本发明属于生物医药，具体涉及ipsc衍生的血管内皮细胞hec-n1及其应用。
背景技术：
1、神经调节蛋白1(neuregulin-1,nrg-1)是神经调节蛋白家族成员之一，其编码基因(nrg1)位于8号染色体上，包含21个外显子，可产生30多个转录本。nrg-1的蛋白结构由n端的胞外结构域(extracellular structural domain,ecd)、跨膜结构域、c端的胞内结构域(intracellular structural domain,icd)构成。其中，胞外结构域中还包含一个egf样结构域(egf-like structural domain)，它是nrg-1与erbb受体结合的关键区域。nrg1基因编码的nrg-1前体是一种跨膜蛋白，被蛋白酶的切割后才产生成熟的nrg-1蛋白释放到胞外。
2、nrg-1根据氨基端序列、egf样结构域可变剪切等情况分为六种亚型，其中，根据egf样结构域的不同，有nrg-1α和nrg-1β两种亚型。研究显示nrg-1β是在心血管领域被研究得较广泛的一种亚型。nrg-1β主要由心内的血管内皮细胞分泌，与细胞膜上的erbb家族受体结合启动nrg-1-erbb信号通路，在心脏发育、心脏正常功能的维持、促进心肌细胞增殖等方面发挥重要作用。其中，erbb家族受体包括erbb1,erbb2(her2),erbb3(her3)和erbb4(her4)，而成人心肌细胞主要表达erbb2和erbb4两种受体。erbb2或erbb4基因敲除小鼠在宏观上呈现心室肌肥大、室壁增厚、收缩力减弱等表型，在微观上呈现心肌细胞的肌节结构异常等表型，提示erbb2和erbb4两种受体在维持心肌细胞的结构和功能方面起到重要作用。
3、尽管nrg-1有多种结构各异的亚型，但是每种亚型都含有相似的egf样结构域，而仅仅egf样结构域(并不需要完整的蛋白)便可以与erbb家族受体结合并启动下游的信号通路。多项研究证实，nrg-1β蛋白或其活性多肽(nrg-1β2的第177-237位氨基酸的多肽，即egf样结构域区域)能够促进治疗多种心脏疾病，包括动脉粥样硬化、心肌梗死、缺血再灌注造成的损伤、心力衰竭、心脏毒性、心律失常等。
4、目前，nrg-1β蛋白或其活性多肽在治疗心力衰竭方面的临床研究主要集中在以下方面：(1)利用人重组全长nrg-1β3蛋白(也称nrg-1ggf亚型，或cimaglerminα)进行针对左心收缩功能不全及心力衰竭的治疗；(2)利用人重组蛋白rhnrg-1进行慢性心力衰竭的治疗；(3)利用包含了nrg-1活性多肽和抗erbb3的单克隆抗体的融合蛋白治疗射血分数降低(hfref)型心力衰竭。以上蛋白的给药方式是静脉注射或经皮给药(皮下缓释)。然而，以上的制剂形式和给药方式存在以下问题：(1)nrg-1蛋白尤其是其活性多肽在体内的半衰期较短，容易被降解；nrg-1蛋白或其活性多肽在经历体内循环及相关脏器的代谢作用后，最终到达心肌的活性蛋白的含量存疑；(2)由于nrg-1蛋白或其活性多肽的主要受体之一是erbb2(her2)，而her2在多种恶性肿瘤中高表达，与肿瘤的发生、侵袭、转移和复发密切相关，是肿瘤增殖、侵袭的重要驱动；因此，静脉注射或经皮注射使nrg-1蛋白或其活性多肽进入全身循环系统，具有成瘤或促进肿瘤转移的潜在风险。此外，美国一项临床试验显示，静脉注射人重组全长nrg-1β3蛋白会产生肝脏毒性。
技术实现思路
1、本发明构建了能够表达并分泌nrg-1蛋白的活性多肽(p61)的细胞株-ipsc衍生的血管内皮细胞hec-n1，于2024年1月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：gdmcc no：64266。该细胞株有以下用途：(1)hec-n1可以持续向外界分泌p61，可作为持续生产p61的“活体药物工厂”；(2)hec-n1与人诱导多能干细胞衍生的心肌细胞(hipsc-cm)共培养，可以显著促进hipsc-cm增殖，在规模化生产中提高hipsc-cm的产量；(3)利用生物3d打印技术构建包含hec-n1的细胞补片，对心肌坏死有显著的治疗效果。
1.ipsc衍生的血管内皮细胞hec-n1，于2024年1月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：gdmcc no：64266。
2.根据权利要求1所述的ipsc衍生的血管内皮细胞hec-n1在制备治疗心脏疾病的产品中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述心脏疾病包括动脉粥样硬化、心肌梗死、缺血再灌注造成的损伤、心力衰竭、心脏毒性、心律失常。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为细胞补片。
5.一种治疗心脏疾病的产品，其特征在于，包括权利要求1所述的ipsc衍生的血管内皮细胞hec-n1。
6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述心脏疾病包括动脉粥样硬化、心肌梗死、缺血再灌注造成的损伤、心力衰竭、心脏毒性、心律失常。
7.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述产品为细胞补片。
8.根据权利要求7所述的细胞补片，其特征在于，其制备方法如下：
9.根据权利要求1所述的ipsc衍生的血管内皮细胞hec-n1在人诱导多能干细胞衍生的心肌细胞的培养基中作为增殖促进剂的应用。
10.一种人诱导多能干细胞衍生的心肌细胞的培养基，其特征在于，包括权利要求1所述的ipsc衍生的血管内皮细胞hec-n1。
