本发明涉及菌菇栽培技术,具体涉及一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法。
背景技术:
1、白灵菇,拉丁学名p l eurotus tuo l i ens i s,在分类学上属担子菌门(bas id i omycota)、蘑菇亚门(agar i comycot i na)、蘑菇纲(agar i comycetes)、蘑菇亚纲(agar i comycet i dae)、蘑菇目(agar i ca l es)、侧耳科(p l eurotaceae)、侧耳属(pl eurotus),其中文学名为白灵侧耳,与常见的平菇近缘。
2、白灵侧耳(p l eurotus tuo l i ens i s)商品名为白灵菇,是我国具有自主知识产权和明确原产地的品种,也是最早被列入我国植物新品种保护名录(第六批)的食用菌品种(2005年5月20日农业部令第51号公布施行)。2019年全国白灵侧耳产量为5.7881万吨,比2018年增长3.67%。白灵侧耳虽已人工栽培多年,但工厂化栽培菌株的农艺性状和商品性状还有待改进,原基诱导难、一致性低和生产周期较长是目前产业发展遇到的主要瓶颈问题。
3、当前白灵侧耳栽培主要有农业式栽培和工厂化栽培两种栽培方式,从接种到开始出菇,通常需要100~120天左右。尤其是工厂化栽培方式,相对金针菇(60~70天)、杏鲍菇(50~60天)、平菇(30~40天)而言,生产周期太长,严重影响工厂化栽培的效益。因此,加快选育短周期易出菇的白灵侧耳新品种是当务之急。
4、白灵侧耳育种方法主要包括野生菌株驯化和杂交育种等两种方式,这两种方式都面临着生产周期长和生产成本高等问题,尤其是杂交育种过程中,数量众多的杂交菌株到底能不能出菇以及出菇整齐度,还有出菇周期,都需要大量的栽培周期来验证。
5、因此,提供一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,以解决现有技术中的上述不足之处。
2、为了实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,包括如下步骤:
3、s1、在无菌条件下,将活力旺盛的白灵侧耳菌种接种到培养皿中的pda固体培养基的中央,在22℃~28℃、黑暗条件下培养5~7天,待菌丝直径为3~5cm;
4、s2、然后将培养皿在0~4℃、黑暗条件下进行冷刺激处理后,再将培养皿置于8~12℃培养箱中进行原基诱导培养,光照10h/黑暗14h处理,观察菌丝凝集的早晚情况和15天后的原基分化情况;
5、s3、记录筛选菌丝凝集的早晚情况且可以形成原基并分化出菇的菌株,即为短周期、易出菇的白灵侧耳种质资源。
6、进一步地,步骤s1中所述pda固体培养基由去皮马铃薯200g/l,葡萄糖20g/l和琼脂粉20g/l制备而成;
7、pda固体培养基的具体配制方法如下:将去皮马铃薯200g切片,加入800ml去离子水,煮10~15分钟至一触即烂,四层纱布过滤至烧杯中,然后在烧杯中加葡萄糖20g至溶解完毕,加水定容至1l,并转移至容量为1l的三角瓶中,再加入20g琼脂粉,121℃灭菌30min,再冷却至45~50℃,倒入已灭菌的直径9cm的培养皿中,倒入量为20ml,凝固备用。
8、进一步地,步骤s1中所述pda固体培养基为自行配制培养基,非市售马铃薯葡萄糖琼脂粉。
9、进一步地,步骤s1中所述培养温度为25℃。
10、进一步地,步骤s2中所述冷刺激处理温度为4℃。
11、进一步地,步骤s2中所述原基诱导光照条件为光照10h处理时,光照强度为600lux。
12、进一步地,步骤s3中所述冷刺激处理时间为6h。
13、进一步地,步骤s2中所述培养皿置于培养箱中进行原基诱导培养为10℃。
14、进一步地,步骤s3中所述菌丝凝集的早晚情况的记录时间分别为5d、10d和15d。
15、进一步地,步骤s3中所述记录形成原基并分化出菇时间为15d。
16、与现有技术相比,本发明提供的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,是一种可以快速鉴定短周期易出菇且整齐度高的白灵侧耳菌株的方法,可以在育种前期淘汰大多数不易出菇,生产周期长,冷刺激时间长的试验材料,只保留短周期易出菇的材料去栽培,从而达到节省育种的工作量,节省人力物力财力的目的,也可以为选育短周期易出菇的适合工厂化栽培的白灵侧耳品种提供参考。
1.一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s1中所述pda固体培养基由去皮马铃薯200g/l,葡萄糖20g/l和琼脂粉20g/l制备而成;
3.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s1中所述pda固体培养基为自行配制培养基,非市售马铃薯葡萄糖琼脂粉。
4.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s1中所述培养温度为25℃。
5.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s2中所述冷刺激处理温度为4℃。
6.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s2中所述原基诱导光照条件为光照10h处理时,光照强度为600lux。
7.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s3中所述冷刺激处理时间为6h。
8.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s2中所述培养皿置于培养箱中进行原基诱导培养为10℃。
9.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s3中所述菌丝凝集的早晚情况的记录时间分别为5d、10d和15d。
10.根据权利要求1所述的一种快速筛选短周期易出菇白灵侧耳菌株资源的方法,其特征在于,步骤s3中所述记录形成原基并分化出菇时间为15d。
