本发明涉及一种斑头鱼人工授精装置及人工授精方法，属于养殖鱼类育种技术领域。
背景技术：
斑头鱼hexagrammosagrammus，俗称窝黄鱼、紫勾子，主要分布于西北太平洋的日本北海道南部至九州、朝鲜半岛以及中国东海、黄海和渤海等沿海岩礁或浅水海藻区域，是栖息在近海的冷温性底层鱼类。斑头鱼具有耐低温、食性杂、抗逆性强、蛋白质丰富和味道鲜美等特点，适合沿海岩礁地带的人工养殖，是一种极有发展前景的海水养殖鱼类。
由于过度捕捞和环境污染等原因，已经造成近海渔业经济鱼类种类和数量的不断减少，资源量严重衰退。近年来，渔民对斑头鱼捕捞强度逐渐增大，而渔获量和捕捞个体却在逐年减小，导致其资源所承受的压力越来越大，资源衰退的趋势也日趋严重，亟需开展斑头鱼人工繁育技术研究，恢复渔业资源。斑头鱼怀卵量少，鱼卵为黏性卵，人工授精时极易黏结整团，受精率和孵化率较低。斑头鱼的人工繁育技术目前尚未有报道，已知最新受精率仅为35.8％，孵化率41.4％，本发明提供了一种斑头鱼人工授精装置及使用方法，将受精卵块定型成为中空的球体，可以使水流经卵块内部，增加供氧量，防止水霉滋生，提高受精率和孵化。生产试验表明，采用此方法，受精率可达66.3％，孵化率可达73.1％，大大提高了斑头鱼苗种生产中的受精率和孵化率。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，而提供一种斑头鱼人工授精装置及人工授精方法，能有效提高斑头鱼的授精效率和孵化率，从而弥补现有技术的不足。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明首先提供一种斑头鱼人工授精方法，包括以下步骤：
(1)亲鱼选择：选择色泽正常、体形完整、无病无伤，摄食良好、活力良好的斑头鱼作为亲鱼；雌、雄亲鱼捕获后，采用塑料袋装海水打包充氧后运输到培育车间中，期间操作要仔细，避免损伤亲鱼；
(2)亲鱼培育：将亲鱼投放于培育车间中的亲鱼培育池中，采用砂滤自然海水流水培育，连续充气；每日投喂2次，直至雌、雄亲鱼成熟；
(3)人工采精：将步骤(2)中培育成熟的雄亲鱼放到含有香酚的海水中麻醉2-4分钟，使亲鱼处于麻醉状态；将麻醉后的雄亲鱼用干毛巾擦拭干净，小心挤压其腹部，将精液挤出并收集到离心管中，然后置于盛有冰块的冰盒上备用，3只雄鱼的精液为一组，遮光存放；
(4)人工采卵：将步骤(2)中培育成熟的雌亲鱼放到含有丁香酚的海水中麻醉2-4分钟，使亲鱼处于麻醉状态；将麻醉后的雌亲鱼用干毛巾擦拭干净，小心挤压其腹部，将鱼卵挤出并收集到受精卵定型器中，鱼卵过多的情况下挤入到多个受精卵定型器中；
所述的受精卵定型器，包括受精卵盒及定型器：受精卵盒为正方体形状的框架结构，四个侧面以及底面分别缝制有筛绢，顶面敞口；定型器整体为中空的树枝状结构，包括一条主枝干和多条分枝干，主枝干上设置有多个圆形的插槽，分枝干的一端插入主支杆的插槽内构成树枝状结构；树枝状的定型器正好能够放进受精卵盒的内部从而构成受精卵定型器；斑头鱼的鱼卵具有极强的黏性，能够黏附在树枝状的定型器上；
(5)人工授精：将装满鱼卵的受精卵定型器并排摆放在长方体形状的授精盒中，用医用生理盐水稀释精液，用玻璃棒搅拌均匀；然后立即将稀释的精液倒入装有受精卵定型器的授精盒中，再将授精盒放置在水平桌面上，迅速向授精盒中加入砂滤海水，直至受精卵定型器的上沿，静置20-40min，此期间精卵结合形成受精卵；待受精卵硬化定型后，将受精卵块从受精卵盒中取出，轻轻拆除分枝干，得到中空带孔的受精卵团块，用大量海水洗受精卵3-5次，将洗净的受精卵放入孵化池中进行孵化；
(6)受精卵孵化：将受精卵块放入孵化池的孵化网箱中，采用静水、连续充气的孵化方式进行孵化；孵化时间为20-26天，20天之后，及时将初孵仔鱼移出孵化池继续进行培育。
上述技术方案中，步骤(1)中，所述的亲鱼，为3～4龄斑头鱼；雄鱼体重100～150g，雌鱼体重100～200g。
上述技术方案中，步骤(2)中，所述的亲鱼培育池中雌雄亲鱼的投放比为1:1，培育密度为5-8尾/m3；投喂的饵料为牡蛎肉和/或沙蚕，每日投喂量为亲鱼体重的3％-5％。
上述技术方案中，步骤(3)中，雄亲鱼优选放到含有23-26mg/l丁香酚的海水中麻醉，麻醉时间优选为3分钟。
上述技术方案中，步骤(4)中，雌亲鱼优选放到含有23-26mg/l丁香酚的海水中麻醉，麻醉时间优选为3分钟。
上述技术方案中，步骤(5)中，用吸管吸取精液1ml，用医用生理盐水稀释至50ml后再倒入装有鱼卵的受精卵定型器的中；静置的时间优选为30min。
上述技术方案中，步骤(6)中，孵化过程中，每2天升高1℃，至12℃后恒温孵化；从受精第10天开始，每天分2次将受精卵移至室外背阴处阴干，每次1小时，阴干过程中每15分钟流水刺激1分钟。
本发明还提供一种斑头鱼人工授精装置，包括授精盒及受精卵定型器，其特征在于：
所述的授精盒1，为长方体形状、敞口的盒状结构；所述的受精卵定型器放置于授精盒内部；
所述的受精卵定型器，包括受精卵盒2及定型器3；所述的定型器放置于受精卵盒内部；
所述的受精卵盒2，为正方体形状的框架结构，四个侧面以及底面分别缝制有筛绢，顶面敞口；
所述的定型器3，整体为树枝状结构，包括一条主枝干、多条分枝干，分枝干交叉的分布在主枝干上；
所述的主枝干，整体为长方体结构，竖向设置，其上设置有多个圆形的插槽；
所述的分枝干，整体为圆柱体结构，一端能够插入主枝干的插槽内从而构成树枝状结构。
上述技术方案中，所述的授精盒为塑料材质的盒体，规格为长40-60cm、宽10-15cm、高5-7cm；内部能够放置10个以上的受精卵定型器。
上述技术方案中，所述的受精卵盒为塑料材质的框架体，边长为4-6cm。
上述技术方案中，所述的筛绢，网目为80-160目。
上述技术方案中，所述的定型器，整体均为塑料材质。
上述技术方案中，所述的主枝干上的插槽为8个，分枝干为8条。
上述技术方案中，所述的主枝干，规格为长4-6cm、宽0.4-0.5cm、高0.4-0.5cm，插槽的直径为0.2-0.3cm。
上述技术方案中，所述的分枝干，长度为2-3cm，直径为0.2-0.3cm。
本发明的方法使斑头鱼鱼卵受精率达87.2％，孵化率达60.7％，填补了斑头鱼人工授精的孵化的空白，为斑头鱼人工繁育和增养殖奠定了基础。
附图说明：
图1为本发明斑头鱼人工授精装置的整体结构示意图；
其中：1为授精盒，2为受精卵盒，3为定型器。
具体实施方式
以下对本发明技术方案的具体实施方式详细描述，但本发明并不限于以下描述内容：
本发明提供一种斑头鱼人工授精装置，包括授精盒及受精卵定型器，如图1所示：授精盒1，为长方体形状、敞口的盒状结构，受精卵定型器放置于授精盒内部；受精卵定型器包括受精卵盒2及定型器3，定型器放置于受精卵盒内部；受精卵盒2，为正方体形状的框架结构，四个侧面以及底面分别缝制有筛绢，顶面敞口；定型器3，整体为树枝状结构，包括一条主枝干、多条分枝干，分枝干交叉的分布在主枝干上；主枝干整体为长方体结构，竖向设置，其上设置有多个圆形的插槽；分枝干整体为圆柱体结构，一端能够插入主枝干的插槽内从而构成树枝状结构。
本发明还提供一种使用上述人工授精装置进行人工授精的方法，包括以下步骤：
(1)亲鱼选择：选择色泽正常、体形完整、无病无伤，摄食良好、活力良好的斑头鱼作为亲鱼；雌、雄亲鱼捕获后，采用塑料袋装海水打包充氧后运输到培育车间中，期间操作要仔细，避免损伤亲鱼；
(2)亲鱼培育：将亲鱼投放于培育车间中的亲鱼培育池中，采用砂滤自然海水流水培育，连续充气；每日投喂2次，直至雌、雄亲鱼成熟；
(3)人工采精：将步骤(2)中培育成熟的雄亲鱼放到含有香酚的海水中麻醉2-4分钟，使亲鱼处于麻醉状态；将麻醉后的雄亲鱼用干毛巾擦拭干净，小心挤压其腹部，将精液挤出并收集到离心管中，然后置于盛有冰块的冰盒上备用，3只雄鱼的精液为一组，遮光存放；
(4)人工采卵：将步骤(2)中培育成熟的雌亲鱼放到含有丁香酚的海水中麻醉2-4分钟，使亲鱼处于麻醉状态；将麻醉后的雌亲鱼用干毛巾擦拭干净，小心挤压其腹部，将鱼卵挤出并收集到受精卵定型器中，鱼卵过多的情况下挤入到多个受精卵定型器中；斑头鱼的鱼卵具有极强的黏性，能够黏附在树枝状的定型器上；
(5)人工授精：将装满鱼卵的受精卵定型器并排摆放在长方体形状的授精盒中，用医用生理盐水稀释精液，用玻璃棒搅拌均匀；然后立即将稀释的精液倒入装有受精卵定型器的授精盒中，再将授精盒放置在水平桌面上，迅速向授精盒中加入砂滤海水，直至受精卵定型器的上沿，静置20-40min，此期间精卵结合形成受精卵；待受精卵硬化定型后，将受精卵块从受精卵盒中取出，轻轻拆除分枝干，得到中空带孔的受精卵团块，用大量海水洗受精卵3-5次，将洗净的受精卵放入孵化池中进行孵化；
(6)受精卵孵化：将受精卵块放入孵化池的孵化网箱中，采用静水、连续充气的孵化方式进行孵化；孵化时间为20-26天，20天之后，及时将初孵仔鱼移出孵化池继续进行培育。
下面结合具体的实施例对本发明进行阐述：
实施例1：
斑头鱼的人工育苗目前还没有报道，我们在摸索的过程中，参考了同属鱼类大泷六线鱼的人工授精和孵化的方法，并结合斑头鱼在自然环境中的生态位和习性，首次突破了斑头鱼的人工授精和孵化技术。
2018年9月-11月，在山东省海洋生物研究院中试基地进行了斑头鱼人工授精及孵化方法的试验，过程及结果如下：
(1)亲鱼选择：选择3～4龄斑头鱼，雄鱼体重100-150g，雌鱼体重100-200g。选择的亲鱼色泽正常、体形完整、无病无伤，摄食良好、活力良好。亲鱼捕获后，采用塑料袋海水打包充氧运输至亲鱼培育车间，期间操作要仔细，避免损伤亲鱼。
(2)亲鱼培育：:亲鱼培育池中雌雄亲鱼比1:1，培育密度为6尾/m3，采用砂滤自然海水流水培育，连续充气，投喂牡蛎肉(牡蛎肉不够时投喂沙蚕)，日投喂2次，每日投喂量为亲鱼体重的4％。
(3)人工采精：将成熟斑头鱼雄鱼放到含24.5mg/l丁香酚的海水中麻醉3分钟后，亲鱼处于麻醉状态；将麻醉后的雄鱼用干毛巾擦拭干净，小心挤压腹部，将精液挤出并收集到2ml的离心管中，置于盛有冰块的冰盒上备用，3只雄鱼的精液为一组，遮光存放。
(4)人工采卵：将成熟斑头鱼雌鱼放到含24.5mg/l丁香酚的海水中麻醉3分钟后，亲鱼处于麻醉状态；用干毛巾将亲鱼体表擦拭干净，小心挤压亲鱼腹部，将鱼卵挤入定型器，鱼卵过多可以挤入多个受精卵定型器中，每只雌鱼卵子单独为一组。
(5)人工授精：将装满鱼卵的受精卵定型器并排摆放在长方体形状的授精盒中，用吸管吸取精液1ml，用医用生理盐水稀释至50ml，用玻璃棒搅拌均匀；然后立即将稀释的精液倒入装有受精卵定型器的授精盒中，再将授精盒放置在水平桌面上，迅速向授精盒中加入砂滤海水，直至受精卵定型器的上沿，静置30min，此期间精卵结合形成受精卵；待受精卵硬化定型后，将受精卵块从受精卵盒中取出，轻轻拆除分枝干，得到中空带孔的受精卵团块，用大量海水洗受精卵5次，将洗净的受精卵放入孵化池中进行孵化；
(6)受精卵孵化：将受精卵块放入孵化池的孵化网箱中，采用静水、连续充气的孵化方式进行孵化；受精卵孵化过程中，每2天升高1℃，至12℃后恒温孵化；从受精第10天开始，每天分2次将受精卵移至室外背阴处阴干，每次1小时，阴干过程中每15分钟流水刺激1分钟。孵化时间为20-26天，20天之后，及时将初孵仔鱼移出孵化池进行培育
孵化存活率的检测：本发明的方法使斑头鱼鱼卵受精率达87.2％，孵化率达60.7％，填补了斑头鱼人工授精的孵化的空白，为斑头鱼人工繁育和增养殖奠定了基础。
上述实例只是为说明本发明的技术构思以及技术特点，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明的实质所做的等效变换或修饰，都应该涵盖在本发明的保护范围之内。
1.一种斑头鱼人工授精方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)亲鱼选择：选择色泽正常、体形完整、无病无伤，摄食良好、活力良好的斑头鱼作为亲鱼；雌、雄亲鱼捕获后，采用塑料袋装海水打包充氧后运输到培育车间中，期间操作要仔细，避免损伤亲鱼；
(2)亲鱼培育：将亲鱼投放于培育车间中的亲鱼培育池中，采用砂滤自然海水流水培育，连续充气；每日投喂2次，直至雌、雄亲鱼成熟；
(3)人工采精：将步骤(2)中培育成熟的雄亲鱼放到含有香酚的海水中麻醉2-4分钟，使亲鱼处于麻醉状态；将麻醉后的雄亲鱼用干毛巾擦拭干净，小心挤压其腹部，将精液挤出并收集到离心管中，然后置于盛有冰块的冰盒上备用，3只雄鱼的精液为一组，遮光存放；
(4)人工采卵：将步骤(2)中培育成熟的雌亲鱼放到含有丁香酚的海水中麻醉2-4分钟，使亲鱼处于麻醉状态；将麻醉后的雌亲鱼用干毛巾擦拭干净，小心挤压其腹部，将鱼卵挤出并收集到受精卵定型器中，鱼卵过多的情况下挤入到多个受精卵定型器中；
所述的受精卵定型器，包括受精卵盒(2)及定型器(3)：受精卵盒(2)为正方体形状的框架结构，四个侧面以及底面分别缝制有筛绢，顶面敞口；定型器(3)整体为中空的树枝状结构，包括一条主枝干和多条分枝干，主枝干上设置有多个圆形的插槽，分枝干的一端插入主支杆的插槽内构成树枝状结构；树枝状的定型器正好能够放进受精卵盒的内部从而构成受精卵定型器；斑头鱼的鱼卵具有极强的黏性，能够黏附在树枝状的定型器上；
(5)人工授精：将装满鱼卵的受精卵定型器并排摆放在长方体形状的授精盒(1)中，用医用生理盐水稀释精液，用玻璃棒搅拌均匀；然后立即将稀释的精液倒入装有受精卵定型器的授精盒中，再将授精盒放置在水平桌面上，迅速向授精盒中加入砂滤海水，直至受精卵定型器的上沿，静置20-40min，此期间精卵结合形成受精卵；待受精卵硬化定型后，将受精卵块从受精卵盒(2)中取出，轻轻拆除分枝干，得到中空带孔的受精卵团块，用大量海水洗受精卵3-5次，将洗净的受精卵放入孵化池中进行孵化；
(6)受精卵孵化：将受精卵块放入孵化池的孵化网箱中，采用静水、连续充气的孵化方式进行孵化；孵化时间为20-26天，20天之后，及时将初孵仔鱼移出孵化池继续进行培育。
2.根据权利要求1所述的人工授精方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的亲鱼，为3～4龄斑头鱼；雄鱼体重100～150g，雌鱼体重100～200g。
3.根据权利要求1所述的人工授精方法，其特征在于：步骤(2)中，所述的亲鱼培育池中雌雄亲鱼的投放比为1:1，培育密度为5-8尾/m3；投喂的饵料为牡蛎肉和/或沙蚕，每日投喂量为亲鱼体重的3％-5％。
4.根据权利要求1所述的人工授精方法，其特征在于：步骤(3)中，雄亲鱼放到含有23-26mg/l丁香酚的海水中麻醉，麻醉时间为3分钟。
5.根据权利要求1所述的人工授精方法，其特征在于：步骤(4)中，雌亲鱼放到含有23-26mg/l丁香酚的海水中麻醉，麻醉时间为3分钟。
6.根据权利要求1所述的人工授精方法，其特征在于：步骤(5)中，用吸管吸取精液1ml，用医用生理盐水稀释至50ml后再倒入装有鱼卵的受精卵定型器的中；静置的时间为30min。
7.根据权利要求1所述的人工授精方法，其特征在于：步骤(6)中，孵化过程中，每2天升高1℃，至12℃后恒温孵化；从受精第10天开始，每天分2次将受精卵移至室外背阴处阴干，每次1小时，阴干过程中每15分钟流水刺激1分钟。
8.一种斑头鱼人工授精装置，包括授精盒及受精卵定型器，其特征在于：
所述的授精盒(1)，为长方体形状、敞口的盒状结构；所述的受精卵定型器放置于授精盒内部；
所述的受精卵定型器，包括受精卵盒(2)及定型器(3)；所述的定型器放置于受精卵盒内部；
所述的受精卵盒(2)，为正方体形状的框架结构，四个侧面以及底面分别缝制有筛绢，顶面敞口；
所述的定型器(3)，整体为树枝状结构，包括一条主枝干、多条分枝干，分枝干交叉的分布在主枝干上；
所述的主枝干，整体为长方体结构，竖向设置，其上设置有多个圆形的插槽；
所述的分枝干，整体为圆柱体结构，一端能够插入主枝干的插槽内从而构成树枝状结构。
9.根据权利要求8所述的人工授精装置，其特征在于：所述的授精盒为塑料材质的盒体，规格为长40-60cm、宽10-15cm、高5-7cm，内部能够放置10个以上的受精卵定型器；所述的受精卵盒为塑料材质的框架体，边长为4-6cm；所述的筛绢，网目为80-160目。
10.根据权利要求8所述的人工授精装置，其特征在于：所述的定型器，整体均为塑料材质；所述的主枝干上的插槽为8个，分枝干为8条；所述的主枝干，规格为长4-6cm、宽0.4-0.5cm、高0.4-0.5cm，插槽的直径为0.2-0.3cm；所述的分枝干，长度为2-3cm，直径为0.2-0.3cm。
技术总结