本发明涉及生物，具体涉及用于提取欧洲云杉愈伤组织细胞核的裂解液及提取方法。
背景技术：
1、细胞核是真核生物最重要的细胞器之一，是亲本遗传信息的主要载体和执行者。对植物细胞开展非对称融合、基因组文库构建、核dna、rna、蛋白质含量分析、染色体杂交育种等分子生物育种和单细胞核测序研究，均要求制备杂质少、核数量多、完整性高的细胞核悬液。与动物细胞不同的是，植物细胞具有排列紧密的细胞壁结构，特别地，林木植物富含多糖、多酚等次生代谢物质，细胞核提取难度更大。前人研究指出mgso4、galbraith's和wpb分别是小麦(triticum aestivum)种子、梨(pyrus sinkiangensis)和荔枝(litchichinensis)叶片细胞核提取最佳裂解液。然而每种植物材料的细胞结构异质性大，因此需要进行适当的优化和修改以适应特定的材料。而针叶树含有更多的多糖类物质，其细胞核提取尚鲜有报道。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供用于提取欧洲云杉愈伤组织细胞核的裂解液及提取方法。本发明通过比较6种裂解液(lb01、otto’s、galbraith’s、gpb、wpb和tris·mgcl2)对欧洲云杉胚性愈伤组织细胞核提取结果，筛选最适裂解液，以最大限度地提高细胞核提取效率，也为未来在针叶树基因工程领域中使用细胞核提取液提供了新的方法和研究基础。
2、为了达到上述发明目的，本发明采用的技术方案为：
3、一方面，提供用于提取欧洲云杉愈伤组织细胞核的裂解液lb01，其包括以下成分：
4、15mm三(羟甲基)氨基甲烷，2mm na2edta，0.5mm四盐酸精胺，80mm kcl，20mmnacl，0.1％(v/v)tritonx-100，15mmβ-巯基乙醇。
5、进一步地，裂解液ph为7.0～8.0，-20℃保存，使用时解冻，解冻后4℃保存。
6、另一方面，提供使用lb01裂解液提取欧洲云杉愈伤组织细胞核的方法，其包括以下步骤：
7、取欧洲云杉胚性愈伤组织细胞，将其放入培养皿中，加入细胞核提取裂解液，将其切碎，冰上裂解，过滤，离心，去除上清液，加入缓冲液，重悬细胞核。
8、进一步地，具体包括以下步骤：
9、取欧洲云杉paviii细胞系胚性愈伤组织细胞0.5g，将其放入培养皿中，加入1.5ml细胞核提取裂解液，将其切碎，冰上裂解5min，将裂解液过滤至300目尼龙网并稍作收集，1000g转速，4℃离心8min，去除上清液，加入100μl的pbs缓冲液，重悬细胞核。
10、本发明的有益效果为：
11、lb01裂解液提取欧洲云杉et细胞核表现出很好的核质量，可作为欧洲云杉首选细胞核提取裂解液，为裸子植物细胞核提取提供参考。
1.用于提取欧洲云杉愈伤组织细胞核的裂解液，其特征在于，所述裂解液为lb01，其包括以下成分：
2.根据权利要求1所述的用于提取欧洲云杉愈伤组织细胞核的裂解液，其特征在于，所述裂解液ph为7.0～8.0，-20℃保存，使用时解冻，解冻后4℃保存。
3.使用权利要求1-2任一所述的裂解液提取欧洲云杉愈伤组织细胞核的方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的提取欧洲云杉愈伤组织细胞核的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
