本发明属于荧光标记，具体涉及一种线粒体荧光标记物及标记方法。
背景技术：
1、线粒体作为细胞内的重要器官，参与调节能量代谢、细胞凋亡、钙离子平衡等多种生物学过程，因此在许多领域都有重要的研究价值。线粒体研究的主要方向包括线粒体功能与代谢、线粒体与疾病、线粒体动力学等，其应用涉及医学、药物研发和生物技术等多个领域，对于深入理解细胞生物学过程和疾病发生机制，以及开发新的治疗方法具有重要意义。
2、线粒体荧光标记是一种用于研究细胞线粒体结构和功能的重要技术。通过标记线粒体，研究者可以观察线粒体在细胞内的位置、形态和数量，以及评估靶向线粒体药物的结合能力等，从而揭示线粒体在细胞生物学中的作用和评估靶向线粒体药物的稳定性等作用。线粒体常用的荧光标记技术有：(1)荧光蛋白标记技术；(2)荧光探针标记技术；(3)纳米颗粒标记技术；(4)基因编辑技术标记线粒体。
3、目前，线粒体荧光标记技术已经得到了广泛应用，但仍存在一些挑战和限制。首先，线粒体荧光标记的选择取决于研究的目的。目前实验中常用的线粒体标记物包括mito-tracker、mito-gfp、mito-rfp等。mito-tracker是一种广泛应用的线粒体标记物，它可以选择性地进入活性线粒体并发出红色荧光，但需要注意的是，mito-tracker可能对线粒体功能产生影响，还有mito-tracker对光的敏感性较高，长时间暴露在强光下可能会导致荧光信号的减弱或消失，影响实验结果的可靠性。相比之下，mito-gfp和mito-rfp是基因表达的线粒体标记物，它们可以将荧光蛋白定位到线粒体，但需要转染细胞并表达外源蛋白，标记流程繁琐。
4、其次，线粒体荧光标记技术的应用受到成本和复杂度的限制。一些标记物的使用需要特殊的实验条件和设备，增加了实验的成本和难度。此外，线粒体标记还需要对细胞进行染色或转染，可能会对细胞造成损伤，影响实验结果的准确性。
5、综上所述，线粒体荧光标记技术在揭示线粒体结构和功能方面发挥了重要作用，但仍面临着一些挑战和限制，如存在标记流程繁琐、孵育时间长、对孵育温度有特定要求、荧光易淬灭、不稳定等问题。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种线粒体荧光标记物及标记方法，能够快速及简单地对线粒体进行荧光标记。
2、实现上述目的包括如下技术方案。
3、本发明第一方面提供一种线粒体荧光标记物，其是桑黄酮(kuwanon c)上通过化学键连接有荧光基团的化合物。
4、在一些实施例中，所述荧光基团与所述桑黄酮的苯环4'号位的羟基通过化学键相连接。
5、在一些实施例中，所述荧光基团为红色荧光基团cy3。
6、本发明第二方面提供一种如上所述的线粒体荧光标记物在标记细胞线粒体中的应用。
7、本发明第三方面提供一种线粒体荧光标记试剂盒，所述线粒体荧光标记试剂盒包括如上所述的线粒体荧光标记物和标记用试剂。
8、本发明第四方面提供一种线粒体荧光标记方法，包括如下步骤：
9、获得待标记细胞，或待标记的分离的线粒体；
10、配制如上所述的线粒体荧光标记物的有机溶液；
11、将线粒体荧光标记物的有机溶液与待标记细胞或待标记的分离的线粒体混合，室温静置孵育；
12、细胞的线粒体或分离的线粒体标记上所述线粒体荧光标记物。
13、在一些实施例中，所述细胞为动物细胞。
14、在一些实施例中，所述细胞为离体细胞。
15、在一些实施例中，静置时间为5min～10min。
16、在一些实施例中，所述线粒体荧光标记物在有机溶液中的浓度为5nm～10μm；优选地，所述线粒体荧光标记物在有机溶液中的浓度为10nm～10μm。
17、在一些实施例中，所述有机溶液为无水乙醇或二甲基亚砜。
18、本发明中，通过将来源于桑科植物特有的化合物桑黄酮与荧光基团结合得到一种新的荧光标记物，发现其能够结合到线粒体上，本发明提供了该荧光标记物能够在室温条件下快速进行离体细胞内线粒体或分离的线粒体的特异性荧光标记，在该新颖的线粒体标记方法中，在标记过程中无需对细胞进行预处理，而且标记荧光稳定且不易淬灭，以及在标记完成后再进行其他染色标记也不会影响该标记效果，所述标记方法还具有成本低廉及操作步骤简便，且安全性高的优点。
1.一种线粒体荧光标记物，其特征在于，其是桑黄酮上通过化学键连接有荧光基团的化合物。
2.如权利要求1所述的线粒体荧光标记物，其特征在于，所述荧光基团与所述桑黄酮的苯环4'号位的羟基通过化学键相连接。
3.如权利要求1或2所述的线粒体荧光标记物，其特征在于，所述荧光基团为红色荧光基团cy3。
4.权利要求1-3任一项所述的线粒体荧光标记物在标记细胞线粒体中的应用。
5.一种线粒体荧光标记方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的线粒体荧光标记方法，其特征在于，所述细胞为动物细胞。
7.如权利要求5所述的线粒体荧光标记方法，其特征在于，静置时间为5min～10min。
8.如权利要求5所述的线粒体荧光标记方法，其特征在于，所述线粒体荧光标记物在有机溶液中的浓度为5nm～10μm。
9.如权利要求5所述的线粒体荧光标记方法，其特征在于，所述有机溶液为无水乙醇或二甲基亚砜。
10.一种线粒体荧光标记试剂盒，其特征在于，所述线粒体荧光标记试剂盒包括如权利要求1-3任一项所述的线粒体荧光标记物和标记用试剂。
