背景技术：
1、程序性死亡-1(pd-1、cd279)是cd28超家族的成员，其通过与其两种天然配体pd-l1(cd274)和pd-l2(cd273)相互作用来负调控t细胞的功能。pd-1是i型跨膜受体蛋白，由单个免疫球蛋白(ig)可变样结构域、细胞质结构域和两个基于酪氨酸的信号传导基序组成。pd-1在静息t细胞上以低水平组成性表达，并在激活后在t细胞、自然杀伤t(nkt)细胞、b细胞和巨噬细胞上上调。
2、一些小鼠模型中pd-1的缺失通过先天免疫提供了对细菌感染的明显抗性，证明了pd-1对病原体感染的调控作用的重要性。此外，pd-1在许多自身免疫性疾病包括系统性红斑狼疮(sle)和类风湿性关节炎中发挥着重要作用。
3、免疫检查点抑制剂，例如人源化程序性细胞死亡1(pd-1)特异性mab，已广泛用于癌症免疫治疗。除pd-1外，还发现了pd-1的一种替代剪接同工型，即δ42pd1。此外，还利用杂交瘤技术生产了δ42pd1特异性mab ch101和ch34。δ42pd1的免疫调节作用也已被证实，这意味着δ42pd1是开发治疗人类疾病的治疗性抗体的潜在靶点。许多癌症患者对抗pd1免疫疗法没有应答。
4、因此，仍然需要有效的抗pd1免疫疗法，特别是用于人类。
技术实现思路
0、发明概述
1、本发明涉及特异性结合pd-1蛋白同工型δ42pd1的抗体。在一些实施方案中，抗体是单克隆抗体。在某些实施方案中，本发明是完全人源化的ch101和ch34抗体，即huch101和huch34，通过cdr移植具有约97.0％人源性。我们还确定了它们与δ42pd1相互作用的特异性、结合亲和力和敏感性。
2、本发明的另一个方面提供了用于预防、治疗或改善癌症和病毒感染的方法。该方法包括向需要此类预防和治疗的受试者施用有效量的靶向本发明的pd1蛋白同工型(例如δ42pd1蛋白质)的抗体、编码靶向本发明的蛋白质(例如δ42pd1蛋白质)的抗体(例如质粒)的核酸分子。在某些实施方案中，huch101和huch34显示出作为抗体药物针对肝细胞癌的治疗效果。
1.人源化δ42pd1特异性单克隆抗体(mab)。
2.权利要求1所述的人源化δ42pd1特异性mab，其中可变重链包含与seq id no:3的至少80％序列同一性并且可变轻链包含与seq id no:4的至少80％序列同一性。
3.权利要求1所述的人源化δ42pd1特异性mab，其中重链恒定区和轻链恒定区是人igg1恒定重链片段和人igg1恒定轻链片段，所述人igg1恒定重链片段根据seq id no:19或与seq id no:19具有至少80％同一性的序列，所述人igg1恒定轻链片段根据seq id no:18或与seq id no:18具有至少80％同一性的序列。
4.组合物，其包含权利要求1所述的人源化δ42pd1特异性mab。
5.权利要求4所述的组合物，其进一步包含药学上可接受的载剂和/或赋形剂。
6.编码人源化δ42pd1特异性mab的核酸分子。
7.权利要求6所述的核酸分子，其中所述核酸分子是质粒。
8.权利要求6所述的核酸分子，其中编码所述人源化δ42pd1特异性mab的可变重链的核酸序列包含与seq id no:7的至少80％序列同一性，并且编码所述人源化δ42pd1特异性mab的可变轻链的核酸序列包含与seq id no:8的至少80％序列同一性。
9.权利要求6所述的核酸分子，其中编码所述重链恒定区和所述轻链恒定区的核酸序列是编码人igg1恒定重链片段的核酸序列和编码人igg1恒定轻链片段的核酸序列，所述编码人igg1恒定重链片段的核酸序列根据seq id no:20或与seq id no:20具有至少80％序列同一性的序列，所述编码人igg1恒定轻链片段的核酸序列根据seq id no:17或与seq idno:17具有至少80％序列同一性的序列。
10.抑制受试者的癌细胞增殖的方法，其包括向所述受试者施用人源化δ42pd1特异性单克隆抗体(mab)。
11.权利要求10所述的方法，其中所述人源化δ42pd1特异性mab的可变重链包含与seqid no:3的至少80％序列同一性，并且所述人源化δ42pd1特异性单克隆抗体的可变轻链包含与seq id no:4的至少80％序列同一性。
12.权利要求10所述的方法，其中所述人源化δ42pd1特异性单克隆抗体的重链恒定区和轻链恒定区是人igg1恒定重链片段和人igg1恒定轻链片段。
13.权利要求12所述的方法，其中所述人igg1恒定重链具有以下序列：根据seq id no:19或与seq id no:19具有至少80％同一性的序列，并且所述人igg1轻链片段具有以下序列：根据seq id no:18或与seq id no:18具有至少80％同一性的序列。
14.δ42pd1特异性抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)，其中
15.权利要求14所述的抗体或其抗原结合片段，其中
16.权利要求14-15中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是选自igg、iga、igm、ige和igd的同种型。
17.权利要求14-15中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是选自igg1、igg2、igg3和igg4的亚型。
18.权利要求14-17中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链恒定区和/或轻链恒定区，所述重链恒定区包含与seq id no:19或21具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的氨基酸序列，所述轻链恒定区包含与seq id no:18具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的氨基酸序列。
19.权利要求14-18中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段选自fab、fab’、f(ab’)2、fd、fd’、fv、scfv、ds-scfv和dab。
20.权利要求14-19中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是鼠抗体、人抗体或人源化抗体。
21.权利要求14-20任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是单克隆抗体。
22.权利要求21所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链和轻链，所述重链包含与seq id no:40具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的氨基酸序列，所述轻链包含与seq id no:41具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的氨基酸序列。
23.权利要求14-20中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是双特异性抗体或多特异性抗体。
24.权利要求23所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是双特异性抗体，所述双特异性抗体还包含与第二抗原结合的第二抗原结合区。
25.权利要求24所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述第二抗原是肿瘤相关抗原或免疫细胞抗原，例如t细胞抗原。
26.核酸，其包含编码根据权利要求14-25中任一项所述的抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列。
27.载体，其包含根据权利要求26所述的核酸。
28.宿主细胞，其包含根据权利要求26所述的核酸或根据权利要求27所述的载体。
29.药物组合物，其包含(i)根据权利要求14-25中任一项所述的抗体或其抗原结合片段；和(ii)药学上可接受的载剂或佐剂。
30.抗体-药物缀合物，其包含根据权利要求14-25中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。
31.治疗受试者的疾病的方法，其包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求14-25中任一项所述的抗体或其抗原结合片段、根据权利要求29所述的药物组合物、或根据权利要求30所述的抗体-药物缀合物。
32.权利要求31所述的方法，其中所述疾病是癌症(例如，肝细胞癌)或由病毒感染引起的疾病或病况(例如，由hiv感染引起的疾病或病况)。
33.权利要求31或32所述的方法，其进一步包括向所述受试者施用第二治疗剂。
34.权利要求33所述的方法，其中所述第二治疗剂选自抗体、化疗剂和小分子药物。
