本发明属于医药，尤其涉及活性氧响应的两性离子载药纳米粒子及其制备方法和应用。
背景技术：
1、心血管疾病已成为全球健康的重大威胁，其中动脉粥样硬化（as）最为普遍。早期as的准确诊断和特异性治疗对防治心血管疾病具有重要的临床价值。在as病变的早期阶段，脂质代谢受损和进行性炎症引发的血管壁胆固醇异常积累是关键因素。在as病变部位的氧化应激和微酸性微环境下，氧化的低密度脂蛋白（ox-ldl）在断裂的内膜中积累，促进炎症细胞浸润和活化以及多种炎症因子的释放。同时，局部浸润的巨噬细胞发生m1极化，增加局部活性氧（ros）水平，紊乱脂质代谢，最终转化为大量泡沫细胞。其中，高水平的ros导致线粒体通透性过渡孔（mptp）的打开，进而导致线粒体膜电位的崩溃并阻碍三磷酸腺苷（atp）的合成以加速细胞凋亡。因此，抑制炎症和减少巨噬细胞中胆固醇积累是治疗as的策略之一。
2、近年来，肿瘤血管内皮细胞的主动跨细胞转运策略为抗肿瘤纳米药物递送提供了新思路，这种策略不依赖于epr效应，提高了纳米药物在肿瘤组织中的治疗效果。两性离子聚合物的纳米颗粒具有隐身效果，避免聚集，减少清除和增强药物富集程度。因此，n-氧化性两性离子聚合物的细胞膜黏附特性和主动转胞吞作用为构建其高效抗动脉粥样硬化纳米药物赋予了巨大的潜力和良好的研究基础。他汀类药物是治疗心血管疾病的基石，除了降胆固醇作用外，还具有多效性作用。另外，与低分子量药物和常规非共价纳米药物递送体系相比，纳米前药融合了前药和纳米技术的优势，纳米前体药物具有延长血液循环、稳定性好、生物利用度高、全身毒性低等特点。并且纳米前体药物可以被设计成刺激反应性，以提高药物疗效并减少副作用。然而，基于纳米前药的纳米药物策略在癌症治疗中取得了进展，但在心血管疾病（如as）中的应用仍然有限。为此提出活性氧响应的两性离子载药纳米粒子及其制备方法和应用。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供活性氧响应的两性离子载药纳米粒子及其制备方法和应用，旨在解决上述背景技术中提出的问题。
2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、活性氧响应的两性离子载药纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：
4、称取3g,0.0072mol辛伐他汀溶解在50ml无水二氯甲烷中，称取7.31g,0.0576 mol草酰氯溶解在30ml无水二氯甲烷中，在冰浴条件下将辛伐他汀溶液滴加在草酰氯中，并加入1ml无水三乙胺除去产生的hcl气体，滴加30min后过夜反应12h，溶液由无色变为黄色，将溶剂及过量的草酰氯旋干后溶解在50ml无水二氯甲烷中，得到草酰氯化的辛伐他汀溶液；将2g opda-hema溶解在30ml二甲基亚砜中，在氩气氛围下，将草酰氯化的辛伐他汀溶液缓慢滴加在opda-hema中，并加入1.8ml，0.013mol三乙胺；滴加后继续反应24h，然后除去溶剂，并将产品转移到透析袋，用去离子水透析72h，冻干后得到白色絮状产物，即opda-hema-sv。
5、进一步的，所述透析袋的截留分子量为3500da。
6、进一步的，所述pda-hema的合成步骤为：在多次烘烤、抽真空且充氩气的支口瓶中依次加入0.064g,0.41mmol 2-2-联吡啶和0.064g,0.65mmol cucl，来回摇晃，络合成砖红色物质，向支口瓶中依次加入12ml,0.06mol dea、2.4ml,0.02mol hema、270μl,1.8mmol 2-溴-2-甲基丙酸乙酯和8ml dmf，然后在氩气气氛55℃下聚合7h，反应停止后暴露在空气中并加入5ml二氯甲烷淬灭，过中性氧化铝柱子除去铜离子，浓缩滤液，然后用冷石油醚沉淀，反复重结晶纯化，最后在真空干燥箱中干燥24h，得到5g pda-hema；
7、所述opda-hema的合成步骤为：向5g pda-hema中加入30ml 30%过氧化氢水溶液，室温搅拌2h，然后将溶液转移到透析袋，用去离子水透析48h，每隔3-4h更换一次透析水，冻干后得到白色絮状产物，即opda-hema。
8、进一步的，所述2-2-联吡啶和cucl的比例为0.05~0.7：0.2~1。
9、进一步的，所述opda-hema的合成步骤中，透析袋的截留分子量为3000da。
10、根据上述所述的制备方法制得的活性氧响应的两性离子载药纳米粒子。
11、根据上述所述的活性氧响应的两性离子载药纳米粒子在制备抗动脉粥样硬化药物中的应用。
12、与现有技术相比，本发明的有益效果是：
13、1、本发明中，辛伐他汀通过ros反应裂解键过氧酸键与两性离子聚合物偶联，形成了一种新型前药—opda-hema-sv。opda-hema-sv能够在高ros浓度下响应过氧草酸根裂解释放辛伐他汀，实现了在病变部位的精准药物释放，从而发挥辛伐他汀的抗氧化、免疫调节、抗炎和稳定斑块等药效。得益于前药的性质，opda-hema-sv在体内显示出了优异的生物利用度，同时其两性离子特性赋予了它低毒性、高效的转胞吞能力以及深层细胞穿透能力，因此opda-hema-sv对as有很好的治疗效果。
14、2、本发明中opda-hema-sv的制备过程简便，有利于实现规模化生产。
15、3、本发明中opda-hema-sv的开发不仅为心血管疾病的治疗提供了新的思路和方法，也展示了纳米医学在前药设计方面的应用潜力，为未来的医药研究与临床治疗提供了有价值的参考。
1.活性氧响应的两性离子载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的活性氧响应的两性离子载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述透析袋的截留分子量为3500da。
3.根据权利要求1所述的活性氧响应的两性离子载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述pda-hema的合成步骤为：在多次烘烤、抽真空且充氩气的支口瓶中依次加入0.064g,0.41mmol 2-2-联吡啶和0.064g,0.65mmol cucl，来回摇晃，络合成砖红色物质，向支口瓶中依次加入12ml,0.06mol dea、2.4ml,0.02mol hema、270μl,1.8mmol 2-溴-2-甲基丙酸乙酯和8ml dmf，然后在氩气气氛55℃下聚合7h，反应停止后暴露在空气中并加入5ml二氯甲烷淬灭，过中性氧化铝柱子除去铜离子，浓缩滤液，然后用冷石油醚沉淀，反复重结晶纯化，最后在真空干燥箱中干燥24h，得到5g pda-hema；
4.根据权利要求3所述的活性氧响应的两性离子载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述2-2-联吡啶和cucl的比例为0.05~0.7：0.2~1。
5.根据权利要求3所述的活性氧响应的两性离子载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述opda-hema的合成步骤中，透析袋的截留分子量为3000da。
6.根据权利要求1-5任一所述的制备方法制得的活性氧响应的两性离子载药纳米粒子。
7.根据权利要求6所述的活性氧响应的两性离子载药纳米粒子在制备抗动脉粥样硬化药物中的应用。
