本发明涉及一株双孢接合糖酵母（ zygosaccharomyces bisporus）f3404及其在制备具有降低反式脂肪酸能力产品中的应用，属于功能微生物。
背景技术：
1、反式脂肪酸（trans fatty acids, tfa）是指含有一个或多个反式构型双键的不饱和脂肪酸。人工制造的tfa也称为工业tfa，油脂的氢化是工业tfa的主要来源。大量研究表明工业tfa对人体健康具有不良影响，其中动脉粥样硬化、血栓和冠心病等心血管疾病与工业tfa的摄入密切相关，最近已成为食品安全领域的主要关注点。世界卫生组织报告称，当tfa摄入大于总能量摄入的1%时，冠心病死亡率和其它疾病的风险等级增加，并且每年全球有50多万因过量摄入tfa造成冠心病死亡的病例。反式油酸是工业tfa最主要的一类反式异构体。。
2、益生菌是活的微生物，在足够数量的情况下对宿主健康有益。益生菌通常需要满足安全、对机体有健康功效和具有足够的活菌数量三个特征。同时，益生菌主要由乳酸菌和部分酵母菌构成，其中酵母菌具备优异的合成和代谢脂肪酸的能力。因此，筛选能够代谢反式脂肪酸并具有益生能力的酵母菌是一种缓解反式脂肪酸对人体危害的新策略，也为减少反式脂肪酸的摄入提供一种展新思路。
技术实现思路
1、本发明提供了一株双孢接合糖酵母（ zygosaccharomyces bisporus）f3404，其于2024年4月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.30463，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
2、本发明另一目的是将上述双孢接合糖酵母f3404应用在降低反式脂肪酸含量中，该菌株具有降低反式脂肪酸、耐受胃肠道消化的能力，具备可食用性，具有能降低机体患心血管疾病等相关疾病风险的能力。
3、本发明目的通过以下技术方案实现：
4、1、采集云南省保山市腾冲市腊腌菜作为样品筛选菌株，吸取腌菜样品，加入生理盐水中振荡混匀，按10倍梯度稀释法稀释，选取10-5~10-7浓度下样品悬液在酵母浸出粉胨葡萄糖培养基（yeast extract peptone dextrose medium，ypd）上进行涂布，30℃培养，挑取单菌落在ypd固体培养基上划线纯化后，在ypd液体培养基中扩大培养并吸取少量菌液利用显微镜观察菌株微观形态，初步鉴定纯化后菌种为酵母菌；
5、挑取扩大培养后菌液在反式油酸固体培养基中划线培养，同时使用灭菌后生理盐水清洗扩大培养菌种，并调节初始od600 nm值为2.0 ± 0.05待用，以1%接种量接种至反式油酸液体培养基测定菌株的生长曲线；
6、2、菌株的分子生物学鉴定
7、以该菌株的菌悬液作为模板，采用引物nl1：gcatatcaataagcggaggaaaag， nl4：ggtccgtgtttcaagacgg，进行扩增，获得的扩增产物送测序公司进行序列测定，获得如seqid no:1所示的26s rrna序列，将测序结果与ncbi上序列进行比对，结合形态学特征和分子鉴定结果，最终将该菌株鉴定为双孢接合糖酵母（ zygosaccharomyces bisporus），命名为f3404；
8、3、菌株代谢反式脂肪酸能力分析-以反式油酸为例
9、利用气相色谱-质谱联用（gas chromatography-mass spectrometry, gc-ms）技术检测 z. bisporus f3404代谢反式油酸能力，结果表明菌株f3404具有代谢反式油酸能力，在培养12h后，菌株反式油酸代谢率达到47.02 ± 1.21%；利用共聚焦激光扫描显微镜观察 z.bisporus f3404在反式油酸液体和ypd液体培养基中培养后，脂肪酸在菌株内的分布，结果表明反式油酸明显进入菌株内部。
10、4、通过耐酸、耐胆盐和模拟胃肠道消化实验发现 z.bisporus f3404具备耐受胃肠道消化能力，利用溶血性实验证明 z.bisporus f3404具有可食用性，耐热性实验证明 z.bisporus f3404能适应人体温度。
11、本发明菌株b2904可用于制备药物、化妆品、食品、保健品、发酵剂、饲料中任意一种制剂，还可以加入一种或多种制剂学上可接受的辅料，制成适宜的使用剂型。
12、与现有技术相比，本发明具有如下优点：
13、1、本发明利用云南省保山市腾冲市腊腌菜为原料筛选获得食源性功能菌株 z.bisporusf3404，原料来源安全可靠，通过耐酸、耐胆盐和模拟胃肠道消化实验发现 z.bisporus f3404具备耐受胃肠道消化能力，利用溶血性实验证明 z.bisporus f3404具有可食用性，并能在人体中生长；
14、2、通过实验验证 z. bisporus f3404具有代谢反式脂肪酸能力，且在菌株内部观察到反式脂肪酸；
15、总之本发明 z. bisporusf3404可用于降低宿主体内反式脂肪酸，进而减少机体患心血管等疾病风险、减少肥胖等功能，作为一种食源性微生物，其对人体危害小，市场前景较好，适用于工业化生产和市场推广应用。
1.一株双孢接合糖酵母（zygosaccharomyces bisporus）f3404，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为cgmcc no.30463。
2.权利要求1所述的双孢接合糖酵母f3404在制备降低反式脂肪酸含量制剂中的应用。
3.权利要求1所述的双孢接合糖酵母f3404在制备降低人体胃肠道中反式脂肪酸含量制剂中的应用。
4.一种微生物制剂，其特征在于：含有权利要求1所述的双孢接合糖酵母f3404或其培养物。
