籽油、红花油、高油酸红花油、mct油(中链甘油三酯)、葵花籽油、高油酸葵花籽油、棕榈和棕榈仁油、棕榈油精、卡诺拉油、海洋油(例如鱼油)、棉籽油、长链多不饱和脂肪酸(如花生四烯酸(ara)、二十二碳六烯酸(dha)和二十碳五烯酸(epa))及其组合。该营养组合物还可以包含一种或多种结构脂质。结构脂质主要是三酰基甘油(在同一甘油主链上含有中链和长链脂肪酸的混合物)。结构脂质是本领域已知的，并且描述于例如us4871768、us6160007且描述于fitchhaumann，“structuredlipidsallowfattailoring[结构脂质允许脂肪剪裁]”，inform，1997，8(10)，1004。
螯合剂
在优选的实施例中，用于根据本发明使用的营养组合物或用于根据本发明方法的组合物包含螯合剂。该螯合剂优选地选自由以下组成的组：磷酸、柠檬酸、可溶性磷酸盐、可溶性柠檬酸盐及其混合物。可溶性柠檬酸盐的实例包括柠檬酸钠和柠檬酸钾。可溶性磷酸盐的实例包括磷酸钠、磷酸钾、磷酸氢二钠和磷酸氢二钾。优选地，该螯合剂是柠檬酸或可溶性柠檬酸盐或其组合。在此实施例中，进一步优选的是，该螯合剂以0.5-10g/1000ml营养组合物的量存在。更优选地，该螯合剂以0.5-8g/1000ml营养组合物、甚至更优选地以0.5-5g/1000ml营养组合物的量存在。
如本领域已知的，螯合剂的存在可能导致胶束酪蛋白的胶束结构改变。认为钙与螯合剂的结合可以导致从酪蛋白胶束中释放钙离子。钙离子从酪蛋白胶束中的这种释放导致胶束结构改变：胶束体积增加，导致粘度增加。此外，应当防止钙盐的沉淀(例如以柠檬酸钙的形式)，因为这可能导致该营养组合物的感官特性不太理想。螯合剂的最佳量将尤其取决于该营养组合物的ph、该营养组合物中存在的胶束酪蛋白的量、该胶束酪蛋白的来源(例如mci、mpc或mpi)、存在于该组合物中的水解的乳清蛋白的量和类型以及任何另外的任选组分的存在。
另外的成分
用于如本文披露使用的营养组合物和用于如本文披露方法的营养组合物可以任选地包含选自由以下组成的组的一种或多种另外的成分：不可消化的碳水化合物、维生素和相关营养素以及矿物质。
该营养组合物可以包含不可消化的碳水化合物。不可消化的碳水化合物(也称为膳食纤维或称为不可消化的寡糖)是本领域已知的，并且更详细地描述于例如wo2013/025104、wo2014/099795和wo2009/072885，并且描述于综述文章mussatto等人，“non-digestibleoligosaccharides：areview[不可消化的寡糖：综述]”，carbohydratepolymers[碳水化合物聚合物]2007，68，587-597和vanloo等人，“functionalfoodpropertiesofnon-digestibleoligosaccharides：aconsensusreportfromtheendoproject(dgxiiairii-ct94-1095)[不可消化的寡糖的功能性食品特性：来自endo项目的共识报告(dgxiiairii-ct94-1095)]”，britishjournalofnutrition[英国营养学杂志](1999)，81，121-132。
不可消化的碳水化合物的非限制性实例包括果寡糖(fos)、半乳寡糖(gos)、反式半乳寡糖(tos)、木寡糖(xos)、大豆寡糖、果胶等，优选具有在2至20的范围内、更优选地在2至10的范围内的聚合度。
该营养组合物可以包含一种或多种维生素或相关营养素。维生素和相关营养素的非限制性实例包括维生素a、维生素d、维生素e、维生素k、硫胺素、核黄素、吡哆醇、维生素b、烟酸、叶酸、泛酸、生物素、维生素c、胆碱、肉碱、肌醇、其盐和衍生物及其组合。
该营养组合物还可以包含一种或多种矿物质，其非限制性实例包括钙、磷、镁、铁、锌、铬、锰、钼、硒、铜、碘、钠、钾、氯化物及其组合。
在优选的实施例中，用于根据本发明使用的组合物和用于根据本发明方法的组合物包含一种或多种选自由以下组成的组的微量营养素：维生素，优选地维生素d、维生素b1、维生素b2、维生素b12和/或维生素k；以及矿物质，优选地钙、镁、磷和/或硒。
该营养组合物还可以包含一种或多种成分，如例如防腐剂、抗氧化剂、乳化剂、缓冲剂、着色剂、调味剂等。稳定剂的实例包括角叉菜胶和羧甲基纤维素(cmc)。
粘度
已经发现，即使在热处理之后，用于根据本发明使用的液体营养组合物或用于根据本发明方法的液体营养组合物仍具有出人意料的低粘度。
通常，增加液体营养组合物中蛋白质的量导致该组合物的粘度增加。当该组合物包含另外的组分、特别是脂肪和碳水化合物时，粘度的增加可能甚至更大。如以上更详细地描述的，太高的粘度可能导致食用或施用该液体组合物的问题。此外，具有高蛋白质含量的液体营养组合物通常具有降低的热稳定性。
用于根据本发明使用的液体营养组合物或用于根据本发明方法的液体营养组合物(包含相对大量的蛋白质并且具有相对较高的卡路里密度)具有对于肠施用(包括通过管饲)可接受的粘度。优选地，根据本发明的组合物在20℃和100s-1的剪切速率下具有150mpas或更低的粘度。进一步优选的是，该组合物具有120mpas或更低、更优选地100mpas或更低、甚至更优选地80mpas或更低、最优选地60mpas或更低的粘度，全部是在20℃和100s1的剪切速率下。此外，该组合物的粘度优选地是5mpas或更高、更优选地10mpas或更高，均是在100s-1的剪切速率下。确定营养组合物的粘度的方法是本领域技术人员已知的。用于根据本发明使用的或用于根据本发明方法的营养组合物的粘度可以通过使用采用杯和鲍勃几何的旋转粘度计适当地确定。
该营养组合物优选地具有在6至8的范围内、更优选地在6.2至7.5的范围内、最优选地在6.4至7.2的范围内的ph。如有需要，可以通过添加酸或碱来调节ph。调节营养组合物的ph的方法是本领域已知的。为了增加ph，可以使用例如naoh或koh。可替代地，如果需要降低ph，则可以用食品级酸(例如盐酸、柠檬酸、乳酸、磷酸)等进行ph调节。
如本文披露的液体营养组合物具有几个优点。首先，包含至少40wt.％的胶束酪蛋白和至少10wt.％的水解的乳清蛋白的蛋白质部分的存在使得该液体营养组合物能够具有相对较高的蛋白质含量，如至少10g蛋白质/100ml组合物的蛋白质含量，而该组合物仍具有低粘度。此外，该组合物能够经受高温处理，如灭菌或uht。另外，该组合物具有良好的储存稳定性。通常，包含相对大量的酪蛋白或胶束酪蛋白和酪蛋白酸盐的组合的液体组合物的粘度随时间增加。出人意料地，在包含胶束酪蛋白和水解的乳清蛋白的组合的根据本发明的液体营养组合物中，特别是在较低的温度(例如5℃)下，粘度随时间的这种增加显著更少。如本领域已知的，营养组合物中水解的蛋白质的存在通常导致该组合物的味道相当差。然而，尽管存在水解的乳清蛋白，但是根据本发明的液体营养组合物仍然具有良好的味道。
可以如例如在wo2016/174651中描述的那样来制造用于根据本发明使用的营养组合物或用于根据本发明方法的营养组合物，该营养组合物包括胶束酪蛋白和水解的乳清的蛋白质共混物。
附图说明
图1.胃模拟模型随时间的ph图。
图2.在消化的胃阶段中，液相中蛋白质随时间的百分比。关于细节，参见实例1。
图3.在消化的胃阶段中，液相中蛋白质随时间的百分比。关于细节，参见实例2。
实验部分
材料与方法
使用建立的体外消化胃模型获得蛋白质消化数据。胃排空是消化中的限速步骤。鉴于液体通过胃的传输时间比(半)固体的传输时间更快，快速排空液体部分(或液相)中蛋白质的量是快速消化的关键。
使用的蛋白质来源：
refitmci88是胶束酪蛋白的来源，包含88wt.％的蛋白质(基于总干物质)和约90wt.％-95wt.％的胶束酪蛋白和约5wt.％-10wt.％的乳清蛋白(基于蛋白质总干物质)。
hyvitalwhey8016是来自鲜乳乳清的轻度水解的乳清蛋白，具有约80wt.％的蛋白质含量(基于总干物质)。hyvitalwhey8016具有在7％-10％范围内的水解度(dh)。
hyvitalwheyetd120是轻度水解的乳清蛋白，其通常含有约77％的蛋白质。该产品源自鲜乳或可替代地源自酸乳清。hyvitalwheyetd120具有约8％的dh。
excellion酪蛋白酸钠(nacas)是通过酸沉淀从鲜乳中获得的基于酪蛋白的蛋白质。该产品含有约90％的蛋白质。
nutriwhey800f(wpc80)是通过酸乳清的超滤获得的具有约80％的蛋白质的乳清蛋白浓缩物。
为了确定液相中蛋白质的量，首先，在发酵罐中，在以50rpm持续搅拌下，将测试组合物(取决于测试产品的蛋白质浓度，例如100或350ml的体积)加热至37℃，并且取出参考样品(x.0)。随后，如minekusfoodfunct.[食品与功能]，2014，5：1113中所述，在发酵罐中，将模拟胃液(350ml)添加到产品中，该模拟胃液由以下组成：
ο243.2ml的sgf电解质储液
ο在sgf电解质储液中制备的25，000u/ml的60.8ml猪胃蛋白酶储液(来自猪胃粘膜的胃蛋白酶，3，200-4，500u/mg蛋白质，西格玛公司(sigma))：
ο190μl的0.3mcacl2；
ο1900μl的1mhcl以达到ph3.0；
ο73.9ml的水。
立即取出第一样品(x.1)用作参考，并且随后绘制ph(用hcl和naoh建立随时间的下降曲线，所有样品的斜率与图1所示的相似)。
将孵育在37℃下维持例如1至3小时。
在消化过程中，在测试系列过程中取出样品(每个采样点1*40ml)用于分析。拍摄发酵罐的图片，同时取出40ml样品，并且立即在纱布(网目尺寸1至2mm)上过滤样品。将观察结果写在日志中。
立即将样品滤液在冰上冷却以停止酶活性，并且随后将其分开进行不同的分析：
-1.0ml用于用lc-ms进行蛋白质分析：过滤后立即快速冷冻并且储存在-20℃下直至分析。
-2*12ml用于进一步分析：立即快速冷冻并且储存在-20℃下直至分析。
-剩余样品用于蛋白质分析
实例1
在此实例中，评估了包含胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的共混物(测试组合物a)、胶束酪蛋白与酪蛋白酸钠的共混物(测试组合物b)的组合物以及包含天然乳清的组合物(测试组合物c)的消化性。
测试组合物的蛋白质分析(表1)揭示如下：
a：10％mci与乳清水解物：10g蛋白质/100ml，重量比为67∶33。
b：10％mci与酪蛋白酸钠：10g蛋白质/100ml，重量比为67∶33。
c：10％乳清蛋白：10g蛋白质/100ml。表1：蛋白质分析结果(凯氏定氮法)
如表1和图2所证明，在成人的ph胃条件下，mci和水解的乳清蛋白的共混物(组合物a，mci：hwp8016)停留在液相中，这与针对mci：nacas共混物(组合物b)观察到的结块明显不同。由于液相中的蛋白质可能会更快地离开胃，mci：hwp蛋白质共混物的消化比mci：nacas共混物的消化更快，该mci：nacas共混物在胃中凝胶化或凝结，因此导致胃排空和消化延迟。
甚至更出人意料地，本发明的mci：hwp组合物的胃排空与乳清蛋白的胃排空相当，如图2中wpc80参考样品(组合物c)所示。
实例2
在此实验中，评估了包含胶束酪蛋白和不同的水解的乳清蛋白的共混物的组合物(测试组合物e和f)的消化性。同样，用包含天然乳清的参考组合物g研究了在这些测试产品中水解的乳清的相关性。在参考组合物h中，胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比是95∶5，因此在要求保护的90∶10范围之外。
制备以下测试组合物：
e：mci88：hwpetd120：10g蛋白质/100ml，重量比为67∶33
f：mci88：hwp8016：10g蛋白质/100ml，重量比为67∶33(与实验1中的测试产品b相同的蛋白质和比率)
g：mci88：wpc80：10g蛋白质/100ml，重量比为80∶20(如在牛乳中)
h：mci88：8016：10g蛋白质/100ml，重量比为约95∶5
表2和图3中的结果证明，与上表1中所示的数据相符，在成人的ph胃条件下，含有mci：hwp8016(f)和mci：hwpetd120(e)的测试组合物中的蛋白质停留在液相中(如实验1所示)。相比之下，包含mci88：wpc80(重量比为80∶20)的组合物(g)(即缺少水解的乳清蛋白并且与牛乳中的比率相似)中的蛋白质在很大程度上从水相中被消耗(60％-80％)。这指示胃排空延迟。对于包含95wt％的mci88和5wt％的水解的乳清蛋白的共混物(h)也是如此。
表2.蛋白质分析结果(凯氏定氮法)
1.一种包含至少10g蛋白质/100ml组合物的热处理液体高蛋白质组合物，该热处理液体高蛋白质组合物用于以下任何一种或多种，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内：
在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结：
b)增加胃排空速率：
c)增强蛋白质消化：
d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度，
其中该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。
2.一种包含至少10g蛋白质/100ml组合物的热处理液体高蛋白质组合物，该热处理液体高蛋白质组合物用于治疗和/或预防与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40：60至90：10的范围内，其中该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。
3.用于根据权利要求1或权利要求2所述使用的组合物，其中该受试者患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症，优选地患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降和/或少肌症。
4.一种用于以下任何一种或多种的非治疗性方法：
在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；
b)增加胃排空速率；
c)增强蛋白质消化；
d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度，
该非治疗性方法包括向该受试者施用热处理液体高蛋白质组合物的步骤，该热处理液体高蛋白质组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。
5.一种用于以下任何一种或多种的治疗性方法：
在受试者中，a)预防或减少上胃肠道中的凝结；
b)增加胃排空速率：
c)增强蛋白质消化：
d)增加游离的必需氨基酸、优选地亮氨酸的血清浓度，
该方法包括向该受试者施用热处理液体高蛋白质组合物的步骤，该热处理液体高蛋白质组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。
6.一种用于治疗和/或预防受试者的与肌肉质量和/或力量损失相联系的病症的治疗性方法，该方法包括向该受试者施用热处理液体高蛋白质组合物的步骤，该热处理液体高蛋白质组合物包含至少10g蛋白质/100ml组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，并且其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在40∶60至90∶10的范围内。
7.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，其中该受试者处于疾病状态、正在从疾病状态中恢复和/或营养不良。
8.根据权利要求5-7中任一项所述的方法，其中该受试者患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降、骨骼下降、少肌症、骨质疏松症和/或骨肌减少症，优选地患有瘦肌肉质量下降、肌肉消耗、肌肉下降和/或少肌症。
9.用于根据权利要求1-3中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8中任一项所述的方法，其中该组合物中胶束酪蛋白和水解的乳清蛋白的合并的量是总蛋白质的至少70wt％、优选地至少85重量％。
10.用于根据权利要求1-3或9中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9中任一项所述的方法，其中该蛋白质提供该组合物总能量含量的20％至95％、优选地50％-80％。
11.用于根据权利要求1-3或9-10中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-10中任一项所述的方法，其中该组合物包含至少12、优选地至少15、更优选地至少18g蛋白质/100ml组合物。
12.用于根据权利要求1-3或9-11中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-11中任一项所述的方法，其中该液体营养组合物具有包含至少12g的蛋白质、优选地至少15g的蛋白质、更优选地至少18g的蛋白质的单位份量。
13.用于根据权利要求1-3或9-12中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-12中任一项所述的方法，其中该液体营养组合物具有至多125ml、优选地至多100ml、更优选地至多80ml的单位份量。
14.用于根据权利要求1-3或9-13中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-13中任一项所述的方法，其中至少50wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白和/或至少15wt.％的蛋白质是水解的乳清蛋白。
15.用于根据权利要求1-3或9-14中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-14中任一项所述的方法，其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的重量比在60：40至90：10、优选地60：40至84：16的范围内。
16.用于根据权利要求1-3或9-15中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-15中任一项所述的方法，其中该水解的乳清蛋白具有在5％至25％、优选地7％至15％的范围内的水解度。
17.用于根据权利要求1-3或9-16中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-16中任一项所述的方法，其中在20℃和100s-1的剪切速率下，该组合物的粘度是150mpa.s或更低。
18.用于根据权利要求1-3或9-17中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-17中任一项所述的方法，其中该组合物具有1.5kcal/ml或更高的能量密度。
19.用于根据权利要求1-3或9-18中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-18中任一项所述的方法，其中该组合物还包含一种或多种优选地选自由以下组成的组的微量营养素：维生素，优选地维生素d、维生素b1、维生素b2、维生素b12和/或维生素k；以及矿物质，优选地钙、镁、磷和/或硒。
20.用于根据权利要求1-3或9-19中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-19中任一项所述的方法，其中该组合物还包含亮氨酸代谢物，优选地β-羟基-β-甲基丁酸盐(hmb)。
21.用于根据根据权利要求1-3或9-20中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-20中任一项所述的方法，其中该组合物在受试者、优选地老年人受试者中增加必需氨基酸的血清浓度以克服合成代谢抗性。
22.用于根据权利要求1-3或9-21中任一项所述使用的组合物或根据权利要求4-8或9-21中任一项所述的方法，其中在施用后约60分钟内，该组合物使受试者中的亮氨酸血清浓度增加至高于250微摩尔/升、优选地高于300微摩尔/升。
23.一种热处理液体营养组合物，其中至少40wt.％的蛋白质是胶束酪蛋白，并且至少10wt.％的蛋白质是具有至少5％的水解度的水解的乳清蛋白，其中胶束酪蛋白与水解的乳清蛋白的比率在40：60至90：10的范围内，并且其中该组合物呈至多100ml、优选地至多80ml的单位份量的形式，并且其中所述单位份量包含至少15g的蛋白质、优选地至少18g的蛋白质。
技术总结