本发明属于生物，具体涉及一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh及其制备方法和应用。
背景技术：
1、抗菌脂肽是一种脂肪酸与多肽通过脱水缩合作用偶联的具有抗菌活性的非天然多肽，脂肪酸部分通常由c12、c14或c16组成，多肽部分通常由10-20个氨基酸残基组成，对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和部分真菌具有广谱抗菌活性。与抗菌肽类似，抗菌脂肽通过物理破坏细菌膜的方式来杀灭致病微生物。因此，抗菌脂肽相比常见的抗生素不容易产生耐药性，是一种极具潜力的饲用抗生素替代物质。
2、近年来，抗菌脂肽被证明在体外具有高效抗菌活性，但是其口服稳定性差，极易被胃肠道内的蛋白酶水解为小肽片段，在畜牧生产中难以直接作为饲料添加剂进行饲喂。因此，在保留抗菌脂肽高效抗菌活性的基础上，进一步克服其酶稳定性差的技术瓶颈是解决抗菌脂肽作为饲用抗生素替代物质应用到畜牧生产中最关键的一环。
技术实现思路
1、基于以上不足之处，本发明的目的在于提供一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh，其目的是能够抵抗多种蛋白酶的水解并抑制猪副伤寒沙门氏菌的生长，使其拥有成为饲用抗生素替代物的潜力。
2、本发明的目的是这样实现的：一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh，其氨基酸序列为c14-(fhhfhhh)3-(dab)6，其中，c14为含有十四碳的肉豆蔻酸，dab为二氨基丁酸。
3、进一步的，如上所述的抗菌脂肽cfh的分子式如式(ⅰ)所示：
4、
5、本发明的另一目的是提供一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh的制备方法，方法步骤如下：
6、s1：设计一条多肽包括3个结构片段，片段1为含有十四碳的肉豆蔻酸；片段2为模板多肽，其模板序列为(fhhfhhh)3；片段3为二氨基丁酸；其中，所述的肉豆蔻酸为抗菌脂肽提供自组装驱动力，所述的模板多肽为抗菌脂肽提供杀灭病原体的疏水力，所述的二氨基丁酸为抗菌脂肽提供吸附病原体膜的正电荷并避免被胰蛋白酶识别，其序列为c14-(fhhfhhh)3-(dab)6；
7、s2：采用固相化学合成法得到肽树脂，将得到的肽树脂经过tfa切割后，得到多肽，经过反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定后，即完成该多肽的制备；
8、s3：再经过含有多种蛋白酶的抗菌活性测定、溶血活性测定，最后命名为抗菌脂肽cf h。
9、本发明的另一目的是提供一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh在制备用于治疗猪副伤寒沙门氏菌感染性疾病的药物中的应用。
10、本发明的有益效果及优点如下：本发明将肉豆蔻酸作为脂肪酸链为抗菌脂肽提供自组装所必须的疏水力，抗菌脂肽在自组装后能够将酶切位点隐藏到纳米结构的内部，并避免被蛋白酶识别；同时将易受胰蛋白酶识别的精氨酸替换为dab，并免受胰蛋白酶的识别，成功创制一条能够抵抗多种蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh，并对其进行生物学活性检测，发现其在胰蛋白酶、糜蛋白酶、人工胃液和人工肠液存在下对猪副伤寒沙门氏菌具有高效杀菌活性，具备较低的溶血毒性，该抗酶解脂肽cfh在128μm的浓度下仅造成6.05％的红细胞溶血，其已具备成为饲用抗生素替代物的发展潜力。因此，本发明是一种全新设计的耐蛋白酶水解抗菌脂肽，为饲用型抗生素替代物质的研发提供理论基础和技术支持。
1.一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh，其特征在于，其氨基酸序列为c14-(fhhfhhh)3-(dab)6，其中，c14为含有十四碳的肉豆蔻酸，dab为二氨基丁酸。
2.根据权利要求1所述的一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh，其特征在于，其分子式如式(ⅰ)所示，
3.根据权利要求1所述的一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh的制备方法，其特征在于，方法步骤如下：
4.根据权利要求1所述的一种耐蛋白酶水解的抗菌脂肽cfh在制备用于治疗猪副伤寒沙门氏菌感染性疾病的药物中的应用。
