本发明涉及微生物领域，具体涉及诺卡氏菌lhy-5及其降解呕吐毒素的应用。
背景技术：
1、呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇，don） 是一种主要由镰刀菌真菌产生的霉菌毒素，主要存在于谷物中。don、don代谢物和掩蔽don的存在对动物和人类健康有风险，它们是由生长在田间谷物上的镰刀菌属植物病原真菌产生的，同时经常与其他霉菌毒素同时出现，特别是与其他镰刀菌毒素一起发生。don、3-ac-don、15-ac-don和don-3-葡萄糖苷，主要存在于小麦、大麦、燕麦、黑麦和玉米等谷物中。
2、don污染可能发生在整个供应链，从农田到食品和饲料过程中均可能产生污染。霉菌毒素在田间的传播有时难以控制。don脱毒的方法可分为化学方法、物理方法和生物方法。这些方法在控制don方面取得了相当大的成功，但是在实际应用中仍有局限性。物理和化学方法所涉及的过程难以控制，需要额外的仪器，或者需要更高的成本。对于化学方法，可能会残留潜在的有害物质。考虑到上述缺点，生物解毒已成为一种潜在的技术。生物方法具有特异性、高效性和环境安全性。同时，生物法实现这些技术所需的条件是温和的，并且会降低对食品或饲料的质量和适口性的影响。此外，一些特定的微生物不仅能够降解don，还能够产生对健康有益的物质。使用选定的微生物被认为是净化霉菌毒素的最佳策略，在工业应用中使用全细菌细胞可能是最可行的缓解手段。尽管，生物降解技术具有其高效、绿色、反应条件温和等特点，但可供使用的生物资源却十分匮乏。
3、研究表明，don可以被微生物代谢为低毒性化合物。例如， don在有氧条件下被从土壤样品中分离的菌株降解为3-epi-don。鸡肠道和牛瘤胃微生物也能够通过去环氧化降解未dom-1。一些德沃斯氏菌被报道能够降解呕吐毒素降解菌株。这些菌株不能以don为唯一碳源进行利用，而仅能将其转化为3-keto-don或3-epi-don。从德沃斯氏菌菌株中鉴定的基因depa和depb被证明分别参与者这两种化合物的产生。类诺卡式菌是少数能够以don为唯一碳源的菌株，能够将don完全降解。尽管已有数百株德沃斯氏菌和诺卡氏菌等从世界各地的土壤样品中分离出来，但公开报道的don降解菌株很少。在表型测试实验中，由于一些德沃斯氏菌亚种和诺卡氏菌亚种缺乏关键有效的降解途径，导致无法降解don，这可能取决于菌株的生境。呕吐毒素通常在镰刀菌侵染植物过程中产生，而拥有丰富植物的林区、耕地和苗圃土壤可能存在不同程度的污染。挖掘土壤种的降解菌及其所携带的基因资源也将为新型降解酶技术的开发提供新的关键材料。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一株用于降解呕吐毒素的诺卡氏菌株。
2、本发明的再一目的是利用所述诺卡氏菌株制成的生物脱毒剂。
3、本发明的另一目的是提供制备上述生物脱毒剂的制备方法。
4、本发明的另一目的是提供上述诺卡氏菌株的应用。
5、根据本申请的诺卡氏菌（ nocardioides sp.）菌株lhy-5，其保藏编号为cgmcc no.26561。通过比对亲缘模式菌株的形态学、分子生物学和生理生化特性，确定其为诺卡氏属（ nocardioides sp.）中的一个新种。
6、根据本发明的生物脱毒剂，其包括作为活性成分的上述诺卡氏菌（ nocardioides sp.）菌株lhy-5，或其细胞内溶物，例如胞内蛋白，该生物脱毒剂可以是液体剂型也可以是固体剂型，并通过现有技术中已公开的制备方法来制备。
7、根据本发明的制备上述生物脱毒剂的方法，包括以下步骤：
8、将本申请的诺卡氏菌（ nocardioides sp.）菌株lhy-5活化，多级扩培发酵，当菌体处于稳定期时，收集发酵液，制备成液体型生物脱毒剂。
9、根据本发明的制备上述生物脱毒剂的方法，其中，该所述发酵液经自然沉降、离心、过滤等不影响菌体活性的方法浓缩后得到浓度较高的菌悬液；更优选地，所述菌悬液还可以加入营养液或营养液和保护剂的混合液，制备成液体型生物脱毒剂。进一步地，也可以利用本领域现有方法制备将该液体型生物脱毒剂制成固体型生物脱毒剂，例如加入吸附剂、保护剂等。
10、根据本发明的制备上述生物脱毒剂的方法，其中，所述方法还包括以下步骤：
11、将得到的浓度较高的菌悬液或菌体细胞，利用均质、超声等现有的方法进行破碎，除去菌体细胞碎片等杂质后通过浓缩获得浓度较高的蛋白液，制得液体型生物脱毒剂。
12、根据本发明的制备上述生物脱毒剂的方法，其中，多级扩培发酵所用的发酵培养基的配方：胰蛋白胨10g、酵母浸粉5g、氯化钠10g，加蒸馏水至1l，ph7.0-7.2，121℃灭菌20min。
13、本发明的优点在于：
14、（1）本发明分离得到一株诺卡氏菌（ nocardioides sp.）菌株lhy-5，与现有能够降解呕吐素的菌株相比，16s rdna序列及全基因组存在显著的差异。能够将有毒化合物don完全降解，反应过程不可逆，反应条件温和，最终将其完全转化后，被自身利用，不会引起二次污染。
15、（2）本发明提供的诺卡氏菌（ nocardioides sp.）菌株lhy-5可用于制备各种don的生物脱毒制剂。
16、（3）本发明提供的菌株可应用于被don污染的土壤或水体等各种生态系统，达到生态体修复的目的。
1.诺卡氏菌（nocardioides sp.）菌株lhy-5，其特征在于，所述诺卡氏菌（nocardioides sp.）菌株lhy-5的保藏编号为cgmcc no. 26561。
2.一种生物脱毒剂，其特征在于，所述生物脱毒剂包括作为活性成分的权利要求1所述的诺卡氏菌（nocardioides sp.）菌株lhy-5，或其细胞内溶物。
3.一种制备权利要求2所述生物脱毒剂的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，向所述高浓度菌悬液中加入营养液或营养液和保护剂的混合液，制备成液体型生物脱毒剂。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述多级扩培发酵所用的发酵培养基的配方为：胰蛋白胨10g、酵母浸粉5g、氯化钠10g，加蒸馏水至1l，ph7.0-7.2，121℃灭菌20min。
7.权利要求1所述的诺卡氏菌（nocardioides sp.）菌株lhy-5用于降解呕吐毒素的应用。
