本发明涉及一种可增加蛋黄色度的能实现精准配料的蛋鸡饲料，属于生物发酵饲料生产
技术领域：
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背景技术：
：鸡蛋是最常见的富含蛋白质的营养食品，国内外需求量巨大。鸡蛋蛋壳和蛋黄的颜色深浅是消费者所关注的重点之一。其中蛋黄颜色是由脂溶性色素在卵形成期间沉积到蛋黄中形成。由于现代鸡场采用集中喂养模式，蛋鸡饲料中的天然色素的来源，主要来自两方面，一方面来自饲料原料本身，如玉米；另一方面来自添加的色素。有时候从成本等方面考虑，蛋鸡饲料中可能会造成天然色素不足，蛋鸡无法获取足够的天然色素，将造成鸡蛋蛋黄色度偏低。在蛋鸡中添加符合食品及饲料规范及食品安全的色素，是蛋鸡场的常用做法，这是允许的。当前市场常用的蛋鸡饲料增色用的添加剂，有化学合成的，也有天然的；部分化学合成、价格低廉的色素用量少，着色效果也不错，但存在问题是，有些色素是化学合成的色素，不被消费者接受；有的色素被蛋鸡服用后，蛋黄颜色不够稳定，尤其是加热煮熟后的蛋黄颜色会在较短时间内褪色。有些天然色素，则价格偏高，色调也不够稳定。利用红曲菌发酵，可产生红曲米、红曲红、红曲黄和红曲橙等多种天然色素，这些色素有增色功能、杀菌功能和抗氧化功能，是可供人类食用的安全色素。红曲产品作为鸡、鸭、猪、牛的饲料添加剂，在近十多年来的文献及专利中有所报道，主要体现在蛋鸡饲料中应用红曲产品，可以增加蛋黄的色度，提高产蛋率等。其中包括采用不同的红曲产品(如红曲米产品或红曲菌接种在一些原料上所得到的培养物)或采用不同的红曲添加量以提高蛋黄色度。目前国内外尚无红曲色素大规模应用于蛋鸡蛋鸭饲料的实例，但可以预见在不久的将来，在蛋鸡蛋鸭饲料中使用红曲色素将是大势所驱，具有广阔的前景。虽然，目前有一些使用红曲产品作为色素类添加物用于鸡、鸭饲料的文献资料，但是还存在如下至少一个缺陷：(1)已有的添加方式成本较高或者并不适合用于饲料体系：用于蛋鸡的红曲发酵饲料，分为饲料添加剂和发酵饲料两种类型。添加剂类型的，是研究者自行生产或购买的红曲米添加到饲料中；发酵饲料类型的，是将红曲种子接入到发酵原料中进行固态发酵，但是由于饲料发酵的方式及饲料原料的特点，并不太合适用于固态发酵生产色素。(2)皆未明确提及饲料中红曲产品中的色素种类：已有报道中，无论是自制或外购的红曲产品中，大多只是笼统地提到采用红曲或红曲色素，皆未明确提及饲料中红曲产品中的色素种类是哪一类型。(3)缺少对色素的定性定量方法：在红曲色素的定量方面，诸多专利、文献中明确提到饲料中红曲色素含量的也更是凤毛麟角。目前在有关饲料中红曲色素定性及定量方面最为明确的文献有：李泳宁等提到的一种含有红曲色素的发酵饲料，是将红曲菌种子及枯草芽孢杆菌种子接入饲料原料中经固态发酵制备得到，其中仅提及红曲红色价为800u/g(李泳宁，朱宏阳，吴焜，连建芸，一种富含红曲色素微生物发酵饲料在蛋鸡养殖中的应用，粮食与饲料工业，2015,2:52-54.)。这种饲料在鸡饲料中用量为0.5％。但是此文献中所提到将红曲菌种子及枯草芽孢杆菌种子直接接入饲料原料中经固态发酵制备得到含有红曲色素的发酵饲料中的色价值，是否能生产出合格的饲料，并达到所宣称的色价值800u/g还值得商榷。金华莲等报道，在蛋鸡日粮中加入0.5-1.0％红曲霉一中药复合制剂(以红曲粉为主，与山药、神曲、山楂和红枣配伍而成)，可显著增强蛋壳厚度，加深蛋壳红色度(ciea)，降低蛋黄红色度(cieb)，其中的红曲粉由红曲霉接入籼米培养基发酵后经烘干制成粉末。红曲霉一中药复合制剂的最适添加量为0.5％。但红曲粉的有关色素的种类及含量(如色价)均未提及。[金华莲，董玉影，张敏，梁成云.红曲霉一中药复合制剂对蛋鸡生产性能及蛋常规品质的影响.延边大学农学学报，2012，(34)4：293-298.]。而且该文献所提及红曲霉一中药复合制剂只具有加深蛋壳红色度的功能。(4)红曲色素种类繁多、性质差别大，不同红曲产品中红曲色素种类差异也大：将红曲产品用于蛋鸡饲料，主要是利用红曲色素。红曲色素，种类繁多，据报道红曲色素种类多达一百多种；根据色调的类型分为红色素、黄色素和橙色素三大类。红、黄、橙三种类型的红曲色素，有的是脂溶性的(黄、橙色素大多属于脂溶性)，有的则是水溶性的(红曲红色素属大多属于水溶性)。由于蛋黄颜色主要是由脂溶性色素在卵形成期间沉积到蛋黄中形成。因此有的红曲色素对于提高蛋黄的颜色有帮助作用，有的则不一定具有这种作用。另外，不同的红曲微生物产生的色素种类或不同红曲产品中的色素种类也是不一样的。有的红曲产品中主要含红曲红色素，有的红曲产品中则含有更多的红曲黄色素或红曲橙色素。(5)有些红曲色素不太稳定，易变：更值得一提的是，色素属生物活性物质，有些不太稳定，易变。其中黄色素和橙色素稳定性较差，在一定的条件下会转变为红色素。例如，橙色素和氨基酸、肽或蛋白质在较高温度下反应会转变为水溶性更好的红色素；黄色素在一定条件下最终也会变成红色素(机理尚不清楚)。但黄色素和橙色素易溶于酒精或油脂中，在这些溶剂中色素的稳定性较好。(6)饲料中红曲色素控制不当会影响饲料使用者对饲料品质的判断即使能得到蛋黄黄色度加深的蛋鸡饲料，但若蛋鸡饲料中红曲色素种类及色价控制不当，也会产生一些负面影响，比如虽然可能会得到好的蛋黄质量，但是也会导致排泄物颜色加深、异常，从而影响消费者对禽类健康状态的判断、甚至引发对鸡蛋品质的误解。基于以上(1)-(6)的缺陷，目前在蛋鸡饲料中使用红曲色素产品，仍属于初级的探索阶段，还存在诸多问题：例如，在饲料中使用自制或外购的红曲米，存在的问题是固态发酵法生产的红曲米，由于菌种、生产原料、生产工艺等原因，红曲产品中三种色调的色素比例并不稳定，在不利的环境下，色素的分子结构可能会改变；色素含量也是会随着贮存时间而衰减的，即同一个红曲产品储存不同时间后，其色素含量会下降导致使用效果差。故在多重不利因素的影响下色素种类及含量难以人为控制。有的专利或文献，只提红曲产品的用量(如在饲料中的百分比)，却没有提及红曲产品中关键物质色素的种类及含量(色价)；甚至有的专利或文献中没有看到红曲色素的检测分析数据，因而在绝大多数专利或文献中用在饲料中的红曲色素没有严格的定性及定量数据。然而，鸡蛋蛋黄中色度值的大小，与从饲料中摄入的色素种类、含量及摄入量是有一定的对应关系。以上问题，最终将导致的结果是：目前根本无法对饲料中红曲色素的种类、含量、用量进行精准和稳定的控制，无法得到精准配料的蛋鸡饲料，从而无法稳定地、有效地改善蛋鸡的蛋黄色度。技术实现要素：为了解决上述的至少一个问题，本发明通过以下手段实现了可增加蛋黄色度的蛋鸡饲料的精准配料：(1)获得了多种色素种类明确、色素化学结构稳定、色素不容易发生种类转化、色素含量稳定的色素料；(2)提供了分析检测红曲红、红曲黄、红曲橙色素的含量的方法。本发明还发现，即使是饲料中最终色素色价相同，但如果色素的种类不同，也会影响到蛋鸡饲料的使用效果；在此基础上，本发明提供了一些能够稳定地、有效地改善蛋鸡的蛋黄色度的饲料配方。为获得良好的鸡蛋品质，若使用红曲色素类型的产品，不仅要知道该红曲产品在饲料中的用量比例，更要通过分析检测以掌握其生产过程中不同阶段红曲红、红曲黄、红曲橙色素的含量的数据(一般在某一特征波长下测定其od值)，从而用于蛋鸡的喂养实验时，达到精准配料的目的。本发明的第一个目的是提供一种色素种类明确、色素化学结构稳定的三类红曲色素料，所述三类红曲色素料为红曲黄色素料、红曲橙色素料、红曲红色素料，由红曲菌液态发酵生产，并且在生产过程中采用色素保护措施制备得到。在一种实施方式中，所述含有红曲黄色素的发酵液为紫色红曲菌jjly-4a(monascuspurpureusjjly-4a)的发酵液；含有红曲橙色素料的发酵液为紫色红曲菌9903(monascuspurpureus9903)的发酵液。所述红曲黄色素料(或红曲橙色素料)的制备：是在含有红曲黄色素(或红曲橙色素)的发酵液中，加入食用油，使发酵液中大部分油溶性更佳的红曲黄色素(或红曲橙色素)转移到食用油中；离心分离后得到含有红曲黄色素(或红曲橙色素)的油相，将含色素的油与淀粉混合。在一种实施方式中，加入的食用油为豆油，加量为发酵液的体积的10-20％。在一种实施方式中，在油相中加入的淀粉为玉米淀粉；可选地，玉米淀粉质量为油相质量的1-2倍。在一种实施方式中，所述红曲黄色素料的色价为200-600ku/kg，红曲橙色素料的色价为200-600ku/kg。所述红曲红色素，由发酵液中的红曲黄色素和红曲橙色素转化而来。可选地，其制备：是在离心分离油相后的发酵液中加入(适量)饲料原料(含蛋白质的玉米粉或豆粕粉)，并升温到一定温度(50-60度)保持一定时间(30-60min)，发酵液的部分残留色素与饲料原料中的蛋白质、肽类物质和氨基酸会反应转变为水溶性较好的红曲红色素，然后通过烘干或喷雾干燥制备得到红曲红色素料。红曲红色素料的色价为800-1400ku/kg。本发明中，对发酵所生产的橙色素、黄色素，加入含有蛋白质的物料中，在一定条件下(一定时间内和较高温度下)，橙、黄色素会转变为红色素。因此如果不对红曲发酵液中的黄、橙色素进行保护，在发酵、发酵液的脱水及其它配料过程中，这类色素极易发生变化，从而不能达到应有的蛋黄增色效果，这将导致对于以色素为饲料中添加物的产品来说，所配制的饲料对鸡产蛋性能的改善作用是有限的、盲目的或不充足的。本发明的第二个目的是提供一种可稳定地、有效地改善蛋黄色度的蛋鸡饲料的精准配料及适合于红曲黄色素、红曲橙色素的检测方法，所述方法包括，测定本发明的色素种类明确、色素化学结构稳定的三类红曲色素料的色价，按照饲料中对三类红曲色素的终浓度的要求，称取相应的红曲色素料重量，再添加到饲料中。在一种实施方式中，所述测定色价的方法，包括：称取0.5-1g色素料，溶于50ml的70％的乙醇溶液中，如果测得od值大于0.7，再用70％的乙醇进一步稀释至od值在0.3-0.7范围内，将稀释液在特征波长下测定其od值，将od值乘以总稀释倍数，即得到其色价值。最重要的一点是要采用合适的检测波长对天然的红曲黄色素料及天然红曲橙色素料进行检测(原因是本专利所述的红曲黄色素及红曲橙色素检测时所采用的检测波长并不限定在现行的红曲产品国标中的检测方法中的检测波长中)，本专利针对不同的色素料的检测波长是：其中，在485-505nm波长范围内测定红曲红色素的od值，在380-420nm波长范围内测定红曲黄色素的od值，在450-485nm波长范围内测定红曲橙色素的od值。在一种实施方式中，所述饲料中，红曲黄色素、红曲橙色素、红曲红色素的终浓度分别为红曲黄色素的色价为0.4-10ku/kg，红曲橙色素的色价为0.4-12ku/kg，红曲红色素的色价为1-15ku/kg。本发明的第三个目的是提供一种可稳定地、有效地改善蛋黄色度的蛋鸡饲料，所述蛋鸡饲料中，含有红曲黄色素料、红曲橙色素料、红曲红色素料和饲料原料。所述红曲黄色素料、红曲橙色素料、红曲红色素料，由红曲菌液态发酵生产，并且在生产过程中采用色素保护措施制备得到。所述红曲黄色素料(或红曲橙色素料)的制备：是在含有红曲黄色素(或红曲橙色素)的发酵液中，加入食用油，使发酵液中大部分红曲黄色素(或红曲橙色素)转移到食用油中；离心分离后得到含有红曲黄色素(或红曲橙色素)的油相，将含色素的油与淀粉混合。在一种实施方式中，所述饲料原料包括玉米粉、豆粕粉、鱼粉、麸皮、米糠、食用油、贝壳粉、麦青粉、预混料，按一定比例组成。在一种实施方式中，所述蛋鸡饲料，按重量份数计，含有：红曲黄色素料0.1-2.5份、红曲橙色素料0.5-2.5份、红曲红色素料0.1-1.5份、玉米粉50-60份、豆粕粉20-30份、鱼粉1-2份、麸皮1-3份、米糠粉1-3份、食用油0.5-2份、贝壳粉7-8份、麦青粉1-3份、预混料3-5份。其中，蛋鸡饲料中，红曲黄色素的色价为0.4-10ku/kg，红曲橙色素的色价为0.4-12ku/kg，红曲红色素的色价为1-15ku/kg。所述红曲黄色素、红曲橙色素、红曲红色素的色价，是按照本发明的测定方法来测定确定的。在一种实施方式中，所述蛋鸡饲料，按重量份数计，红曲黄色素料0.5-1.2份、红曲橙色素料0.5-1.2份、红曲红色素料0.1-1.2份。本发明的有益效果：本发明采用不同的红曲菌发酵法产生的3种不同色调的红曲色素(红曲黄、红曲橙、红曲红色素)，在发酵液中加入色素的保护剂(豆油)，使发酵液中大部分红曲黄色素和橙色素转移到食用油中；离心分离后，含色素的油与淀粉混合，从而制备得到保护的红曲黄色素料和红曲橙色素料；本发明采用的保护剂为食用油和淀粉按一定的比例配制而成，可以有效地对红曲发酵液中的脂溶性的黄色素和橙色素加以保护，使得色素是化学结构稳定、不容易发生转化的，得到的各色素料中色素含量稳定且可定性定量检测。同时，按照本发明方法制备得到的红曲红色素料的色价为800-1400ku/kg、红曲黄色素料的色价为200-600ku/kg、红曲橙色素料的色价为200-600ku/kg。本发明还确定了三类红曲色素的测定色价的方法，该方法适合于本发明得到的红曲色素料的色价检测，从而可以定量地控制蛋鸡发酵饲料中的三种不同红曲色素的含量；本专利实施后的结果，从定性的角度揭示，红曲色素中，脂溶性佳的红曲黄色素和红曲橙色素对提高鸡蛋蛋黄色度的作用更大，而水溶性好的红曲红色素对相对作用较小。进一步地，本发明提供了可稳定地、有效地改善蛋黄色度的蛋鸡饲料。该饲料用于蛋鸡的喂养，可明显提高生蛋黄和熟蛋黄的颜色，具有很好的养殖效果和一定的经济效益。其中，本发明的蛋鸡饲料，与对照组相比，鸡蛋生蛋黄色度平均值可提高2-3点(罗氏比色卡)，至9-13点；蒸熟鸡蛋的蛋黄色度平均值一般可提高1-1.6(罗氏比色卡)，到4.5-5。综上，本发明，以红曲菌生物发酵法生产的红曲红、红曲黄、红曲橙色素料，采用严格的配方，组成了色素种类明确、色素用量定量化(以单位质量饲料中一定的色价数为定量依据)的“天然色素混合物”，并将其与饲料原料混合，制备成可提高鸡蛋蛋黄色度的“蛋鸡饲料”。通过多次蛋鸡喂养实验，并不断改进方法，最终获得优化的含有三种红曲色素含量稳定、用量精准的，可改善产蛋性能的蛋鸡饲料的制备方法及最佳的配方。这与之前一些专利或文献中报道的饲料中含有或添加了红曲色素的技术上有重大的区别，在国内外公开的文献中未见相同报道。附图说明图1是红曲橙色素；(a)红曲橙色素发酵液；(b)和(c)为不同色价的红曲橙色素料；(d)红曲橙色素发酵液离心后的分层情况。图2是红曲黄色素发酵液其红曲黄色素料；(a)从左至右分别为含菌体发酵液、油相、水相；(b)和(c)为不同色价的红曲黄色素料。图3是(a)烘干前红曲色素料(黄色)；(b)烘干后红曲色素料(红色)。图4是生蛋黄和蒸蛋黄的黄色度；(a)3组、4组、8组的生蛋黄色度，色度值分别为9、10、13；(b)3组、4组、8组的蒸蛋黄色度，色度值分别为3、4、7；(c)6组对照的生蛋黄色度，色度值为7；(d)6组和8组蒸熟蛋黄的比较。图5是生蛋和蒸蛋的黄色度；(a)7组、8组的生蛋黄色度，色度值分别为8、13；(b)7组、8组的蒸蛋黄色度，色度值分别为3.5、7；(c)8号蒸熟蛋黄。图6是鸡场现场图。图7为实施例1中红曲橙色素料的生产工艺流程图。图8为实施例2中红曲黄色素料的生产工艺流程图。图9为实施例3中红曲红色素料的生产工艺流程图。具体实施方式1、生物材料说明紫色红曲菌jjly-4a(monascuspurpureusjjly-4a)：已经在申请号为201410116854.6、发明名称为《一种偶联原位萃取发酵红曲黄色素的双液相发酵方法》、公开号为cn104946699a的专利文献中，于2015年09月30日公开了。紫色红曲菌9903(monascuspurpureus9903)：已经在申请号为201410117001.4、发明名称为《一种偶联原位发酵萃取红曲橙色素的双液相发酵方法》、公开号为cn104946718a的专利文献中，于2015年09月30日公开了。2、红曲色素的定性及色素含量(即色价)的测定方法红曲色素的检测方法：称取0.5-1g色素料，溶于50ml的70％的乙醇溶液中，如果测得od值大于0.7，再用70％的乙醇进一步稀释至od值在0.3-0.7范围内，将稀释液在特征波长下测定其od值，将od值乘以总稀释倍数，即得到其色价值。色价值越高，说明其色素的含量越高。红曲色素的含量，即色价，色价的定义：单位质量(g)，或单位体积(ml)的色素样品，用70％的乙醇水溶液溶解并稀释后，用分光光度计，用1cm比色皿，在一定波长下测得的吸光度值(od值)乘以其稀释倍数，色价的单位分别是ku/kg或ku/l(也可用u/g或u/ml)。红曲红色素的特征波长，一般是485-505nm之间的峰值；故检测红曲红色素，采用在485-505nm波长范围内测定其od值；天然红曲黄色素的特征波长，一般是380-420nm之间的峰值；故检测天然红曲黄色素，采用在380-420nm波长范围内测定其od值；(国家标准的红曲黄是半合成的，和本专利所提及的天然红曲黄色素，并不是同一种物质，故二者的检测波长是不同的)；红曲橙色素的特征波长，一般是450-485nm之间的峰值；故检测红曲橙色素，采用在450-485nm波长范围内测定其od值。以上红曲色素定性及定量的方法，红曲红色素料的检测参照红曲行业内的标准方法，但是本专利所制备的天然红曲黄色素料和红曲橙色素料，暂无国家标准可循，主要是根据我们样品的特性来确定的，与文献中的方法原理相同，但是检测波长的范围会有所调整，并不限定在国家标准中的方法中。3、生、熟蛋黄的比色生蛋黄的比色：每组取一枚鸡蛋，破蛋壳，将蛋黄分离出来放于另一个新的干净有贴编号的培养皿或白色瓷碟中，蛋清弃用(收集至烧杯/大碗中)，蛋壳弃用(入垃圾桶)。由3个不同的人对每一枚鸡蛋进行比色，对每一枚蛋黄使用罗氏比色卡对比蛋黄颜色，读出最接近相应色卡颜色的数字。将3个不同的人对应的鸡蛋编号比色值进行记录，并计算平均值。蒸蛋黄比色：用大锅盛适量的水，将支架放于中，蒸笼入于支架上方，使用煤气灶将水烧开。将蛋黄转移至可以加热的平底菜盘或小碗(每枚蛋黄的盘旁或碗边需有鸡蛋编号)，面上盖保鲜膜，放于蒸笼上开始计时，蒸5分钟，待蛋黄凝固。将蛋黄从蒸笼上取出，去保鲜膜开始计时，冷却3-5分钟。将蒸熟了的蛋黄取出放于对应编号的培养皿中，从中间平切开来。对每一枚蒸熟的蛋黄使用罗氏比色卡对比蛋黄颜色，读出最接近相应色卡颜色的数字，由3个不同的人对每一枚鸡蛋进行比色。将3个不同的人对应的鸡蛋编号比色值进行记录，并计算平均值。4、蛋鸡喂养试验期间，每天6:30和14:30各喂饲料1次。采用3层重叠式笼养方式，自由采食、饮水。湿帘负压通风调温，每天光照16h。每天每只母鸡食用饲料100-110g。在产蛋高峰期，鸡的产蛋率为80％以上。一般在产蛋率达到60％，开始取蛋用于检测。下面给出的实施例拟对本发明作进一步说明，但不能理解为是对本发明保护范围的限制，该领域的技术人员根据上述本发明的内容对本发明作出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。实施例1：红曲橙色素料的制备红曲橙色素料按以下方法制备所得：红曲橙色素料的生产工艺流程如图7所示：所述红曲橙色素的制备方法为：将产红曲橙色素的红曲菌种子液接种于含有(g/l)玉米淀粉60，硫酸铵5.0，kh2po42.0，k2hpo42.0，mgso4·7h2o0.5，cacl20.1，feso4·7h2o0.01，znso4·7h2o0.01，mnso4·h2o0.03，nano32.0，乳酸调节ph至4.0的培养基中，接种量，10％；发酵120h后，结束发酵，发酵液色价：450-600u/ml。向发酵液中加入10～20％(按发酵液体积计)的大豆油，在30℃下搅拌处理30min，离心，离心收集油相，加入油相质量1～2倍的玉米淀粉，混合均匀获得红曲橙色素料。油相中的色素量约占发酵液色素总量的三分之二。其中，红曲菌为紫色红曲菌9903(monascuspurpureus9903)；脂溶性红曲橙色素 玉米淀粉的脱水干燥技术：采用烘干法。水溶性的红曲红色素料采用喷雾干燥法制得粉剂，得到的红曲红色素料的色价为800-1400ku/kg。红曲橙色素发酵液、油相及制备的红曲橙色素料见图1。得到的红曲橙色素料的色价为200-600ku/kg。实施例2：红曲黄色素料的制备红曲黄色素料按以下方法制备所得：红曲黄色素料的生产工艺流程如图8所示：红曲黄色素的制备方法为：将产红曲黄色素的红曲菌种子液接种于含有(g/l)玉米淀粉60，硫酸铵5.0，kh2po42.0，k2hpo42.0，mgso4·7h2o0.5，cacl20.1，feso4·7h2o0.01，znso4·7h2o0.01，mnso4·h2o0.03，nano32.0，乳酸调节ph至4.0的培养基中，接种量，10％；发酵120h后，结束发酵，发酵液色价：450-600u/ml。向发酵液中加入10～20％(按发酵液体积计)的大豆油，在30℃下搅拌处理30min，离心，离心收集油相，加入油相体积1～2倍的玉米淀粉，混合均匀获得红曲黄色素料。油相中的色素量约占发酵液色素总量的三分之二。得到的红曲黄色素料的色价为200-600ku/kg。技术说明：红曲菌为紫色红曲菌jjly-4a(monascuspurpureusjjly-4a)；脂溶性红曲黄色素 玉米淀粉的脱水干燥技术：采用烘干法。水溶性的红曲红色素料采用喷雾干燥法制得粉剂。红曲黄色素发酵液、油相及制备的红曲黄色素料见图2。实施例3：红曲红色素料的制备红曲红色素由实施例1或实施例2的红曲黄色素或红曲橙色素发酵液分离油相后，由发酵液中的残余色素转化而来。分离油相后的发酵液中的色素量约为发酵液色素问题量的三分之一。红曲红色素料的生产工艺流程如图9所示：在实施例1或实施例2离心分离油相后的发酵液中加入3-5％(质量体积比)的饲料原料(含蛋白质的玉米粉或豆粕粉)，并升温到一定温度(50-60度)保持一定时间(30-60min)，发酵液的部分残留色素与饲料原料中的蛋白质、肽类物质和氨基酸会反应生变为水溶性较好的红曲红色素。通过在发酵液中加入玉米粉烘干或在过滤后的发酵液加入玉米淀粉，再通过喷雾干燥制备得到红曲红色素料，见图3。得到的红曲红色素料的色价为800-1400ku/kg。针对实施例1-3制备的色素色料，比较了储存不同时间段后得到的色价的变化情况。说明，通过本发明实施例1-2的方法进行对红曲色素中的黄、橙色素进行保护，可以有效保证色素的稳定性。表1不同储存时间下的色素的色价变化“-”代表未做检测。储存条件是：常温常压自然堆放。其中，与红曲黄色素料相对应的对照红曲料的制备方法：红曲黄色素的发酵液(不加豆油进行离心分离)直接与玉米粉按1比1(质量比)混合，60度烘干，得红曲黄色素料的对照。拌料时颜色是正常的黄色素料，烘干后，即变为红色，说明一部分黄色素转变为了红色素，类似于图3(b)。引起色素料变化的主要因素一个是在发酵液中加入的是含有蛋白质、肽和氨基酸的玉米淀粉或豆粕粉；另一个因素是在烘干过程中温度的升高，加速了色素物质的变化。与红曲橙色素料相对应的对照红曲料的制备方法：红曲橙色素的发酵液(不加豆油进行离心分离)直接与玉米粉按1比1(质量比)混合，60度烘干，得红曲橙色素料的对照。拌料时颜色是正常的橙色素料，烘干后，即变为红色，说明一部分橙色素转变为了红色素。引起色素料变化的主要因素同上。实施例4：蛋鸡饲料的配制、蛋鸡喂养及蛋黄色度的检测蛋鸡饲料配方见表2。红曲红色素料(实施例3制备得到)，色价(505nm所测)1000ku/kg，在饲料中的加入量为2kg/t。红曲橙色素料和红曲黄色素料(实施例1和2制备得到)，均为通过液态发酵及稳定性处理后制备得到。其中，红曲黄色素料色价(400-420nm所测)为600ku/kg(见图2(c))，在饲料中的加入量为10kg/t；红曲橙色素色价(460-480nm所测)为300ku/kg(见图1(c))，在饲料中的加入量为6.7kg/t。在饲料中，红曲色素的总色价为10ku/kg。表2饲料配料表3#蛋黄高用量(kg)色价含量(ku/kg)饲料中的单位色价(ku/kg)红曲黄色素料106006.00红曲橙色素料6.73002.01红曲红色素料210002.00豆粕粉2400玉米粉551.30贝壳粉700米糠200麸皮200鱼粉100食用油100麦青粉200预混料40总量100010.01预混料是购自佛山播恩生物科技有限公司的型号为433型4％产蛋期复合预混合饲料产品。对蛋鸡进行喂养，具体是：试验期间，每天6:30和14:30各喂饲料1次。采用3层重叠式笼养方式，自由采食、饮水。湿帘负压通风调温，每天光照16h。每天每只母鸡食用饲料100-110g。在产蛋高峰期，鸡的产蛋率为80％以上。一般在产蛋率达到60％，开始取蛋用于检测。表2的配方饲料喂养，部分生蛋黄及蒸熟蛋黄的比色结果见图4。结果显示，编号为3(即本实施例配方喂养)的生黄蛋黄色度达到9以上。蒸煮后的蛋黄色度为3以上。具体地，所喂养的鸡蛋的蛋黄色度见表3(鸡蛋平行数为4)。表3此外，不加色素的空白饲料(其他组分和比例都一样，仅不加任何红曲色素料)以同样的方法进行喂养，同样的条件和时期下进行检测，生蛋蛋黄色度为7。见图4(c)的6号蛋，生蛋黄色度平均色度值为7。实施例5：蛋鸡饲料的配制、蛋鸡喂养及蛋黄色度的检测蛋鸡饲料配方见表4。红曲红色素料(实施例3制备得到)，色价(505nm所测)1000ku/kg，在饲料中的加入量为2kg/t。红曲橙色素料和红曲黄色素料(实施例1和2制备得到)，均为本公司通过液态发酵及稳定性处理后制备得到。其中，红曲黄色素料色价(400-420nm所测)为300ku/kg(见附图2(b))，在饲料中的加入量为6.7kg/t；红曲橙色素色价(460-480nm所测)为600ku/kg(见附图1(b))，在饲料中的加入量为10kg/t。在饲料中，红曲色素的总色价为10ku/kg。表4饲料配料表4#蛋橙高配料用量(kg)色价含量(ku/kg)饲料中的单位色价(ku/kg)红曲黄色素料6.73002.01红曲橙色素料106006.00红曲红色素料210002.00豆粕粉2400玉米粉551.30贝壳粉700米糠200麸皮200鱼粉100食用油100麦青粉200预混料400总量100010.01预混料是购自佛山播恩生物科技有限公司的型号为433型4％产蛋期复合预混合饲料产品。表4的配方饲料喂养，生蛋黄及蒸熟蛋黄的比色结果见图4。结果显示，编号为4生黄蛋黄色度达到10以上，蒸煮后的蛋黄色度为4以上。具体地，所喂养的鸡蛋的蛋黄色度见表5(鸡蛋平行数为4)。值得注意的是，3组(实施例4)和4组(实施例5)虽然饲料中的总色素含量相同，色价均为10ku/kg，但由于所加入的色素类型不同，故两者生蛋黄的色度有较大的区别。表5此外，不加色素的空白饲料(即在表4配料表的基础上去除色素料)以同样的方法进行喂养，同样的条件和时期下进行检测，生蛋蛋黄色度和熟蛋蛋黄色度与实施例4的空白饲料基本一致。实施例6：蛋鸡饲料的配制、蛋鸡喂养及蛋黄色度的检测本实施例蛋鸡饲料配方见表6。红曲红色素料(实施例3制备得到)，色价(505nm所测)1000ku/kg；在饲料中的加入量为8kg/t。红曲橙色素料和红曲黄色素料(实施例1和2制备得到)，均为本公司通过液态发酵及稳定性处理后制备得到；其中，红曲黄色素料色价(400-420nm所测)为400ku/kg，见图2(图1和图2中的红曲橙色素料和红曲黄色素料的图片，只是部分色价不同的样品，色价有高有低；但不可能也没有必要做所有色价的色素料；使用时，只需要将高色价的红曲料和低色价的红曲料按一定的比例混合，就可以得到在高色价和低色价之间的任何色价的红曲色素料)，在饲料中的加入量为1kg/t；红曲橙色素色价(460-480nm所测)为400ku/kg，见图1，在饲料中的加入量为1kg/t。在饲料中，红曲色素的总色价为12ku/kg。表6饲料配料表预混料是购自佛山播恩生物科技有限公司的型号为433型4％产蛋期复合预混合饲料产品。表6的配方饲料喂养，生蛋黄及蒸熟蛋黄的比色结果见图5。结果显示，7号生黄蛋黄色度达到8，蒸煮后的蛋黄色度为3。具体地，所喂养的鸡蛋的蛋黄色度见表7(鸡蛋平行数为4)。表7此外，不加色素的空白饲料以同样的方法进行喂养，同样的条件和时期下进行检测，生蛋蛋黄色度和熟蛋蛋黄色度与实施例4的空白饲料基本一致。实施例7：蛋鸡饲料的配制、蛋鸡喂养及蛋黄色度的检测本实施例蛋鸡饲料配方见表8。红曲红色素料(实施例3制备得到)，色价(505nm所测)1000ku/kg；在饲料中的加入量为12kg/t。红曲橙色素料和红曲黄色素料(实施例1和2制备得到)，均为本公司通过液态发酵及稳定性处理后制备得到；其中，红曲黄色素料色价(400-420nm所测)为400ku/kg，在饲料中的加入量为8kg/t；红曲橙色素色价(460-480nm所测)为400ku/kg，在饲料中的加入量为12kg/t。在饲料中，红曲色素的总色价为20ku/kg。表8饲料配料表预混料是购自佛山播恩生物科技有限公司的型号为433型4％产蛋期复合预混合饲料产品。表8的配方饲料喂养，生蛋黄及蒸熟蛋黄的比色结果见图4。结果显示，编号为8的生黄蛋黄色度达到13。蒸煮后的蛋黄色度为7，具体地，所喂养的鸡蛋的蛋黄色度见表9(鸡蛋平行数为4)。从表8及表9的结果可以看出，在饲料中的色素含量越大，生蛋黄的色度值也越大，蒸熟蛋黄色度也是较大。我们还注意到，在所有实验组中，表8中，虽然总色素含量最高，但这主要是红色素的用量最大，即红色素的比例最大，但是鸡蛋的色度相对于实施例8(见表10和表11)，并没有明显提高，这说明红色素对提高蛋黄色度的作用相对较小，而橙色素和黄色素所起的作用更大。表9此外，不加色素的空白饲料以同样的方法进行喂养，同样的条件和时期下进行检测，生蛋蛋黄色度和熟蛋蛋黄色度与实施例4的空白饲料基本一致。实施例8：蛋鸡饲料的配制、蛋鸡喂养及蛋黄色度的检测本实施例蛋鸡饲料配方见表10。红曲红色素料(实施例3制备得到)，色价(505nm所测)1000ku/kg；在饲料中的加入量为1kg/t.红曲橙色素料和红曲黄色素料(实施例1和2制备得到)，均为本公司通过液态发酵及稳定性处理后制备得到；其中，红曲黄色素料色价(400-420nm所测)为600ku/kg，在饲料中的加入量为8kg/t；红曲橙色素色价(460-480nm所测)为600ku/kg，在饲料中的加入量为10.9kg/t。在饲料中，红曲色素的总色价为12.0ku/kg。表10饲料配料表8-2#蛋最佳配料用量(kg)色价含量(ku/kg)饲料中的单位色价(ku/kg)红曲黄色素料86004.8红曲橙色素料116006.6红曲红色素料110001豆粕粉2400玉米粉5590贝壳粉700米糠200麸皮210鱼粉100食用油100麦青粉100预混料40总量100012.4预混料是购自佛山播恩生物科技有限公司的型号为433型4％产蛋期复合预混合饲料产品。表10的配方饲料喂养，生蛋黄及蒸熟蛋黄的比色结果见图5。结果显示，8号生黄蛋黄色度达到13，蒸煮后的蛋黄色度为7，具体地，所喂养的鸡蛋的蛋黄色度见表11(鸡蛋平行数为4)。值得注意的是7组，虽然色素的添加量(以色价表示，见表5)与8-2组相同，但由于所加入的色素的种类不同，故8-2组的生蛋黄色度明显高于7组(见表6)。表11此外，不加色素的空白饲料以同样的方法进行喂养，同样的条件和时期下进行检测，生蛋蛋黄色度和熟蛋蛋黄色度与实施例4的空白饲料基本一致。实施例9：单一色素配制的蛋鸡饲料，及其对蛋鸡喂养的蛋黄色度的影响本实施例蛋鸡饲料配方见表12、表13、表14。其中红曲红色素料，色价(505nm所测)800ku/kg；在饲料中的加入量为10kg/t；红曲黄色素料，色价(420nm所测)400ku/kg；红曲橙色素料(465nm所测)，色价也是400ku/kg。生蛋黄及蒸熟蛋黄的比色结果见表15。表12饲料配料表表13饲料配料表表14饲料配料表预混料是购自佛山播恩生物科技有限公司的型号为433型4％产蛋期复合预混合饲料产品。表15单一色调色素饲料鸡蛋蛋黄色度此外，不加色素的空白饲料以同样的方法进行喂养，同样的条件和时期下进行检测，生蛋蛋黄色度和熟蛋蛋黄色度与实施例4的空白饲料基本一致。当前第1页1 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技术特征：1.一种色素种类明确、色素化学结构稳定的三类红曲色素料，其特征在于，所述三类红曲色素料为红曲黄色素料、红曲橙色素料、红曲红色素料，由红曲菌液态发酵，并经过一定的制备过程生产得到；
所述红曲黄色素料或红曲橙色素料的制备：是在含有红曲黄色素或红曲橙色素的发酵液中，加入食用油，使发酵液中大部分红曲黄色素或红曲橙色素转移到食用油中；离心分离后得到含有红曲黄色素或红曲橙色素的油相，将含色素的油与淀粉混合；
所述红曲红色素料，由发酵液中的红曲黄色素和红曲橙色素转化而来。
2.根据权利要求1所述的三类红曲色素料，其特征在于，加入的食用油为豆油，加量为发酵液的体积的10-20％；可选地，在油相中加入的淀粉为玉米淀粉；可选地，玉米淀粉质量为油相质量的1-2倍。
3.根据权利要求1所述的三类红曲色素料，其特征在于，所述含有红曲黄色素的发酵液为紫色红曲菌jjly-4a(monascuspurpureusjjly-4a)的发酵液；含有红曲橙色素料的发酵液为紫色红曲菌9903(monascuspurpureus9903)的发酵液。
4.根据权利要求1所述的三类红曲色素料，其特征在于，红曲红色素料的制备：是在离心分离油相后的发酵液中加入饲料原料，并升温到一定温度保持一定时间，发酵液的部分残留色素与饲料原料中的蛋白质、肽类物质和氨基酸会反应生变为水溶性较好的红曲红色素，然后通过喷雾干燥制备得到红曲红色素料。
5.一种可稳定地、有效地改善蛋黄色度的蛋鸡饲料的精准配料方法，其特征在于，所述方法包括，测定权利要求1的色素种类明确、色素化学结构稳定的三类红曲色素料的色价，按照饲料中对三类红曲色素的终浓度的要求，称取相应的红曲色素料重量，再添加到饲料中。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述测定色价的方法，包括：称取0.5-1g色素料，溶于50ml的70％的乙醇溶液中，如果测得od值大于0.7，再用70％的乙醇进一步稀释至od值在0.3-0.7范围内，将稀释液在特征波长下测定其od值，将od值乘以总稀释倍数，即得到其色价值；其中，在485-505nm波长范围内测定红曲红色素的od值，在380-420nm波长范围内测定红曲黄色素的od值，在450-485nm波长范围内测定红曲橙色素的od值。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述蛋鸡饲料中，红曲黄色素、红曲橙色素、红曲红色素的终浓度分别为红曲黄色素的色价为0.4-10ku/kg，红曲橙色素的色价为0.4-12ku/kg，红曲红色素的色价为1-15ku/kg。
8.一种可稳定地、有效地改善蛋黄色度的蛋鸡饲料，其特征在于，所述蛋鸡饲料中，含有红曲黄色素料、红曲橙色素料、红曲红色素料和饲料原料；红曲黄色素的色价为0.4-10ku/kg，红曲橙色素的色价为0.4-12ku/kg，红曲红色素的色价为1-15ku/kg。
9.根据权利要求8所述的蛋鸡饲料，其特征在于，所述饲料原料包括玉米粉、豆粕粉、鱼粉、麸皮、米糠、食用油、贝壳粉、麦青粉、预混料。
10.根据权利要求8所述的蛋鸡饲料，其特征在于，所述蛋鸡饲料，按重量份数计，含有：红曲黄色素料0.1-2.5份、红曲橙色素料0.5-2.5份、红曲红色素料0.1-1.5份、玉米粉50-60份、豆粕粉20-30份、鱼粉1-2份、麸皮1-3份、米糠粉1-3份、食用油0.5-2份、贝壳粉7-8份、麦青粉1-3份、预混料3-5份。其中，蛋鸡饲料中，红曲黄色素的色价为0.4-10ku/kg，红曲橙色素的色价为0.4-12ku/kg，红曲红色素的色价为1-15ku/kg。
技术总结本发明公开了一种可增加蛋黄色度的能实现精准配料的蛋鸡饲料，属于生物发酵饲料生产技术领域。本发明的蛋鸡饲料中的红曲色素料是由红曲菌通过液态发酵法生产且通过一系列的关键技术和措施保护其中的红曲黄色素和红曲橙色素的化学结构和含量的稳定性。红曲色素料，可以通过色价测定后，按一定比例添加到饲料中，其中饲料中红曲黄色素的色价为0.4‑10KU/Kg，红曲橙色素色价为0.4‑12KU/Kg，红曲红色素色价为1‑15KU/Kg。本发明的饲料喂养一定生长阶段的蛋鸡，可提高鸡蛋蛋黄(生蛋黄及煮熟蛋黄)的色度值。本发明揭示红曲色素的种类及添加量对提高鸡蛋品质的作用，可以实现蛋鸡饲料的精准配料，达到稳定地、有效地改善蛋鸡的蛋黄色度的作用。
技术研发人员：许赣荣;邢宏博;倪冬姣;张增玉;熊爱军;邓诗贵;曾李;刘善平;邹新华
受保护的技术使用者：播恩生物技术股份有限公司;佛山播恩生物科技有限公司
技术研发日：2020.02.05
技术公布日：2020.06.09
