本发明涉及具有低内毒素含量的硅藻土组合物。在另一个方面中，本发明涉及生产具有低内毒素含量的硅藻土组合物的方法。在另一个方面中，本发明涉及具有低内毒素含量的硅藻土组合物作为生物制药应用中的预涂过滤的预涂剂的使用。
背景技术：
：：在生物制药过程中，通常在发酵罐中使产生产物，如抗体的细胞增殖。在发酵过程结束时，细胞以及细胞碎片必须与产物分离以获得具有所期望的产物的透明上清液。通常，为了实现这种分离，实施离心以及后续的无菌过滤。然而，无菌过滤经常在特定时间后导致过滤器堵塞，这使得对于发酵罐的处理，使用几个过滤器是不可避免的。在不先离心的情况下，无菌过滤将立即导致过滤器堵塞，从而甚至使过滤是不可能的。包括离心和无菌过滤的整个分离程序需要明显很长的时间并且涉及复杂的工作步骤，并因此提高了成本。可以克服离心步骤和过滤器堵塞的一种方式是使用硅藻土(de)的预涂过滤。为此目的，向细胞肉汤中加入特定量的硅藻土，然后过滤。在该预涂过滤期间，硅藻土在无菌过滤器上构建了其中结合细胞和细胞碎片的粗糙-孔状滤饼，因此所述细胞和细胞碎片可以不再会导致过滤器堵塞。简要地，硅藻土是天然存在的、柔软的硅酸沉积岩，其由硅藻的化石化残余物组成，所述硅藻是一类硬皮原生生物，也称为金藻。从化学角度来看，硅藻土主要由无定形二氧化硅组成，但是也含有大量结晶二氧化硅。基于其天然沉积以及其进一步加工，如锻烧，硅藻土可以含有多达15质量％的方石英和1质量％的石英。对于硅藻土在实验室中的使用，由于必须符合多种发酵罐的形状和通常多种样品，因此敞开剂量施用(例如，通过漏斗)是优选的。在工业规模上，可以使用具体开发的包装溶液，其允许几乎无尘的连接。硅藻土在实验室中的应用所产生的主要问题是粉尘颗粒的极高释放，这具体在使用具有粉状形态的干燥材料时发生。因此，处于其纯化形式的硅藻土不适合于在通过通风橱提供的安全工作台之外使用。具体地，由于作为方石英和石英(两者均高度可吸入)的大量结晶二氧化硅，硅藻土释放的粉尘颗粒的吸入对肺有害，从而导致矽肺。此外，结晶二氧化硅还被认为是对人致癌的。与之相反，无定形二氧化硅被认为具有低毒性。尽管如此，其长期吸入可以导致肺部变化。除了在健康问题角度的上述考虑之外，粉尘的产生还导致了有关工作环境的常规卫生要求的其它问题。通过使用粘结剂形成硅藻土颗粒的尝试未显著降低粉尘颗粒的释放，因为这类颗粒还通过摩擦产生粉尘颗粒，然后当以敞开方式处理时得到释放。此外，该方法的缺陷在于照此引入样品溶液中的粘结剂从而会污染样品并可能干扰其后续分析。用水使硅藻土润湿会降低粉尘颗粒的释放。此外，它允许敞开处理并且不向含水样品添加任何新的物质。基于硅藻土和水的质量比，获得了易碎至固体形状的产品。然而，这些产品通常难以处理，因为它们不再能自由流动，具体地，当所述质量比为约1:3或甚至更小时。此外，向硅藻土添加大量的水还导致样品进一步不期望的稀释。由水的额外添加所造成的其它问题在于促进了微生物的生长以及与之有关的内毒素形成，从而导致样品污染。考虑到以上缺陷，本发明潜在的技术问题将是提供应显示出显著降低的粉尘颗粒释放并且同时具有低内毒素含量的硅藻土组合物。具体地，要提供的硅藻土组合物应使得能够在预涂过滤中几乎无尘应用。此外，本发明的目标是提供用于产生所述硅藻土组合物的方法。技术实现要素：通过提供在权利要求中显示其特征的实施方式解决了上述问题。具体地，根据本发明的第一方面，提供了具有低内毒素含量的硅藻土组合物，其包含锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物，其中锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.0至1:2.0的范围内，并且其中所述硅藻土组合物的内毒素含量等于或小于0.5eu/ml。由于锻制硅藻土颗粒与水的优化质量比，根据本发明所述的硅藻土组合物显示出极低的粉尘颗粒的释放。具体地，当与干燥硅藻土相比时，根据本发明所述的硅藻土组合物使得所释放的粉尘颗粒的量减少超过80％(参照图1)。照此，可以以敞开方式处理它而无明显健康风险。此外，根据本发明所述的硅藻土组合物具有低内毒素含量，因此特别适合于生物制药应用，例如，真核和原核细胞的预涂过滤，其中内毒素的不存在是非常期望的。如上所述，根据本发明所述的硅藻土组合物包含锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物(agglomeratedmixture)。在本文中，可以通过本领域中已知的任何方法锻烧所使用的硅藻土颗粒。由于锻烧，所述硅藻土颗粒不含水。从而，由于所述锻制硅藻土颗粒不添加额外量的水，因此有可能准确调整锻制硅藻土颗粒与水的质量比。另外，所述锻制硅藻土颗粒优选地基本不含来源于其藻类来源的有机残余物。为此目的，在锻烧之前和/或之后，所述硅藻土颗粒可以经历彻底(酸性)清洗程序。优选地，用于以上定义的硅藻土组合物的水不含内毒素并且不含细菌，其中后者被认为是内毒素的来源。从而，有可能容易地确保根据本发明所述的硅藻土组合物中的低内毒素含量。可以通过γ-灭菌获得不含内毒素并且不含细菌的水，例如，如以下进一步更详细地描述的。无论在本发明申请中任何处可应用时，术语“不含”将不被视为字面含义，即它还应表示“基本不含”。因此，只要它不会不利地影响本发明的有利作用，则术语“不含”可以涵盖少量。根据本发明，锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.0至1:2.0的范围内。因此，通过以上述质量比混合锻制硅藻土颗粒与水，形成了含有33.3至50.0质量％的量的锻制硅藻土颗粒和含有50.0至66.7质量％的量的水的结块。在以上定义的硅藻土组合物的优选实施方式中，锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.1至1:1.7的范围内。也就是说，在该优选实施方式中，所形成的结块含有37.0至47.6质量％的量的锻制硅藻土颗粒和52.4至63.0质量％的量的水。在如上定义的硅藻土组合物的更优选的实施方式中，锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.2至1:1.4的范围内。也就是说，在该更优选的实施方式中，所形成的结块含有41.7至45.5质量％的量的锻制硅藻土颗粒和54.5至58.3质量％的量的水。在锻制硅藻土颗粒与水的质量比在如上定义的范围中的情况下，包含处于结块混合物形式的锻制硅藻土颗粒与水的本发明所述所述的硅藻土组合物显示出极低的粉尘颗粒释放。就所考虑的锻制硅藻土颗粒的平均粒径而言，本发明未具体限制。例如，所述平均粒径可以在0.1至800μm的范围内，例如，0.1至600μm，0.1至400μm，0.1至200μm或者0.2至200μm，但不限于此。在以上定义的硅藻土组合物的具体实施方式中，所述锻制硅藻土颗粒的平均粒径在0.5至10μm的范围内。对于平均粒径的调整，可以使用本领域中已知的任何机械分离程序对锻烧后获得的硅藻土颗粒进行分类。在锻制硅藻土颗粒的平均粒径处于以上定义的范围内的情况下，可以获得结块混合物，其中所述锻制硅藻土颗粒充分自由流动。在本文中，通过激光衍射法(精度：±1％)，使用常规颗粒粒径测量仪器(mastersizer2000,malverninstruments)测量锻制硅藻土颗粒的平均粒径。在本发明的另一个具体实施方式中，如上定义的硅藻土组合物还包含不透水的(water-impermeable)和可γ灭菌(γ-sterilizable)的包装件(packaging)，其密封锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物，即其以密封的方式封闭所述结块混合物，从而可以不与环境发生物料交换。由于包装件的水不渗透性，它可以在以上定义的硅藻土组合物的储存期间确保锻制硅藻土颗粒与水的质量比维持甚至更长的时间段，如数月至长达三年。也就是说，当包装件时，防止所述硅藻土组合物容易地转变为易于释放粉尘颗粒的干燥形式。有利地，在包装件以上定义的硅藻土组合物的情况下，它可以容易地以不同的量保存和运输。在除去包装件之后，可以以几乎无尘的方式剂量施用所需要的量。此外，由于所述包装件是可γ灭菌的，即所述包装件本身及其内容物可以通过γ-射线辐射灭菌，因此有可能在根据本发明所述的硅藻土组合物中获得等于或小于0.5eu/ml的内毒素含量，如以下进一步描述的。从化学角度来看，内毒素是脂多糖。它们是革兰氏阴性细菌细胞壁的组分，已知其在人中引起发热，例如，当注入血流中时。如果免疫应答非常剧烈，则内毒素在血液中的存在(也称为内毒素血症)导致了脓毒性休克。不利地，细菌内毒素是热稳定的，并且它们的毒性不依赖于细菌细胞的存在。在本文中，根据鲎变形细胞溶解物测试(简单缩写为lal测试，它是本领域中已知的用于内毒素测试的最常见的方法)测量硅藻土组合物的内毒素含量。简要地，lal测试潜在的测定是基于鲎(limulous)生物学，其在血细胞(变形细胞)中产生lal酶以结合来自侵袭细菌的内毒素并使其失活。具体地，lal用作原始免疫系统(primitiveimmunesystem)。通过使内毒素失活，形成凝块，其可以进一步保护鲎不被感染。通过向要测试的样品中添加lal试剂并测定凝块形成，lal测试利用了这种酶的作用。这可以通过光学装置实现，因为凝块形成使样品浑浊。内毒素含量以浓度具体表示为单位体积的“内毒素单位”(eu)，例如，eu/ml，其大致对应于0.1至0.2ng内毒素每毫升样品体积。如技术人员已知的，还可以使用重组因子c(rfc)-基内毒素测试来测量内毒素含量，其已批准作为如上所述的常规lal测试的替代，从而不伤害濒危的鲎。重组因子c-基内毒素测试是内毒素特异性的并且可以消除假-阳性葡聚糖反应。具体地，在重组因子c-基内毒素测试中，因子c的合成形式结合至内毒素，从而激活凝血级联。典型的rfc-基测定是终点荧光测试，其中未结合的因子c切割荧光底物，从而释放可检测的荧光物质。在本文中，根据上述lal测试测量根据本发明的硅藻土组合物的内毒素含量。根据本发明，如上定义的硅藻土组合物的内毒素含量等于或小于0.5eu/ml，优选地等于或小于0.2eu/ml，并且更优选地等于或小于0.1eu/ml。通常，根据本发明，未具体限制内毒素含量的下限。例如，所述下限可以对应于lal测试的检测下限，其为约0.01eu/ml。因此，内毒素含量为0.01eu/ml的样品可以被认为是不含内毒素的。对于内毒素含量的测量，将根据本发明的硅藻土组合物溶于1l水。在本文中，溶于1l水的硅藻土组合物的量始终使得40g锻制硅藻土颗粒包含在最终所得溶液中。例如，在所述硅藻土组合物中锻制硅藻土颗粒与水的质量比为1:1.0的情况下，将其80g溶于1l水。与此一致，在所述硅藻土组合物中锻制硅藻土颗粒与水的质量比为1:2.0的情况下，将其120g溶于1l水。在任何情况下，使用上述lal测试所测量的，根据本发明的内毒素含量基于最终所得溶液的体积，等于或小于0.5eu/ml，优选地等于或小于0.2eu/ml，并且更优选地等于或小于0.1eu/ml，其大致分别对应于基于锻制硅藻土颗粒的质量，等于或小于12.5eu/g，优选地等于或小于5eu/g，并且更优选地等于或小于2.5eu/g的内毒素含量。在包装根据本发明的硅藻土组合物的情况下，用于密封所述硅藻土组合物的包装件可以是(例如)袋或容器，对其未具体限制，只要它是不透水的，具体地，水蒸汽不可渗透的，并且可γ灭菌的。通常，由不同聚合物和金属层组成的层压件可以用作包装件材料。在如上定义的硅藻土组合物的具体实施方式中，所述不透水且可γ灭菌的包装件由4-层层压件组成，其从包装件内部至外部(即从锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物的接触侧向周围环境)包含以下层(i)至(iv)：(i)聚乙烯(pe)或聚丙烯(pp)层，其厚度在30至150μm的范围内，优选地在50至120μm的范围内，例如，75μm或100μm；(ii)聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)或取向聚酰胺(opa)层，其厚度在5至20μm的范围内，优选地在8至15μm的范围内，例如，12μm；(iii)铝(alu)层，其厚度在5至20μm的范围内，优选地在8至15μm的范围内，例如，12μm；和(iv)聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)层，其厚度在5至20μm的范围内，优选地在8至15μm的范围内，例如，12μm。在以上定义的4-层层压件中，包装件内侧的pe或pp用作杀菌-稳定的(retort-stable)热密封层材料。pe或pp层的厚度主要影响层压件的机械强度、密封强度和硬度，其对于确保紧密密封是必不可少的。中间pet或opa层提供机械强度，例如，抗刺穿性和防摔性，以及密封强度，从而保护与作为阻挡层的alu层的结合。也就是说，将铝用作主要防氧气、光和水的阻挡材料。由于alu层的存在，如上定义的4层-层压件具有至多0.05g/m2·天，例如，至多0.03g/m2·天或者至多0.02g/m2·天的透水性，并因此在本发明的意义上可以认为是不透水的。最终，外侧pet层用作保护层，其提供硬度和拉伸强度，并且根据需要，用作包装件印刷的密封-耐受性基底。通常，可以相对于袋尺寸、灌装机以及机械强度和硬度要求来适当设置4个层(i)至(iv)的厚度。以上定义的4个层(i)至(iv)(其在水-不渗透性方面是优良的，具体地，在水蒸汽渗透性方面是优良的)的典型组合包括pe(100μm)/pet(12μm)/alu(12μm)/pet(12μm)和pe(75μm)/opa(12μm)/alu(12μm)/pet(12μm)，但不限于此。上述4-层层压件可以容易地暴露于γ-辐射而不会被损坏，因此允许对密封锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物的包装件γ-灭菌。在另一个方面中，本发明涉及允许产生以上定义的硅藻土组合物的方法。在该方面，以上对于根据本发明所述的硅藻土组合物提供的所有限制和定义同样适用于用于产生根据本发明的硅藻土组合物的方法，反之亦然。具体地，用于产生根据本发明的硅藻土组合物的方法包括以下步骤(a)至(e)：(a)提供锻制硅藻土颗粒；(b)将所述锻制硅藻土颗粒与水以1:1.0至1:2.0的质量比混合，从而获得锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物；(c)在不透水且可γ灭菌的包装件中密封在步骤(b)中获得的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物，从而获得密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物；(d)通过暴露于γ-辐射，对在步骤(c)中获得的密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物灭菌，从而获得内毒素含量等于或小于0.5eu/ml的硅藻土组合物；和(e)任选地，从步骤(d)中获得的硅藻土组合物中除去包装件。在下文中，更详细地描述了用于产生根据本发明的硅藻土组合物的方法的步骤(a)至(e)。在如上定义的方法的步骤中(a)中，提供了锻制硅藻土颗粒。如上所述，在步骤(a)中提供的硅藻土颗粒已提前进行锻烧，从而确保它们不含水，从而使得能够在以下步骤(b)中对要调整的质量比进行准确调整。在如上定义的方法的步骤(b)中，将所述锻制硅藻土颗粒与水混合，其中所述锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.0至1:2.0的范围内，优选地在1:1.1至1:1.7的范围内，并且更优选地在1:1.2至1:1.4的范围内。从而，获得了锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物。一旦混合，获得的结块含有33.3至50.0质量％的量，优选地37.0至47.6质量％的量，并且更优选地41.7至45.5质量％的量的锻制硅藻土颗粒，同时含有50.0至66.7质量％的量，优选地52.4至63.0质量％的量，并且更优选地54.5至58.3质量％的量的水。就所考虑的在步骤(b)中用于产生所期望的结块所的水而言，优选地，它不含内毒素并且不含细菌，从而有利于在步骤(d)中进行的γ-灭菌。就所考虑的锻制硅藻土颗粒的平均粒径而言，未具体限制以上定义的方法。如结合根据本发明所述的硅藻土组合物所提及的，所述平均粒径可以在0.1至800μm的范围内，例如，0.1至200μm或者0.2至200μm的范围内，但不限于此。在以上定义的方法的具体实施方式中，步骤(a)中提供的锻制硅藻土颗粒的平均粒径在0.5至10μm的范围内。在满足以上定义的平均粒径范围的情况下，通过以上定义的方法可获得的硅藻土组合物是充分自由流动的。在本文中，可以通过本领域中已知的任何混合技术来进行锻制硅藻土颗粒与水的混合。在以上定义的方法的具体实施方式中，在步骤(b)中，通过喷雾-润湿将所述锻制硅藻土颗粒与水混合。通常，喷雾润湿包括使所述锻制硅藻土颗粒流化，并在流化期间向其喷水，从而导致结块形成，直至实现所期望的锻制硅藻土颗粒与水的质量比。作为另外一种选择，可以在常规混合机，例如，犁铧混合机中将锻制硅藻土颗粒与水边搅拌边混合。为此目的，优选地在加水前将锻制硅藻土颗粒装填至混合机中。为了避免可能导致内毒素形成的细菌污染，在实施步骤(c)之前，可以根据需要，例如，在0℃至15℃，0℃至10℃或5℃至10℃的温度下，将在以上定义的方法的步骤(b)中获得的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物冷却。在如上定义的方法的步骤(c)中，将已在步骤(b)中获得的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物在不透水且可γ灭菌的包装件中密封。从而，获得了密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物。在密封前，通常在室温下(25℃)，通过本领域中已知的任何方式，将在步骤(b)中获得的结块混合物转移至包装件中，所述包装件是(例如)袋或容器。然后，可以通过施加热来实现密封，其也称为热密封。然而，本发明不局限于任何具体的密封程序。如上所述，未具体限制包装件，只要它是水不可渗透的，具体地，水蒸气不可渗透的且可γ灭菌的。此外，为步骤(c)中锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物的密封提供的包装件可以用于单次使用或用于多次使用，即它可以或不可以再密封。在以上定义的方法的具体实施方式中，用于密封步骤(c)中的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物的不透水且可γ灭菌的包装件由4-层层压件组成，其从包装件内侧向外侧包括以下层(i)至(iv)：(i)聚乙烯(pe)或聚丙烯(pp)层，其厚度在30至150μm的范围内，优选地在50至120μm的范围内，例如，75μm或100μm；(ii)聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)或取向聚酰胺(opa)层，其厚度在5至20μm的范围内，优选地在8至15μm的范围内，例如，12μm；(iii)铝(alu)层，其厚度在5至20μm的范围内，优选地在8至15μm的范围内，例如，12μm；和(iv)聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)层，其厚度在5至20μm的范围内，优选地在8至15μm的范围内，例如，12μm。为了简明起见，参考上文中的段落，其中详细描述了用于密封锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物的不透水且可γ灭菌的包装件。可以以上述结合步骤(b)所解释的相同方式冷却在以上定义的方法的步骤(c)中获得的密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物。从而，它可以确保所述密封的结块混合物不会进一步被细菌污染，其可能导致内毒素的形成。在如上定义的方法的步骤(d)中，通过暴露于γ-辐射使已在步骤(c)中获得的密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物灭菌。从而，获得了内毒素含量等于或小于0.5eu/ml的硅藻土组合物。如技术人员已知的，通过暴露于γ-辐射的样品灭菌是用于除去微生物，如细菌的有效方法。由于通过革兰氏阴性细菌解体释放内毒素，因此除去这类细菌确保了灭菌样品中的低内毒素含量。在以上定义的方法的具体实施方式中，用于对步骤(d)中的密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物灭菌的γ-辐射的剂量无限制地在25至100kgy的范围内，例如，40至80kgy，50至70kgy，例如，至少25kgy。基于步骤(d)中应用的具体辐射剂量，将γ-灭菌实施一定时间段，所述时间段在2至10小时，3至8小时和4至6小时的范围内，例如，5小时，但不限于此。在以上定义的方法的步骤(d)中获得的硅藻土组合物具有低内毒素含量，即等于或小于0.5eu/ml，优选地等于或小于0.2eu/ml，并且更优选地等于或小于0.1eu/ml的内毒素含量，其可以使用如上所述的lal测试来评价。在完成步骤(d)中的γ-灭菌之后，可以将所述硅藻土组合物在室温下储存，例如，不需要进一步冷却。在如上定义的方法的步骤(e)中，任选地从已在步骤(d)中获得的硅藻土组合物中除去密封锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物的包装件。优选地，直至马上要使用之前才除去包装件。在另一个方面中，本发明涉及以上定义的硅藻土组合物作为生物制药应用中预涂过滤的预涂剂的使用，并且具体地涉及其用于水介质中真核和/或原核细胞的预涂过滤的使用。在生物制药过程中，当使用硅藻土作为预涂过滤的预涂剂时，确保低内毒素含量以及硅藻土的无尘应用是特别重要的。当使用根据本发明所述的硅藻土组合物时，满足了这些要求。附图说明附图示出了：图1示出了对于锻制硅藻土颗粒与水的不同质量比所测量的颗粒计数速率(颗粒个数/min)。图2示出了干燥硅藻土(图2a)和锻制硅藻土颗粒与水的质量比为1:1.25(即含有44.4质量％的量的锻制硅藻土颗粒和含有55.6质量％的量的水)的根据本发明的硅藻土组合物(图2b)的照片。具体实施方式实施例将通过实施例进一步说明本发明。然而，本发明不应视为受限于以下实施例。将通过包装件密封的包含不同质量比的锻制硅藻土颗粒(c300,advancedminerals)和水的结块混合物的硅藻土组合物打开并倒入烧杯中。然后，通过粉尘颗粒测量仪(metone3400,hach)确定一分钟内的粉尘颗粒释放。在本文中，锻制硅藻土颗粒的粒径为10、5、3、2、1和0.5μm，并且水的内毒素含量小于0.05eu/ml。本文所使用的包装件为4-层层压件，其包含pe(75μm)、opa(12μm)、alu(12μm)和pet(12μm)层。出乎意料地，将一部分的锻制硅藻土颗粒和1.25部分的水混合导致产生了硅藻土组合物，其中与干燥硅藻土相比，粉尘颗粒的释放减少了超过85％，如通过图1中各自的颗粒计数速率(颗粒个数/min)可以推断的。意外地，如从图2可以看出的，当将锻制硅藻土颗粒与水的质量比为1:1.25的硅藻土组合物与干燥硅藻土相比时，未观察到明显的差异。具有低内毒素含量的根据本发明的硅藻土组合物显示出减少的粉尘颗粒释放，同时仍显示出优良的自由流动特征。照此，它特别适合作为生物制药应用中的预涂过滤，具体地，水介质中的真核和原核细胞的预涂过滤的预涂剂。有利地，根据本发明所述的硅藻土组合物使得粉尘颗粒易于处理并且最大程度降低了粉尘颗粒吸入的风险。当前第1页1 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技术特征：1.一种具有低内毒素含量的硅藻土组合物，包含锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物，其中锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.0至1:2.0的范围内，并且其中所述硅藻土组合物的内毒素含量等于或小于0.5eu/ml。
2.根据权利要求1所述的硅藻土组合物，其中锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.1至1:1.7的范围内。
3.根据权利要求2所述的硅藻土组合物，其中锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.2至1:1.4的范围内。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的硅藻土组合物，其中所述锻制硅藻土颗粒的平均粒径在0.5至10μm的范围内。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的硅藻土组合物，还包含密封锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物的不透水且可γ灭菌的包装件。
6.根据权利要求5所述的硅藻土组合物，其中所述不透水且可γ灭菌的包装件由4层层压件组成，所述4层层压件从所述包装件的内侧向外侧包含以下层(i)至(iv)：
(i)聚乙烯或聚丙烯层，具有在30至150μm的范围内的厚度；
(ii)聚对苯二甲酸乙二醇酯或取向聚酰胺层，具有在5至20μm的范围内的厚度；
(iii)铝层，具有在5至20μm的范围内的厚度；和
(iv)聚对苯二甲酸乙二醇酯层，具有在5至20μm的范围内的厚度。
7.一种用于生产具有低内毒素含量的硅藻土组合物的方法，包括以下步骤：
(a)提供锻制硅藻土颗粒；
(b)将所述锻制硅藻土颗粒与水以1:1.0至1:2.0的质量比混合，从而获得锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物；
(c)在不透水且可γ灭菌的包装件中密封在步骤(b)中获得的所述锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物，从而获得密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物；
(d)通过暴露于γ-辐射，对在步骤(c)中获得的所述密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物灭菌，从而获得内毒素含量等于或小于0.5eu/ml的硅藻土组合物；和
(e)任选地，从在步骤(d)中获得的所述硅藻土组合物中除去包装件。
8.根据权利要求7所述的方法，其中步骤(a)中提供的所述锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.1至1:1.7的范围内。
9.根据权利要求8所述的方法，其中步骤(a)中提供的所述锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.2至1:1.4的范围内。
10.根据权利要求7至9中任一项所述的方法，其中步骤(a)中提供的所述锻制硅藻土颗粒的平均粒径在0.5至10μm的范围内。
11.根据权利要求7至10中任一项所述的方法，其中通过喷雾-润湿在步骤(b)中混合所述锻制硅藻土颗粒与水。
12.根据权利要求7至11中任一项所述的方法，其中用于密封步骤(c)中的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物的所述不透水且可γ灭菌的包装件由4层层压件组成，所述4层层压件从所述包装件的内侧向外侧包括以下层(i)至(iv)：
(i)聚乙烯或聚丙烯层，具有在30至150μm的范围内的厚度；
(ii)聚对苯二甲酸乙二醇酯或取向聚酰胺层，具有在5至20μm的范围内的厚度；
(iii)铝层，具有在5至20μm的范围内的厚度；和
(iv)聚对苯二甲酸乙二醇酯层，具有在5至20μm的范围内的厚度。
13.根据权利要求7至12中任一项所述的方法，其中用于对步骤(d)中的所述密封的锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物灭菌的γ-辐射具有在25至100kgy的范围内的剂量。
14.根据权利要求1至6中任一项所述的硅藻土组合物作为生物制药应用中预涂过滤的预涂剂的用途。
15.根据权利要求14所述的用途，用于水介质中真核和/或原核细胞的预涂过滤。
技术总结本发明涉及具有低内毒素含量的硅藻土组合物，其包含锻制硅藻土颗粒与水的结块混合物，其中锻制硅藻土颗粒与水的质量比在1:1.0至1:2.0的范围内，并且其中硅藻土组合物的内毒素含量等于或小于0.5EU/mL。在另一个方面中，本发明涉及用于生产具有低内毒素含量的硅藻土组合物的方法。在另一个方面中，本发明涉及具有低内毒素含量的硅藻土组合物作为生物制药应用中的预涂过滤的预涂剂的用途。
技术研发人员：卡尔·普夫兰茨;弗洛里安·黑本施特赖特;安德烈亚斯·皮克尔
受保护的技术使用者：赛多利斯史泰迪生物技术有限责任公司
技术研发日：2018.10.09
技术公布日：2020.06.05
