本发明涉及一种具有治疗胰岛素抵抗作用的植物多糖，具体是一种新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法。
背景技术：
随着社会生活方式的改变和能量摄入过剩，胰岛素抵抗的发病率日益增高，胰岛素抵抗是导致代谢综合征和2型糖尿病以及其它多种疾病的重要原因，但由于胰岛素抵抗本身并没有给机体带来明显的症状，难以察觉，所以很多胰岛素抵抗的患者并没有得到及时的治疗和干预，而使胰岛素抵抗进一步发展为其它多种疾病。胰岛素抵抗的发生机制十分复杂。
目前对于胰岛素抵抗的治疗主要是采取不同的方法控制影响胰岛素抵抗的因素，并对由胰岛素抵抗引起的疾病进行对症治疗。用于胰岛素抵抗治疗的各类药物很多还都处于基础研究的阶段，而且疗效不确定及众多副作用，在临床上的应用尚不广泛，目前还没有一种得到广泛认可和可长期安全使用的有效的治疗药物。在有记载的中医治疗“消渴”的验方中，黄芪的使用频率非常高，黄芪富含糖类、胆碱、叶酸及多种氨基酸等，由于黄芪成分复杂，而且常常与其它中药配伍使用，因此限制了黄芪有效成分的研究。本发明通过对黄芪干燥根中提取的植物多糖即黄芪多糖，发现黄芪多糖对高脂诱导胰岛素抵抗小鼠具有治疗作用，能够改善机体的糖脂代谢和抑制肝脏的脂肪合成，有效的缓解机体的胰岛素抵抗状态。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，包括以下步骤：
s1：以黄芪根为原料，将黄芪根粉碎并进行筛分，并加入水中进行浸泡，浸泡时间为1-2小时，浸泡完毕后，对浸泡的黄芪进行加热，加热温度为110℃-130℃。
s2：接着对加热后的黄芪溶液进行提取，使用亚临界萃取釜中萃取，过滤得萃取液。
s3：将萃取液进行过滤，得到黄芪多糖滤液。
s4：最后将黄芪多糖滤液进行浓缩，浓缩温度为100℃-120℃，并加入辅料进行干燥处理，得到黄芪多糖颗粒。
作为本发明进一步的方案：根据s1步骤所述的黄芪根粉碎后的颗粒度为15-35目，所述水的重量份数为黄芪重量的五倍。
作为本发明再进一步的方案：根据s2步骤所述的亚临界水萃取温度为130℃-180℃，压力为2-15mpa，萃取时间为30-60min。
作为本发明再进一步的方案：根据s4步骤所述的辅料为淀粉或微晶纤维素，添加量比例为总重量的1-3％。
作为本发明再进一步的方案：根据s4步骤所述的干燥处理温度为100-150℃，干燥时间为1-3h。
作为本发明再进一步的方案：根据步骤s3步骤所述的过滤通过超滤膜进行过滤，超滤膜孔径为15kda-25kda，超滤压力为0.4-0.7mpa，温度为10-15℃。
作为本发明再进一步的方案：根据s1步骤所述的对浸泡的黄芪进行加热，使用加热釜加热。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
该新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，植物多糖长期灌胃能够降低胰岛素抵抗小鼠的体重，以及改善胰岛素抵抗小鼠的糖耐量和胰岛素敏感性，小鼠胰岛素抵抗状况得到改善。
附图说明
图1为新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的对高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠体重的影响示意图。
图2为新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的对高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠葡萄糖耐量的影响示意图。
图3为新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的对高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠胰岛素敏感性的影响示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一
请参阅图1～3，本发明实施例中，一种新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，s1：以黄芪根为原料，将黄芪根粉碎并进行筛分，并加入水中进行浸泡，浸泡时间为1小时，浸泡完毕后，对浸泡的黄芪进行加热，加热温度为110℃。
s2：接着对加热后的黄芪溶液进行提取，使用亚临界萃取釜中萃取，过滤得萃取液。
s3：将萃取液进行过滤，得到黄芪多糖滤液。
s4：最后将黄芪多糖滤液进行浓缩，浓缩温度为100℃，并加入辅料进行干燥处理，得到黄芪多糖颗粒。
根据s1步骤所述的黄芪根粉碎后的颗粒度为15目，所述水的重量份数为黄芪重量的五倍。
根据s2步骤所述的亚临界水萃取温度为130℃，压力为2mpa，萃取时间为30min。
根据s4步骤所述的辅料为淀粉或微晶纤维素，添加量比例为总重量的1％。
根据s4步骤所述的干燥处理温度为100℃，干燥时间为1h。
根据步骤s3步骤所述的过滤通过超滤膜进行过滤，超滤膜孔径为15kda，超滤压力为0.4mpa，温度为10℃。
根据s1步骤所述的对浸泡的黄芪进行加热，使用加热釜加热。
采用高脂饮食诱导的方法，在小鼠第6周龄的时候给予小鼠高脂饮食，建立胰岛素抵抗小鼠模型，在小鼠第15周龄的时候开始进行药物灌胃，将胰岛素抵抗小鼠模型随机分为3组：分别为高脂诱导胰岛素抵抗组(hfd)、药物治疗组即黄芪多糖灌胃组(hfd aps)、把正常饮食组(rc)的小鼠设为正常对照组，在实验过程中监测小鼠体重的变化。
实施例二
请参阅图1～3，本发明实施例中，一种新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，s1：以黄芪根为原料，将黄芪根粉碎并进行筛分，并加入水中进行浸泡，浸泡时间为1.2小时，浸泡完毕后，对浸泡的黄芪进行加热，加热温度为115℃。
s2：接着对加热后的黄芪溶液进行提取，使用亚临界萃取釜中萃取，过滤得萃取液。
s3：将萃取液进行过滤，得到黄芪多糖滤液。
s4：最后将黄芪多糖滤液进行浓缩，浓缩温度为105℃，并加入辅料进行干燥处理，得到黄芪多糖颗粒。
根据s1步骤所述的黄芪根粉碎后的颗粒度为20目，所述水的重量份数为黄芪重量的五倍。
根据s2步骤所述的亚临界水萃取温度为140℃，压力为5mpa，萃取时间为40min。
根据s4步骤所述的辅料为淀粉或微晶纤维素，添加量比例为总重量的1.5％。
根据s4步骤所述的干燥处理温度为120℃，干燥时间为1.5h。
根据步骤s3步骤所述的过滤通过超滤膜进行过滤，超滤膜孔径为20kda，超滤压力为0.5mpa，温度为11℃。
根据s1步骤所述的对浸泡的黄芪进行加热，使用加热釜加热。
实施例三
本实施例与实施例二的不同之处，在于还包括：
通过葡萄糖耐量试验(gtt)和胰岛素耐量试验(itt)来判断小鼠胰岛素抵抗的情况。
药物灌胃之后的第12周进行葡萄糖耐量试验，具体操作如下：
1)小鼠禁食12-14h，于次日进行实验，禁食期间自由饮水。
2)实验开始前称量小鼠体重，并记录。
3)给小鼠剪尾，擦掉小鼠尾巴的第一滴血，用血糖仪检测小鼠0min的血糖，并记录。
4)参考小鼠体重，按照2g/kg的葡萄糖注射量，腹腔注射20％葡萄糖溶液，并进行计时，记录15min、30min、60min、120min的血糖值。
药物灌胃之后的第13周进行胰岛素耐量试验，具体操作如下：
1)小鼠禁食4-6h，禁食期间自由饮水。
2)实验开始前称量4组小鼠体重，并记录。
3)给小鼠剪尾，弃去第一滴血，用血糖仪检测小鼠尾尖血糖，并记录为0min的血糖值。
4)参考小鼠体重，腹腔注射胰岛素溶液(0.75u/kg)，并进行计时，记录15min、30min、60min的血糖值。
实施例四
请参阅图1～3，本发明实施例中，一种新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，s1：以黄芪根为原料，将黄芪根粉碎并进行筛分，并加入水中进行浸泡，浸泡时间为1.4小时，浸泡完毕后，对浸泡的黄芪进行加热，加热温度为120℃。
s2：接着对加热后的黄芪溶液进行提取，使用亚临界萃取釜中萃取，过滤得萃取液。
s3：将萃取液进行过滤，得到黄芪多糖滤液。
s4：最后将黄芪多糖滤液进行浓缩，浓缩温度为110℃，并加入辅料进行干燥处理，得到黄芪多糖颗粒。
根据s1步骤所述的黄芪根粉碎后的颗粒度为25目，所述水的重量份数为黄芪重量的五倍。
根据s2步骤所述的亚临界水萃取温度为150℃，压力为8mpa，萃取时间为40min。
根据s4步骤所述的辅料为淀粉或微晶纤维素，添加量比例为总重量的2％。
根据s4步骤所述的干燥处理温度为130℃，干燥时间为2h。
根据步骤s3步骤所述的过滤通过超滤膜进行过滤，超滤膜孔径为22kda，超滤压力为0.6mpa，温度为13℃。
根据s1步骤所述的对浸泡的黄芪进行加热，使用加热釜加热。
利用h&e染色的方法观察各组小鼠肝脏组织形态学变化，判断黄芪多糖对胰岛素抵抗小鼠肝脏组织形态的影响。
实施例五
请参阅图1～3，本发明实施例中，一种新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，s1：以黄芪根为原料，将黄芪根粉碎并进行筛分，并加入水中进行浸泡，浸泡时间为2小时，浸泡完毕后，对浸泡的黄芪进行加热，加热温度为130℃。
s2：接着对加热后的黄芪溶液进行提取，使用亚临界萃取釜中萃取，过滤得萃取液。
s3：将萃取液进行过滤，得到黄芪多糖滤液。
s4：最后将黄芪多糖滤液进行浓缩，浓缩温度为120℃，并加入辅料进行干燥处理，得到黄芪多糖颗粒。
根据s1步骤所述的黄芪根粉碎后的颗粒度为35目，所述水的重量份数为黄芪重量的五倍。
根据s2步骤所述的亚临界水萃取温度为180℃，压力为15mpa，萃取时间为60min。
根据s4步骤所述的辅料为淀粉或微晶纤维素，添加量比例为总重量的3％。
根据s4步骤所述的干燥处理温度为150℃，干燥时间为3h。
根据步骤s3步骤所述的过滤通过超滤膜进行过滤，超滤膜孔径为25kda，超滤压力为0.7mpa，温度为15℃。
根据s1步骤所述的对浸泡的黄芪进行加热，使用加热釜加热。
提取肝脏组织中的蛋白，利用westernblot的方法检测各组小鼠肝脏中胰岛素通路相关信号分子和acc蛋白表达的变化，比较黄芪多糖对胰岛素抵抗小鼠信号通路的影响。
通过对制备过程中各类参数进行调节，使黄芪多糖的制备效率得到调节，从而能够对产能进行精准把控。
该植物多糖具有以下有益效果：
1、植物多糖长期灌胃能够降低胰岛素抵抗小鼠的体重。
2、植物多糖改善胰岛素抵抗小鼠的糖耐量。
3、植物多糖使胰岛素抵抗小鼠胰岛素敏感性得到提高。
尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
1.一种新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1：以黄芪根为原料，将黄芪根粉碎并进行筛分，并加入水中进行浸泡，浸泡时间为1-2小时，浸泡完毕后，对浸泡的黄芪进行加热，加热温度为110℃-130℃；
s2：接着对加热后的黄芪溶液进行提取，使用亚临界萃取釜中萃取，过滤得萃取液；
s3：将萃取液进行过滤，得到黄芪多糖滤液；
s4：最后将黄芪多糖滤液进行浓缩，浓缩温度为100℃-120℃，并加入辅料进行干燥处理，得到黄芪多糖颗粒。
2.根据权利要求1所述的新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，其特征在于：根据s1步骤所述的黄芪根粉碎后的颗粒度为15-35目，所述水的重量份数为黄芪重量的五倍。
3.根据权利要求1所述的新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，其特征在于：根据s2步骤所述的亚临界水萃取温度为130℃-180℃，压力为2-15mpa，萃取时间为30-60min。
4.根据权利要求1所述的新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，其特征在于：根据s4步骤所述的辅料为淀粉或微晶纤维素，添加量比例为总重量的1-3％。
5.根据权利要求1所述的新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，其特征在于：根据s4步骤所述的干燥处理温度为100-150℃，干燥时间为1-3h。
6.根据权利要求1所述的新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，其特征在于：根据步骤s3步骤所述的过滤通过超滤膜进行过滤，超滤膜孔径为15kda-25kda，超滤压力为0.4-0.7mpa，温度为10-15℃。
7.根据权利要求1所述的新型治疗胰岛素抵抗的植物多糖的制备方法，其特征在于：根据s1步骤所述的对浸泡的黄芪进行加热，使用加热釜加热。
技术总结