1.本发明属于日用化妆品技术领域，具体涉及一种黑发精华液，还涉及该黑发精华液的制备方法。
背景技术：2.目前市面上常见的黑发产品大多是含有染发成分的染发膏剂型，通常根据其配方体系可以分为化学染发产品和天然成分染发产品。
3.化学染发产品按照染发持久时间分为永久性染发产品、半永久性染发产品和暂时性染发产品，永久性染发产品含有染料中间体和偶联剂或改性剂，这些中间体可以渗入到头发内部毛髓中，通过氧化、偶合和缩合反应，形成稳定的染料分子，被封闭在头发纤维内，不易冲洗除去，能够起到持久染色的作用，一般可以维持1～3个月的效果；半永久性染发产品是将分子量相对较小的染料分子渗透进入头发表皮层或部分皮质层组织及髓质，从而起到染黑的效果，维持时间通常可抵挡6～12次的洗发；暂时性染发产品，主要用于临时性的头发修饰，一般由水溶性的酸、碱性染料或颜料组成，也可由酸性染料、氨水或金属盐组成不溶性的混合物，基本附着于头发表面，暂时性染发产品作用是一次性的，如使用时不小心还容易沾染衣物。这些黑发产品，基本上都是通过化学染发成分将头发染色而达到黑发的效果，这种产品存在很多缺点和不足，包括：染发持久性不长，需要经常性反复染，而反复染发，很容易导致头皮过敏等问题，并且容易损伤发质，让头发变得容易掉落或者变得粗糙等等。
4.天然成分染发产品：从天然色素中提取成分而制成的植物染发剂，一般不损伤头发结构和不破坏所贮藏的色素，但黑发效果一般，不持久。
5.经科学家研究发现，人体头发中的黑色，来源于存在于毛根与皮肤之间的色素干细胞，正是由于色素干细胞制造的色素细胞，人的头发才会保持黑色。如果这种干细胞减少或枯竭，人的头发就会变成白色，这就是头发由黑变白的根本原因。而现有黑发产品通过染发来让白发变黑，并没有从源头上解决白发问题。
6.基于此，本发明提供一种黑发精华液，不含染发成分，增加黑色素的生成，激活抗氧化防御来减少对黑色素细胞的损害，从而减少白发数量，使白发慢慢转黑发。
技术实现要素：7.本发明第一目的在于提供一种黑发精华液，解决的技术问题是现有黑发产品含染色成分对黑发效果不持久，无法从根源上改善白发生成的不足。
8.本发明第二目的在于提供一种黑发精华液的制备方法。
9.本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
10.一种黑发精华液，包括黑发组合物，以黑发精华液总量计，所述黑发组合物包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.010％～10.00％、芝麻籽提取物0.010％～5.00％、何首乌根提取物0.010％～5.00％、水解亚麻提取物0.0010％～5.00％、胡黄连根
提取物0.00010％～0.500％、乙酰酪氨酸0.0100％～1.00％和欧洲落叶松提取物0.0010％～1.00％。
11.进一步地，所述黑发组合物包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.010％～1.0％、芝麻籽提取物0.010％～0.5％、何首乌根提取物0.010％～1.0％、水解亚麻提取物0.0010％～0.20％、胡黄连根提取物0.00010％～0.20％、乙酰酪氨酸0.0100％～0.45％和欧洲落叶松提取物0.0010％～0.15％。
12.进一步地，所述黑发组合物包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.3％、芝麻籽提取物0.05％、何首乌根提取物0.414％、水解亚麻提取物0.0055％、胡黄连根提取物0.0005％、乙酰酪氨酸0.17％和欧洲落叶松提取物0.06％。
13.本发明黑发组合物将不同作用机理的白发转黑发有体外测试效果的活性成分组合在一起，通过促进活色素干细胞的增殖，增加真皮乳头的黑色素生成，并通过激活抗氧化防御来减少ros对黑色素细胞的损害，刺激头发黑色素的沉着，从而重新生长黑发，让白发慢慢变回黑色。本发明中，墨旱莲叶提取物改善抗氧化特性，通过激活抗氧化防御来减少ros对黑色素细胞的损害。黑芝麻是我国传统的滋补食品,有显著的医疗保健功效。黑芝麻对酪氨酸酶的激活及促黑色素生成方面均具有较强的作用,黑芝麻水提物对细胞的增殖活性、黑素含量及酪氨酸酶活性的油积极影响,并促进进行黑素合成的相关基因(tyrosinase/mitf/trp-1/trp-2)mrna和蛋白质的表达,促进黑色素生成治疗白发。何首乌根提取物用于治疗肝脏和肾脏不适，具有滋补阴气的能力，其可维持健康人体的平衡。乙酰酪氨酸是进行黑色素合成途径的前提，增加真皮乳头的黑色素细胞的黑色素合成。
14.本发明中，所述黑发精华液，还包括以黑发精华液总量计的以下组分：辅料0.5％-10％。
15.本发明的一些实施方案中，所述辅料包括调理剂和防腐剂中的一种或两种。
16.进一步地，所述调理剂为甘油、戊二醇、peg-40氢化蓖麻油、薄荷脑和甘草酸二钾中的一种或两种以上。
17.本发明的一些实施方案中，所述辅料还包括增稠剂、ph稳定剂和螯合稳定剂。
18.进一步地，所述增稠剂为黄原胶，所述ph稳定剂为无水柠檬酸和柠檬酸钠，所述螯合稳定剂为edta二钠。
19.本发明的一些实施方案中，所述黑发精华液包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.3％、芝麻籽提取物0.05％、何首乌根提取物0.414％、水解亚麻提取物0.0055％、胡黄连根提取物0.0005％、乙酰酪氨酸0.17％、欧洲落叶松提取物0.06％、戊二醇3％、甘油3％、edta二钠0.05％、黄原胶0.2％、柠檬酸钠0.2％、柠檬酸0.12％、甘草酸二钾0.2％、薄荷脑0.2％、peg-40氢化蓖麻油1.0％。
20.一种黑发精华液的制备方法，包括以下步骤：
21.(1)将配方量的戊二醇、甘油、edta二钠、黄原胶和甘草酸二钾混合，溶解成透明状，得到预制液a；将薄荷脑、peg-40氢化蓖麻油和吐温-20混合搅拌溶解，做成预制液b；
22.(2)向预制液a中依次加入墨旱莲叶提取物、芝麻籽提取物份、何首乌根提取物、水解亚麻提取物、胡黄连根提取物、乙酰酪氨酸、欧洲落叶松提取物，溶解后，再加入柠檬酸钠/柠檬酸，调整ph值在4.5～5.0之间，再加入预制液b，搅拌冷却，即得到黑发精华液。
23.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
24.(1)本发明黑发精华液中黑发组合物将不同作用机理的白发转黑发活性成分组合在一起，通过增加真皮乳头的黑色素生成，并通过激活抗氧化防御来减少ros对黑色素细胞的损害，刺激头发黑色素的沉着，从而重新生长黑发，让白发慢慢变回黑色。
25.(2)本发明黑发精华液不含染发剂，能够从根源上改善白发，不会导致头皮过敏等问题，也不会损伤发质。
附图说明
26.图1为本发明中水解亚麻提取物对络氨酸酶的影响情况；
27.图2为本发明中水解亚麻提取物对tpr-1、mitf、pmel17和c-kit的表达的影响情况；
28.图3为本发明中水解亚麻提取物对par-2在角质形成细胞中表达的影响情况；
29.图4为本发明中胡黄连根提取物对黑色素细胞中抗氧化关键基因表达的影响情况；
30.图5为本发明中胡黄连根提取物对真皮乳头细胞中ros的影响情况；
31.图6为本发明中胡黄连根提取物对络氨酸酶活性的影响情况；
32.图7为本发明中胡黄连根提取物对黑色素生成含量的影响情况；
33.图8为本发明中欧洲落叶松提取物对毛囊中黑色素生成含量的影响情况；
34.图9为本发明实施例黑发精华液对离体白发毛囊中黑色素生成含量的影响情况；
35.图10为本发明实施例黑发精华液对离体白发毛囊处理后的图像；
36.图11为人体测试志愿者使用实施例1黑发精华液后白发比例变化情况；
37.图12-图16是人体测试志愿者使用实施例1黑发精华液后效果图；
38.图17为人体测试志愿者使用实施例1黑发精华液后白发密度量化分析情况；
39.图18为人体测试志愿者使用实施例1黑发精华液后白发密度效果图。
具体实施方式
40.以下结合具体的实施例对本发明作进一步的说明，以便本领域技术人员更好理解和实施本发明的技术方案。
41.实施例1
42.一种黑发精华液，包括以下重量百分比组分：
[0043][0044]
上述黑发精华液的制备方法：
[0045]
(1)先将1，2-戊二醇和浓甘油混合好，搅拌均匀，做成预制液a；将薄荷脑、peg-40氢化蓖麻油和吐温-20混合好，加热40-50℃，搅拌溶解成透明状，降温，做成预制液b；
[0046]
(2)往一合适容器中加入水、edta二钠、甘草酸二钾和黄原胶，搅拌溶解，加热至60-75℃，加入预制液a，搅拌至完全溶解；
[0047]
(3)依次计入墨旱莲叶提取物、芝麻籽提取物份、何首乌根提取物、水解亚麻提取物、胡黄连根提取物、乙酰酪氨酸、欧洲落叶松提取物，确保完全溶解成透明状；
[0048]
(4)加入柠檬酸和柠檬酸钠，搅拌溶解，调节ph值为4.0～5.0之间；
[0049]
(5)加入预制液b和防腐剂，搅拌溶解；冷却到30℃以下，调配结束。
[0050]
实施例2
[0051]
一种黑发精华液，包括以下重量百分比组分：
[0052][0053][0054]
上述黑发精华液的制备方法：
[0055]
(1)先将1，2-戊二醇和浓甘油混合好，搅拌均匀，做成预制液a；将薄荷脑、peg-40氢化蓖麻油和吐温-20混合好，加热40-50℃，搅拌溶解成透明状，降温，做成预制液b；
[0056]
(2)往一合适容器中加入水、edta二钠、甘草酸二钾和黄原胶，搅拌溶解，加热至60-75℃，加入预制液a，搅拌至完全溶解；
[0057]
(3)依次计入墨旱莲叶提取物、芝麻籽提取物份、何首乌根提取物、水解亚麻提取物、胡黄连根提取物、乙酰酪氨酸、欧洲落叶松提取物，确保完全溶解成透明状；
[0058]
(4)加入柠檬酸和柠檬酸钠，搅拌溶解，调节ph值为4.0～5.0之间；
[0059]
(5)加入预制液b和防腐剂，搅拌溶解；冷却到30℃以下，调配结束。
[0060]
实施例3
[0061]
一种黑发精华液，包括以下重量百分比组分：
[0062][0063]
上述黑发精华液的制备方法：
[0064]
(1)先将1，2-戊二醇和浓甘油混合好，搅拌均匀，做成预制液a；将薄荷脑、peg-40氢化蓖麻油和吐温-20混合好，加热40-50℃，搅拌溶解成透明状，降温，做成预制液b；
[0065]
(2)往一合适容器中加入水、edta二钠、甘草酸二钾和黄原胶，搅拌溶解，加热至60-75℃，加入预制液a，搅拌至完全溶解；
[0066]
(3)依次计入墨旱莲叶提取物、芝麻籽提取物份、何首乌根提取物、水解亚麻提取物、胡黄连根提取物、乙酰酪氨酸、欧洲落叶松提取物，确保完全溶解成透明状；
[0067]
(4)加入柠檬酸和柠檬酸钠，搅拌溶解，调节ph值为4.0～5.0之间；
[0068]
(5)加入预制液b和防腐剂，搅拌溶解；冷却到30℃以下，调配结束。
[0069]
实施例4
[0070]
一种黑发精华液，包括以下重量百分比组分：
[0071][0072][0073]
上述黑发精华液的制备方法：
[0074]
(1)先将1，2-戊二醇和浓甘油混合好，搅拌均匀，做成预制液a；将薄荷脑、peg-40氢化蓖麻油和吐温-20混合好，加热40-50℃，搅拌溶解成透明状，降温，做成预制液b；
[0075]
(2)往一合适容器中加入水、edta二钠、甘草酸二钾和黄原胶，搅拌溶解，加热至60-75℃，加入预制液a，搅拌至完全溶解；
[0076]
(3)依次计入墨旱莲叶提取物、芝麻籽提取物份、何首乌根提取物、水解亚麻提取物、胡黄连根提取物、乙酰酪氨酸、欧洲落叶松提取物，确保完全溶解成透明状；
[0077]
(4)加入柠檬酸和柠檬酸钠，搅拌溶解，调节ph值为4.0～5.0之间；
[0078]
(5)加入预制液b和防腐剂，搅拌溶解；冷却到30℃以下，调配结束。
[0079]
性能测试
[0080]
本发明中水解亚麻提取物帮助头发保持、恢复原有色泽，其作用如下：1)显著提高
启动黑色素细胞生成黑色素的限速关键酶-络氨酸酶的水平，如图1所示；2)提高了所有蛋白质标记物如tpr-1、mitf、pmel17和c-kit的表达，如图2所示；tpr-1是人体黑色素细胞中一种参与黑色素合成的重要蛋白质；mitf，有助于人体黑色素细胞中的黑色素合成；pmel17，有利于黑色素储存在人体黑色素细胞中；c-kit，调节人体黑色素细胞中的黑色素过程；3)显著提高了par-2在角质形成细胞中的表达，促进黑色素从黑色素细胞向角质形成细胞的运转，如图3所示。
[0081]
本发明中胡黄连根提取物含有胡黄连苦苷ii：环烯醚萜苷和多酚类，具有抗细胞凋零，抗炎症，抗氧化的效果，对白发转黑有高效果；1)提高黑色素细胞中抗氧化关键基因的表达，防止氧化应激，改善抗氧化特性，限制头发变白，如图4所示；2)毛囊球中的真皮毛乳头细胞在调节活跃黑色素细胞更新中起重要作用，而细胞中ros会影响他们的活性，胡黄连提取物能够减少ros在真皮乳头细胞中的产生，限制环境氧化压力，从而提升头发着色，如图5所示；3)促进络氨酸酶的活性，增加色素沉着，如图6所示；4)促进黑色素的生成，从而逆转头发色素的减少，图7所示。
[0082]
其中，胡黄连根提取物对黑色素细胞抗氧化基因表达影响测试方法如下：先用1.0％的胡黄连根提取物培养黑色素细胞48小时，24小时后检测氧化应激：分成两部分，一部分用250μmh2o2处理2小时，一部分不处理，在混合培养三倍体上使用rt-qpcr检测nrf2、hmox1、slc7a11基因的mrna表达。
[0083]
胡黄连根提取物对黑色素细胞内ros含量影响测试方法如下：由于毛囊球中的真皮毛乳头细胞在调节活跃黑素细胞更新中起着重要作用，而细胞内ros的累计会影响他们的活性，降低ros的产生有利于提升头发着色，通过用黑发组合物培养人真皮毛乳头细胞(hfdpc)24小时，然后再30分钟内施加氧化应激：250um h2o2，最后使用荧光探针(2,7-hfdpc-da)测量细胞内的ros，结果显示不同浓度的胡黄连根提取物处理过的可以有效降低ros的产生。
[0084]
胡黄连根提取物对络氨酸酶活性影响测试方法如下：用胡黄连根提取物培养黑素细胞72小时(n＝3)72小时后检测氧化应激：先用5mh2o2处理30分钟与l-多巴底物孵育后，在540nm处通过光密度(od)评估酶活性。
[0085]
胡黄连根提取物对黑色素生成影响测试方法如下：将黑素细胞和角质形成细胞与胡黄连根提取物或l-络氨酸共培养10天测试第0天、第3天和第7天的氧化应激：先用250um h2o2处理2小时通过405nm(n＝3)处的光密度(od)评估细胞黑色素含量。
[0086]
本发明中，欧洲落叶松提取物刺激白发中黑色素的生成，体外测试结果显示，在3天内显著增加毛囊中66％的黑色素生成，如图8所示。
[0087]
其中，欧洲落叶松提取物体外测试方法如下：将毛发生长初期的毛囊用不同浓度欧洲落叶松提取物处理72小时，使用fontana masson染色法和图像分析法评估黑色素的生成。
[0088]
一、离体实验，测试白发中的黑色素生成
[0089]
将来自2个供体的毛发生长初期的白发毛囊用实施例1含1％的黑发组合成分的黑发精华液处理72小时或者不处理，使用fontana masson染色法(图2的黑色)和图像分析法评估对进入毛囊中的黑色素含量进行定量，如图9、图10所示；
[0090]
结果1％的黑发组合成分在3天内显著增加毛囊中15％的黑色素生成。
[0091]
二、减少白发比例实验
[0092]
第一组志愿者使用安慰剂，第二组志愿者使用实施例1含1％黑发组合成分的黑发精华液，每天一次，持续4个月，评估白发比例；
[0093]
结果：4个月后，黑发组合成分显著降低白发比例17％，是空白的2.1倍，如图11。图12-图16是人体测试志愿者效果图，其中图12为24岁女性，图13为46岁男性，图14为35岁男性，图15为44岁女性。
[0094]
三、白发密度量化分析实验
[0095]
第一组志愿者使用安慰剂，第二组志愿者使用含1％黑发组合成分的头发护理液，每天一次，持续4个月，评估白发比例；
[0096]
结果：4个月后，黑发组合成分显著降低每平方厘米的白发数量，平均减少6.8根，是空白安慰剂组的3.4倍，如图17、图18。
[0097]
以上实施实例对本发明不同的实施过程进行了详细的阐述，但是本发明的实施方式并不仅限于此，所属技术领域的普通技术人员依据本发明中公开的内容，均可实现本发明的目的，任何基于本发明构思基础上做出的改进和变形均落入本发明的保护范围之内，具体保护范围以权利要求书记载的为准。
技术特征：1.一种黑发精华液，其特征在于，包括黑发组合物，以黑发精华液总量计，所述黑发组合物包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.010％～10.00％、芝麻籽提取物0.010％～5.00％、何首乌根提取物0.010％～5.00％、水解亚麻提取物0.0010％～5.00％、胡黄连根提取物0.00010％～0.500％、乙酰酪氨酸0.0100％～1.00％和欧洲落叶松提取物0.0010％～1.00％。2.根据权利要求1所述黑发精华液，其特征在于，所述黑发组合物包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.010％～1.0％、芝麻籽提取物0.010％～0.5％、何首乌根提取物0.010％～1.0％、水解亚麻提取物0.0010％～0.20％、胡黄连根提取物0.00010％～0.20％、乙酰酪氨酸0.0100％～0.45％和欧洲落叶松提取物0.0010％～0.15％。3.根据权利要求2所述黑发精华液，其特征在于，所述黑发精华液包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.3％、芝麻籽提取物0.05％、何首乌根提取物0.414％、水解亚麻提取物0.0055％、胡黄连根提取物0.0005％、乙酰酪氨酸0.17％和欧洲落叶松提取物0.06％。4.根据权利要求1所述黑发精华液，其特征在于，所述黑发精华液，还包括以黑发精华液总量计的以下组分：辅料0.5％-10％。5.根据权利要求4所述黑发精华液，其特征在于，所述辅料包括调理剂和防腐剂中的一种或两种。6.根据权利要求5所述黑发精华液，其特征在于，所述调理剂为甘油、戊二醇、peg-40氢化蓖麻油、薄荷脑和甘草酸二钾中的一种或两种以上。7.根据权利要求6所述黑发精华液，其特征在于，所述辅料还包括增稠剂、ph稳定剂和螯合稳定剂。8.根据权利要求7所述黑发精华液，其特征在于，所述增稠剂为黄原胶，所述ph稳定剂为无水柠檬酸和柠檬酸钠，所述螯合稳定剂为edta二钠。9.根据权利要求8所述黑发精华液，其特征在于，所述黑发精华液包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.3％、芝麻籽提取物0.05％、何首乌根提取物0.414％、水解亚麻提取物0.0055％、胡黄连根提取物0.0005％、乙酰酪氨酸0.17％、欧洲落叶松提取物0.06％、戊二醇3％、甘油3％、edta二钠0.05％、黄原胶0.2％、柠檬酸钠0.2％、柠檬酸0.12％、甘草酸二钾0.2％、薄荷脑0.2％、peg-40氢化蓖麻油1.0％。10.一种权利要求1-9任一项所述黑发精华液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将配方量的戊二醇、甘油、edta二钠、黄原胶和甘草酸二钾混合，溶解成透明状，得到预制液a；将薄荷脑、peg-40氢化蓖麻油和吐温-20混合搅拌溶解，做成预制液b；(2)向预制液a中依次加入墨旱莲叶提取物、芝麻籽提取物份、何首乌根提取物、水解亚麻提取物、胡黄连根提取物、乙酰酪氨酸、欧洲落叶松提取物，溶解后，再加入柠檬酸钠/柠檬酸，调整ph值在4.5～5.0之间，再加入预制液b，搅拌冷却，即得到黑发精华液。
技术总结本发明提供了一种黑发精华液，包括黑发组合物，以黑发精华液总量计，所述黑发组合物包括以下质量百分比的组分：墨旱莲叶提取物0.010％～10.00％、芝麻籽提取物0.010％～5.00％、何首乌根提取物0.010％～5.00％、水解亚麻提取物0.0010％～5.00％、胡黄连根提取物0.00010％～0.500％、乙酰酪氨酸0.0100％～1.00％和欧洲落叶松提取物0.0010％～1.00％。本发明黑发精华液中黑发组合物将不同作用机理的白发转黑发活性成分组合在一起，通过增加真皮乳头的黑色素生成，并通过激活抗氧化防御来减少ROS对黑色素细胞的损害，刺激头发黑色素的沉着，从而重新生长黑发，让白发慢慢变回黑色。黑色。
技术研发人员：林新文 高臣臣 王乃龙
受保护的技术使用者：曼秀雷敦（中国）药业有限公司
技术研发日：2022.09.02
技术公布日：2022/12/16
