本发明属于中药提取,涉及一种从小黄皮中提取的新化合物、提取方法及应用。
背景技术:
1、小黄皮( clausena emarginatahuang)是芸香科(rutaceae)黄皮属小乔木,产自云南西南、东南部海拔300~800m的石灰岩灌丛中,广西也有分布。小黄皮的根、叶均可入药,其性苦、辛,微温,具有宣肺止咳、行气止痛、通经活络等功效。民间主治感冒头痛、风寒咳嗽、胃痛、风湿性关节炎等。
2、小黄皮中含有柠檬苦素、咔唑生物碱、香豆素、酰胺生物碱、木脂素等多种类型的化学成分,具有抗炎、抗氧化、保肝、神经保护、细胞毒等多种药理活性。目前,关于小黄皮化学成分及生物活性系统研究的文献报道较少。因此,对小黄皮中新化合物的研究与开发能够拓展小黄皮化学物质基础范围,从中得到结构多样性的天然产物,寻找具有较好生物活性的单体化合物,为药物的化学合成及结构修饰研究提供有价值的先导化合物,同时也为小黄皮的临床应用以及资源的合理利用与开发提供理论支持。
技术实现思路
1、基于上述所要解决的技术问题,本发明提供一种从小黄皮中提取的新化合物、提取方法及应用。
2、为实现上述目的,本发明采用了以下技术方案:
3、第一方面,本发明提供一种从小黄皮中提取的新化合物,该新化合物的分子式为c21h22o5,化学结构式为:。在本申请中,从小黄皮中提取的新化合物被命名为clauemarmarin h。
4、第二方面,本申请还提供一种从小黄皮中提取新化合物的方法,该方法包括:
5、s01:小黄皮茎枝干燥、粉碎后,采用醇加热回流提取三次,提取液过滤后合并滤液,减压浓缩至无醇味,冷却至室温,得到提取物。
6、挑选无虫害、无病害的小黄皮,进行干燥、粉碎处理,然后加入浓度95%的乙醇,采用加热回流的方式提取三次,其中,乙醇的加入量为小黄皮质量的5-10倍。收集三次加热回流提取得到的提取液,过滤后合并滤液。将滤液减压浓缩至无醇味,放凉至室温,得提取物,备用。
7、s02:所述提取物采用硅藻土柱色谱进行分离,依次采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、体积比1:1的丙酮-乙醇、乙醇、体积比1:1的乙醇-水进行洗脱,得到7种洗脱馏分,其中,7种所述洗脱馏分包括氯仿洗脱馏分。
8、s03:所述氯仿洗脱馏分采用硅胶柱色谱进行分离,采用石油醚-丙酮进行梯度洗脱,得到6种洗脱馏分,其中,6种所述洗脱馏分包括洗脱馏分f2。
9、氯仿洗脱馏分采用硅胶柱色谱进行分离,其中,硅胶柱色谱中硅胶的粒径为200-300目,采用石油醚-丙酮进行梯度洗脱,洗脱梯度为100:0,9:1,8:2,7:3,6:4,5:5,v/v,得到6种洗脱馏分,其中,6种洗脱馏分中包括洗脱馏分f2。
10、s04:所述洗脱馏分f2采用中压液相色谱进行分离,采用甲醇-水进行梯度洗脱,得到多个洗脱馏分。
11、将洗脱馏分f2上中压液相色谱仪,采用450 mm × 60 mm、粒径为50 μm的ods c18柱为色谱柱进行层析分离,并采用甲醇-水进行梯度洗脱,洗脱条件为30:70-90:10,v/v,运行时长0-6 h,流速为25 ml/min,得到多个洗脱馏分。
12、s05:对所述多个洗脱馏分进行高效液相色谱分析,将相同组分合并后,得到组分f2s1、组分f2s2和组分f2s3。
13、s06:将所述组分f2s2采用半制备型高效液相色谱进行分离,采用甲醇-水进行等度洗脱,收集洗脱馏分,减压回收至干,得到新化合物。
14、将组分f2s2上半制备型高效液相色谱仪,采用250 mm × 20 mm、粒径为5 μm的odsc18柱为色谱柱进行层析分离,并采用甲醇-水进行等度洗脱,洗脱条件为40:60,v/v,流速为8 ml/min。根据半制备型高效液相色谱仪显示器上新化合物的色谱图收集相应洗脱馏分,在40℃下减压回收至干,得到新化合物clauemarmarin h。
15、第三方面,本申请提供的新化合物clauemarmarin h能够用于制备抗炎药物。
16、本发明具有以下有益效果:
17、(1)本发明提供一种新化合物clauemarmarin h,该新化合物首次从小黄皮中提取分离出来,分离方法和药理活性研究未被现有期刊论文所报道。
18、(2)本发明提供的新化合物clauemarmarin h具有抗炎作用,对lps诱导的bv2细胞释放no具有较好的抑制活性,可用于制备抗炎药物,也可以作为其它药物化学合成及结构修饰的先导化合物及新药研发的原料。
19、(3)本发明提供的新化合物clauemarmarin h的提取方法简单、快速、成本低,提取的化合物纯度高,能够达到90%。
1.一种从小黄皮中提取的新化合物,其特征在于,所述新化合物的分子式为c21h22o5,化学结构式为:。
2.一种从小黄皮中提取新化合物的方法,其特征在于,包括:
3.根据权利要求2所述的从小黄皮中提取新化合物的方法,其特征在于,醇为浓度95%的乙醇。
4.根据权利要求2所述的从小黄皮中提取新化合物的方法,其特征在于,醇的加入量为所述小黄皮质量的5-10倍。
5.根据权利要求2所述的从小黄皮中提取新化合物的方法,其特征在于,所述硅胶柱色谱中硅胶的粒径为200-300目。
6.根据权利要求2所述的从小黄皮中提取新化合物的方法,其特征在于,所述石油醚-丙酮梯度洗脱的梯度为100:0,9:1,8:2,7:3,6:4,5:5,v/v。
7.根据权利要求2所述的从小黄皮中提取新化合物的方法,其特征在于,采用中压液相色谱进行分离时,所述甲醇-水梯度洗脱的条件为30:70-90:10,v/v,运行时长0-6 h,流速25 ml/min。
8.根据权利要求2所述的从小黄皮中提取新化合物的方法,其特征在于,采用半制备型高效液相色谱进行分离时,所述甲醇-水等度洗脱的条件为40:60,v/v,流速8 ml/min。
9.根据权利要求2所述的从小黄皮中提取新化合物的方法,其特征在于,减压回收的温度为40℃。
10.权利要求1所述的从小黄皮中提取的新化合物用于抑制lps诱导的bv2细胞释放no。
