本发明属于色素提取分离与纯化技术领域，特别涉及一种紫槐色素的提取纯化方法。
背景技术：
紫槐，又名红花洋槐(robiniapseudoacacial.)，属豆科蝶形花亚科刺槐属植物，为刺槐变种，因其花穗硕大，花期长而艳丽，是园林常用的观赏树种之一。紫槐有一定的抗旱能力，对土壤适应性强，广泛分布于我国南北各地。紫槐苗木主要依靠刺槐砧嫁接繁育而来，研究主要集中在嫁接技术、组织培养及快速繁殖方面。目前，对紫槐研究报道主要有紫槐叶营养成分分析。
槐花研究主要集中在洋槐花方面，包括槐花营养成分测定，槐花中黄酮提取、分离、结构分析及功效测定等方面，而对紫槐研究较少，紫槐花色素提取及稳定性研究更少，目前没有紫槐花色素分离纯化报道。通过分离纯化紫槐花中色素目的为下一步研究紫槐花中的有效成分提供理论依据和技术支撑。
技术实现要素：
有鉴于上述技术问题，本发明提供了一种紫槐色素的提取纯化方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
s1，采摘未盛开之前的紫槐花，进行干燥，粉碎；
s2，将粉碎的紫槐花浸入柠檬酸溶液中，采用超声提取法提取3-4次，得初提取液；
s3，将初提取液于-35-40℃下冷冻3-4天，然后真空干燥2-3天，制得紫槐色素粗品干粉；
s4，将s3的紫槐色素粗品干粉溶于ph值为4-4.2的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，制得色素溶液；
s5，将s4的色素溶液上大孔树脂吸附，室温下，于振荡吸附10-12h，吸附完成后，将大孔树脂和色素溶液分离，先用蒸馏水冲洗已吸附色素的大孔树脂，至滤液无色为止，再用乙醇溶液，室温下，洗脱解吸大孔树脂3-4h，收集洗脱液；
s6，将s5的洗脱液浓缩至原体积1/4-5，收集浓缩液，将浓缩液于-35-40℃下真空冷冻干燥2-3天，制得紫槐色素半成品；
s7，将s6的紫槐色素半成品替换s3的紫槐色素粗品干粉并按照s4-s6步骤重复2-3次，得紫槐色素纯品。
进一步的，s1中，所述干燥方法烘干，烘干条件为60-65℃、2h。
进一步的，s2中，柠檬酸溶液中柠檬酸的质量分数为0.1％，色素溶液中的紫槐色素粗品干粉浓度为0.020g/ml，粉碎的紫槐花与柠檬酸溶液的料液比为1g：90ml。
进一步的，s2中，超声提取的参数设置为：超声波功率400w，超声波时间40min，超声波温度50℃。
进一步的，s4的色素溶液中的紫槐色素粗品干粉浓度为0.020g/ml。
进一步的，s5中，大孔树脂为d-101大孔树脂。
更进一步的，大孔树脂与色素溶液的料液比为1g：50ml。
进一步的，s5中，所述乙醇溶液中乙醇体积分数为70％。
更进一步的，s5洗脱解吸中，大孔树脂与乙醇溶液的料液比为1g：50ml。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1.本发明的一种紫槐色素的提取纯化方法，采用大孔树脂吸附，其理化性质稳定，不溶于酸、碱及有机溶剂，不受无机盐类及强离子低分子化合物的影响。树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质)之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作，使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。同其他方法相比，大孔树脂吸附不破坏被分离物质的结构，不改变被分离物质性质；操作方便，大孔树脂可反复利用，是较为经济的一种纯化方法。
2.通过本发明提供的方法提取纯化的紫槐色素纯品较紫槐色素粗品干粉的纯度提高，色价提高了将近4倍，纯化前，色素粗制品为淡粉色固体粉末，而纯化后，得到的色素为粉色固体粉末。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
本实施例的一种紫槐色素的提取纯化方法包括如下步骤：
s1，采摘未盛开之前的紫槐花，进行干燥，粉碎；干燥方法烘干，烘干条件为60℃、2h。
s2，将粉碎的紫槐花浸入柠檬酸溶液中，采用超声提取法提取3次，得初提取液；柠檬酸溶液中柠檬酸的质量分数为0.1％，粉碎的紫槐花与柠檬酸溶液的料液比为1g：90ml，超声提取的参数设置为：超声波功率400w，超声波时间40min，超声波温度50℃。
s3，将初提取液于-35℃下冷冻3天，然后真空干燥2天，制得紫槐色素粗品干粉。
s4，将s3的紫槐色素粗品干粉溶于ph值为4的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，制得色素溶液，色素溶液中的紫槐色素粗品干粉浓度为0.020g/ml。
s5，将s4的色素溶液上大孔树脂(d-101大孔树脂)吸附，室温下，于100r/min的恒温振荡培养箱中振荡吸附10h，吸附完成后，将大孔树脂和色素溶液分离，先用蒸馏水冲洗已吸附色素的大孔树脂，至滤液无色为止，再用乙醇溶液，室温下，于转速为100r/min的恒温振荡培养箱中洗脱解吸大孔树脂3h，收集洗脱液；
s6，将s5的洗脱液浓缩至原体积1/4，收集浓缩液，将浓缩液于-35℃下真空冷冻干燥2天，制得紫槐色素半成品；
s7，将s6的紫槐色素半成品替换s3的紫槐色素粗品干粉并按照s4-s6步骤重复2次，得紫槐色素纯品。
经检测，紫槐色素粗品干粉色价为217，纯品色价为856。
实施例2
本实施例的一种紫槐色素的提取纯化方法包括如下步骤：
s1，采摘未盛开之前的紫槐花，进行干燥，粉碎；干燥方法烘干，烘干条件为602℃、2h。
s2，将粉碎的紫槐花浸入柠檬酸溶液中，采用超声提取法提取4次，得初提取液；柠檬酸溶液中柠檬酸的质量分数为0.1％，粉碎的紫槐花与柠檬酸溶液的料液比为1g：90ml，超声提取的参数设置为：超声波功率400w，超声波时间40min，超声波温度50℃。
s3，将初提取液于-38℃下冷冻4天，然后真空干燥3天，制得紫槐色素粗品干粉。
s4，将s3的紫槐色素粗品干粉溶于ph值为4.1的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，制得色素溶液，色素溶液中的紫槐色素粗品干粉浓度为0.020g/ml。
s5，将s4的色素溶液上大孔树脂(d-101大孔树脂)吸附，室温下，于100r/min的恒温振荡培养箱中振荡吸附11h，吸附完成后，将大孔树脂和色素溶液分离，先用蒸馏水冲洗已吸附色素的大孔树脂，至滤液无色为止，再用乙醇溶液，室温下，于转速为100r/min的恒温振荡培养箱中洗脱解吸大孔树脂4h，收集洗脱液；
s6，将s5的洗脱液浓缩至原体积1/5，收集浓缩液，将浓缩液于-38℃下真空冷冻干燥3天，制得紫槐色素半成品；
s7，将s6的紫槐色素半成品替换s3的紫槐色素粗品干粉并按照s4-s6步骤重复3次，得紫槐色素纯品。
经检测，紫槐色素粗品干粉色价为208，纯品色价为832。
实施例3
本实施例的一种紫槐色素的提取纯化方法包括如下步骤：
s1，采摘未盛开之前的紫槐花，进行干燥，粉碎；干燥方法烘干，烘干条件为65℃、2h。
s2，将粉碎的紫槐花浸入柠檬酸溶液中，采用超声提取法提取4次，得初提取液；柠檬酸溶液中柠檬酸的质量分数为0.1％，粉碎的紫槐花与柠檬酸溶液的料液比为1g：90ml，超声提取的参数设置为：超声波功率400w，超声波时间40min，超声波温度50℃。
s3，将初提取液于40℃下冷冻4天，然后真空干燥3天，制得紫槐色素粗品干粉。
s4，将s3的紫槐色素粗品干粉溶于ph值为4.2的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，制得色素溶液，色素溶液中的紫槐色素粗品干粉浓度为0.020g/ml。
s5，将s4的色素溶液上大孔树脂(d-101大孔树脂)吸附，室温下，于100r/min的恒温振荡培养箱中振荡吸附12h，吸附完成后，将大孔树脂和色素溶液分离，先用蒸馏水冲洗已吸附色素的大孔树脂，至滤液无色为止，再用乙醇溶液，室温下，于转速为100r/min的恒温振荡培养箱中洗脱解吸大孔树脂3-4h，收集洗脱液；
s6，将s5的洗脱液浓缩至原体积5，收集浓缩液，将浓缩液于40℃下真空冷冻干燥3天，制得紫槐色素半成品；
s7，将s6的紫槐色素半成品替换s3的紫槐色素粗品干粉并按照s4-s6步骤重复3次，得紫槐色素纯品。
经检测，紫槐色素粗品干粉色价为231，纯品色价为874。
实施例1-3提取纯化得到的紫槐色素纯品较紫槐色素粗品干粉的纯度提高，色价均提高了将近4倍，纯化前，色素粗制品为淡粉色固体粉末，而纯化后，得到的色素为粉色固体粉末。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
1.一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1，采摘未盛开之前的紫槐花，进行干燥，粉碎；
s2，将粉碎的紫槐花浸入柠檬酸溶液中，采用超声提取法提取3-4次，得初提取液；
s3，将初提取液于-35-40℃下冷冻3-4天，然后真空干燥2-3天，制得紫槐色素粗品干粉；
s4，将s3的紫槐色素粗品干粉溶于ph值为4-4.2的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，制得色素溶液；
s5，将s4的色素溶液上大孔树脂吸附，室温下，振荡吸附10-12h，吸附完成后，将大孔树脂和色素溶液分离，先用蒸馏水冲洗已吸附色素的大孔树脂，至滤液无色为止，再用乙醇溶液，室温下，洗脱解吸大孔树脂3-4h，收集洗脱液；
s6，将s5的洗脱液浓缩至原体积1/4-5，收集浓缩液，将浓缩液于-35-40℃下真空冷冻干燥2-3天，制得紫槐色素半成品；
s7，将s6的紫槐色素半成品替换s3的紫槐色素粗品干粉并按照s4-s6步骤重复2-3次，得紫槐色素纯品。
2.根据权利要求1所述的一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，s1中，所述干燥方法烘干，烘干条件为60-65℃、2h。
3.根据权利要求1所述的一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，s2中，柠檬酸溶液中柠檬酸的质量分数为0.1％，粉碎的紫槐花与柠檬酸溶液的料液比为1g：90ml。
4.根据权利要求1所述的一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，s2中，超声提取的参数设置为：超声波功率400w，超声波时间40min，超声波温度50℃。
5.根据权利要求1所述的一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，s4的色素溶液中的紫槐色素粗品干粉浓度为0.020g/ml。
6.根据权利要求1所述的一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，s5中，大孔树脂为d-101大孔树脂。
7.根据权利要求6所述的一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，s5中，大孔树脂与色素溶液的料液比为1g：50ml。
8.根据权利要求1所述的一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，s5中，所述乙醇溶液中乙醇体积分数为70％。
9.根据权利要求8所述的一种紫槐色素的提取纯化方法，其特征在于，s5洗脱解吸中，大孔树脂与乙醇溶液的料液比为1g：50ml。
技术总结