1.本发明涉及与粘蛋白17(muc17)结合的抗体。此外，本发明涉及包含此类抗体的检测系统。这些抗体或检测系统可以用于检测或定量muc17，用于诊断与muc17相关联的疾病，用于患者分层、监测疾病进展以及评价治疗应答。2.粘蛋白已被鉴定为炎症和癌症疾病的令人感兴趣的标志物。粘蛋白是高分子量糖蛋白，其特征在于串联重复结构域内丝氨酸和苏氨酸残基处的高水平o-糖基化(johansson和hansson,nat.rev.immunology[自然综述：免疫学]2016)。存在至少20个粘蛋白家族成员，包括分泌蛋白和跨膜蛋白，它们由不同组织中的上皮细胞表达(corfield,biochim.biophys.acta[生物化学与生物物理学学报]2013)。粘蛋白的主要功能在于粘膜层的结构和粘膜层的调控，该粘膜层在上皮细胞与环境之间形成保护性屏障(hollingsworth和swanson,nat.rev.cancer[自然综述：癌症]2004；hattrup和gendler,annu.rev.physiol.[生理学年评]2008)。跨膜粘蛋白也在细胞信号传导(对包括增殖和细胞凋亡的调控)，以及在肿瘤发生中起作用(hollingsworth和swanson,nat.rev.cancer[自然综述：癌症]2004)。在粘蛋白中，粘蛋白17(muc17)是最初通过其与muc3的同源性鉴定的跨膜粘蛋白(gum等人,biochem.biophys.res.comm.[生物化学与生物物理研究通讯]2002)。[0003]对muc17的完整编码序列的分析揭示，它具有由61个串联重复序列的中心区构成的大的细胞外结构域、表皮生长因子(egf)结构域、海胆精子蛋白、肠激酶和集聚蛋白(sea)结构域，以及第二egf结构域。sea结构域含有在其他粘蛋白中保守的推定的裂解位点(moniaux等人,j.biol.chem.[生物化学杂志]2006)。muc17是单次跨膜蛋白，具有在细胞内的80个氨基酸的胞质尾(moniaux等人,j.biol.chem.[生物化学杂志]2006)。muc17在健康成人中的表达局限于内衬于肠的肠上皮细胞或成熟吸收性上皮细胞的顶端表面(moniaux等人,j.biol.chem.[生物化学杂志]2006；johanasson和hansson,nat.rev.immunology[自然综述：免疫学]2016)。muc17也由胃和胰腺表达(moniaux等人,j.biol.chem.[生物化学杂志]2006；moehle等人,j.mol.med.[分子医学杂志]2006)。muc17的生物学功能被认为是维持肠道中的粘膜屏障完整性，诸如通过粘膜恢复(luu等人,int.j.biochem.cellbiol.[国际生物化学与细胞生物学杂志]2010；resta-lenert等人,am.j.physiology[美国生理学杂志]2011；johanasson和hansson,nat.rev.immunology[自然综述：免疫学]2016)。[0004]muc17在一些癌症中异常表达。muc17mrna经证明在一种胰腺癌细胞系和三种结肠癌细胞系中表达(gum等人2002)。免疫组织化学研究确认了muc17蛋白在胰腺癌中的表达(moniaux等人2006)。然而，在结肠癌中，muc17蛋白表达显示出降低(senapati等人,j.clin.pathol.[临床病理学杂志]2010)。虽然如此，muc17的表达模式使其成为用于治疗不同形式的恶性肿瘤的潜在靶标。启动了使用抗muc17抗体构建体进行的临床试验，以测试其治疗胃肠癌和胃食管结合部癌的适用性(clinicaltrials.gov；nct04117958)。技术实现要素：[0005]鉴于文献中关于muc17作为病理学病状的潜在靶标的相互矛盾的含义，本发明的目标是清楚地鉴定与muc17上调相关联的特定病状，并且提供选择性结合muc17的结合物(例如，抗体)，以用作muc17相关病状中的诊断工具，优选地用于检测/诊断所述特定病状和/或在治疗性发明之前、与之同时和之后监测疾病状态。监测用于确定给定治疗的成功，并且允许主治医师确定治疗是否有效或是否不足以及是否需要修改。[0006]理想地，诊断抗体与一个区域结合，该区域类似于治疗性抗体构建体所识别或靶向的区域。由于肿瘤抗原自身可以呈现不同的剪接形式或者可以具有影响靶标的三维结构的突变，因此希望验证该治疗性抗体的靶标是否存在于给定患者中，以及该患者是否有资格进行这种治疗。当给定患者中不存在肿瘤抗原的靶区域时，鉴于与治疗相关联的潜在不良事件，用选择性结合的治疗性抗体构建体进行治疗可能不是有利的。进一步，患者不会进行不适当和潜在不利的、令人筋疲力尽且成本高昂的治疗，而是可以用更可能有效的替代治疗方法进行治疗。应记住，接受免疫疗法的患者通常是重症患者。此类患者经常是一线疗法难治性的或经历过复发和/或具有对初始疗法不产生应答的转移。不希望在没有明确的诊断基础证明用免疫治疗性化合物进行治疗是合理的且有医学依据的情况下治疗此类患者。[0007]因此，本发明提供了一种与muc17结合的抗体。该抗体可以在诊断方法中在组织样品上使用，这些组织样品从个体、特别是从怀疑患有与异常muc17表达相关联和/或可通过异常muc17表达鉴定的肿瘤性疾病，例如胃肠癌、胰腺癌等的患者获得。[0008]该抗体还可以充当在实验室动物中，例如在先前处死的患癌动物中检测muc17的诊断工具。[0009]此外，本发明提供了一种编码该抗体构建体的多核苷酸、包含此多核苷酸的载体、和表达该构建体的宿主细胞以及包含其的诊断组合物和包含作为诊断工具的本发明的抗体和另外的成分的试剂盒，这些另外的成分包括但不限于第二抗体、酶、缓冲液、使用说明书、校准工具、对照等中的至少一种。[0010]本发明的实施例[0011]在第一实施例中，本发明涉及一种与如seqidno:1中描绘的人muc17结合的抗体，其中所述抗体结合细胞表面相关muc17蛋白。[0012]在第二实施例中，本发明涉及一种与如seqidno:1中描绘的人muc17结合的抗体，其中所述抗体结合细胞表面相关muc17蛋白，其中所述抗体包含含有seqidno:4中描绘的cdr3区的可变重链。[0013]在第三实施例中，本发明涉及根据实施例1和2所述的抗体，其中所述抗体进一步包含如seqidno:2和3中描绘的重链cdr1和cdr2区和/或seqidno:6、7和8中描绘的轻链cdr1、cdr2和/或cdr3区。[0014]在第四实施例中，本发明涉及根据前述实施例中任一项所述的抗体，其中单克隆抗体包含由seqidno:5和9中描绘的序列组成的vh区和/或vl区。[0015]在第五实施例中，本发明涉及根据前述实施例中任一项所述的抗体，其中该抗体是单克隆抗体。[0016]在第六实施例中，本发明涉及根据前述实施例中任一项所述的抗体，其中该抗体与免疫组织化学测定中的人和食蟹猴muc17、荧光激活细胞分选测定中的表达muc17的细胞、以及表达muc17的固定且透化细胞特异性地结合，任选地其中该抗体不与分泌形式的humuc17结合。[0017]在第七实施例中，本发明涉及根据前述实施例中任一项所述的抗体，其中该抗体包含seqidno:5中包含的vh区和根据seqidno:9的vl区。[0018]在第八实施例中，本发明涉及根据前述实施例中任一项所述的抗体，该抗体是igg、igd、ige、igm或iga抗体，优选地是igg抗体，诸如igg1、igg2、igg3或igg4抗体。[0019]在所述实施例内，在本发明的上下文中进一步设想提供一种抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4171至4296的表位结合。[0020]在所述实施例内，在本发明的上下文中还设想提供一种抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4184至4291的表位结合。[0021]在所述实施例内，在本发明的上下文中进一步设想提供一种抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4131至4243的表位结合。[0022]在所述实施例内，在本发明的上下文中还设想提供一种抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4244至4389的表位结合。[0023]在所述实施例内，在本发明的上下文中进一步设想提供一种抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4131至4243的表位结合，但不与muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4244至4389的表位结合。[0024]在所述实施例内，在本发明的上下文中还设想提供一种抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4171至4390或根据uniprotq685j3编号的氨基酸4184至4390的表位结合，但不与muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4291至4390的表位或muc17内对应于根据uniprotq685j3编号的氨基酸4341至4390的表位结合。[0025]在第九实施例中，本发明涉及一种多核苷酸，该多核苷酸编码根据前述实施例中任一项所述的抗体。[0026]在第十实施例中，本发明涉及载体，该载体包含根据实施例九所述的多核苷酸。[0027]在第11实施例中，本发明涉及宿主细胞，这些宿主细胞经根据第十实施例所述的多核苷酸或经根据第九实施例所述的载体转化或转染。[0028]在第12实施例中，本发明涉及一种用于产生根据实施例一至八中任一项所述的抗体的工艺，所述工艺包括在允许所述抗体表达的条件下培养如实施例十所述的宿主细胞并从培养物中回收所产生的抗体。[0029]在第13实施例中，本发明涉及杂交瘤，该杂交瘤产生根据前述实施例一至八中任一项所述的抗体。[0030]在第14实施例中，本发明涉及一种组合物，该组合物包含根据实施例一至八中任一项所述的或根据第12实施例所述的工艺产生的抗体。[0031]在第15实施例中，本发明涉及一种检测系统，该检测系统包含根据实施例1至8中任一项所述的或根据实施例12所述的工艺产生的抗体。[0032]在第16实施例中，本发明涉及根据实施例1-8中任一项所述的或根据实施例12所述的工艺产生的抗体或根据实施例15所述的检测系统在诊断方法中的用途。[0033]在第17实施例中，本发明涉及根据实施例1-8中任一项所述的或根据实施例12所述的工艺产生的抗体、根据实施例14所述的组合物、或根据实施例15所述的检测系统，该抗体、组合物、或检测系统用于在检测肿瘤性生长的方法中使用。[0034]在第18实施例中，本发明涉及用于根据实施例17所述在检测肿瘤性生长的方法中使用的抗体或检测系统，该方法包括确定来自怀疑患有癌症的患者的样品和阴性对照样品以及任选地阳性对照样品中的muc17表达量。[0035]在第19实施例中，本发明涉及用于根据实施例17和18中任一项所述在检测肿瘤性生长的方法中使用的抗体或检测系统，该方法包括确定来自怀疑患有癌症的患者的样品和阴性对照样品中的muc17表达量，进一步包括在这些样品之间比较muc17表达量，任选地其中阴性对照和/或阳性对照中的表达量可以衍生自在检测肿瘤性生长的方法中获得的至少一个阴性对照样品和/或至少一个阳性对照样品中的存储数据，该方法包括确定muc17表达量，进一步任选地，其中阴性对照样品和/或阳性对照样品中的表达量可以衍生自包括在检测肿瘤性生长的方法中获得的多于一个阴性对照样品和/或多于一个阳性对照样品的平均表达量的存储数据，该方法包括确定muc17表达量。[0036]在第20实施例中，本发明涉及用于根据实施例17和19中任一项所述在检测肿瘤性生长的方法中使用的抗体或检测系统，该方法包括确定样品中的muc17表达量，其中该样品是固体组织样品或液体组织样品。[0037]在第21实施例中，本发明涉及一种用于检测和/或定量样品中的muc17表达的方法，该方法包括以下步骤：[0038](a)使用根据前述实施例中任一项所述的或根据前述实施例中任一项产生的抗体，或使用根据实施例15所述的检测系统，用于确定样品中的muc17表达量；以及[0039](b)将步骤(a)中确定的muc17表达量与以下比较：[0040](c)muc17表达量的预定义值，[0041](d)对照样品中确定的muc17表达量，或[0042](e)在先前时间点处从同一来源或受试者获得的样品中确定的muc17表达量。[0043]在第22实施例中，本发明涉及一种用于诊断与muc17表达量或增加的muc17表达量相关联的肿瘤性疾病的方法，该方法包括以下步骤：[0044](a)使用根据实施例中任一项所述的或根据实施例中任一项产生的抗体，或使用根据实施例15所述的检测系统，用于确定样品中的muc17表达量；以及[0045](b)将步骤(a)中确定的muc17表达量与以下比较：[0046](c)指示这种疾病不存在的muc17表达量的预定义截止值，或[0047](d)代表这种肿瘤性疾病不存在的在阴性对照样品中确定的muc17表达量，[0048]其中与(i)的预定义截止值或(ii)的在阴性对照样品中确定的muc17表达量相比，步骤(a)中确定的muc17表达量更高指示存在与muc17表达或增加的muc17表达量相关联的疾病。[0049]在第23实施例中，本发明涉及一种用于监测与muc17表达或与增加的muc17表达量相关联的疾病的进展或用于监测对与muc17表达或与增加的muc17表达量相关联的疾病的治疗的应答的方法，该方法包括以下步骤：[0050](a)使用如前述实施例中任一项所述的抗体，或使用如实施例15所述的检测系统，用于在第一个时间点处确定从被诊断患有这种疾病的受试者获得的样品中的muc17表达量；[0051](b)使用如前述实施例中任一项所述的抗体，或使用如实施例15所述的检测系统，用于在第二个时间点处或在治疗之后确定从该受试者获得的样品中的muc17表达量；以及[0052](c)将步骤(a)中确定的muc17表达量与步骤(b)中确定的muc17表达量比较；[0053]其中与步骤(b)中确定的muc17表达量相比，步骤(a)中确定的muc17表达量更高指示疾病正在进展，并且/或者其中与步骤(b)中确定的muc17表达量相比，步骤(a)中确定的muc17表达量更低指示所述疾病正在进入缓解期或所述疾病对该治疗产生应答。[0054]在第24实施例中，本发明涉及用于如实施例16至20中任一项所述使用的用途或产物或如实施例21至23中任一项所述的方法，其中该样品是生物学样品，优选地是人生物学样品，诸如组织样品或包含培养细胞的样品。[0055]在第25实施例中，本发明涉及用于如实施例16至20中任一项所述使用的用途或产物或如实施例21至24中任一项所述的方法，其中该样品从人受试者，优选地怀疑患有或患有与muc17表达或增加的muc17表达量相关联的疾病的人受试者，或者已接受与muc17表达或增加的muc17表达量相关联的疾病的治疗的受试者获得。[0056]在第26实施例中，本发明涉及用于如实施例16至20中任一项所述使用的用途或产物或如实施例21至25中任一项所述的方法，其中该疾病选自下组，该组由以下组成：食管癌、胃癌、胃食管癌(包括胃食管结合部癌，gjc)、胃肠癌、和胰腺癌。[0057]在第27实施例中，本发明涉及如本文以上定义的产物中的任一种用于在免疫组织化学方法(ihc方法)中检测muc17表达的用途，该方法包括提供组织样品(包括液体活检材料，例如从个体或动物或从细胞培养物获得的细胞)的步骤。样品材料通常提供在支持物，例如载剂诸如玻璃或塑料载玻片上。可以使用本领域已知的固定介质固定组织，诸如石蜡、乙醇、或丙酮、或确保将组织或细胞固定在支持物上的任何其他合适的介质。随后制备样品，例如脱石蜡，与允许本文所述的抗体接近目的靶(此处为muc17)的培养基一起温育。随后将组织与包含足够量的本文披露的抗体的培养基一起温育，以允许这些抗体与组织样品中存在的muc17结合。在通常已知且合理的时间量之后，通常通过在介质诸如pbs中洗涤支持物和组织来停止组织与抗体的温育。温育步骤和洗涤步骤两者都可以在室温下进行，但是升高的温度或更低的温度，例如从2℃-50℃是可能的。通常，温育温度取决于温育持续时间。例如，可以在4℃下过夜染色组织，但同样可以在更高的温度下，例如在约30℃至40℃下，例如在37℃下将温育时间缩短至几分钟。为了检查温育介质、固定介质、孵育时间和温度的影响，通常使用已知表达靶标(此处为muc17)的阳性对照材料和已知不表达muc17的样品的阴性对照进行测试。也可以(任选地，另外)使用本发明的抗体产物和封闭表位，即对应于被本文所述的抗体特异性/选择性识别或结合的那些的表位进行阴性对照。在滴定测定中将这些封闭表位添加到阳性对照材料中。因此可以确定阻止本发明的抗体特异性和/或选择性检测muc17的表位的浓度。以这种方式，阳性对照-在存在封闭表位的情况下-不再充当阳性对照，因为结合muc17的抗体的量被足够量的使抗体饱和的封闭表位封闭。确定封闭表位和抗体的正确量以进行适当的阳性和阴性对照是免疫细胞化学并且特别是免疫组织化学
技术领域：
：的技术人员已知的事情。一旦适当对照可用，可以分析测试材料，例如从怀疑患有可以通过病理性增强/分布的muc17表达表征的疾病例如癌症的患者获得的材料。如以下进一步讨论的，抗体可以携带可检测标记，或者它们可以被携带这种标记的另一种结合物识别。这些技术的术语被本领域技术人员称为直接免疫细胞学/免疫组织化学检测和间接免疫细胞学/免疫组织化学检测。一旦对组织样品和对照进行了所需的温育步骤和洗涤步骤，就可以准备组织进行分析，例如使用基于免疫荧光的检测系统。可以确定可检测标记的强度和数量，并且与阳性和阴性对照和/或与已知标准值进行比较。基于此，科学家们能够得出关于样品是否为muc17表达阳性的结论。附图说明[0058]图1a至图1c示出了经由免疫组织化学，muc17在胃癌中高表达。使用本文所述的抗体的免疫组织化学揭示了人转移性胃癌组织切片中的多灶性、弥漫性muc17染色(棕色染色)(图1a至图1b)，而muc17表达仅限于正常人胃肠道(即肠上皮细胞)中的顶膜中(图1c)。[0059]定义[0060]因此，在一个方面，本发明提供了一种与muc17结合的抗体(或其部分或衍生物)。在下文中，每当使用术语“抗体”(即与muc17结合的抗体)时，该术语意味着还涵盖“抗体片段”，它们将在下文中定义。此外，以下提供的本发明的“抗体”(例如，与muc17结合的单克隆抗体)的定义和说明类似地适用于任何化学或酶促修饰的抗体，例如携带标记(诸如荧光、放射性、发光或显色标记)或能够产生可检测信号的酶的抗体。“可检测信号”意指可以使用本领域已知的方法测量muc17抗体上的标记强度。[0061]“抗体”(有时也称为免疫球蛋白)是与其靶标免疫特异性地结合的蛋白质。抗体通过其可变区识别被称为抗原的唯一靶标。“抗体”可以是任何免疫球蛋白同种型，包括igg(包括igg1、igg2、igg3和igg4亚型)、iga(包括iga1和iga2亚型)、igm和ige。术语“抗体”可以包括例如单克隆抗体、嵌合抗体、重组抗体、去免疫抗体、亲和性成熟抗体、人源化抗体和人抗体，以及来自诸如啮齿动物、兔、小鼠、大鼠、仓鼠、山羊等其他物种的抗体。抗体可以仅衍生自单一来源，或者可以是“嵌合的”，也就是说，抗体的不同部分(诸如cdr、框架区、可变区、恒定区)可以衍生自两种不同的抗体。根据本发明的“抗体”的定义包括全长抗体，还包括通过生物技术或蛋白质工程方法或过程生成的骆驼抗体和其他免疫球蛋白。抗体也可以在杂交瘤中产生。[0062]完整的igg抗体通常包含两条全长重链和两条全长轻链。“轻链”包括具有一个结构域的可变区(“vl”)和具有一个结构域的恒定区(“cl”)。轻链的可变区位于多肽的氨基末端。轻链包括κ链和λ链。“重链”包括具有一个结构域的可变区(“vh”)和具有-在完整igg抗体的情况下-三个结构域的恒定区(“ch”)：ch1、ch2和ch3。vh位于多肽的氨基末端处，并且ch结构域位于羧基末端处，其中ch3最接近该多肽的羧基末端。[0063]在经典的全长抗体或免疫球蛋白中，每条轻(l)链通过一个共价二硫键与重(h)链连接，而两条h链通过一个或多个二硫键彼此连接，这取决于h链同种型。通常将最靠近vh的重链恒定(ch)结构域命名为ch1。恒定(“c”)结构域不直接参与抗原结合，但表现出各种效应子功能，诸如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)和补体激活(补体依赖性细胞毒性，cdc)。抗体的fc区是经典抗体的“尾部”区域，其与被称为fc受体的细胞表面受体和补体系统的一些蛋白质相互作用。在igg、iga和igd抗体同种型中，fc区由从抗体的两条重链的第二和第三恒定结构域(ch2和ch3)衍生的两个相同的蛋白质片段构成。igm和igefc区在每条多肽链中含有三个重链恒定结构域(ch2、ch3和ch4)。fc区还含有通过一个或多个二硫键和非共价相互作用保持在一起的所谓“铰链”区的部分。天然存在的igg的fc区具有高度保守的n-糖基化位点。fc片段的糖基化是fc受体介导的活性所必需的。[0064]设想本发明的单克隆抗体可以是igg、igd、ige、igm或iga抗体。根据一个实施例，该单克隆抗体是igg抗体，诸如igg1、igg2、igg3或igg4抗体。该抗体的同种型和亚类可以是小鼠、兔、仓鼠等的(例如，小鼠igg、小鼠igg1等)。[0065]在本发明的上下文中，术语“可变”是指抗体或免疫球蛋白结构域表现出其序列可变性并且参与确定特定抗体的特异性和结合亲和力的那些部分(即“一个或多个可变区”)。通常，重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)的配对一起形成单个抗原结合位点。可变性在整个抗体的可变区中并非均匀分布；它集中在重链可变区和轻链可变区中的每一个的子结构域中。这些子结构域称为“高变区”或“互补决定区”(cdr)。可变区的更保守的(即非超变)部分被称为“框架”(fr)区，并且为三维空间中的六个cdr提供支架以形成抗原结合表面。天然存在的抗体重链和轻链的可变区各自包含主要采用β-折叠构型的四个fr区(fr1、fr2、fr3和fr4)。与cdr一起，它们在可变重链或轻链内形成以下序列：fr1-cdr1-fr2-cdr2-fr3-cdr3-fr4。每条链中的超变区通过框架区紧密靠近在一起，并通常与来自另一条链的超变区一起有助于抗原结合位点的形成(参见kabat等人,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest.[具有免疫学意义的蛋白质序列]贝塞斯达,美国国立卫生研究院(bethesda,nationalinstituteofhealth.)1991)。[0066]术语“cdr”及其复数“cdrs”是指其中三个构成轻链可变区(cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3)的结合特征和三个构成重链可变区(cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3)的结合特征的互补决定区。cdr包含大多数负责抗体(或抗体构建体或结合结构域)与抗原的特异性相互作用的残基，并且因此有助于抗体分子的功能活性：它们是抗原特异性的主要决定簇。cdr边界和长度的准确定义受制于不同的分类和编号系统。因此，cdr可以通过kabat、chothia、接触(contact)或任何其他边界定义(包括本文所述的编号系统)来引用。尽管有不同的边界，但这些系统中的每一者在构成可变序列内所谓的“高变区”的方面具有一定程度的重叠。因此，根据这些系统的cdr定义可以相对于相邻框架区在长度和边界区域方面不同。参见，例如kabat(一种基于跨物种序列变异性的方法)、chothia(一种基于抗原-抗体复合物的晶体学研究的方法)和/或maccallum(kabat等人,上述引文；chothia等人,j.mol.biol[分子生物学杂志],1987,196:901-917；以及maccallum等人,j.mol.biol[分子生物学杂志],1996,262:732)。表征抗原结合位点的还另一标准是由牛津大学分子公司(oxfbrdmolecular)的abm抗体建模软件使用的abm定义。参见，例如proteinsequenceandstructureanalysisofantibodyvariabledomains[抗体可变结构域的蛋白质序列和结构分析]在：antibodyengineeringlabmanual[抗体工程化实验室手册](编辑如下：duebel,s.和kontermann,r.,springer-verlag[施普林格出版社],海德堡(heidelberg))中。就两种残基鉴定技术定义重叠区而非相同区而言，可以将它们组合以定义杂合cdr。然而，根据所谓的kabat系统进行编号是优选的。[0067]典型地，cdr形成可以分类为规范结构的环结构。术语“规范结构”是指由抗原结合(cdr)环所采用的主链构象。从比较结构研究中，已经发现六个抗原结合环中的五个仅具有有限的可用构象组库。每个规范结构可以通过多肽骨架的扭转角来表征。因此，在抗体之间的相应环可以具有非常相似的三维结构，尽管在环的大部分中具有高的氨基酸序列可变性(chothia和lesk,j.mol.biol.[分子生物学杂志],1987,196:901；chothia等人,nature[自然],1989,342:877；martin和thornton,j.mol.biol[分子生物学杂志],1996,263:800)。此外，所采用的环结构与其周围的氨基酸序列之间存在关系。特定规范类别的构象由环的长度和位于环内以及保守框架内(即，环外)关键位置的氨基酸残基决定。因此，可以基于这些关键氨基酸残基的存在来进行对特定规范类别的分配。[0068]术语“规范结构”还可以包括关于抗体的线性序列的考虑因素，例如，如通过kabat(kabat等人,上述引文)编目的。kabat编号方案(系统)是以一致方式对抗体可变区的氨基酸残基进行编号的广泛采用的标准，并且是本发明应用的优选方案，也如本文其他地方所提及。另外的结构考虑因素也可以用于确定抗体的规范结构。例如，kabat编号未完全反映的那些差异可以通过chothia等人的编号系统来描述，并且/或者通过其他技术(例如结晶学和二维或三维计算建模)来揭示。因此，可以将给定的抗体序列置于规范的类别中，该类别尤其允许鉴定适当的类别序列(例如，基于在文库中包括多种规范结构的期望)。文献中描述了抗体氨基酸序列的kabat编号和如由chothia等人(上述引文)所述的结构考虑因素以及其用于解释抗体结构的规范方面的含义。不同类别的免疫球蛋白的亚基结构和三维构型在本领域中是熟知的。有关抗体结构的综述，参见antibodies:alaboratorymanual[抗体：实验室手册],coldspringharborlaboratory[冷泉港实验室],harlow等人编辑,1988。[0069]轻链的cdr3以及特别是重链的cdr3可以构成轻链可变区和重链可变区内抗原结合中最重要的决定簇。在一些抗体或结合结构域中，重链cdr3似乎构成抗原与抗体之间的主要接触区域。其中仅仅改变cdr3的体外选择方案可以用于改变抗体/结合结构域的结合特性或确定哪些残基有助于抗原的结合。因此，cdr3典型地是抗体结合位点内分子多样性的最大来源。例如，cdr-h3可以短至两个氨基酸残基或大于26个氨基酸。[0070]组装和体细胞突变后的抗体基因的序列高度改变，并且估计这些改变的基因编码1010种不同抗体分子(immunoglobulingenes[免疫球蛋白基因],第2版,jonio等人编辑,academicpress[学术出版社],sandiego,ca[加利福尼亚州圣地亚哥],1995)。因此，免疫系统提供了免疫球蛋白组库。术语“组库”是指完全或部分衍生自至少一种编码至少一种免疫球蛋白的序列的至少一种核苷酸序列。一个或多个序列可以通过重链的v、d和j区段以及轻链的v和j区段的体内重排来生成。可替代地，一种或多种序列可以响应于发生重排(例如体外刺激)而从细胞生成。可替代地，一种或多种序列的一部分或全部可以通过dna剪接、核苷酸合成、诱变和其他方法获得，参见例如美国专利5,565,332。组库可以仅包括一种序列或可以包括多种序列，包括遗传多样性集合中的序列。[0071]设想本发明的抗体是单克隆的。如本文所用，命名为“单克隆”(mab)的抗体或结合结构域获得自实质上同质的抗体或结合结构域的群体，即除了可以以少量存在的可能的天然发生的突变和/或翻译后修饰(例如，异构化、酰胺化)之外，在群体中包含的各个抗体或结合结构域是相同的(具体地，关于它们的氨基酸序列)。与典型地包括针对不同决定簇(或表位)的不同抗体的多克隆抗体制剂相比，单克隆抗体或结合结构域针对抗原内的单一表位具有高度特异性。除了它们的特异性之外，单克隆抗体还在它们通过杂交瘤培养物合成，因此不被其他免疫球蛋白污染方面是有优势的。修饰语“单克隆”指示获得自实质上均质的抗体或结合结构域群体的抗体或结合结构域的特征，并且不应理解为要求通过任何特定方法产生抗体。[0072]为了制备单克隆抗体，可以使用提供通过连续细胞系培养产生的抗体的任何技术。例如，有待使用的单克隆抗体或结合结构域可以通过首先由koehler等人nature[自然],256:495(1975)描述的杂交瘤方法制备，或者可以通过重组dna方法(参见，例如美国专利号4,816,567)制备。用于产生人单克隆抗体的另外技术的实例包括三源杂交瘤技术、人b细胞杂交瘤技术(kozbor,immunologytoday[今日免疫学]4(1983),72)和ebv-杂交瘤技术(cole等人,monoclonalantibodiesandcancertherapy[单克隆抗体和癌症疗法],alanr.liss公司(alanr.liss,inc.)(1985),77-96)。[0073]然后可以使用标准方法(诸如酶联免疫吸附测定(elisa)和表面等离子体共振(biacoretm)分析筛选杂交瘤，以鉴定一种或多种产生与指定抗原免疫特异性地结合的抗体或结合结构域的杂交瘤。任何形式的相关抗原均可以用作免疫原，例如重组抗原、天然存在形式、嵌合抗原、该抗原的任何变体或片段以及其抗原肽。如在biacoretm系统中采用的表面等离子体共振可以用于增加与靶抗原的表位结合的噬菌体抗体或结合结构域的效率(schier,humanantibodieshybridomas[人抗体杂交瘤]7(1996),97-105；malmborg,j.immunol.methods[免疫学方法杂志]183(1995),7-13)。[0074]另一种制备抗体或结合结构域的示例性方法包括筛选蛋白质表达文库，例如噬菌体展示或核糖体展示文库。噬菌体展示描述于例如以下中：ladner等人,美国专利号5,223,409；smith(1985)science[科学]228:1315-1317，clackson等人,nature[自然],352:624-628(1991)和marks等人,j.mol.biol.[分子生物学杂志],222:581-597(1991)。[0075]除了使用展示文库之外，还可以使用相关抗原来免疫非人动物，例如啮齿动物(诸如小鼠、仓鼠、兔或大鼠)。在一个实施例中，非人动物至少包括人免疫球蛋白基因的一部分。例如，可以采用人ig(免疫球蛋白)基因座的大片段来工程化在小鼠抗体产生方面有缺陷的小鼠品系。通过使用杂交瘤技术，可以产生和选择衍生自具有所需特异性的基因的抗原特异性单克隆抗体。参见，例如xenomousetm；green等人(1994)naturegenetics[自然遗传学]7:13-21；us2003-0070185；wo96/34096和wo96/33735。[0076]单克隆抗体也可以从非人动物获得，然后使用本领域已知的重组dna技术进行修饰，例如人源化、去免疫、呈现嵌合(renderedchimeric)等。经修饰的抗体、构建体或结合结构域的实例包括非人抗体/抗体构建体的人源化变体、“亲和力成熟”抗体、构建体或结合结构域(参见，例如hawkins等人j.mol.biol.[分子生物学杂志]254,889-896(1992)以及lowman等人,biochemistry[生物化学]30,10832-10837(1991))以及具有一种或多种改变的效应子功能的抗体变体或突变体(参见，例如美国专利5,648,260；kontermann和dübel(2010),上述引文；以及little(2009),上述引文)。[0077]在免疫学中，亲和力成熟是这样的过程：通过该过程，在免疫应答的过程中b细胞产生与抗原的亲和力增加的抗体。通过反复暴露于相同抗原，宿主将产生相继更大亲和力的抗体。与天然原型类似，体外亲和力成熟是基于突变和选择的原理。体外亲和力成熟已成功用于优化抗体、抗体片段、抗体变体、抗体变体、或结合结构域。使用辐射、化学诱变剂或易错pcr引入cdr内的随机突变。此外，遗传多样性可以通过链改组来增加。使用展示方法(如噬菌体展示)进行两轮或三轮突变和选择通常产生具有低纳摩尔范围内的亲和力的抗体、抗体片段、抗体变体、或结合结构域。[0078]还考虑了本文所述的抗体的氨基酸序列修饰。例如，可能希望改善该抗体的结合亲和力和/或其他生物特性。抗体的氨基酸序列变体通过肽合成或通过将适当的核苷酸改变引入编码该抗体的核酸分子中来制备。所有以下描述的氨基酸序列修饰都应产生保留未修饰亲本分子(与muc17结合)所需的生物学活性的抗体。[0079]术语“氨基酸”或“氨基酸残基”典型地是指具有其本领域公认的定义的氨基酸，诸如选自下组的氨基酸，该组由以下组成：丙氨酸(ala或a)；精氨酸(arg或r)；天冬酰胺(asn或n)；天冬氨酸(asp或d)；半胱氨酸(cys或c)；谷氨酰胺(gln或q)；谷氨酸(glu或e)；甘氨酸(gly或g)；组氨酸(his或h)；异亮氨酸(ile或i)；亮氨酸(leu或l)；赖氨酸(lys或k)；甲硫氨酸(met或m)；苯丙氨酸(phe或f)；脯氨酸(pro或p)；丝氨酸(ser或s)；苏氨酸(thr或t)；色氨酸(trp或w)；酪氨酸(tyr或y)；以及缬氨酸(val或v)，尽管可以根据需要使用修饰的、合成的或稀有的氨基酸。基本上存在由不同的侧链决定的四种不同类别的氨基酸：[0080](1)非极性和中性(不带电荷)：ala、gly、ile、leu、met、phe、pro、val[0081](2)极性和中性(不带电荷)：asn、cys(仅微极性)、gln、ser、thr、trp(仅微极性)、tyr[0082](3)酸性和极性(带负电荷)：asp和glu[0083](4)碱性和极性(带正电荷)：arg、his、lys[0084]疏水性氨基酸可以根据它们是否具有脂肪族或芳香族侧链来分开。phe和trp(非常大的疏水性)、tyr和his(较小疏水性)被分类为芳香族氨基酸。严格地说，脂肪族意味着侧链仅含有氢和碳原子。通过这种严格的定义，具有脂肪族侧链的氨基酸是丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸(也是正亮氨酸)、脯氨酸和缬氨酸。丙氨酸的侧链非常短，意味着它不是特别具有疏水性，并且脯氨酸具有不寻常的几何形状，使其在蛋白质中起特殊作用。通常方便地将甲硫氨酸考虑为与异亮氨酸、亮氨酸和缬氨酸在同一类别，尽管它还含有硫原子。统一的主题是这些氨基酸主要含有非反应性和柔性侧链。通常将氨基酸丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸和苏氨酸分组在一起，因此它们全部都很小。gly和pro可能影响链取向。[0085]氨基酸修饰包括，例如，单克隆抗体或结合结构域的氨基酸序列内残基的缺失、残基的插入和/或残基的取代。进行缺失、插入和/或取代的任何组合以获得最终的单克隆抗体或结合结构域，条件是最终的抗体拥有所需特征，例如，未修饰亲本分子的生物活性(诸如结合muc17)。氨基酸变化还可以改变抗体的翻译后过程，诸如改变糖基化位点的数目或位置。[0086]例如，可以在每个cdr中插入、缺失和/或取代1、2、3、4、5或6个氨基酸(当然，取决于它们各自的长度)，而可以在每个fr中插入、缺失和/或取代1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或25个氨基酸。氨基酸序列插入还包括n末端和/或c末端氨基酸添加，其长度范围为例如从1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个残基至含有超过10个例如一百个或更多个残基的多肽，以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。[0087]对于氨基酸修饰(特别是对于氨基酸取代)最感兴趣的位点包括高变区，特别是重链和/或轻链的各个cdr，但是本文也考虑重链和/或轻链中的fr变化。取代可以是如本文所述的保守取代。优选地，可以在cdr中取代1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸，而可以在框架区(fr)中取代1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或25个氨基酸，这分别取决于cdr或fr的长度。例如，如果cdr序列涵盖6个氨基酸，则设想这些氨基酸中的一个、两个或三个被取代。相似地，如果cdr序列涵盖15个氨基酸，则设想这些氨基酸中的一个、两个、三个、四个、五个或六个被取代。[0088]用于鉴定作为优选诱变位置的单克隆抗体或结合结构域内的某些残基或区域的有用方法被称为“丙氨酸扫描诱变”，并且描述于例如cunninghamb.c.和wellsj.a.(science.[科学]1989年6月2日；244(4908):1081-5)。在此，鉴定构建体内的残基或残基组(例如带电残基，诸如arg、his、lys、asp和glu)，并将其用中性或非极性氨基酸(最优选地丙氨酸或聚丙氨酸)替换，以影响各个氨基酸与靶蛋白表位的相互作用。丙氨酸扫描是用于确定特定残基对给定蛋白的稳定性或功能的贡献的技术。丙氨酸的使用是因为其具有非巨大的、化学惰性的甲基官能团，但仍然模仿许多其他氨基酸所具有的二级结构偏好。在需要保守突变残基的大小的情形下，有时可以使用巨大的氨基酸(诸如缬氨酸或亮氨酸)。该技术还可以用于确定特定残基的侧链是否在生物活性中起重要作用。丙氨酸扫描通常通过定点诱变或随机通过创建pcr文库来完成。此外，已经开发了基于理论丙氨酸取代来估计热力学参数的计算方法。可以通过ir/nmr光谱学、数学方法、生物测定等来测试数据。[0089]然后，通过在取代位点处或为取代位点引入另外的或其他变体来精确对取代展示功能灵敏度的那些氨基酸位置(如例如通过丙氨酸扫描确定的)。因此，虽然用于引入氨基酸序列变化的位点或区域是预定的，但突变本身的性质无需预定。例如，为了分析或优化给定位点处突变的性能，可以在靶密码子或区域处进行丙氨酸扫描或随机诱变，并且筛选所表达的单克隆抗体/变体以获得所需活性的最优组合。用于在具有已知序列的dna中的预定位点进行取代突变的技术是熟知的，例如，m13引物诱变和pcr诱变。突变体的筛选通过例如使用如本文所述的抗原(例如，muc17)结合活性测定进行。[0090]通常，如果在重链和/或轻链/可变区的一个或多个或所有cdr中氨基酸被取代，则设想当时获得的“经取代的”序列与“原始”或“亲本”cdr序列具有至少60％或65％、更优选70％或75％、甚至更优选80％或85％并且特别优选90％或95％同一性/同源性/相似性。这意味着原始序列与经取代的序列之间的同一性/同源性/相似性程度取决于cdr的长度。例如，总共具有5个氨基酸并且包含一个氨基酸取代的cdr与“原始”或“亲本”cdr序列具有80％同一性，而总共具有10个氨基酸并且包含一个氨基酸取代的cdr与“原始”或“亲本”cdr序列具有90％同一性。因此，本发明的单克隆抗体的经取代的cdr可以与其原始序列具有不同的同一性程度，例如，cdrl1可以具有80％的同源性，而cdrl3可以具有90％的同源性。相同的考虑适用于框架区和整个vh和vl区。[0091]“变体cdr”是与本发明的亲本cdr具有特定序列同源性、相似性或同一性的cdr，并且与亲本cdr共享生物学功能，包括但不限于至少60％、65％、70％、75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的亲本cdr的特异性和/或活性。通常，各个变体cdr之间的氨基酸同源性、相似性或同一性为本文所描述的亲本序列的至少60％，并且更典型地具有至少65％或70％、优选至少75％或80％、更优选至少85％、90％、91％、92％、93％、94％、并且最优选95％、96％、97％、98％、99％、和几乎100％的渐增的同源性、相似性或同一性。这同样适用于“变体vh”和“变体vl”。根据一个实施例，“变体vh”和/或“变体vl”内的序列变化不延伸至cdr。因此，本发明涉及如本文所定义的抗体或衍生物或片段，该抗体或衍生物或片段包含与如本文所定义的特定序列(“亲本”vh和vl)具有某些序列同源性/同一性/相似性(参见上文)的vh和vl序列，其中这些cdr序列与本文所定义的特定cdr序列(“亲本”cdr)具有100％同一性。[0092]优选的取代(或替换)是保守取代。然而，设想了任何取代(包括非保守取代或来自下表1中列出的“示例性取代”中的一个或多个)，只要该单克隆抗体(抗体构建体)保留其与muc17结合的能力，和/或只要其cdr、fr、vh和/或vl序列与原始或亲本序列具有至少60％或65％、更优选至少70％或75％、甚至更优选至少80％或85％、并且特别优选至少90％或95％的同一性程度即可。[0093]保守替换(也称为保守突变或保守取代)是将给定氨基酸改变为具有相似的生物化学特性(例如，电荷、疏水性、大小)的不同氨基酸的氨基酸替换。与非保守替换相比，蛋白质中的保守替换通常对蛋白质功能具有较小的影响。表1中示出了保守取代。示例性保守取代显示为“示例性取代”。如果此类取代导致生物活性的变化，那么可以引入如本文中参考氨基酸类别进一步描述的更多实质性变化，并筛选产物的所需特征。[0094]表1：氨基酸取代(aa＝氨基酸)[0095][0096][0097]本发明的抗体的生物特性的实质性修饰是通过选择在保持以下的效应方面显著不同的取代来完成：(a)取代区域中的多肽骨架的结构，例如呈折叠或螺旋构象，(b)分子在靶位点的电荷或疏水性，或(c)侧链的大部分。非保守取代通常需要将上面所定义的氨基酸类别之一(诸如极性、中性、酸性、碱性、脂肪族、芳香族、小……)的成员交换为另一种类别。任何不参与维持抗体的适当构象的半胱氨酸残基通常可以被丝氨酸取代以改善该抗体的氧化稳定性。[0098]氨基酸序列的序列同一性、同源性和/或相似性通过使用在本领域中已知的标准技术，优选地使用默认设置或通过检验来确定，这些标准技术包括但不限于smith和waterman,1981,adv.appl.math.[应用数学进展]2:482的局部序列同一性算法，needleman和wunsch(jmolbiol.[分子生物学杂志]1970年3月；48(3):443-53)的序列同一性比对算法，pearson和lipman(procnatlacadsciusa.[美国国家科学院院刊]1988年4月；85(8):2444-8)的相似性搜索方法，这些算法的计算机化实现(威斯康星遗传学软件包(wisconsingeneticssoftwarepackage)中的gap、bestfit、fasta和tfasta，威斯康星州麦迪逊市科学大道575号遗传学计算机组(geneticscomputergroup,575sciencedrive,madison,wis.))，由devereux等人(nucleicacidsres.[核酸研究]1984年1月11日；12(1pt1):387-95)描述的最佳拟合序列程序。设想了百分比同一性通过fastdb基于以下参数来计算：错配罚分为1；空位罚分为1；空位大小罚分为0.33；以及连接罚分为30。还参见“currentmethodsinsequencecomparisonandanalysis[序列比较和分析的当前方法]”,macromoleculesequencingandsynthesis[大分子测序与合成],selectedmethodsandapplications[所选择的方法与应用],第127-149页(1988),alanr.liss公司。[0099]有用算法的实例是pileup。pileup使用渐进式双序列比对从一组相关序列创建多序列比对。它还可以绘制显示用于创建比对的聚类关系的树突。pileup使用feng和doolittle(jmolevol.[分子进化杂志]1987；25(4):351-60)的渐进式比对方法的简单化；该方法类似于由higgins和sharp(computapplbiosci.[计算机在生物科学中的应用]1989年4月；5(2):151-3)所描述的方法。有用的pileup参数包括默认空位权重为3.00、默认空位长度权重为0.10、和加权末端空位。[0100]有用的算法的另一个实例是blast算法，描述于以下中：altschul等人(jmolbiol.[分子生物学杂志]1990年10月5日；215(3):403-10.)；altschul等人(nucleicacidsres.[核酸研究]1997年9月1日；25(17):3389-402)；以及karlin和altschul(procnatlacadsciusa.[美国国家科学院院刊]1993年6月15日；90(12):5873-7)。特别有用的blast程序是wu-blast-2程序，该程序从altschul等人(methodsenzymol.[酶学方法]1996；266:460-80)获得。wu-blast-2使用几个搜索参数，其中大部分都设定为默认值。将可调整参数设置为以下值：重叠间隔＝1，重叠分数＝0.125，字阈值(t)＝ii。hsps和hsps2参数是动态值，并且由程序本身根据特定序列的组成和特定数据库的组成来确立，根据该特定数据库来搜索感兴趣的序列；然而，可以调整这些值以提高灵敏度。[0101]另外的有用算法是空位blast，如由altschul等人(nucleicacidsres.[核酸研究]1997年9月1日；25(17):3389-402)报道的。空位blast使用blosum-62取代评分；阈值t参数设定为9；触发非空位扩展的双击方法，对k的空位长度收取10+k的成本；xu设定为16，并且xg设定为40(用于数据库搜索阶段)以及67(用于算法的输出阶段)。有空位的比对由对应于约22位的得分触发。[0102]与此一致，关于编码本文鉴定的单克隆抗体(抗体构建体)的核酸序列的术语“核酸序列同一性/同源性/相似性的百分比(％)”被定义为候选序列中与该抗体的编码序列中的核苷酸残基相同的核苷酸残基的百分比。比对两个序列并从而确定它们的同源性的一种方法使用wu-blast2(设定为默认参数)的blastn模块，其中重叠跨度和重叠分数分别设定为1和0.125。通常，编码各个变体cdr的核苷酸序列与本文所描述的核苷酸序列之间的核酸序列同源性、相似性或同一性是至少60％，并且更典型地具有至少65％、70％、75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％和几乎100％的渐增的同源性、相似性或同一性。再次，这同样适用于编码“变体vh”和/或“变体vl”的核酸序列。[0103]根据本发明的术语“抗体衍生物”还可以包含全长抗体的片段，诸如vh、vhh、vl、(s)dab、fv、轻链(vl-cl)、fd(vh-ch1)、重链、fab、fab’、f(ab')2或“rigg”(由重链和轻链组成的“半抗体”)。抗体片段可以通过完整抗体的酶促或化学切割来产生。根据本发明的抗体构建体还可以包含抗体的修饰的片段，也称为抗体变体或抗体衍生物。实例包括但不限于scfv、di-scfv或bi(s)-scfv、scfv-fc、scfv-拉链(zipper)、scfab、fab2、fab3、双抗体、单链双抗体、串联双抗体(tandab)、串联di-scfv、串联tri-scfv、“微型抗体”(其由如下结构示例：(vh-vl-ch3)2、(scfv-ch3)2、((scfv)2-ch3+ch3)、((scfv)2-ch3)或(scfv-ch3-scfv)2)、多体抗体诸如三抗体(triabody)或四抗体(tetrabody)、和单结构域抗体(诸如纳米抗体或仅包含一个可变区的单可变结构域抗体，该结构域可以是vhh、vh或vl，它独立于其他可变区或结构域而与抗原或靶标特异性地结合)。根据本发明的抗体构建体的其他可能形式是交叉体、最大体、杂fc构建体、单fc构建体和scfc构建体。那些形式的实例将在下文进行描述。此外，术语“抗体”的定义包括仅由一条多肽链组成的分子以及由两条、三条、四条或更多条多肽链组成的分子，这些链可以是相同的(同源二聚体、同源三聚体或同源寡聚物)或不同的(异源二聚体、异源三聚体或异源寡聚物)。上述鉴定的抗体及其片段、变体、衍生物和由其衍生的结合结构域的实例尤其描述于harlow和lane,antibodies:alaboratorymanual[抗体：实验室手册],cshlpress[冷泉港实验室出版社](1988)；kontermann和dübel,antibodyengineering[抗体工程],springer[斯普林格出版社],第2版2010；以及little,recombinantantibodiesforimmunotherapy[用于免疫疗法的重组抗体],cambridgeuniversitypress[剑桥大学出版社]2009。[0104]术语“结合结构域”或“与……结合的结构域”与本发明相关地表征抗体的结构域，该结构域与在靶标或抗原(此处：muc17)上的表位特异性地结合/相互作用/识别该表位。结合结构域的结构和功能是基于抗体的结构和/或功能，例如全长免疫球蛋白分子的结构和/或功能。因此，“结合结构域”或“与……结合的结构域”可以包含允许免疫特异性靶结合的抗体的最低结构要求。结合结构域的这种最小结构要求可以例如通过至少三个轻链cdr(即vl区的cdr1、cdr2和cdr3)和/或三个重链cdr(即vh区的cdr1、cdr2和cdr3)、优选全部六个cdr的存在来定义。“与……结合的结构域”(或“结合结构域”)典型地可以包含抗体轻链可变区(vl)和抗体重链可变区(vh)；然而，它不必须包含两者，但可以包含vh或vl中的仅一者。例如，fd片段通常保留完整抗原结合结构域的一些抗原结合功能。[0105]“与……结合的结构域”(或“结合结构域”)或抗体构建体的形式的实例包括但不限于全长抗体、全长抗体的片段(诸如vh、vhh、vl)、(s)dab、fv、轻链(vl-cl)、fd(vh-ch1)、重链、fab、fab’、f(ab')2或“rigg”(“半抗体”))、抗体变体或衍生物(诸如scfv、di-scfv或bi(s)-scfv、scfv-fc、scfv-拉链、scfab、fab2、fab3、双抗体、单链双抗体、串联双抗体(tandab)、串联di-scfv、串联tri-scfv、“微型抗体”(选自形式诸如(vh-vl-ch3)2、(scfv-ch3)2、((scfv)2-ch3+ch3))、((scfv)2-ch3)或(scfv-ch3-scfv)2)、多抗体(诸如三抗体或四抗体)、以及单结构域抗体(诸如纳米抗体或单可变结构域抗体)(仅包含一个可变区，其可以是vhh、vh或vl)。“与……结合的结构域”(或“结合结构域”)的形式的另外的实例包括(1)包含vl、vh、cl和ch1的抗体片段或变体(诸如fab)；(2)包含两个连接的fab片段的抗体片段或变体(诸如f(ab')2)；(3)包含vh和ch1的抗体片段或变体(诸如fd)；(4)包含vl和cl的抗体片段或变体(诸如轻链)；(5)包含vl和vh的抗体片段或变体(诸如fv)；(5)具有vh结构域的dab片段(ward等人,(1989)nature[自然]341:544-546)；(6)包含重链和/或轻链的至少三个分离的cdr的抗体变体；以及(7)单链fv(scfv)。根据本发明的抗体的实施例的实例例如描述于wo00/006605、wo2005/040220、wo2008/119567、wo2010/037838、wo2013/026837、wo2013/026833、us2014/0308285、us2014/0302037、wo2014/144722、wo2014/151910、和wo2015/048272中。[0106]在scfv中，vh区和vl区以vh-vl或vl-vh的顺序(从n-末端至c-末端)排列。设想vh区和vl区通过接头(优选地肽接头)连接。根据一个实施例，vh区位于接头的n末端，并且vl区位于接头的c末端。此外可能的是，抗体构建体的两个scfv结构域经由接头(优选地肽接头)连接。scfv可以例如包含以第一结构域-接头-第二结构域的顺序(从n末端至c末端)的结构域。逆序(第二结构域-接头-第一结构域)也是可能的。[0107]接头优选地是肽接头，更优选地是短肽接头。根据本发明，“肽接头”包含将抗体的一个结构域的氨基酸序列与另一个(可变和/或结合)结构域(例如，可变结构域或结合结构域)连接的氨基酸序列。这种肽接头的基本技术特征在于它不包含任何聚合活性。合适的肽接头是在美国专利4,751,180和4,935,233或wo88/09344中描述的那些。在本发明的上下文中，“短”接头具有在2个与50个之间的氨基酸，优选地在3个与35个之间、在4个与30个之间、在5个与25个之间、在6个与20个之间或在6个与17个之间的氨基酸。一个结合结构域的两个可变区之间的接头可以具有与这两个结合结构域之间的接头不同的长度(例如可以更长)。例如，在一个结合结构域的两个可变区之间的接头可以具有在7个与15个之间(优选地在9个与13个之间)的氨基酸的长度，并且在两个结合结构域之间的接头可以具有在3个与10个(优选地在4个与8个之间)的氨基酸的长度。进一步设想，该肽接头是甘氨酸/丝氨酸接头。在甘氨酸/丝氨酸接头中的大多数氨基酸选自甘氨酸和丝氨酸。[0108]根据本发明的一个实施例，与muc17结合的本发明的抗体可以是“单链抗体”。尽管fv片段的两个结构域vl和vh由独立的基因编码，但使用重组方法可以将这两个结构域通过人工接头接合，如上文所述，该人工接头使它们能够制成单条蛋白质链，其中vl和vh区配对以形成单价分子；参见，例如huston等人(1988)proc.natl.acad.sciusa[美国国家科学院院刊]85:5879-5883。使用本领域技术人员已知的常规技术获得这些抗体片段，并且按照与全长抗体或igg相同的方式评价片段的功能。因此，单链可变片段(scfv)是免疫球蛋白的重链(vh)和轻链(vl)可变区的融合蛋白，通常用短接头肽连接。为了灵活性，接头通常富含甘氨酸，以及为了溶解性通常富含丝氨酸或还有苏氨酸，并且可以连接vh的n末端和vl的c末端，或反之亦然。尽管去除了恒定区并引入了接头，但该蛋白质保留了原始免疫球蛋白的特异性。[0109]命名为“单结构域抗体”的抗体包含一个(单体)抗体可变区，该抗体可变区能够独立于其他可变区与特定抗原选择性结合。第一单结构域抗体是从骆驼中发现的重链抗体工程化而来，并且这些被称为vhh片段。软骨鱼类也具有重链抗体(ignar)，可以从这些重链抗体中获得称为vnar片段的单结构域抗体。替代性方法是将来自常见免疫球蛋白的二聚体可变区分裂成单体，因此获得vh或vl作为单结构域ab。尽管对单结构域抗体的大多数研究目前都是基于重链可变区，但衍生自轻链的纳米抗体也显示出与靶表位特异性地结合。单结构域抗体的实例是所谓的sdab、纳米抗体或单可变结构域抗体。因此，(单结构域mab)2是由(至少)两个单结构域单克隆抗体构成的单克隆抗体，这些单结构域单克隆抗体单独地选自包含vh、vl、vhh和vnar的组。接头优选呈肽接头的形式。类似地，“scfv-单结构域mab”是由至少一个如上所述的单结构域抗体和一个如上所述的scfv分子构成的单克隆抗体。同样，接头优选呈肽接头的形式。[0110]根据一个实施例，与muc17结合的抗体或抗体构建体呈一种或多种多肽的形式或呈蛋白质的形式。除了蛋白质部分之外，此类多肽或蛋白质可以包括非蛋白质部分(例如，化学接头或化学交联剂诸如戊二醛)。[0111]肽是经由共价肽(酰胺)键连接的氨基酸单体的短链。因此，肽被列为生物低聚物和聚合物的宽的化学类别。作为肽或多肽链的部分的氨基酸被称为“残基”并且可以被连续编号。除环肽外的所有肽在肽的一端具有n末端残基，并且在另一端具有c末端残基。寡肽仅由少数氨基酸(通常在两个与二十个之间)组成。多肽是更长、连续且无支链的肽链。基于大小，肽与蛋白质不同；并且作为任意基准，肽可以理解为含有大约50个或更少的氨基酸。蛋白质由通常以生物功能方式排列的一种或多种多肽组成。虽然应用于肽与多肽和蛋白质的实验室技术的各方面不同(例如，电泳、色谱等的特性)，但是区分肽与多肽和蛋白质的大小边界不是绝对的。因此，在本发明的上下文中，术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”可以可互换地使用，并且术语“多肽”通常是优选的。术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”还指天然修饰的肽/多肽/蛋白质，其中修饰例如通过翻译后修饰(如糖基化、乙酰化、磷酸化等)来实现。当在本文中提及时，“肽”、“多肽”或“蛋白质”也可以是经化学修饰的。此类修饰在本领域中是熟知的并且在下文中描述。[0112]术语“与……(特异性或免疫特异性地)结合”、“(特异性或免疫特异性地)识别”、或“与……(特异性或免疫特异性地)反应”意指根据本发明，抗体或结合结构域与靶分子(抗原)(此处：muc17)上的给定表位相互作用或(免疫-)特异性地相互作用。这种相互作用或结合在特定靶标上的表位中比在替代性物质(非靶分子)中更频繁、更快速地发生，具有更长的持续时间、具有更大的亲和力、或者具有上述的一些组合。然而，由于不同物种中同源蛋白质之间的序列相似性，与其靶标(诸如，人靶标)免疫特异性地结合的抗体或结合结构域可以与来自不同物种(诸如，来自非人灵长类动物，诸如食蟹猴)的同源靶分子交叉反应。因此，术语“特异性/免疫特异性结合”可以包括抗体或结合结构域与多于一个物种中的表位或结构相关表位的结合。[0113]在本发明的上下文中，术语“表位”是指被结合结构域、抗体或其衍生物识别/免疫特异性地识别的抗原的部分或区域。“表位”是抗原性的，并且因此术语表位有时也被称为“抗原结构”或“抗原决定簇”。与表位结合的结合结构域、抗体或抗体构建体的部分被称为互补位(paratope)。据信特异性结合是通过结合结构域、抗体或抗体构建体和抗原的氨基酸序列中的特定基序实现的。因此，由于它们的一级、二级和/或三级结构以及所述结构的潜在二次修饰的结果，结合得以实现。互补位与其抗原决定簇的特异性相互作用可以导致所述位点与抗原的简单结合。在一些情况下，特异性相互作用可以可替代地或另外导致信号的引发，例如由于诱导抗原构象的变化、抗原的寡聚化等。[0114]基于蛋白抗原的表位的结构和与互补位的相互作用，蛋白抗原的表位分为两类(构象表位和线性表位)。构象表位由抗原氨基酸序列的不连续部分构成。这些表位基于抗原的三维表面特征和形状或三级结构(折叠)与互补位发生相互作用。确定表位构象的方法包括但不限于x射线晶体学、二维核磁共振(2d-nmr)光谱和定点自旋标记以及电子顺磁共振(epr)光谱。相反，线性表位基于其一级结构与互补位发生相互作用。线性表位由来自抗原的连续氨基酸序列形成，并且典型地在独特的序列中包含至少3个或至少4个、且更通常地至少5个或至少6个或至少7个，例如约8个至约10个氨基酸。[0115]以下描述了用于muc17表位作图的方法：在人muc17蛋白的细胞外结构域内的预定义区域(通常是连续氨基酸延伸)与另一物种(诸如小鼠，但也可以设想其他物种，只要该抗体对该物种没有交叉反应性即可)的muc17的相应区域交换/替换。这些人muc17/小鼠(或其他物种)的muc17嵌合体可以在宿主细胞(诸如cho细胞)的表面上表达。可以经由facs分析对抗体或抗体构建体的结合进行测试。当完全消除抗体与嵌合分子的结合时，或当观察到显著的结合降低时，可以得出结论，从此嵌合分子中去除的人muc17的区域与免疫特异性表位-互补位识别相关。与人(野生型)muc17的结合相比，结合的所述降低优选是至少10％、20％、30％、40％、或50％，更优选是至少60％、70％、或80％，并且最优选是90％、95％或甚至100％，由此将与人muc17的结合设定为100％。可替代地，可以通过将一个或多个点突变引入muc17的序列来修饰上述表位作图分析。这些点突变可以例如反映人muc17与小鼠(或其他物种)muc17之间的差异。[0116]确定靶抗原的特定残基对抗体或结合结构域的识别的贡献的另一种方法是丙氨酸扫描(参见，例如morrisonkl和weissga.curropinchembiol.[化学生物学新见]2001年6月；5(3):302-7)，其中有待分析的每个残基例如经由定点诱变被丙氨酸替换。丙氨酸的使用是因为其具有非巨大的、化学惰性的甲基官能团，但仍然模仿许多其他氨基酸所具有的二级结构参考。在需要保守突变残基的大小的情形下，有时可以使用巨大的氨基酸(诸如缬氨酸或亮氨酸)。[0117]单克隆抗体与靶抗原的表位之间的相互作用意味着可变区对表位/靶抗原(此处：muc17)表现出明显或显著的亲和力，并且通常不表现出对靶抗原以外的蛋白质或抗原的显著亲和力-尽管上文讨论过与例如来自其他物种的同源靶标的交叉反应性。“显著亲和力”包括以约≤10-6m的亲和力(解离常数，kd)结合。优选地，当结合亲和力为约≤10-7m、≤10-8m、≤10-9m、或≤10-10m时，认为结合是特异性的。因此，设想本发明的单克隆抗体(或抗体构建体)对muc17的亲和力(kd)为约≤10-7m、≤10-8m、≤10-9m、或≤10-10m。这些值优选地在表面等离振子体共振测定，诸如biacore测定中测量。[0118]可以容易地测试抗体与靶标是否(免疫-)特异性地反应或结合，例如通过将所述抗体与其所需靶蛋白或抗原的亲和力与所述抗体与非靶蛋白或抗原(此处：muc17以外的蛋白质)的亲和力进行比较。优选地，本发明的抗体不与muc17以外的蛋白质或抗原显著地结合-除非有意将针对另一个靶标的任何其他一个或多个结合结构域引入到本发明的抗体/抗体构建体中。术语“不显著地结合”意指本发明的单克隆抗体(或抗体构建体)不与muc17以外的蛋白质或抗原结合。因此，抗体构建体显示出≤30％、优选≤20％、更优选≤10％、特别优选≤9％、≤8％、≤7％、≤6％、≤5％、≤4％、≤3％、≤2％、或≤1％的与muc17以外的蛋白质或抗原的反应性，由此，与muc17的结合被设定为100％。“反应性”可以例如以亲和力值表示(参见上文)。设想本发明的单克隆抗体(或衍生物、结合结构域等)不与人baff-r和/或人taci结合或者不与之显著地结合、相互作用、识别、免疫特异性地结合或交叉反应。[0119]本发明的抗体可以是“体外生成的抗体”和/或“重组抗体”。在本发明的上下文中，术语“体外生成的”是指根据上述定义的抗体，其中可变区的全部或部分(例如，至少一个cdr)在非免疫细胞选择中(例如，在体外噬菌体展示中、在蛋白质芯片上或在其中可以测试候选氨基酸序列结合抗原的能力的任何其他方法中)生成。因此，该术语优选排除仅通过动物的免疫细胞中的基因组重排生成的序列。设想抗体是通过噬菌体展示或文库筛选方法或者通过将来自预先存在的抗体的cdr序列移植到支架中产生或可获得的。“重组抗体”是使用(尤其)重组dna技术或基因工程化生成或产生的抗体。[0120]本发明的抗体的氨基酸取代变化的优选类型涉及取代亲本抗体结构的高变区内的一个或多个残基。通常，选择用于进一步开发的一种或多种所得变体相对于生成它们的亲本抗体结构将具有改善的生物特性。用于生成此类取代变体的便利方式包括使用噬菌体展示的亲和力成熟。简言之，将高变区的几个位点(例如6-7个位点)突变以在每个位点生成所有可能的氨基酸取代。由此生成的变体以单价方式从丝状噬菌体颗粒展示为与每个颗粒内包装的m13的基因iii产物的融合物。然后如本文所披露那样筛选噬菌体展示的变体的生物活性(例如结合亲和力)。为了鉴定对抗原结合有显著贡献的候选高变区位点(用于修饰的候选者)，还可以进行丙氨酸扫描诱变。可替代地或另外，分析在抗原与抗体或结合结构域之间的复合物的晶体结构以鉴定在抗体结合结构域与其特异性抗原之间的接触点可能是有益的。根据本文详述的技术，此类接触残基和相邻残基是取代的候选物。一旦生成了此类变体，就如本文所述对这组变体进行筛选，并且可以选择在一种或多种相关测定中具有优异特性的抗体、其抗原结合片段、抗体构建体或结合结构域用于进一步的开发。[0121]根据一个实施例，抗体衍生自小鼠。术语“抗体”分别包括具有抗体衍生的区的抗体和结合结构域，这些抗体衍生的区诸如实质上对应于本领域中已知的种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区或结构域。本发明的结合结构域可以包含例如cdr中且特别是cdr3中不由种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。抗体结合结构域可以具有至少一个、两个、三个、四个、五个、或更多个被不由种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基替换的位置。如本文所用的抗体和结合结构域的定义还涵盖仅包含非人工和/或遗传改变的抗体序列的抗体和结合结构域。[0122]设想本发明的抗体是“分离的”或“实质上纯的”抗体。当用于描述本文所述的抗体时，“分离的”或“实质上纯的”意指抗体已从其产生环境的组分中鉴定、分离和/或回收。优选地，抗体不与或实质上不与来自其产生环境的所有其他组分缔合。其产生环境的污染组分(诸如由重组转染细胞产生的污染组分)是可以干扰例如抗体的诊断用途的材料，并且可能包括酶、激素和其他蛋白质或非蛋白质化合物。应当理解，根据情况，分离的或实质上纯的抗体可以构成给定样品中总蛋白质/多肽含量的按重量计从5％至99.9％。使用诱导型启动子或高表达启动子，可以以显著更高的浓度产生所需抗体。该定义包括在本领域已知的多种生物体和/或宿主细胞中产生抗体。在某些实施例中，抗体(1)通过使用旋杯式序列分析仪纯化至足以获得至少15个n末端或内部氨基酸序列的残基的程度，或(2)通过sds-page在非还原或还原条件下使用考马斯蓝或优选银染色纯化至均质。然而，通常将通过至少一个纯化步骤来制备分离的抗体。[0123]根据本发明的一个实施例，单克隆抗体或结合结构域包含vh区，该vh区包含如seqidno:2中描绘的vh-cdr1、如seqidno:3中描绘的vh-cdr2、和如seqidno:4中描绘的vh-cdr3；和vl区，该vl区包含如seqidno:6中描绘的vl-cdr1、如seqidno:7中描绘的vl-cdr2、和如seqidno:8中描绘的vl-cdr3。[0124]进一步设想，本发明的抗体与上述a)、b)或c)的抗体结合相同的muc17表位，或者与上述a)、b)或c)的抗体竞争结合muc17。[0125]抗体或结合结构域是否与另一给定抗体或结合结构域结合muc17的(或muc17的细胞外结构域的)相同表位可以通过不同分析(例如，通过用嵌合或突变的muc17分子进行表位作图，如例如wo2013/072406中所述)测量。本文描述了确定表位的其他方法，诸如丙氨酸扫描(参见，例如morrisonkl和weissga.curropinchembiol.[化学生物学新见]2001年6月；5(3):302-7)，其中有待分析的靶氨基酸序列内的每个残基例如经由定点诱变被丙氨酸替换。丙氨酸的使用是因为其具有非巨大的、化学惰性的甲基官能团，但仍然模仿许多其他氨基酸所具有的二级结构参考。在需要保守突变残基的大小的情形下，有时可以使用巨大的氨基酸(诸如缬氨酸或亮氨酸)。这种将氨基酸的系统突变引入靶蛋白序列，并测试抗体与每种突变蛋白的结合以鉴定构成表位的氨基酸的方法，也称为“定点诱变”。可用于对靶抗原上的抗体表位作图的其他方法包括高通量鸟枪诱变表位作图、交联耦合质谱法、x射线共晶体学、低温电子显微镜检查和氢-氘交换。[0126]可以在竞争测定诸如竞争性elisa中测量抗体是否与另一种给定抗体竞争结合抗原(诸如muc17)。也可以使用亲和素偶联的微粒(珠粒)。与亲和素涂覆的elisa板相似，当与生物素化蛋白质反应时，这些珠粒中的每一个都可用作可在其上进行测定的底物。将抗原涂覆在珠粒上，并且然后用第一抗体预涂覆。添加第二抗体并且确定任何另外的结合。读数经由流式细胞术发生。可以使用基于细胞的竞争测定，使用天然表达muc17的细胞或用muc17稳定地或瞬时地转化的细胞。在本文的上下文中，术语“竞争结合”意指在两种测试的抗体之间发生的至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、或至少90％的竞争(如通过上文披露的任何一种测定所确定的)。[0127]根据本发明的一个实施例，该抗体包含：[0128]a)seqidno:5中包含的vh区；[0129]b)如seqidno:9中的任一个中描绘的vl区；[0130]或本发明的单克隆抗体[0131]c)与c)的抗体结合相同的muc17表位或与c)的抗体竞争结合muc17；[0132]d)与d)的抗体结合相同的muc17表位或与d)的抗体竞争结合muc17；或[0133]e)与e)的抗体结合相同的muc17表位或与e)的抗体竞争结合muc17。[0134]设想本发明的单克隆抗体(或“第一单克隆抗体”)和/或如本文定义的第二单克隆抗体与样品中的muc17结合。根据一个实施例，该样品可以是生物学样品。根据一个实施例，该样品是人样品，例如人生物学样品。该生物学样品可以是(人)血清样品、血浆样品、血液样品、骨髓样品或组织样品。该样品也可以是从(人)骨髓单核细胞或(人)外周血单核细胞的细胞培养物中获得的上清液。该样品可以获得自受试者，例如怀疑患有或患有(被诊断患有)与muc17或增加的muc17相关联的疾病的人受试者，或者已经接受与muc17或增加的muc17相关联的疾病的治疗的受试者。[0135]“血液”是人类和其他动物体内的一种体液，它向细胞输送必需的物质，诸如营养物质和氧，并从这些细胞中转移代谢废物。在脊椎动物中，血液由悬浮在血浆中的血细胞组成。血液血浆或“血浆”是血液的液体组分，其中悬浮有几种类型的血细胞。它主要是水，并且含有溶解的蛋白质(诸如血清白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等)、葡萄糖、凝血因子、电解质、激素、二氧化碳和氧气。血液血清或“血清”是不含凝血因子的血浆。因此，血清包括所有未用于凝血的血浆蛋白。“骨髓”是半固态组织，可以在骨头的海绵状或网眼状部分内找到。“组织”是介于细胞与完整器官之间的细胞组织水平。组织是来自相同起源的相似细胞及其细胞外基质的集合，它们一起执行特定功能。然后通过将多个组织功能性分组在一起形成器官。[0136]本发明的抗体的共价修饰也包括在本发明的范围内，并且通常但不总是在翻译后进行。例如，通过使抗体的特定氨基酸残基与可以与选择的侧链或与n末端或c末端残基反应的有机衍生剂反应，将抗体的若干种类型的共价修饰引入到分子中。用双功能剂衍生化可用于将本发明的抗体交联到水不溶性支持基质或表面以用于多种方法(特别是检测方法)中。谷氨酰胺酰基和天冬酰胺酰基残基通常分别脱酰胺成相应的谷氨酰基和天冬氨酰基残基。可替代地，这些残基在温和的酸性条件下脱酰胺。这些残基的任何一种形式都属于本发明的范围。其他修饰包括脯氨酸和赖氨酸的羟基化，丝氨酰或苏氨酰残基的羟基磷酸化，赖氨酸、精氨酸和组氨酸侧链的α-氨基甲基化(t.e.creighton,proteins:structureandmolecularproperties[蛋白质：结构和分子特性],w.h.freeman&co.公司,旧金山(w.h.freeman&co.,sanfrancisco),1983,第79-86页)，n末端胺的乙酰化和任何c末端羧基的酰胺化。[0137]根据本发明，单克隆抗体与可检测标记偶联。在一些实施例中，本发明的单克隆抗体的共价修饰包括添加一种或多种标记，诸如检测标记。标记或标记基团可以经由各种长度的间隔臂与抗体偶联以减少潜在的空间位阻。用于标记蛋白质的各种方法在本领域中是已知的并且可以用于进行本发明。术语“标记”或“标记基团”是指任何可检测的标记。通常，标记属于多种类别，这取决于将检测它们的测定-以下实例包括但不限于：[0138]a)同位素标记，这些同位素标记可以是放射性同位素或重同位素，诸如放射性同位素或放射性核素(例如，3h、14c、15n、35s、89zr、90y、99tc、111in、125i、131i)[0139]b)磁性标记(例如，磁性颗粒)[0140]c)氧化还原活性部分[0141]d)光学染料(包括但不限于，生色团、磷光体和荧光团)，诸如荧光基团(例如fitc、罗丹明、镧系元素磷光体)、化学发光基团和荧光团，这些荧光团可以是“小分子”荧光剂或蛋白质荧光剂[0142]e)酶促基团(例如，辣根过氧化物酶、β-半乳糖苷酶、萤光素酶、碱性磷酸酶)[0143]f)生物素化基团[0144]g)由第二报道基因识别的预定多肽表位(例如，亮氨酸拉链对序列、第二抗体的结合位点、金属结合结构域、表位标签等)[0145]“荧光标记”意指可以经由其固有荧光特性加以检测的任何分子。合适的荧光标记包括但不限于荧光素、罗丹明、四甲基罗丹明、伊红、赤藓红、香豆素、甲基-香豆素、芘、孔雀石绿、二苯乙烯、萤光黄、瀑布蓝j、德克萨斯红、iaedans、edans、bodipyfl、lc红640、cy5、cy5.5、lc红705、俄勒冈绿、alexa-fluor染料(alexafluor350、alexafluor430、alexafluor488、alexafluor546、alexafluor568、alexafluor594、alexafluor633、alexafluor660、alexafluor680)、瀑布蓝、瀑布黄和r-藻红蛋白(pe)(俄勒冈州尤金市分子探针公司(molecularprobes,eugene,or))、fitc、罗丹明和德克萨斯红(伊利诺伊州罗克福德皮尔斯公司(pierce,rockford,il))、cy5、cy5.5、cy7(宾夕法尼亚州匹兹堡市阿默舍姆生命科学公司(amershamlifescience,pittsburgh,pa))。合适的光学染料(包括荧光团)描述于richardp.haugland的molecularprobeshandbook[分子探针手册]中。[0146]合适的蛋白质荧光标记还包括但不限于，绿色荧光蛋白，包括gfp的renilla、ptilosarcus、或aequorea种类(chalfie等人,1994,science[科学]263:802-805)、egfp(clontech实验室公司，登录号u55762)、蓝色荧光蛋白(bfp，量子生物技术公司(quantumbiotechnologies,inc.)，加拿大魁北克省蒙特利尔市迈松纳夫大道西1801号第8层(邮编：h3h1j9)(1801demaisonneuveblvd.west,8thfloor,montreal,quebec,canadah3h1j9)；stauber,1998,biotechniques[生物技术]24:462-471；heim等人,1996,curr.biol.[当代生物学]6:178-182)、增强型黄色荧光蛋白(eyfp，克罗泰克实验室有限公司(clontechlaboratories,inc.))、萤光素酶(ichiki等人,1993,j.immunol.[免疫学杂志]150:5408-5417)、β半乳糖苷酶(nolan等人,1988,proc.natl.acad.sci.u.s.a.[美国国家科学院院刊]85:2603-2607)和海肾(renilla)(wo92/15673、wo95/07463、wo98/14605、wo98/26277、wo99/49019、美国专利号5,292,658；5,418,155；5,683,888；5,741,668；5,777,079；5,804,387；5,874,304；5,876,995；5,925,558)。[0147]本发明的抗体还可以包含另外的结构域，这些结构域例如有助于分离分子。有助于分离抗体的结构域可以选自肽基序或辅助性地引入的部分，这些部分可以在分离方法(例如，分离柱)中捕获。此类另外的结构域的非限制性实施例包括称为myc-标签、hat-标签、ha-标签、tap-标签、gst-标签、几丁质结合结构域(cbd-标签)、麦芽糖结合蛋白(mbp-标签)、flag-标签、strep-标签以及其变体(例如strepii-标签)和his-标签的肽基序。以鉴定的cdr为特征的所有本文所披露的抗体都可以包含his-标签结构域，该his-标签结构域通常称为分子的氨基酸序列中的连续his残基的重复，例如五个his残基或六个his残基(六聚组氨酸)的重复。his-标签可以位于例如抗体的n末端或c末端。在一个实施例中，六组氨酸标签经由肽键连接至根据本发明的抗体的c末端。[0148]本发明进一步提供了一种编码本发明的抗体的多核苷酸/核酸分子。核酸分子是由核苷酸构成的生物聚合物。多核苷酸是由共价键合在链中的13个或更多个核苷酸单体构成的生物聚合物。dna(诸如cdna)和rna(诸如mrna)是具有不同生物功能的多核苷酸/核酸分子的实例。核苷酸是充当核酸分子如dna或rna的单体或亚基的有机分子。本发明的核酸分子或多核苷酸可以是双链的或单链的、线性的或环状的。设想核酸分子或多核苷酸被包含在载体中。此外，设想这种载体被包含在宿主细胞中。所述宿主细胞例如在用本发明的载体或多核苷酸/核酸分子转化或转染后能够表达抗体。为此目的，将多核苷酸或核酸分子可操作地连接至控制序列。[0149]遗传密码是将遗传物质(核酸)内编码的信息翻译成蛋白质的一组规则。活细胞中的生物解码是通过以由mrna指定的顺序连接氨基酸的核糖体，使用trna分子携带氨基酸并一次读出mrna三个核苷酸来完成。该密码定义了这些核苷酸三联体(称为密码子)的序列如何指定在蛋白质合成期间接下来将添加哪种氨基酸。除了一些例外，核酸序列中的三核苷酸密码子指定单一氨基酸。因为大多数基因都使用基本上相同的密码进行编码，所以此特定密码通常称为规范或标准遗传密码。[0150]密码子的简并性是遗传密码的冗余，表现为指定氨基酸的三碱基对密码子组合的多重性。简并性发生是因为存在比可编码的氨基酸更多的密码子。编码一种氨基酸的密码子在它们的三个位置中的任何一个都可以不同；然而，通常这种差异是在第二或第三位置。例如，密码子gaa和gag都指定谷氨酸并表现出冗余；但是，都没有指定任何其他氨基酸，并因此没有表现出歧义。不同生物体的遗传密码可能偏向于使用编码相同氨基酸的几个密码子之一而不是其他密码子-也就是说，将发现比偶然预期具有更大频率的一个。例如，亮氨酸由六种不同的密码子指定，其中一些很少被使用。可获得详细说明大多数生物体的基因组密码子使用频率的密码子使用表。重组基因技术通常通过实施称为密码子优化的技术来利用这种效应，其中将那些密码子用于设计被各自宿主细胞(诸如人仓鼠起源的细胞、大肠杆菌(escherichiacoli)细胞或酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)细胞)偏好的多核苷酸，例如以增加蛋白质表达。因此，设想本披露的多核苷酸/核酸分子是密码子优化的。然而，可以使用编码所需氨基酸的任何密码子来设计编码本发明的抗体的多核苷酸/核酸分子。[0151]根据一个实施例，编码本发明的抗体的本发明的多核苷酸/核酸分子呈一个单一分子的形式或两个或更多个分开的分子的形式。如果本发明的抗体构建体是单链，则编码这种构建体的多核苷酸/核酸分子将最可能也呈一个单一分子的形式。然而，还设想抗体(诸如重链和轻链)的不同组分位于单独的多肽链上，在这种情况下，多核苷酸/核酸分子最有可能呈现两个(或更多个)独立分子的形式。[0152]这同样适用于包含本发明的多核苷酸/核酸分子的载体。如果本发明的抗体是单链抗体，则一个载体可以在一个单一位置(作为一个单一开放阅读框，orf)包含对抗体进行编码的多核苷酸。一个载体还可以在分开的位置(具有单独的orf)包含两个或更多个多核苷酸/核酸分子，它们中的每一个编码本发明的抗体(诸如重链和轻链)的不同组分。设想包含本发明的多核苷酸/核酸分子的载体呈一个单一载体的形式或呈两个或更多个分开的载体的形式。在一个实施例中，并且出于在宿主细胞中表达抗体的目的，本发明的宿主细胞应包含编码抗体的多核苷酸/核酸分子或包含这种多核苷酸/核酸分子的载体全部，这意味着抗体的所有组分-无论是编码为一个单一分子还是在单独的分子/位置编码-将在翻译之后组装并一起形成本发明的生物活性抗体。[0153]本发明还提供了包含本发明的多核苷酸/核酸分子的载体。载体是用作将(外来)遗传物质转移到细胞中的媒介物的核酸分子，通常用于复制和/或表达。术语“载体”涵盖但不限于质粒、病毒、粘粒和人工染色体。一些载体专门设计用于克隆(克隆载体)，其他载体设计用于蛋白质表达(表达载体)。所谓的转录载体主要用于扩增其插入物。通常在含有其在大肠杆菌中维持所需的元件的大肠杆菌载体上进行dna操作。然而，载体也可以具有允许它们维持在另一种生物体诸如酵母、植物或哺乳动物细胞中的元件，并且这些载体被称为穿梭载体。将载体插入靶标或宿主细胞中通常被称为转化(对于细菌细胞)和转染(对于真核细胞)，而病毒载体的插入通常被称为转导。[0154]一般而言，工程化载体包含复制起点、多克隆位点和选择性标记。载体本身通常是包含插入物(转基因)和充当载体“骨架”的较大序列的核苷酸序列(通常为dna序列)。虽然遗传密码决定了给定编码区的多肽序列，但其他基因组区域可能会影响这些多肽产生的时间和地点。因此，现代载体可以涵盖除转基因插入物和骨架之外的另外的特征：启动子、遗传标记、抗生素抗性、报告基因、靶向序列、蛋白质纯化标签。称为表达载体(表达构建体)的载体尤其用于在靶细胞中表达转基因，并且通常具有控制序列。[0155]术语“控制序列”是指在宿主生物体中表达可操作地连接的编码序列所必需的dna序列。例如，适用于原核生物的控制序列包括启动子、任选的操纵子序列和核糖体结合位点。已知真核细胞利用启动子、聚腺苷酸化信号、kozak序列和增强子。[0156]当核酸与另一核酸序列处于功能关系时，该核酸是“可操作地连接的”。例如，如果将前序列或分泌前导序列的dna表达为参与多肽分泌的前蛋白，则该前序列或分泌前导序列的dna可操作地连接至该多肽的dna；如果启动子或增强子影响编码序列的转录，则该启动子或增强子可操作地连接至该编码序列；或者如果核糖体结合位点被定位成促进翻译，则该核糖体结合位点可操作地连接至编码序列。通常，“可操作地连接”意指所连接的核苷酸序列是连续的，并且在分泌性前导序列的情形下是连续的并处于阅读相(readingphase)中。然而，增强子不必是连续的。连接通过在方便的限制性位点进行接合来完成。如果不存在此类位点，则根据常规实践使用合成的寡核苷酸衔接子或接头。[0157]“转染”是有意将核酸分子或多核苷酸(包括载体)引入到靶细胞中的过程。该术语主要用于真核细胞中的非病毒方法。转导通常用于描述病毒介导的核酸分子或多核苷酸的转移。动物细胞的转染典型地涉及打开细胞膜中的瞬时孔或“洞”，以允许摄取物质。转染可以使用生物颗粒(诸如病毒转染，也称为病毒转导)、基于化学的方法(诸如使用磷酸钙、脂质转染、fugene、阳离子聚合物、纳米颗粒)或物理处理(诸如电穿孔、显微注射、基因枪、细胞挤压、磁转染、静水压力、穿刺转染(impalefection)、超声波、光学转染、热休克)进行。[0158]术语“转化”用于描述核酸分子或多核苷酸(包括载体)向细菌中，和向非动物真核细胞(包括植物细胞)中的非病毒转移。因此，转化是细菌或非动物真核细胞的基因改变，该基因改变是因通过一个或多个细胞膜从其周围直接摄取并随后并入外源遗传物质(核酸分子)而产生。转化可以通过人工手段进行。为了发生转化，细胞或细菌必须处于感受态，这可能作为对诸如饥饿等环境条件和细胞密度的时间限制反应而发生，并且也可以被人工诱导。[0159]此外，本发明提供了宿主细胞，该宿主细胞经本发明的多核苷酸/核酸分子或本发明的载体转化或转染。如本文所用，术语“宿主细胞”或“受体细胞”旨在包括可以是或已经是载体、外源核酸分子和/或编码本发明的抗体的多核苷酸的受体、和/或抗体本身的受体的任何单个细胞或细胞培养物。通过转化、转染等方式将对应的材料引入细胞中(参见上文)。术语“宿主细胞”还旨在包括单细胞的后代或潜在后代。因为某些改变可能由于天然的、意外的或有意的突变或由于环境影响而在随后世代中发生，所以这种后代事实上可能不会与亲本细胞完全相同(在形态或基因组或全部dna补体中)，但仍包括在本文所用术语的范围内。合适的宿主细胞包括原核细胞或真核细胞，并且包括但不限于细菌(诸如大肠杆菌)、酵母细胞、真菌细胞、植物细胞和动物细胞，诸如昆虫细胞和哺乳动物细胞(例如，仓鼠、鼠类、大鼠、猕猴或人细胞)。[0160]除了原核生物之外，真核微生物(诸如丝状真菌或酵母)是本发明的抗体的合适的克隆或表达宿主。酿酒酵母或普通面包酵母是低等真核宿主微生物中最常用的。然而，许多其他属、物种和菌株通常可获得并且可用于本文中，诸如粟酒裂殖酵母(schizosaccharomycespombe)、克鲁维酵母属(kluyveromyce)宿主，诸如乳酸克鲁维酵母(k.lactis)、脆壁克鲁维酵母(k.fragilis)(atcc12424)、保加利亚克鲁维酵母(k.bulgaricus)(atcc16045)、威克克鲁维酵母(k.wickeramii)(atcc24178)、瓦尔提鲁维酵母(k.waltii)(atcc56500)、果蝇克鲁维酵母(k.drosophilarum)(atcc36906)、耐热克鲁维酵母(k.thermotolerans)和马克斯克鲁维酵母(k.marxianus)；耶氏酵母属(ep402226)；毕赤酵母(pichiapastoris)(ep183070)；假丝酵母属(candida)；瑞氏木霉(trichodermareesia)(ep244234)；粗糙脉孢菌(neurosporacrassa)；许旺酵母属(schwanniomyces)，诸如西方许旺酵母(schwanniomycesoccidentalis)；和丝状真菌，诸如脉孢菌属(neurospora)、青霉属(penicillium)、弯颈霉属(tolypocladium)和曲霉属(aspergillus)宿主，诸如构巢曲霉(a.nidulans)和黑曲霉(a.niger)。[0161]用于表达糖基化抗体的合适宿主细胞衍生自多细胞生物体。无脊椎动物细胞的实例包括植物和昆虫细胞。已经鉴定了来自诸如草地贪夜蛾(spodopterafrugiperda)(毛虫)、埃及伊蚊(aedesaegypti)(蚊子)、白纹伊蚊(aedesalbopictus)(蚊子)、黑腹果蝇(drosophilamelanogaster)(果蝇)和家蚕(bombyxmori)的宿主的许多杆状病毒株和变体以及相应的许可性昆虫宿主细胞。用于转染的多种病毒株是公众可获得的，例如苜蓿银纹夜蛾(autographacalifornica)npv的l-1变体和家蚕npv的bm-5株，并且根据本发明，此类病毒可以用作本文的病毒，特别是用于转染草地贪夜蛾细胞。[0162]棉花、玉米、马铃薯、大豆、矮牵牛、番茄、拟南芥和烟草的植物细胞培养物也可以用作宿主。可用于在植物细胞培养物中产生蛋白质的克隆和表达载体是本领域技术人员已知的。参见，例如hiatt等人,nature[自然](1989)342:76-78，owen等人(1992)bio/technology[生物技术]10:790-794，artsaenko等人(1995)theplantj[植物杂志]8:745-750，和fecker等人(1996)plantmolbiol[植物分子生物学]32:979-986。[0163]然而，对脊椎动物细胞的兴趣最大，并且培养物(细胞培养物)中脊椎动物细胞的繁殖已成为常规程序。有用的哺乳动物宿主细胞系的实例是由sv40(诸如cos-7，atcccrl1651)转化的猴肾cv1系；人胚胎肾系(诸如293细胞或亚克隆用于在悬浮培养中生长的293细胞，graham等人,j.genvirol.[普通病毒学杂志]36:59(1977))；幼仓鼠肾细胞(诸如bhk，atccccl10)；中国仓鼠卵巢细胞/-dhfr(诸如cho，urlaub等人,proc.natl.acad.sci.usa[美国国家科学院院刊]77:4216(1980))；小鼠塞托利细胞(sertolicell)(诸如tm4,mather,biol.reprod.[生殖生物学]23:243-251(1980))；猴肾细胞(诸如cviatccccl70)；非洲绿猴肾细胞(诸如vero-76，atcccrl1587)；人宫颈癌细胞(诸如hela，atccccl2)；犬肾细胞(诸如mdck，atccccl34)；布法罗大鼠肝细胞(诸如brl3a，atcccrl1442)；人肺细胞(诸如w138，atccccl75)；人肝细胞(诸如hepg2，14138065)；小鼠乳腺肿瘤(诸如mmt060562，atccccl-51)；tri细胞(mather等人,annalsn.yacad.sci.[纽约科学院年刊](1982)383:44-68)；mrc5细胞；fs4细胞；和人肝癌细胞系(诸如hepg2)。[0164]在另一个实施例中，本发明提供了一种用于产生本发明的抗体的工艺，所述工艺包括在允许表达本发明的抗体的条件下培养本发明的宿主细胞并且从培养物中回收所产生的抗体。[0165]如本文所用，术语“培养”是指细胞在合适的条件下在培养基中的体外维持、分化、生长、增殖和/或繁殖。使细胞在适当的温度和气体混合物下在细胞生长培养基中生长并维持。对于每种细胞类型，培养条件变化很大。典型的生长条件是约37℃的温度、约5％的co2浓度和约95％的湿度。生长培养基的配方可以例如在ph值、碳源(诸如葡萄糖)浓度、生长因子的性质和浓度、以及其他营养素(诸如氨基酸或维生素)的存在方面变化。用于补充培养基的生长因子通常衍生自动物血液的血清，诸如胎牛血清(fbs)、牛小牛血清(fcs)、马血清和猪血清。细胞可以在悬浮液中生长或作为贴壁培养物生长。还存在如下细胞系，这些细胞系已经被修饰以能够在悬浮培养物中存活，因此它们可以按比贴壁条件将允许的更高密度生长。[0166]术语“表达”包括涉及产生本发明的抗体的任何步骤，包括但不限于转录、转录后修饰、翻译、折叠、翻译后修饰、靶向特定亚细胞或细胞外位置、和分泌。术语“回收”是指旨在从细胞培养物中分离抗体的一系列过程。“回收”或“纯化”过程可以分离细胞培养物的蛋白质和非蛋白质部分，并最终将所需抗体与所有其他多肽和蛋白质分离。分离步骤通常利用蛋白质大小、物理化学特性、结合亲和力和生物活性的差异。制备型纯化旨在产生相对大量的纯化蛋白质供后续使用，而分析型纯化产生相对少量的蛋白质用于各种研究或分析目的。[0167]当使用重组技术时，抗体可以在周质空间中细胞内产生，或直接分泌到培养基中。如果抗体是在细胞内产生，则作为第一步，例如通过离心或超滤去除宿主细胞或裂解片段的微粒状碎片。本发明的抗体可以例如在诸如大肠杆菌等细菌中产生。在表达之后，将构建体从可溶性级分中的细菌细胞糊中分离出来，并且可以例如经由亲和色谱和/或尺寸排阻进行纯化。最终纯化可以以与用于纯化在哺乳动物细胞中表达并分泌到培养基中的抗体的工艺类似的方式进行。carter等人(biotechnology[生物技术](ny)1992年2月；10(2):163-7)描述了用于分离分泌到大肠杆菌的周质空间中的抗体的程序。[0168]在抗体分泌到培养基中的情况下，通常首先使用可商购的蛋白质浓缩滤器(例如，超滤单元)从此类表达系统的上清液进行浓缩。[0169]可以使用例如羟基磷灰石色谱、凝胶电泳、透析和亲和色谱回收或纯化从宿主细胞制备的本发明的抗体。根据有待回收的抗体，也可获得用于蛋白质纯化的其他技术，诸如离子交换柱上分级分离、混合模式离子交换、hic、乙醇沉淀、尺寸排阻色谱、反相hplc、在二氧化硅上进行的色谱、在肝素琼脂糖上进行的色谱、在阴离子或阳离子交换树脂(诸如聚天冬氨酸柱)上进行的色谱、免疫亲和(诸如蛋白质a/g/l)色谱、色谱聚焦、sds-page、超速离心和硫酸铵沉淀。蛋白酶抑制剂可以被包括在任何前述步骤中以便抑制蛋白水解，并且抗生素可以被包括来防止污染物的生长。[0170]此外，本发明提供了一种组合物或配制品，该组合物或配制品包含本发明的抗体或包含根据本发明的工艺产生的抗体。该组合物优选地是诊断组合物。如本文所用，术语“诊断组合物”涉及适用于诊断试剂盒或检测系统中的组合物。本发明的一种可能的诊断组合物包含一种或多种本发明的抗体，优选地其量可用于检测样品中的muc17。该诊断组合物可以进一步包含一种或多种载剂、稳定剂、赋形剂、稀释剂、增溶剂、表面活性剂、乳化剂、防腐剂和/或佐剂的合适配制品。本发明的诊断组合物包括但不限于液体、冷冻和冻干组合物。[0171]该组合物可以包含载剂，诸如诊断学上可接受的载剂。一般而言，如本文所用，“诊断学上可接受的载剂”意指与诊断用途相容的所有的水性和非水性溶液、无菌溶液、溶剂、缓冲液(例如磷酸盐缓冲盐水(pbs)溶液)、水、悬浮液、乳液(诸如油/水乳液)、各种类型的润湿剂、脂质体、分散介质和包衣。此类介质和药剂在诊断组合物中的使用在本领域中是熟知的，并且包含此类载剂的组合物可以通过熟知的常规方法配制。[0172]某些实施例提供了诊断组合物，这些诊断组合物包含本发明的抗体和另外一种或多种赋形剂，诸如在本部分和本文其他地方说明性描述的那些赋形剂。赋形剂在本发明中可用于多种目的，诸如调整配制品的物理、化学或生物特性，诸如调整粘度和/或本发明的工艺以改善有效性和/或稳定此类配制品和工艺，以防止例如由于在制造、运输、储存、使用前制备、施用和其后过程中发生的应力而导致的降解和腐坏。赋形剂通常应以其最低有效浓度使用。[0173]在某些实施例中，为了改变、维持或保存组合物的某些特征(诸如ph、摩尔渗透压浓度、粘度、透明度、颜色、等渗性、气味、无菌性、稳定性、溶解或释放速率、吸附性或渗透性)，诊断组合物可以含有配制材料(参见remington’spharmaceuticalsciences[雷明登氏药学全书],第18版,1990,马克出版公司(mackpublishingcompany))。在此类实施例中，合适的配制材料可以包括但不限于：[0174]·氨基酸[0175]·抗微生物剂，诸如抗细菌剂和抗真菌剂[0176]·抗氧化剂[0177]·用于将组合物维持在生理ph或稍低的ph下(典型地在约5至约8或9的ph范围内)的缓冲液、缓冲系统和缓冲剂[0178]·非水性溶剂、植物油和可注射的有机酯[0179]·水性载剂包括水、醇/水性溶液、乳液或悬浮液，包括盐水和缓冲介质[0180]·可生物降解聚合物，诸如聚酯[0181]·增积剂[0182]·螯合剂[0183]·等渗剂和吸收延迟剂[0184]·络合剂[0185]·填充剂[0186]·碳水化合物[0187]·(低分子量)蛋白质、多肽或蛋白质载剂，优选人起源的[0188]·着色剂和调味剂[0189]·含硫还原剂[0190]·稀释剂[0191]·乳化剂[0192]·亲水性聚合物[0193]·成盐抗衡离子[0194]·防腐剂[0195]·金属络合物[0196]·溶剂和助溶剂[0197]·糖和糖醇[0198]·悬浮剂[0199]·表面活性剂或润湿剂[0200]·稳定性增强剂[0201]·张力增强剂[0202]·肠胃外递送媒介物[0203]·静脉内递送媒介物[0204]众所周知，诊断组合物的不同成分可以具有不同的效应，例如，并且氨基酸可以充当缓冲液、稳定剂和/或抗氧化剂；甘露醇可以充当增积剂和/或张力增强剂；氯化钠可以充当递送媒介物和/或张力增强剂；等等。[0205]根据另一方面，本发明提供了一种检测系统，该检测系统包含：a)与muc17结合的第一单克隆抗体(或其衍生物)，和b)任选地与muc17结合的第二单克隆抗体(或其衍生物)，其中第一单克隆抗体(或其衍生物)与muc17的结合是在与muc17结合的第二单克隆抗体(或其衍生物)的存在下发生的。[0206]本发明还提供了一种检测系统，该检测系统包含：a)与muc17结合的第一单克隆抗体(或其衍生物)，和b)任选地与muc17结合的第二单克隆抗体(或其衍生物)，其中第二单克隆抗体(或其衍生物)与muc17的结合是在与muc17结合的第一单克隆抗体(或其衍生物)的存在下发生的。[0207]本发明还提供了一种检测系统，该检测系统包含：a)与muc17结合的第一单克隆抗体(或其衍生物)，和b)任选地与muc17结合的第二单克隆抗体(或其衍生物)，其中第一单克隆抗体(或其衍生物)与muc17的结合是在与muc17结合的第二单克隆抗体(或其衍生物)的存在下发生的，并且其中第二单克隆抗体(或其衍生物)与muc17的结合是在与muc17结合的第一单克隆抗体(或其衍生物)的存在下发生的。[0208]“检测系统”是包含用于进行分析测定的试剂的试剂盒或工具(或诊断试剂盒/工具)。在本发明的上下文中，该测定检测和/或定量样品(通常是组织样品)中muc17的存在。该检测系统包含与muc17结合的抗体。通常，检测系统涉及使用固体支持物(诸如微量滴定板或膜)，该固体支持物充当一个表面来固定有待检测的抗原(例如在“直接elisa”的情况下)或与muc17结合的(单克隆)抗体(“捕获抗体”)或与muc17结合的抗体(捕获抗体)结合的“第二抗体”(例如，抗fc抗体)。通常，这种固定是非特异性地(通过吸附到表面上)或特异性地(通过由抗体例如第二抗体捕获)发生的。此外，检测系统可以包含与muc17结合的(单克隆)检测抗体(任选地与酶、可检测标记或报告基团偶联)，以及任选地第二抗体(例如，抗fc抗体)，该第二抗体与检测抗体结合并且与酶、可检测标记或报告基团偶联。[0209]一种非常熟知的检测系统是elisa测定，该测定可以用于本发明的目的。“夹心”elisa用于检测样品抗原或定量未知量的抗原。这些步骤可能包括：提供与已知量的“捕获抗体”结合的表面。这种结合可以通过将捕获抗体吸附到表面上直接发生，或者通过被吸附在表面上并与捕获抗体结合的第二抗体(例如抗fc抗体)发生。表面上的任何非特异性结合位点均被阻断。将含有抗原的样品施加到表面，并且抗原被抗体捕获(结合)。洗涤板以去除未结合的抗原。添加“检测抗体”并且“检测抗体”与抗原结合。该检测抗体可以与酶、可检测标记或报告基团偶联(例如，共价连接)。如果不是这种情况，则施用与酶、可检测标记或报告基团偶联并与检测抗体结合(例如，与其fc区结合)的第二抗体。洗涤板以去除任何未结合的抗体。添加化学底物，该化学底物被转化(例如，被酶)成可检测的形式，诸如光信号(例如，彩色或荧光)或电化学信号。测量板孔或表面的吸光度或者荧光或电化学信号(例如，电流)，以确定抗原的存在和/或量。常用的酶标志物包括：[0210]-opd(邻苯二胺二盐酸盐)变成琥珀色以检测辣根过氧化物酶(hrp)，该酶通常用作缀合蛋白[0211]-tmb(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)在检测hrp时变为蓝色，并且在检测硫酸或磷酸时变为黄色[0212]-检测hrp时，abts(2,2'-连氮双[3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]-二铵盐)变为绿色[0213]-检测碱性磷酸酶时，pnpp(对硝基苯磷酸二钠盐)变为黄色[0214]传统的elisa典型地涉及发色的报告分子和底物，它们会产生可观察到的颜色变化以指示抗原的存在。类似于elisa的新技术使用荧光、电化学发光和定量pcr报告分子来产生可定量的信号。这些新的报告分子可以具有多种优势，包括更高的灵敏度和多路复用。从技术上讲，这些测定并非严格意义上的“elisa”，因为它们不是“酶联”的，而是与一些非酶报告分子相连的。但是，由于这些测定中的一般原理在很大程度上是相似的，因此它们通常与elisa归为同一类别。[0215]该检测系统可以以定性或定量形式使用。定性结果为样品提供简单的阳性或阴性结果(是或否)。阳性与阴性之间的截止可能是统计上的。通常使用标准偏差(测试固有的误差)的两倍或三倍区分阳性样品与阴性样品。以定量形式，将样品的光密度(od)或电化学信号与标准曲线进行比较，该曲线典型地是已知浓度的靶分子溶液的连续稀释物。[0216]本发明还提供了检测系统的第一单克隆抗体(或结合结构域)：[0217]a)包含vh区，该vh区包含如seqidno:2中描绘的vh-cdr1、如seqidno:3中描绘的vh-cdr2、和如seqidno:4中描绘的vh-cdr3；和vl区，该vl区包含如seqidno:6中描绘的vl-cdr1、如seqidno:7中描绘的vl-cdr2、和如seqidno:8中描绘的vl-cdr3；[0218]b)与a)的抗体结合相同的muc17表位或与a)的抗体竞争结合muc17；或[0219]c)与b)的抗体结合相同的muc17表位或与b)的抗体竞争结合muc17。[0220]本发明还提供了检测系统的单克隆抗体：[0221]a)包含seqidno:5中包含的vh区；[0222]b)包含seqidno:7中包含的vl区；[0223]c)包含seqidno:5中包含的vh区和seqidno:7中包含的vl区；[0224]d)与c)的抗体结合相同的muc17表位或与c)的抗体竞争结合muc17；或[0225]e)与d)的抗体结合相同的muc17表位或与d)的抗体竞争结合muc17。[0226]设想使用第一单克隆抗体作为捕获抗体并且使用第二单克隆抗体作为检测抗体的检测系统。[0227]在另一个方面，本发明还提供了本发明的抗体在以下方面的用途或本发明的检测系统在以下方面的用途：[0228]-检测样品中的muc17；[0229]-定量样品中的muc17；[0230]-诊断与muc17或增加的muc17相关联的疾病；[0231]-对被诊断患有与muc17或增加的muc17相关联的疾病的患者进行分层；[0232]-监测与muc17或增加的muc17相关联的疾病的进展；或[0233]-监测对与muc17或增加的muc17相关联的疾病的治疗的应答。[0234]在一个实施例中，该样品是生物学样品，诸如人生物学样品。样品(生物学样品/人生物学样品)可以是血清样品、血浆样品、血液样品、骨髓样品或组织样品。该样品也可以是从骨髓单核细胞或外周血单核细胞的细胞培养物中获得的上清液。该样品可以获得自受试者，例如怀疑患有或患有(被诊断患有)与muc17或增加的muc17相关联的疾病的人受试者，或者已经接受与muc17或增加的muc17相关联的疾病的治疗的受试者。在特定的实施例中，该样品是衍生自怀疑受肿瘤性生长(即，癌症)影响的组织的组织样品。[0235]疾病是一种特殊的异常病状，这种病状会对生物体(诸如人)的一部分或全部的结构或功能产生负面影响，而并非由于任何外部伤害造成。疾病通常被解释为与特定体征和症状相关联的“医学病状”或“障碍”。根据本发明的疾病与muc17或增加的muc17相关联。术语“增加”用于与健康受试者(即没有患这种疾病的受试者)进行的比较。根据一个实施例，与muc17或增加的muc17相关联的疾病是“muc17阳性赘生物”。[0236]“赘生物”是组织的异常生长，通常但不总是形成肿块。当也形成肿块时，通常称之为“肿瘤”。在脑肿瘤中，细胞的不受控制的分裂意指赘生物的肿块尺寸增加，并且在诸如颅内腔的受限空间中这很快造成问题，因为该肿块侵入大脑的空间将其推到旁边，导致脑组织压缩和颅内压增高以及实质破坏。根据本发明，“赘生物”或“肿瘤”还是指将受益于用针对muc17、特别是细胞表面上表达的muc17的疗法(诸如，muc17特异性抗体-包括裸抗体、抗体-药物缀合物(adc))进行的治疗的病状。该病状包括慢性和急性障碍或疾病，这些障碍或疾病包括那些使哺乳动物易患所讨论的病状(赘生物或肿瘤)的病理学病状。[0237]赘生物或肿瘤可以是良性的、潜在恶性的(癌前)、或恶性的(癌性)。恶性赘生物/肿瘤通常被称为癌症。它们通常侵入并破坏周围组织并可形成转移瘤，即它们扩散到身体的其他部位、组织或器官。“原发性肿瘤”是在肿瘤进展开始并继续产生癌性肿块的解剖部位处生长的肿瘤。例如，当胃肠道形成异常细胞时，就会发生胃肠肿瘤。大多数癌症在其原发部位发展，但随后继续形成转移瘤或扩散到身体的其他部位(例如组织和器官)。这些进一步的肿瘤是继发性肿瘤。大多数癌症在它们的原发部位之后、甚至在它们已经扩散到身体的其他部分之后继续被调用。[0238]出于本发明的目的，术语“赘生物”、“肿瘤”和“癌症”可以可互换地使用，并且它们包括原发性肿瘤/癌症和继发性肿瘤/癌症(或“转移瘤”)以及mrd。术语“微小残留病”(mrd)是指在癌症治疗后留在患者体内的少量残留癌细胞存在的证据，例如当患者处于缓解期时(患者没有疾病症状或体征)。通过常规手段通常不能检测到极少量的剩余癌细胞，因为用于评估或检测癌症的标准测试不够敏感以检测mrd。如今，mrd的分子生物学测试非常灵敏，这些测试诸如流式细胞术、pcr和下一代测序。这些测试可以测量组织样品中最低水平的癌细胞，有时低至百万个正常细胞中的一个癌细胞。在本发明的上下文中，设想无论是否检测到mrd，赘生物的术语“预防”、“治疗”或“改善”也涵盖“预防、治疗或改善mrd”。[0239]“与muc17或增加的muc17相关联的疾病”、“muc17阳性赘生物”或“(muc17阳性)赘生物”可以选自下组，该组包括但不限于……[0240]“诊断”或“医学诊断”是确定哪种障碍或病状可以解释受试者的症状和体征的过程。通常，在此过程中会执行一种或多种诊断程序，诸如诊断测试或医学测试。在医学中，术语“监测”是指随着时间的推移观察疾病、病状或一项或多项医学参数。它可以通过使用医疗监视器连续测量某些参数和/或通过重复执行医学测试来执行。诊断测试或医学测试是为检测、诊断或监测疾病、疾病过程、易感性和/或确定治疗过程而执行的医学程序。它与临床化学和分子诊断有关，并且这些程序典型地在医学实验室中执行。[0241]医学疗法或治疗是治愈或改善疾病的努力。在医学领域，常见的治疗包括药疗。使用药疗(也称为药品、制药药物或药物)来诊断、治愈、治疗或预防疾病。因此，术语“治疗”是指治疗性治疗和预防性(prophylactic或preventative)措施两者。[0242]在另一个方面，本发明还提供了一种用于检测和/或定量样品中的muc17的方法，该方法包括以下步骤：[0243](a)使用本发明的抗体或使用本发明的检测系统确定样品中的muc17含量；和[0244](b)将步骤(a)中确定的muc17含量与以下比较：[0245](i)muc17含量的预定义值，[0246](ii)对照样品中确定的muc17含量，或[0247](c)在先前时间点处从同一来源或受试者获得的样品中确定的muc17含量。[0248]出于本发明的目的，术语(muc17的)“量”或“含量”可以与术语(muc17的)“水平”、“量”或“浓度”可互换地使用。“muc17含量的预定义值”可以是已经预先确定的“截止值”。该值可以例如指示样品中的一定muc17含量指示着与muc17或增加的muc17相关联的疾病或muc17阳性赘生物。例如，如果确定样品中的muc17含量为高于预定义截止值三个标准偏差，则从其获得样品的受试者被认为呈胃肠癌(或如本文所述的其他疾病)阳性。“对照样品”通常从与有待的分析样品具有相同性质的来源获得。对照样品可以是代表“正常”muc17含量(例如代表健康受试者)的样品(“阴性对照样品”)，或者也可以是代表muc17含量“异常增加”的样品(“阳性对照样品”)(例如代表患有如本文定义的疾病的受试者)。[0249]在另一个方面，本发明提供了一种用于诊断与muc17或增加的muc17相关联的疾病的方法，该方法包括以下步骤：[0250](a)使用本发明的抗体或使用本发明的检测系统确定样品中的muc17含量；和[0251](b)将步骤(a)中确定的muc17含量与以下比较：[0252](i)指示这种疾病不存在的muc17含量的预定义截止值，或者[0253](ii)代表这种疾病不存在的在对照样品中确定的muc17含量，[0254]其中与(i)的预定义截止值或(ii)的在对照样品中确定的muc17含量相比，步骤(a)中确定的muc17含量更高指示存在与muc17或增加的muc17相关联的疾病。[0255]在另一个方面，本发明还提供了一种用于监测与muc17或增加的muc17相关联的疾病的进展或用于监测对与muc17或增加的muc17相关联的疾病的治疗的应答的方法，该方法包括以下步骤：[0256](a)使用本发明的抗体，或使用本发明的检测系统，在第一个时间点处确定从被诊断患有这种疾病的受试者获得的生物学样品中的muc17含量；[0257](b)使用本发明的抗体，或使用本发明的检测系统，在第二个(稍后的)时间点处或在治疗之后确定从受试者获得的生物学样品中的muc17含量；以及[0258](c)将步骤(a)中确定的muc17含量与步骤(b)中确定的muc17含量比较；[0259]其中与步骤(b)中确定的muc17含量相比，步骤(a)中确定的muc17含量更高指示疾病正在进展，并且/或者其中与步骤(b)中确定的muc17含量相比，步骤(a)中确定的muc17含量更低指示所述疾病正在进入缓解期或所述疾病对该治疗产生应答。[0260]对于上述方法，设想“样品”是生物学样品，诸如人生物学样品。样品可以是(人)组织样品，或(人)的细胞培养物。该“样品”还可以获得自人受试者，优选地，怀疑患有或患有(被诊断为患有)与muc17或增加的muc17相关联的疾病的人受试者，或已经接受与muc17或增加的muc17相关联的疾病的治疗的受试者，如以上所定义的。[0261]对于上述方法，设想“与muc17或增加的muc17相关联的疾病”可以是muc17阳性赘生物。该疾病或muc17阳性赘生物可以下组：胃癌、食管癌、胃食管癌(包括胃食管结合部癌)、胃肠癌、和胰腺癌。[0262]本发明还考虑以下项目：[0263]项目1.一种与可溶性muc17(muc17)结合或不结合的单克隆抗体，其中该抗体与muc17的结合是在与muc17结合的第二单克隆抗体的存在下发生的。[0264]项目2.根据项目1所述的单克隆抗体，其中muc17具有如seqidno:1中描绘的氨基酸序列。[0265]项目3.根据项目1或2所述的单克隆抗体，其中该单克隆抗体与muc17的结合是在与muc17结合的第三抗体的存在下发生的。[0266]项目4：根据前述项目中任一项所述的单克隆抗体，其中该单克隆抗体包含啮齿动物，例如小鼠或兔vh区和/或vl区。[0267]项目5.根据前述项目中任一项所述的单克隆抗体，其中该单克隆抗体对muc17的亲和力(kd)为约≤10-7m、≤10-8m、≤10-9m、或≤10-10m。[0268]项目6.根据项目5所述的单克隆抗体，其中该亲和力在biacore测定中确定。[0269]项目7.如前述项目中任一项所述的单克隆抗体，其中该单克隆抗体：[0270]a)包含vh区，该vh区包含如seqidno:2中描绘的vh-cdr1、如seqidno:3中描绘的vh-cdr2、和如seqidno:4中描绘的vh-cdr3；和vl区，该vl区包含如seqidno:6中描绘的vl-cdr1、如seqidno:7中描绘的vl-cdr2、和如seqidno:8中描绘的vl-cdr3；[0271]b)与a)的抗体结合相同的muc17表位或与a)的抗体竞争结合muc17；[0272]c)与b)的抗体结合相同的muc17表位或与b)的抗体竞争结合muc17；或[0273]d)与c)的抗体结合相同的muc17表位或与c)的抗体竞争结合muc17。[0274]项目8.根据项目7所述的单克隆抗体，该单克隆抗体包含[0275]a)vh区，该vh区包含与seqidno:5中包含的vh区具有至少60％、65％或70％同源性，优选至少75％或80％同源性，更优选至少85％、90％、91％、92％、93％、94％同源性，并且最优选95％、96％、97％、98％或99％同源性的氨基酸序列；vl区，该vl区包含与seqidno:9中包含的vl区具有至少60％、65％或70％同源性，优选至少75％或80％同源性，更优选至少85％、90％、91％、92％、93％、94％同源性，并且最优选95％、96％、97％、98％或99％同源性的氨基酸序列；并且任选地包含如seqidno:2中描绘的vh-cdr1、如seqidno:3中描绘的vh-cdr2、和如seqidno:4中描绘的vh-cdr3，并且任选地包含如seqidno:6中描绘的vl-cdr1、如seqidno:7中描绘的vl-cdr2、和如seqidno:8中描绘的vl-cdr3。[0276]项目9.根据项目7所述的单克隆抗体，其中该单克隆抗体：[0277]a)包含seqidno:5中包含的vh区；[0278]b)包含seqidno:9中包含的vl区；[0279]c)包含seqidno:5中包含的vh区和seqidno:9中包含的vl区；[0280]d)与c)的抗体结合相同的muc17表位或与c)的抗体竞争结合muc17；[0281]e)与d)的抗体结合相同的muc17表位或与d)的抗体竞争结合muc17；或[0282]f)与e)的抗体结合相同的muc17表位或与e)的抗体竞争结合muc17。[0283]项目10.根据项目6至9中任一项所述的单克隆抗体，其中经由用嵌合或突变的muc17分子进行的表位作图、定点诱变(例如丙氨酸扫描)、高通量鸟枪诱变表位作图、交联耦合质谱法、x射线共晶体学、低温电子显微镜检查和氢-氘交换来确定与该muc17表位的结合。[0284]项目11.如项目6至9中任一项所述的单克隆抗体，其中与muc17结合的竞争是在竞争性elisa测定中、在octet竞争测定中或在使用亲和素偶联微粒的竞争测定中确定的。[0285]项目12.根据项目6至9或11中任一项所述的单克隆抗体，其中与muc17结合的竞争被定义为在至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的两种测试抗体之间发生的竞争。[0286]项目13.根据前述项目中任一项所述的单克隆抗体，该单克隆抗体是igg、igd、ige、igm或iga抗体，优选地是igg抗体，诸如igg1、igg2、igg3或igg4抗体。[0287]项目14.根据前述项目中任一项所述的单克隆抗体，其中该单克隆抗体和/或该第二单克隆抗体与生物学样品中的muc17结合，该生物学样品优选地是人生物学样品，诸如(人)血清样品、(人)血浆样品、(人)血液样品、(人)骨髓样品、(人)组织样品或衍生自胃、胃肠道、食管、胃食管包括胃食管结合部、和胰腺的组织样品。[0288]项目15.一种多核苷酸，该多核苷酸编码根据前述项目中任一项所述的单克隆抗体。[0289]项目16.一种载体，该载体包含根据项目15所述的多核苷酸。[0290]项目17.一种宿主细胞，该宿主细胞经根据项目15所述的多核苷酸或根据项目16所述的载体转化或转染。[0291]项目18.一种用于产生根据项目1至14中任一项所述的单克隆抗体的工艺，所述工艺包括在允许所述单克隆抗体表达的条件下培养根据项目17所述的宿主细胞并从培养物中回收所产生的单克隆抗体。[0292]项目19.一种组合物，该组合物包含根据项目1至14中任一项所述的或根据项目18所述的工艺产生的单克隆抗体。[0293]项目20.一种检测系统，该检测系统包含[0294]a)与muc17结合的第一单克隆抗体，和[0295]b)与muc17结合的第二单克隆抗体第一单克隆，[0296]其中该第一单克隆抗体与muc17的结合是在与muc17结合的该第二单克隆抗体的存在下发生的，并且/或者其中该第二单克隆抗体与muc17的结合是在与muc17结合的该第一单克隆抗体的存在下发生的。[0297]项目21.根据项目20所述的检测系统，其中muc17具有如seqidno:1中描绘的氨基酸序列。[0298]项目22.根据项目20或21所述的检测系统，其中该第一单克隆抗体与muc17的结合和该第二单克隆抗体与muc17的结合是在与muc17结合的第三抗体的存在下发生的。[0299]项目23.根据项目20至23中任一项所述的检测系统，其中该第一单克隆抗体和/或该第二单克隆抗体包含小鼠vh区和/或小鼠vl区。[0300]项目24.根据项目20至23中任一项所述的检测系统，其中该第一单克隆抗体和/或该第二单克隆抗体对muc17的亲和力(kd)为约≤10-7m、≤10-8m、≤10-9m、或≤10-10m。[0301]项目25.根据项目20至24中任一项所述的检测系统，其中该第一单克隆抗体：[0302]a)包含vh区，该vh区包含如seqidno:2中描绘的vh-cdr1、如seqidno:3中描绘的vh-cdr2、和如seqidno:4中描绘的vh-cdr3；和vl区，该vl区包含如seqidno:6中描绘的vl-cdr1、如seqidno:7中描绘的vl-cdr2、和如seqidno:8中描绘的vl-cdr3；或[0303]b)与a)或b)的抗体结合相同的muc17表位或与a)的抗体竞争结合muc17。[0304]项目26.根据项目20至26中任一项所述的检测系统，其中该第一单克隆抗体和/或该第二单克隆抗体是igg、igd、ige、igm或iga抗体，优选地是igg抗体，诸如igg1、igg2、igg3或igg4抗体。[0305]项目27.根据项目20至26中任一项所述的检测系统，其中该第一单克隆抗体用作捕获抗体，并且第二单克隆抗体用作检测抗体，或者其中该第一单克隆抗体用作检测抗体，并且该第二单克隆抗体用作捕获抗体。[0306]项目28.根据项目1至14中任一项所述的单克隆抗体或根据项目20至27中任一项所述的检测系统在以下方面的用途：[0307]-检测样品中的muc17；[0308]-定量样品中的muc17；[0309]-诊断与muc17或增加的muc17相关联的疾病；[0310]-对被诊断患有与muc17或增加的muc17相关联的疾病的患者进行分层；[0311]-监测与muc17或增加的muc17相关联的疾病的进展；或[0312]-监测对与muc17或增加的muc17相关联的疾病的治疗的应答。[0313]项目29.一种用于检测和/或定量样品中的muc17的方法，该方法包括以下步骤：[0314](a)使用根据项目1至14中任一项所述的单克隆抗体(或衍生物)，或使用根据项目20至27中任一项所述的检测系统，确定样品中的muc17含量；以及[0315](b)将步骤(a)中确定的muc17含量与以下比较：[0316](i)muc17含量的预定义值，[0317](ii)对照样品中确定的muc17含量，或[0318](iii)在先前时间点处从同一来源或受试者获得的样品中确定的muc17含量。[0319]项目30.一种用于诊断与muc17或增加的muc17相关联的疾病的方法，该方法包括以下步骤：(a)使用根据项目1至14中任一项所述的单克隆抗体，或使用根据项目20至27中任一项所述的检测系统，确定样品中、优选地用于ihc的组织样品中的muc17含量；以及(b)将步骤(a)中确定的muc17含量与以下比较：[0320](i)指示这种疾病不存在的muc17含量的预定义截止值，或者[0321](ii)代表这种疾病不存在的在对照样品中确定的muc17含量，[0322]其中与(i)的该预定义截止值或(ii)的在对照样品中确定的该muc17含量相比，步骤(a)中确定的muc17含量更高指示存在与muc17或增加的muc17相关联的疾病。[0323]项目31.一种用于监测与muc17或增加的muc17相关联的疾病的进展或用于监测对与muc17或增加的muc17相关联的疾病的治疗的应答的方法，该方法包括以下步骤：[0324](a)使用根据项目1至14中任一项所述的单克隆抗体，或使用根据项目20至28中任一项所述的检测系统，在第一个时间点处确定从被诊断患有这种疾病的受试者获得的生物学样品中的muc17含量；[0325](b)使用根据项目1至14中任一项所述的单克隆抗体，或使用根据项目20至28中任一项所述的检测系统，在第二个时间点处或在治疗之后确定从该受试者获得的生物学样品中的muc17含量；以及[0326](c)将步骤(a)中确定的该muc17含量与步骤(b)中确定的该muc17含量比较；[0327]其中与步骤(b)中确定的muc17含量相比，步骤(a)中确定的muc17含量更高指示疾病正在进展，并且/或者其中与步骤(b)中确定的muc17含量相比，步骤(a)中确定的muc17含量更低指示所述疾病正在进入缓解期或所述疾病对该治疗产生应答。[0328]项目32.根据项目28所述的用途或根据项目29至31中任一项所述的方法，其中该样品是生物学样品，优选地是人生物学样品，诸如血清样品、血浆样品、血液样品、骨髓样品、组织样品或者从骨髓单核细胞或外周血单核细胞的细胞培养物中获得的上清液，优选地是组织样品。[0329]项目33.根据项目28或32所述的用途或根据项目29至32中任一项所述的方法，其中该样品获得自人受试者，优选地怀疑患有或患有与muc17或增加的muc17相关联的疾病的人受试者，或者已经接受与muc17或增加的muc17相关联的疾病的治疗的受试者。[0330]项目34.根据项目29、32或33中任一项所述的用途或根据项目29至33中任一项所述的方法，其中该疾病选自下组，该组由以下组成：胃癌、食管癌、胃食管癌包括胃食管结合部癌、胃肠癌、和胰腺癌。[0331]项目35.一种治疗患有至少一种癌症的患者，优选地人患者的方法，该癌症选自下组，该组包括：食管癌、胃癌、胃肠癌、胃食管癌包括胃食管结合部癌、和/或胰腺癌，其中所述患者具有癌细胞，特别是结直肠癌、胃癌、胰腺癌、结肠腺癌、食管癌、胰腺腺癌、直肠腺癌和胃腺癌的细胞上增加的muc17表达。[0332]项目36.根据项目35所述的治疗方法，其中所述增加的表达在根据项目29-31中任一项所述的方法中确定，或者其中包括用于根据以上提及的项目中任一项所述使用的与诊断抗体或包含其的组合物或药物相关的用途或产物。[0333]项目37.根据项目35和36所述的治疗方法，该方法包括向所述患者施用药物，其中该药物选自下组，该组包括：小分子、肽类药物、抗体及其衍生物、毒素、放射疗法、和手术。[0334]项目38.根据项目35至37中任一项所述的治疗方法，其中该药物是包含至少两个结构域的抗体构建体，其中一个结构域与muc17选择性结合。[0335]项目39.根据项目35至38中任一项所述的治疗方法，其中该药物是包含至少两个结构域的抗体构建体，其中另一个结构域与cd3、人cd3、特别是人cd3ε链选择性结合。[0336]项目40.根据项目35至39中任一项所述的治疗方法，其中该药物是进一步包含第三结构域的抗体构建体，该第三结构域包含两个多肽单体，每个多肽单体包含铰链、ch2结构域和ch3结构域，其中所述两个多肽单体经由肽接头彼此融合。[0337]项目41.根据项目35至40中任一项所述的治疗方法，其中该药物是单链抗体构建体。[0338]项目42.根据项目35至41中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中所述第三结构域按氨基至羧基顺序包含：铰链-ch2-ch3-接头-铰链-ch2-ch3。[0339]项目43.根据项目35至42中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第三结构域的所述多肽单体中的每一个具有与选自下组的序列具有至少90％同一性的氨基酸序列，该组由以下组成：seqidno:22-29。[0340]项目44.根据项目35至43中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中所述多肽单体中的每一个具有选自seqidno:22-29的氨基酸序列。[0341]项目45.根据项目35至44中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该ch2结构域包含结构域内半胱氨酸二硫桥。[0342]项目46.根据项目35至45中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中(i)该第一结构域包含两个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含两个抗体可变结构域；(ii)该第一结构域包含一个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含两个抗体可变结构域；(iii)该第一结构域包含两个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含一个抗体可变结构域；或者(iv)该第一结构域包含一个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含一个抗体可变结构域。[0343]项目47.根据项目35至46中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第一结构域和该第二结构域经由肽接头与该第三结构域融合。[0344]项目48.根据项目35至47中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体按氨基至羧基顺序包含：(a)该第一结构域；(b)肽接头，该肽接头优选具有选自由seqidno:10-12组成的组的氨基酸序列；(c)该第二结构域。[0345]项目49.根据项目35至48中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体按氨基至羧基顺序进一步包含：(d)肽接头，该肽接头具有选自由seqidno:10、11、12、17、18、19和20组成的组的氨基酸序列；(e)该第三结构域的第一多肽单体；(f)肽接头，该肽接头具有选自由seqidno:13、14、15和16组成的组的氨基酸序列；和(g)该第三结构域的第二多肽单体。[0346]项目50.根据项目35至49中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seqidno.526(根据uniprotq685j3编号的aa4171至4296)的表位结合。[0347]项目51.根据项目35至50中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seqidno.527(根据uniprotq685j3编号的aa4184至4291)的表位结合。[0348]项目52.根据项目35至51中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seqidno.528(根据uniprotq685j3编号的aa4131至4243)的表位结合。[0349]项目53.根据项目35至52中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seqidno.529(根据uniprotq685j3编号的aa4244至4389)的表位结合。[0350]项目54.根据项目35至53中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seqidno.528(根据uniprotq685j3编号的aa4131至4243)的表位结合，但不与muc17内对应于seqidno.529(根据uniprotq685j3编号的aa4244至4389)的表位结合。[0351]项目55.根据项目35至54中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seqidno.530(根据uniprotq685j3编号的aa4171至4390)或seqidno.531(根据uniprotq685j3编号的aa4184至4390)的表位结合，但不与muc17内对应于seqidno.532(根据uniprotq685j3编号的aa4291至4390)的表位或muc17内对应于seqidno.533(根据uniprotq685j3编号的aa4341至4390)的表位结合。[0352]项目56.根据项目35至55中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中细胞毒性与结合亲和力之间的比率(ec50/kd)*1000低于250，其中该细胞毒性在将nugc-4细胞作为靶细胞并且将hupbmc作为效应细胞中进行确定，并且其中该结合亲和力通过基于表面等离子体共振的测定来确定。[0353]项目57.根据项目35至56中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中细胞毒性与结合亲和力之间的比率(ec50/kd)*1000低于125，其中该细胞毒性在将nugc-4细胞作为靶细胞并且将hupbmc作为效应细胞中进行确定，并且其中该结合亲和力通过基于表面等离子体共振的测定来确定。[0354]项目58.根据项目35至57中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中细胞毒性与结合亲和力之间的比率(ec50/kd)*1000低于21，其中该细胞毒性在将nugc-4细胞作为靶细胞并且将hupbmc作为效应细胞中进行确定，并且其中该结合亲和力通过基于表面等离子体共振的测定来确定。[0355]项目59.根据项目35至58中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第一结合结构域包含含有选自以下的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3的vh区：(a)如seqidno.31中描绘的cdr-h1、如seqidno.32中描绘的cdr-h2、和如seqidno.33中描绘的cdr-h3；(b)如seqidno.42中描绘的cdr-h1、如seqidno.43中描绘的cdr-h2、和如seqidno.44中描绘的cdr-h3；(c)如seqidno.53中描绘的cdr-h1、如seqidno.54中描绘的cdr-h2、和如seqidno.55中描绘的cdr-h3；(d)如seqidno.64中描绘的cdr-h1、如seqidno.65中描绘的cdr-h2、和如seqidno.66中描绘的cdr-h3；(e)如seqidno.75中描绘的cdr-h1、如seqidno.76中描绘的cdr-h2、和如seqidno.77中描绘的cdr-h3；(f)如seqidno.86中描绘的cdr-h1、如seqidno.87中描绘的cdr-h2、和如seqidno.88中描绘的cdr-h3；(g)如seqidno.97中描绘的cdr-h1、如seqidno.98中描绘的cdr-h2、和如seqidno.99中描绘的cdr-h3；(h)如seqidno.108中描绘的cdr-h1、如seqidno.109中描绘的cdr-h2、和如seqidno.110中描绘的cdr-h3；(i)如seqidno.119中描绘的cdr-h1、如seqidno.120中描绘的cdr-h2、和如seqidno.121中描绘的cdr-h3；(j)如seqidno.130中描绘的cdr-h1、如seqidno.131中描绘的cdr-h2、和如seqidno.132中描绘的cdr-h3；(k)如seqidno.141中描绘的cdr-h1、如seqidno.142中描绘的cdr-h2、和如seqidno.143中描绘的cdr-h3；(l)如seqidno.152中描绘的cdr-h1、如seqidno.153中描绘的cdr-h2、和如seqidno.154中描绘的cdr-h3；(m)如seqidno.163中描绘的cdr-h1、如seqidno.164中描绘的cdr-h2、和如seqidno.165中描绘的cdr-h3；(n)如seqidno.174中描绘的cdr-h1、如seqidno.175中描绘的cdr-h2、和如seqidno.176中描绘的cdr-h3；(o)如seqidno.185中描绘的cdr-h1、如seqidno.186中描绘的cdr-h2、和如seqidno.187中描绘的cdr-h3；(p)如seqidno.196中描绘的cdr-h1、如seqidno.197中描绘的cdr-h2、和如seqidno.198中描绘的cdr-h3；(q)如seqidno.207中描绘的cdr-h1、如seqidno.208中描绘的cdr-h2、和如seqidno.209中描绘的cdr-h3；(r)如seqidno.218中描绘的cdr-h1、如seqidno.219中描绘的cdr-h2、和如seqidno.220中描绘的cdr-h3；(s)如seqidno.229中描绘的cdr-h1、如seqidno.230中描绘的cdr-h2、和如seqidno.231中描绘的cdr-h3；(t)如seqidno.240中描绘的cdr-h1、如seqidno.241中描绘的cdr-h2、和如seqidno.242中描绘的cdr-h3；(u)如seqidno.251中描绘的cdr-h1、如seqidno.252中描绘的cdr-h2、和如seqidno.253中描绘的cdr-h3；(v)如seqidno.262中描绘的cdr-h1、如seqidno.263中描绘的cdr-h2、和如seqidno.264中描绘的cdr-h3；(w)如seqidno.273中描绘的cdr-h1、如seqidno.274中描绘的cdr-h2、和如seqidno.275中描绘的cdr-h3；(x)如seqidno.284中描绘的cdr-h1、如seqidno.285中描绘的cdr-h2、和如seqidno.286中描绘的cdr-h3；(y)如seqidno.295中描绘的cdr-h1、如seqidno.296中描绘的cdr-h2、和如seqidno.297中描绘的cdr-h3；(z)如seqidno.306中描绘的cdr-h1、如seqidno.307中描绘的cdr-h2、和如seqidno.308中描绘的l3；(g)如seqidno.100中描绘的cdr-l1、如seqidno.101中描绘的cdr-l2、和如seqidno.102中描绘的cdr-l3；(h)如seqidno.111中描绘的cdr-l1、如seqidno.112中描绘的cdr-l2、和如seqidno.113中描绘的cdr-l3；(i)如seqidno.122中描绘的cdr-l1、如seqidno.123中描绘的cdr-l2、和如seqidno.124中描绘的cdr-l3；(j)如seqidno.133中描绘的cdr-l1、如seqidno.134中描绘的cdr-l2、和如seqidno.135中描绘的cdr-l3；(k)如seqidno.144中描绘的cdr-l1、如seqidno.145中描绘的cdr-l2、和如seqidno.146中描绘的cdr-l3；(l)如seqidno.155中描绘的cdr-l1、如seqidno.156中描绘的cdr-l2、和如seqidno.157中描绘的cdr-l3；(m)如seqidno.166中描绘的cdr-l1、如seqidno.167中描绘的cdr-l2、和如seqidno.168中描绘的cdr-l3；(n)如seqidno.177中描绘的cdr-l1、如seqidno.178中描绘的cdr-l2、和如seqidno.179中描绘的cdr-l3；(o)如seqidno.188中描绘的cdr-l1、如seqidno.189中描绘的cdr-l2、和如seqidno.190中描绘的cdr-l3；(p)如seqidno.199中描绘的cdr-l1、如seqidno.200中描绘的cdr-l2、和如seqidno.201中描绘的cdr-l3；(q)如seqidno.210中描绘的cdr-l1、如seqidno.211中描绘的cdr-l2、和如seqidno.212中描绘的cdr-l3；(r)如seqidno.221中描绘的cdr-l1、如seqidno.222中描绘的cdr-l2、和如seqidno.223中描绘的cdr-l3；(s)如seqidno.232中描绘的cdr-l1、如seqidno.233中描绘的cdr-l2、和如seqidno.234中描绘的cdr-l3；(t)如seqidno.243中描绘的cdr-l1、如seqidno.244中描绘的cdr-l2、和如seqidno.245中描绘的cdr-l3；(u)如seqidno.254中描绘的cdr-l1、如seqidno.255中描绘的cdr-l2、和如seqidno.256中描绘的cdr-l3；(v)如seqidno.265中描绘的cdr-l1、如seqidno.266中描绘的cdr-l2、和如seqidno.267中描绘的cdr-l3；(w)如seqidno.276中描绘的cdr-l1、如seqidno.277中描绘的cdr-l2、和如seqidno.278中描绘的cdr-l3；(x)如seqidno.287中描绘的cdr-l1、如seqidno.288中描绘的cdr-l2、和如seqidno.289中描绘的cdr-l3；(y)如seqidno.298中描绘的cdr-l1、如seqidno.299中描绘的cdr-l2、和如seqidno.300中描绘的cdr-l3；(z)如seqidno.309中描绘的cdr-l1、如seqidno.310中描绘的cdr-l2、和如seqidno.311中描绘的cdr-l3；(aa)如seqidno.320中描绘的cdr-l1、如seqidno.321中描绘的cdr-l2、和如seqidno.322中描绘的cdr-l3；(ab)如seqidno.331中描绘的cdr-l1、如seqidno.332中描绘的cdr-l2、和如seqidno.333中描绘的cdr-l3；(ac)如seqidno.342中描绘的cdr-l1、如seqidno.343中描绘的cdr-l2、和如seqidno.344中描绘的cdr-l3；(ad)如seqidno.353中描绘的cdr-l1、如seqidno.354中描绘的cdr-l2、和如seqidno.355中描绘的cdr-l3；(ae)如seqidno.364中描绘的cdr-l1、如seqidno.365中描绘的cdr-l2、和如seqidno.366中描绘的cdr-l3；(af)如seqidno.375中描绘的cdr-l1、如seqidno.376中描绘的cdr-l2、和如seqidno.377中描绘的cdr-l3；(ag)如seqidno.386中描绘的cdr-l1、如seqidno.387中描绘的cdr-l2、和如seqidno.388中描绘的cdr-l3；(ah)如seqidno.397中描绘的cdr-l1、如seqidno.398中描绘的cdr-l2、和如seqidno.399中描绘的cdr-l3；(ai)如seqidno.408中描绘的cdr-l1、如seqidno.409中描绘的cdr-l2、和如seqidno.410中描绘的cdr-l3；(aj)如seqidno.419中描绘的cdr-l1、如seqidno.420中描绘的cdr-l2、和如seqidno.421中描绘的cdr-l3；(ak)如seqidno.430中描绘的cdr-l1、如seqidno.431中描绘的cdr-l2、和如seqidno.432中描绘的cdr-l3；(al)如seqidno.441中描绘的cdr-l1、如seqidno.442中描绘的cdr-l2、和如seqidno.443中描绘的cdr-l3；(am)如seqidno.452中描绘的cdr-l1、如seqidno.453中描绘的cdr-l2、和如seqidno.454中描绘的cdr-l3；(an)如seqidno.463中描绘的cdr-l1、如seqidno.464中描绘的cdr-l2、和如seqidno.465中描绘的cdr-l3；(ao)如seqidno.474中描绘的cdr-l1、如seqidno.475中描绘的cdr-l2、和如seqidno.476中描绘的cdr-l3；(ap)如seqidno.485中描绘的cdr-l1、如seqidno.486中描绘的cdr-l2、和如seqidno.487中描绘的cdr-l3；(aq)如seqidno.496中描绘的cdr-l1、如seqidno.497中描绘的cdr-l2、和如seqidno.498中描绘的cdr-l3；(ar)如seqidno.507中描绘的cdr-l1、如seqidno.508中描绘的cdr-l2、和如seqidno.509中描绘的cdr-l3；以及(as)如seqidno.518中描绘的cdr-l1、如seqidno.519中描绘的cdr-l2、和如seqidno.520中描绘的cdr-l3；其中优选的是(c)如seqidno.56中描绘的cdr-l1、如seqidno.57中描绘的cdr-l2、和如seqidno.58中描绘的cdr-l3；(n)如seqidno.177中描绘的cdr-l1、如seqidno.178中描绘的cdr-l2、和如seqidno.179中描绘的cdr-l3；(ac)如seqidno.342中描绘的cdr-l1、如seqidno.343中描绘的cdr-l2、和如seqidno.344中描绘的cdr-l3；以及(aj)如seqidno.419中描绘的cdr-l1、如seqidno.420中描绘的cdr-l2、和如seqidno.421中描绘的cdr-l3。[0357]项目61.根据项目35至60中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第一结合结构域包含选自下组的vl区和vh区，该组由以下组成：(a)如seqidno.38中描绘的vl区和如seqidno.37中描绘的vh区；(b)如seqidno.49中描绘的vl区和如seqidno.48中描绘的vh区；(c)如seqidno.60中描绘的vl区和如seqidno.59中描绘的vh区；(d)如seqidno.71中描绘的vl区和如seqidno.70中描绘的vh区；(e)如seqidno.82中描绘的vl区和如seqidno.81中描绘的vh区；(f)如seqidno.93中描绘的vl区和如seqidno.92中描绘的vh区；(g)如seqidno.104中描绘的vl区和如seqidno.103中描绘的vh区；(h)如seqidno.115中描绘的vl区和如seqidno.114中描绘的vh区；(i)如seqidno.126中描绘的vl区和如seqidno.125中描绘的vh区；(j)如seqidno.137中描绘的vl区和如seqidno.136中描绘的vh区；(k)如seqidno.148中描绘的vl区和如seqidno.147中描绘的vh区；(l)如seqidno.159中描绘的vl区和如seqidno.158中描绘的vh区；(m)如seqidno.170中描绘的vl区和如seqidno.169中描绘的vh区；(n)如seqidno.181中描绘的vl区和如seqidno.180中描绘的vh区；(o)如seqidno.192中描绘的vl区和如seqidno.191中描绘的vh区；(p)如seqidno.203中描绘的vl区和如seqidno.202中描绘的vh区；(q)如seqidno.214中描绘的vl区和如seqidno.213中描绘的vh区；(r)如seqidno.226中描绘的vl区和如seqidno.225中描绘的vh区；(s)如seqidno.236中描绘的vl区和如seqidno.235中描绘的vh区；(t)如seqidno.247中描绘的vl区和如seqidno.246中描绘的vh区；(u)如seqidno.258中描绘的vl区和如seqidno.257中描绘的vh区；(v)如seqidno.269中描绘的vl区和如seqidno.268中描绘的vh区；(w)如seqidno.280中描绘的vl区和如seqidno.279中描绘的vh区；(x)如seqidno.292中描绘的vl区和如seqidno.290中描绘的vh区；(y)如seqidno.302中描绘的vl区和如seqidno.301中描绘的vh区；(z)如seqidno.313中描绘的vl区和如seqidno.312中描绘的vh区；(aa)如seqidno.324中描绘的vl区和如seqidno.323中描绘的vh区；(ab)如seqidno.335中描绘的vl区和如seqidno.334中描绘的vh区；(ac)如seqidno.346中描绘的vl区和如seqidno.345中描绘的vh区；(ad)如seqidno.357中描绘的vl区和如seqidno.356中描绘的vh区；(ae)如seqidno.368中描绘的vl区和如seqidno.367中描绘的vh区；(af)如seqidno.379中描绘的vl区和如seqidno.378中描绘的vh区；(ag)如seqidno.390中描绘的vl区和如seqidno.389中描绘的vh区；(ah)如seqidno.401中描绘的vl区和如seqidno.400中描绘的vh区；(ai)如seqidno.412中描绘的vl区和如seqidno.411中描绘的vh区；(aj)如seqidno.423中描绘的vl区和如seqidno.422中描绘的vh区；(ak)如seqidno.434中描绘的vl区和如seqidno.433中描绘的vh区；(al)如seqidno.445中描绘的vl区和如seqidno.444中描绘的vh区；(am)如seqidno.456中描绘的vl区和如seqidno.455中描绘的vh区；(an)如seqidno.467中描绘的vl区和如seqidno.466中描绘的vh区；(ao)如seqidno.478中描绘的vl区和如seqidno.477中描绘的vh区；(ap)如seqidno.489中描绘的vl区和如seqidno.488中描绘的vh区；(aq)如seqidno.500中描绘的vl区和如seqidno.499中描绘的vh区；(ar)如seqidno.511中描绘的vl区和如seqidno.510中描绘的vh区；以及(as)如seqidno.522中描绘的vl区和如seqidno.521中描绘的vh区。[0358]项目62.根据项目35至61中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体包含选自如以下中的任一个中描绘的氨基酸序列的序列：seqidno:39、50、61、72、83、94、105、116、127、138、149、160、171、182、193、204、215、226、237、248、259、270、281、292、303、314、325、336、347、358、369、380、391、402、413、424、435、446、457、468、479、490、501、512、和523。[0359]项目63.根据项目35至62中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体按氨基至羧基顺序包含：(a)该第一结构域，该第一结构域具有选自下组的氨基酸序列，该组由以下组成：seqidno:39、50、61、72、83、94、105、116、127、138、149、160、171、182、193、204、215、226、237、248、259、270、281、292、303、314、325、336、347、358、369、380、391、402、413、424、435、446、457、468、479、490、501、512、和523；(b)肽接头，该肽接头具有选自由seqidno:10-12组成的组的氨基酸序列；(c)该第二结构域，该第二结构域具有选自下组的氨基酸序列，该组由以下组成：wo2008/119567的seqidno:23、25、41、43、59、61、77、79、95、97、113、115、131、133、149、151、167、169、185或187，或如seqidno:13中描绘的氨基酸序列。[0360]项目64.根据项目35至63中任一项所述的治疗方法，其中该药物是根据权利要求25所述的抗体构建体，其中该抗体构建体按氨基至羧基顺序进一步包含：(d)肽接头，该肽接头具有选自由seqidno:10、11、12、17、18、19和20组成的组的氨基酸序列；(e)该第三结构域的第一多肽单体，该第一多肽单体具有选自由seqidno:22-29组成的组的多肽序列；(f)肽接头，该肽接头具有选自由seqidno:13、14、15和16组成的组的氨基酸序列；和(g)该第三结构域的第二多肽单体，该第二多肽单体具有选自由seqidno:22-29组成的组的多肽序列。[0361]项目65.根据项目35至64中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，该抗体构建体具有选自下组的氨基酸序列，该组由以下组成：seqidno:40、41、51、52、62、63、73、74、84、85、95、96、106、107、117、118、128、129、139、140、150、151、161、162、172、173、183、184、194、195、205、206、216、217、227、228、238、239、249、250、260、261、271、272、282、283、293、294、304、305、315、316、326、327、337、338、348、349、359、360、370、371、381、382、392、393、403、404、414、415、424、426、436、437、447、448、458、459、469、470、480、481、491、492、502、503、513、514、524和525，或者具有与所述序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸。[0362]本发明进一步涉及如权利要求中定义和如下列出的治疗方法。[0363]在根据本发明的治疗方法的第一方面中，设想施用包含第一结构域和第二结构域的抗体构建体，该第一结构域与muc17结合，该第二结构域与人和猕猴属cd3ε链的细胞外表位结合。在所述方面内，进一步设想，该抗体构建体包含第三结构域，该第三结构域包含两个多肽单体，每个多肽单体包含铰链、ch2结构域和ch3结构域，其中所述两个多肽单体经由肽接头彼此融合。在所述方面内，进一步设想，该抗体构建体是单链抗体构建体。在所述方面内，进一步设想，该抗体构建体具有第三结构域，该第三结构域按氨基至羧基顺序包含：铰链-ch2-ch3-接头-铰链-ch2-ch3。在所述方面内，进一步设想，所述多肽单体中的每一个具有与如序列表和对应权利要求中定义的序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。在所述方面内，进一步设想，施用抗体构建体，其中该ch2结构域包含结构域内半胱氨酸二硫桥。[0364]在所述方面内，还设想施用抗体构建体，其中(i)该第一结构域包含两个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含两个抗体可变结构域；(ii)该第一结构域包含一个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含两个抗体可变结构域；(iii)该第一结构域包含两个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含一个抗体可变结构域；或者(iv)该第一结构域包含一个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含一个抗体可变结构域。在所述方面内，还设想施用抗体构建体，其中该第一结构域和该第二结构域经由肽接头与该第三结构域融合。在这方面，尤其考虑该抗体构建体是如wo2019/133961中披露的抗体构建体，该文献通过援引并入本文。如所述披露中要求保护的抗体构建体可以用于本文所述的治疗方法中。在本发明的上下文中进一步设想，施用包含如上定义的抗体构建体的药物组合物。[0365]根据本发明的治疗方法包括预防、缓解、预防其恶化或复发、或改善选自以下的疾病：增殖性疾病、肿瘤性疾病、如权利要求中定义的癌症，例如胃肠癌(诸如胃癌、食管癌、胃食管癌(结合部)癌或结直肠癌)或胰腺癌，包括向有需要的受试者施用针对muc17和cd3的抗体构建体的步骤。在本发明的上下文中，提供了施用特异性靶向与恶性肿瘤诊断相关联的muc17的抗体构建体。为此，首先将muc17鉴定为相对于正常组织表达在胃肿瘤中上调的基因。在这方面，根据本文所述的发明性免疫组织化学方法显示muc17蛋白在40％-77％的胃肿瘤中表达。通过流式细胞术还证明，除了一些胰腺癌细胞系和结肠直肠癌细胞系之外，muc17蛋白在胃癌细胞系和食管癌细胞系的细胞表面上表达。甚至已经显示，这种表达在中国患者的胃肿瘤中特别高。因此，将muc17鉴定为与胃肠癌，即胃癌、小肠癌和大肠癌(结肠癌)、食管癌和胰腺癌相关联的有效靶标。在本发明的上下文中，所施用的抗体构建体表现出结合亲和力、强有力的细胞毒性活性，并且是对于sea结构域最稳定的图谱。所施用的抗体构建体可以在靶结合物中具有半胱氨酸钳，即分子内二硫键，以提高稳定性，并且还可以呈作为半衰期延长(hle)部分并针对muc17的单链fc(scfc)形式。进一步，scfc，即hle，抗体构建体能够通过仅每周一次、每两周一次、每三周一次或甚至每四周一次或更低频率施用来进行静脉内给药。因此，在本发明的方法中使用的抗体构建体包含与muc17结合的第一结构域；与人和猕猴属cd3ε链的细胞外表位结合的第二结构域；和任选地包含两个多肽单体的第三结构域，每个多肽单体包含铰链、ch2结构域和ch3结构域，其中所述两个多肽单体经由肽接头彼此融合。在一个实施例中，所施用的抗体构建体包含所有三个这样的结构域。[0366]术语“抗体构建体”是指其中结构和/或功能是基于抗体，例如全长或整个免疫球蛋白分子的结构和/或功能的分子。因此，抗体构建体能够结合至其特异性靶标或抗原和/或从抗体或其片段的可变重链(vh)和/或可变轻链(vl)结构域提取。此外，与其结合配偶体结合的结构域在本文中被理解为抗体构建体的结合结构域。典型地，根据本发明的结合结构域包含允许靶标结合的抗体的最低结构要求。这种最低要求可以例如通过至少三个轻链cdr(即vl区的cdr1、cdr2和cdr3)和/或三个重链cdr(即vh区的cdr1、cdr2和cdr3)，优选全部六个cdr的存在来定义。定义抗体的最低结构要求的替代性方法是分别定义特异性靶标结构内的抗体表位、构成表位区(表位簇)的靶蛋白的蛋白结构域或通过参考与所定义抗体的表位竞争的特异性抗体。根据本发明的构建体所基于的抗体包括例如单克隆、重组、嵌合、去免疫、人源化和人抗体。根据本发明施用的抗体构建体的结合结构域可以例如包含上文提及的cdr组。优选地，那些cdr包含在抗体轻链可变区(vl)和抗体重链可变区(vh)的框架中；然而，它不一定包含两者。例如，fd片段具有两个vh区并且通常保留完整抗原结合结构域的一些抗原结合功能。抗体片段、抗体变体或结合结构域的形式的另外实例包括(1)fab片段，一种具有vl、vh、cl和ch1域的单价片段；(2)f(ab')2片段，一种具有由二硫桥在铰链区处连接的两个fab片段的二价片段；(3)具有两个vh和ch1结构域的fd片段；(4)具有抗体的单臂的vl和vh结构域的fv片段，(5)具有vh结构域的dab片段(ward等人,(1989)nature[自然]341:544-546)；(6)分离的互补决定区(cdr)，和(7)单链fv(scfv)，后者是优选的(例如，衍生自scfv文库)。根据本发明的抗体构建体的实施例的实例例如描述于以下中：wo00/006605、wo2005/040220、wo2008/119567、wo2010/037838、wo2013/026837、wo2013/026833、us2014/0308285、us2014/0302037、wo2014/144722、wo2014/151910和wo2015/048272。[0367]另外，在“结合结构域”或“结合的结构域”的定义内是全长抗体的片段，诸如vh、vhh、vl、(s)dab、fv、fd、fab、fab’、f(ab')2或“rigg”(“半抗体”)。根据本发明施用的抗体构建体还可以包含抗体的修饰片段(也称为抗体变体)，诸如scfv、di-scfv或bi(s)-scfv、scfv-fc、scfv-拉链、scfab、fab2、fab3、双抗体、单链双抗体、串联双抗体(tandab)、串联di-scfv、串联tri-scfv、“多抗体”(诸如三抗体或四抗体)、以及单结构域抗体诸如纳米抗体或仅包含一个可变结构域的单可变结构域抗体，该可变结构域可以是独立于其他v区或结构域而特异性地结合抗原或表位的vhh、vh或vl。如本文所用，术语“单链fv”、“单链抗体”或“scfv”是指单多肽链抗体片段，这些抗体片段包含来自重链和轻链二者的可变区，但缺乏恒定区。通常，单链抗体在vh与vl结构域之间进一步包含多肽接头，该多肽接头使得其形成将允许抗原结合的所需的结构。单链抗体详细论述于以下中：pluckthun，thepharmacologyofmonoclonalantibodies[单克隆抗体的药理学],第113卷,rosenburg和moore编辑springer-verlag[施普林格出版社],纽约,第269-315页(1994)。生成单链抗体的各种方法是已知的，这些方法包括以下中所描述的那些：美国专利号4,694,778和5,260,203；国际专利申请公开号wo88/01649；bird(1988)science[科学]242:423-442；huston等人(1988)proc.natl.acad.sci.usa[美国国家科学院院刊]85:5879-5883；ward等人(1989)nature[自然]334:54454；skerra等人(1988)science[科学]242:1038-1041。在特定实施例中，单链抗体还可以是双特异性的、多特异性的、人和/或人源化的和/或合成的。[0368]此外，术语“抗体构建体”的定义包括单价、二价和多价(polyvalent/multivalent)构建体，并且因此包括仅与两个抗原结构特异性地结合的双特异性构建体，以及通过不同的结合结构域特异性地结合超过两个(例如三个、四个或更多个)抗原结构的多特异性构建体。此外，术语“抗体构建体”的定义包括仅由一条多肽链组成的分子以及由超过一条多肽链组成的分子，这些链可以是相同的(同源二聚体、同源三聚体或同源寡聚物)或不同的(异源二聚体、异源三聚体或异源寡聚物)。以上鉴定的抗体和变体或其衍生物的实例尤其描述于harlow和lane,antibodiesalaboratorymanual[抗体：实验室手册],cshlpress[冷泉港实验室出版社](1988)和usingantibodies:alaboratorymanual[使用抗体：实验室手册],cshlpress[冷泉港实验室出版社](1999)，kontermann和dübel,antibodyengineering[抗体工程化],springer[施普林格出版社],第2版2010以及little,recombinantantibodiesforimmunotherapy[用于免疫疗法的重组抗体],cambridgeuniversitypress[剑桥大学出版社]2009。[0369]如本文所用，术语“双特异性”是指“至少双特异性”的抗体构建体，即该抗体构建体至少包含第一结合结构域和第二结合结构域，其中第一结合结构域与一种抗原或靶标(此处：muc17)结合，并且第二结合结构域与另一抗原或靶标(此处：cd3)结合。因此，根据本发明的抗体构建体包含针对至少两种不同抗原或靶标的特异性。例如，第一结构域优选不与本文所述的物种中的一种或多种的cd3ε的细胞外表位结合。术语“靶细胞表面抗原”是指由细胞表达并且存在于细胞表面以使得为如本文所述的抗体构建体所接近的抗原结构。其可以是蛋白质，优选地蛋白质的细胞外部分，或碳水化合物结构，优选地蛋白质的碳水化合物结构，诸如糖蛋白。其优选地是肿瘤抗原。本发明的术语“双特异性抗体构建体”还涵盖多特异性抗体构建体，诸如三特异性抗体构建体，后者包括三个结合结构域，或具有超过三种(例如四种、五种……)特异性的构建体。[0370]鉴于根据本发明施用的抗体构建体是(至少)双特异性的，它们不是天然存在的并且与天然存在的产物明显不同。因此，“双特异性”抗体构建体或免疫球蛋白是具有至少两个具有不同特异性的不同结合侧端的人工杂交抗体或免疫球蛋白。双特异性抗体构建体可以通过多种方法产生，这些方法包括杂交瘤的融合或fab'片段的连接。参见，例如songsivilai和lachmann,clin.exp.immunol.[临床实验免疫学]79:315-321(1990)。抗体构建体的至少两个结合结构域和可变结构域(vh/vl)可以包含或可以不包含肽接头(间隔肽)。根据本发明，术语“肽接头”包含这样的氨基酸序列：通过该氨基酸序列，本发明的抗体构建体的一个(可变和/或结合)结构域和另一(可变和/或结合)结构域的氨基酸序列彼此连接。肽接头也可以用于将第三结构域与抗体构建体的其他结构域融合。这种肽接头的基本技术特征在于它不包含任何聚合活性。合适的肽接头是在美国专利4,751,180和4,935,233或wo88/09344中描述的那些。肽接头也可以用于将其他结构域或模块或区(诸如半衰期延长结构域)连接到抗体构建体。[0371]抗体构建体优选地为“体外生成的抗体构建体”。这个术语是指根据上述定义的抗体构建体，其中在非免疫细胞选择，例如体外噬菌体展示、蛋白质芯片或其中可以测试候选序列与抗原结合的能力的任何其他方法中生成可变区(例如，至少一个cdr)的全部或一部分。因此，该术语优选排除仅通过动物的免疫细胞中的基因组重排生成的序列。“重组抗体”是通过使用重组dna技术或基因工程制得的抗体。[0372]如本文所用，术语“单克隆抗体”(mab)或单克隆抗体构建体是指从实质上均质的抗体群体获得的抗体，即除了可能少量存在的可能天然存在的突变和/或翻译后修饰(例如，异构化、酰胺化)外，包含该群体的单独抗体是相同的。与典型地包括针对不同决定簇(或表位)的不同抗体的常规(多克隆)抗体制剂相比，单克隆抗体针对抗原上的单一抗原侧或决定簇具有高度特异性。除了它们的特异性之外，单克隆抗体的优点还在于它们通过杂交瘤培养合成，因此不被其他免疫球蛋白污染。修饰语“单克隆”指示从实质上均质的抗体群体获得的抗体的特征，并且不应理解为要求通过任何特定方法产生抗体。为了制备单克隆抗体，可以使用提供通过连续细胞系培养产生的抗体的任何技术。例如，有待使用的单克隆抗体可以通过首先由koehler等人nature[自然],256:495(1975)描述的杂交瘤方法制备，或者可以通过重组dna方法(参见，例如美国专利号4,816,567)制备。用于产生人单克隆抗体的另外技术的实例包括三源杂交瘤技术、人b细胞杂交瘤技术(kozbor,immunologytoday[今日免疫学]4(1983),72)和ebv-杂交瘤技术(cole等人,monoclonalantibodiesandcancertherapy[单克隆抗体和癌症疗法],alanr.liss公司(alanr.liss,inc.)(1985),77-96)。然后可以使用标准方法(诸如酶联免疫吸附测定(elisa)和表面等离子体共振分析例如biacoretm)筛选杂交瘤以鉴定一种或多种产生与指定抗原特异性地结合的抗体的杂交瘤。任何形式的相关抗原均可以用作免疫原，例如重组抗原、天然存在形式、其任何变体或片段以及其抗原肽。如在biacore系统中采用的表面等离子体共振可以用于增加与靶细胞表面抗原的表位结合的噬菌体抗体的效率(schier,humanantibodieshybridomas[人抗体杂交瘤]7(1996),97-105；malmborg,j.immunol.methods[免疫学方法杂志]183(1995),7-13)。制备单克隆抗体的另一种示例性方法包括筛选蛋白质表达文库，例如噬菌体展示或核糖体展示文库。噬菌体展示描述于例如以下中：ladner等人,美国专利号5,223,409；smith(1985)science[科学]228:1315-1317，clackson等人,nature[自然],352:624-628(1991)和marks等人,j.mol.biol.[分子生物学杂志],222:581-597(1991)。[0373]除了使用展示文库之外，还可以使用相关抗原来免疫非人动物，例如啮齿动物(诸如小鼠、仓鼠、兔或大鼠)。在一个实施例中，非人动物至少包括人免疫球蛋白基因的一部分。例如，可以采用人ig(免疫球蛋白)基因座的大片段来工程化在小鼠抗体产生方面有缺陷的小鼠品系。通过使用杂交瘤技术，可以产生和选择衍生自具有所需特异性的基因的抗原特异性单克隆抗体。参见，例如xenomousetm；green等人(1994)naturegenetics[自然遗传学]7:13-21；us2003-0070185；wo96/34096和wo96/33735。[0374]单克隆抗体也可以从非人动物获得，然后使用本领域已知的重组dna技术进行修饰，例如人源化、去免疫、呈现嵌合等。修饰的抗体构建体的实例包括非人抗体的人源化变体、“亲和力成熟”抗体(参见，例如hawkins等人j.mol.biol.[分子生物学杂志]254,889-896(1992)和lowman等人,biochemistry[生物化学]30,10832-10837(1991))和具有改变的一种或多种效应子功能的抗体突变体(参见，例如美国专利5,648,260、kontermann和dübel(2010),上述引文和little(2009),上述引文)。[0375]在免疫学中，亲和力成熟是这样的过程：通过该过程，在免疫应答的过程中b细胞产生与抗原的亲和力增加的抗体。通过反复暴露于相同抗原，宿主将产生相继更大亲和力的抗体。与天然原型类似，体外亲和力成熟是基于突变和选择的原理。体外亲和力成熟已经成功地用于优化抗体、抗体构建体和抗体片段。使用辐射、化学诱变剂或易错pcr引入cdr内的随机突变。此外，遗传多样性可以通过链改组来增加。使用噬菌体展示等展示方法进行两轮或三轮突变和选择通常会产生具有低纳摩尔范围亲和力的抗体片段。[0376]抗体构建体的优选类型的氨基酸取代变异包括取代亲本抗体(例如人源化或人抗体)的一个或多个高变区残基。通常，选择用于进一步开发的一种或多种所得变体相对于生成它们的亲本抗体将具有改善的生物特性。用于生成此类取代变体的便利方式包括使用噬菌体展示的亲和力成熟。简而言之，将几个高变区侧端(例如6-7个侧端)突变以在每个侧端生成所有可能的氨基酸取代。由此生成的抗体变体以单价方式从丝状噬菌体颗粒展示为与每个颗粒内包装的m13的基因iii产物的融合物。然后针对如本文所披露的噬菌体展示的变体的生物活性(例如结合亲和力)对其进行筛选。为了鉴定用于修饰的候选高变区侧端，可以进行丙氨酸扫描诱变以鉴定对抗原结合有显著贡献的高变区残基。可替代地或另外，分析抗原-抗体复合物的晶体结构以鉴定结合结构域与例如人muc17之间的接触点可能是有利的。根据本文阐述的技术，此类接触残基和相邻残基是用于取代的候选者。一旦生成这样的变体，对变体组进行如本文所述的筛选，并且可以选择在一种或多种相关测定中具有优异特性的抗体以用于进一步开发。[0377]根据本发明施用的单克隆抗体和抗体构建体具体地包括“嵌合”抗体(免疫球蛋白)，其中重链和/或轻链的一部分与衍生自特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而一条或多条链的其余部分与衍生自另一物种或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及此类抗体的片段，只要它们表现出所需的生物活性即可(美国专利号4,816,567；morrison等人,proc.natl.acad.sci.usa[美国国家科学院院刊]81:6851-6855(1984))。目的嵌合抗体包括“灵长类化”抗体，这些抗体包含衍生自非人灵长类动物(例如，旧大陆猴、猿等)的可变结构域抗原结合序列和人恒定区序列。已经描述了多种制备嵌合抗体的方法。参见，例如morrison等人,proc.natl.acad.sclu.s.a.[美国国家科学院院刊]81:6851,1985；takeda等人,nature[自然]314:452,1985；cabilly等人,美国专利号4,816,567；boss等人,美国专利号4,816,397；tanaguchi等人,ep0171496；ep0173494；和gb2177096。[0378]抗体、抗体构建体、抗体片段或抗体变体还可以通过例如wo98/52976或wo00/34317中披露的方法特定地缺失人t细胞表位(称为“去免疫”的方法)来进行修饰。简而言之，可以针对与ii类mhc结合的肽分析抗体的重链和轻链可变结构域；这些肽代表潜在的t细胞表位(如wo98/52976和wo00/34317中所定义)。为了检测潜在t细胞表位，可以应用称为“肽穿线”的计算机建模方法，并且此外针对vh和vl序列中存在的基序，可以搜索人mhcii类结合肽的数据库，如wo98/52976和wo00/34317中所述。这些基序与18种主要的mhcii类dr同种异型中的任一种结合，并且因此构成潜在t细胞表位。检测到的潜在t细胞表位可以通过取代可变结构域中的少量氨基酸残基，或者优选通过单个氨基酸取代来消除。典型地，进行保守取代。通常但非唯一地，可以使用人种系抗体序列中的位置所共有的氨基酸。人种系序列例如披露于以下中：tomlinson等人(1992)j.moi.biol.[细胞生物学杂志]227:776-798；cook,g.p.等人(1995)immunol.today[当代免疫]第16(5)卷:237-242；和tomlinson等人(1995)emboj.[欧洲分子生物学学会杂志]14:14:4628-4638。vbase目录提供了人免疫球蛋白可变区序列的综合目录(由tomlinson,la.等人mrccentreforproteinengineering[mrc蛋白质工程化中心],剑桥,英国(cambridge,uk)编译)。这些序列可以用作人序列的来源，例如用于框架区和cdr。也可以使用共有的人框架区，例如如美国专利号6,300,064中所述。[0379]“人源化”抗体、抗体构建体、其变体或片段(诸如fv、fab、fab'、f(ab')2或抗体的其他抗原结合子序列)是主要人序列的抗体或免疫球蛋白，其含有一种或多种衍生自非人免疫球蛋白的最小序列。对于大部分来说，人源化抗体是人免疫球蛋白(受体抗体)，其中来自受体的高变区(也称为cdr)的残基被来自非人(例如啮齿动物)物种(供体抗体)(诸如小鼠、大鼠、仓鼠或兔)的具有所需的特异性、亲和力和能力的高变区的残基替换。在一些情况下，人免疫球蛋白的fv框架区(fr)残基被相应的非人残基替换。此外，如本文所用，“人源化抗体”还可以包含在受体抗体或供体抗体中均未发现的残基。进行这些修饰以进一步改进和优化抗体性能。人源化抗体还可以包含典型地是人免疫球蛋白的免疫球蛋白恒定区(fc)的至少一部分。对于更多的细节，参见jones等人,nature[自然],321:522-525(1986)；reichmann等人,nature[自然],332:323-329(1988)；和presta,curr.op.struct.biol.[生物结构的当代观点],2:593-596(1992)。可以通过用来自人fv可变结构域的等价序列替换不直接参与抗原结合的fv可变结构域的序列来生成人源化抗体或其片段。用于生成人源化抗体或其片段的示例性方法由以下提供：morrison(1985)science[科学]229:1202-1207；oi等人(1986)biotechniques[生物技术]4:214；以及us5,585,089；us5,693,761；us5,693,762；us5,859,205；和us6,407,213。那些方法包括分离、操作和表达编码来自重链或轻链中的至少一种的全部或部分免疫球蛋白fv可变结构域的核酸序列。这种核酸可以如上所述通过产生针对预定靶标的抗体从杂交瘤获得以及从其他来源获得。然后可以将编码人源化抗体分子的重组dna克隆至合适的表达载体中。人源化抗体也可以使用转基因动物诸如表达人重链和轻链基因但不能表达内源小鼠免疫球蛋白重链和轻链基因的小鼠产生。winter描述了可用于制备本文所述的人源化抗体的示例性cdr移植方法(美国专利号5,225,539)。特定人抗体的全部cdr可以用至少一部分非人cdr替换，或者仅一些cdr可以用非人cdr替换。仅需要替换人源化抗体与预定抗原结合所需的cdr数量。可以通过引入保守取代、共有序列取代、种系取代和/或回复突变来优化人源化抗体。此类改变的免疫球蛋白分子可以通过本领域已知的几种技术中的任何一种来制备(例如，teng等人,proc.natl.acad.sci.u.s.a.[美国国家科学院院刊],80:7308-7312,1983；kozbor等人,immunologytoday[今日免疫学],4:7279,1983；olsson等人,meth.enzymol.[酶学方法],92:3-16,1982，和ep239400)。[0380]术语“人抗体”、“人抗体构建体”和“人结合结构域”包括具有抗体区的抗体、抗体构建体和结合结构域，这些抗体区诸如实质上对应于本领域中已知的人种系免疫球蛋白序列的可变和恒定区或结构域，包括例如由kabat等人(1991)(上述引文)描述的那些。本发明的人抗体、抗体构建体或结合结构域可以在例如cdr中且特别是cdr3中包含不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如通过体外随机或侧端特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。人抗体、抗体构建体或结合结构域可以具有至少一个、两个、三个、四个、五个或更多个被氨基酸残基替换的位置，该氨基酸残基不由人种系免疫球蛋白序列编码。然而，如本文所用的人抗体、抗体构建体和结合结构域的定义还考虑“完全人抗体”，这些完全人抗体仅包含非人工和/或遗传改变的人抗体序列，如可通过使用诸如xenomouse技术或系统衍生的那些。优选地，“完全人抗体”不包括不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基。[0381]根据本发明施用的抗体构建体是“分离的”或“实质上纯的”抗体构建体。当用于描述本文披露的抗体构建体时，“分离的”或“实质上纯的”意指抗体构建体已从其产生环境的组分中鉴定、分离和/或回收。优选地，抗体构建体不含来自其产生环境的所有其他组分或实质上不与来自其产生环境的所有其他组分相关。其产生环境的污染组分(诸如由重组转染细胞产生的污染组分)是典型地会干扰多肽的诊断或治疗用途的物质，并且可能包括酶、激素和其他蛋白质或非蛋白质溶质。抗体构建体可以例如占给定样品中总蛋白质的按重量计至少约5％或至少约50％。应当理解，分离的蛋白质可以根据情况占总蛋白质含量的按重量计从5％至99.9％。可以通过使用诱导型启动子或高表达启动子以制备显著更高浓度的多肽，使得制备增加的浓度水平的多肽。该定义包括在本领域已知的多种生物和/或宿主细胞中产生抗体构建体。在优选的实施例中，抗体构建体(1)通过使用旋杯式序列分析仪纯化至足以获得至少15个n末端或内部氨基酸序列的残基的程度，或(2)通过sds-page在非还原或还原条件下使用考马斯蓝或优选银染色纯化至均质。然而，通常，分离的抗体构建体通过至少一个纯化步骤来制备。[0382]术语“结合结构域”表征与靶分子(抗原)上的给定靶表位或给定靶侧端(特异性)结合/相互作用/识别该靶表位或靶侧端的结构域，该靶分子或抗原此处分别为muc17和cd3。第一结合结构域(识别muc17)的结构和功能以及优选还有第二结合结构域(识别cd3)的结构和/或功能是基于抗体，例如全长或完整免疫球蛋白分子的结构和/或功能，并且/或者是从抗体或其片段的可变重链(vh)和/或可变轻链(vl)结构域中提取。优选地，第一结合结构域的特征在于存在三个轻链cdr(即vl区的cdr1、cdr2和cdr3)和/或三个重链cdr(即vh区的cdr1、cdr2和cdr3)。第二结合结构域优选还包含允许靶结合的抗体的最小结构要求。更优选地，第二结合结构域包含至少三个轻链cdr(即vl区的cdr1、cdr2和cdr3)和/或三个重链cdr(即vh区的cdr1、cdr2和cdr3)。设想第一结合结构域和/或第二结合结构域是通过噬菌体展示或文库筛选方法产生或可获得的，而不是通过将cdr序列从预先存在的(单克隆)抗体移植到支架中产生或可获得的。[0383]根据本发明，结合结构域呈一种或多种多肽的形式。此类多肽可以包括蛋白质部分和非蛋白质部分(例如化学接头或化学交联剂，诸如戊二醛)。蛋白质(包括其片段、优选生物活性片段，以及通常具有少于30个氨基酸的肽)包含经由共价肽键彼此偶联的两个或更多个氨基酸(产生氨基酸链)。[0384]如本文所用，术语“多肽”描述了一组分子，其通常由多于30个氨基酸组成。多肽可以进一步形成多聚体，诸如二聚体、三聚体和更高级的寡聚物，即由多于一个多肽分子组成。形成这种二聚体、三聚体等的多肽分子可以相同或不同。因此，此类多聚体的对应高序结构称为同源或异源二聚体、同源或异源三聚体等。异源多聚体的实例是抗体分子，其天然存在的形式由两条相同的多肽轻链和两条相同的多肽重链组成。术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”也是指天然修饰的肽/多肽/蛋白质，其中该修饰是例如通过翻译后修饰(如糖基化、乙酰化、磷酸化等)来实现。当在本文中提及时，“肽”、“多肽”或“蛋白质”也可以是化学修饰的，诸如聚乙二醇化的。此类修饰在本领域中是熟知的并且在下文中描述。[0385]优选地，与muc17结合的结合结构域和/或与cd3ε结合的结合结构域是人结合结构域。包含至少一个人结合结构域的抗体和抗体构建体避免了与具有非人(诸如啮齿动物(例如鼠类、大鼠、仓鼠或兔))可变区和/或恒定区的抗体或抗体构建体相关联的一些问题。这种啮齿动物来源的蛋白质的存在可以导致抗体或抗体构建体的快速清除，或者可以导致患者生成针对抗体或抗体构建体的免疫应答。为了避免使用啮齿动物衍生的抗体或抗体构建体，可以通过将人抗体功能引入到啮齿动物中以使啮齿动物产生完全人抗体来生成人或完全人抗体/抗体构建体。[0386]在酵母人工染色体yac中克隆和重构兆碱基大小的人基因座并将它们引入到小鼠种系中的能力为阐明非常大或粗略定位的基因座的功能组分以及生成有用的人疾病模型提供了强有力的方法。此外，使用这种技术将小鼠基因座取代为其人类等同物可以提供关于对人类基因产物在发育期间的表达和调节、它们与其他系统的交流以及它们参与疾病诱导和进展的独特见解。[0387]这种策略的重要实际应用是小鼠体液免疫系统的“人源化”。将人免疫球蛋白(ig)基因座引入其中内源ig基因已经失活的小鼠中提供了研究抗体的程序化表达和组装的机制以及它们在b细胞发育中的作用的机会。此外，这种策略可以为完全人单克隆抗体(mab)的产生提供理想来源-这是有助于实现抗体疗法在人疾病中的前景的重要里程碑。预期完全人抗体或抗体构建体将小鼠或小鼠衍生的mab所固有的免疫原性和变应性应答最小化，并且由此增加施用的抗体/抗体构建体的功效和安全性。可以预期使用完全人抗体或抗体构建体在治疗需要重复化合物施用的慢性和复发性人类疾病诸如炎症、自身免疫和癌症方面提供了显著优势。实现该目标的一种方法是用人ig基因座的大片段工程化在小鼠抗体产生方面有缺陷的小鼠品系，预期这样的小鼠在没有小鼠抗体的情况下会产生大量的人抗体。大的人ig片段将保留大的可变基因多样性以及对抗体产生和表达的适当调节。通过利用小鼠的抗体多样化和选择机制以及缺乏对人蛋白质的免疫耐受性，这些小鼠品系中的再生人抗体组库应产生针对任何感兴趣的抗原(包括人抗原)的高亲和力抗体。通过使用杂交瘤技术，可以容易地产生和选择具有所需特异性的抗原特异性人mab。这种一般策略与第一代xenomouse小鼠品系有关(参见green等人naturegenetics[自然遗传学]7:13-21(1994))。用含有人重链基因座和κ轻链基因座的分别为245kb和190kb大小的种系构型片段的yac工程化xenomouse品系，这些种系构型片段含有核心可变区和恒定区序列。证明含有人ig的yac与小鼠系统关于抗体的重排和表达是相容的，并且能够取代失活的小鼠ig基因。这通过其诱导b细胞发育、产生完全人抗体的成人样人组库和生成抗原特异性人mab的能力来证明。这些结果还表明，引入含有更多数量的v基因、额外的调控元件和人ig恒定区的更大部分的人ig基因座可以实质上再现作为对感染和免疫的人体液应答的特征的完整组库。green等人的工作最近扩展到通过分别引入人重链基因座和κ轻链基因座的兆碱基大小的种系构型yac片段来引入大于大约80％的人抗体组库。参见mendez等人naturegenetics[自然遗传学]15:146-156(1997)和美国专利申请序列号08/759,620。xenomouse动物的产生在以下中进一步讨论和解释：美国专利申请号07/466,008、07/610,515、07/919,297、07/922,649、08/031,801、08/112,848、08/234,145、08/376,279、08/430,938、08/464,584、08/464,582、08/463,191、08/462,837、08/486,853、08/486,857、08/486,859、08/462,513、序列号08/724,752、和08/759,620；和美国专利号6,162,963；6,150,584；6,114,598；6,075,181和5,939,598以及日本专利号3068180b2、3068506b2和3068507b2。还参见mendez等人naturegenetics[自然遗传学]15:146-156(1997)和green和jakobovitsj.exp.med.[实验医学杂志]188:483-495(1998)、ep0463151b1、wo94/02602、wo96/34096、wo98/24893、wo00/76310和wo03/47336。[0388]在另一种方法中，其他公司(包括genpharm国际公司)利用了“微基因座”方法。在微基因座方法中，通过包含来自ig基因座的单独基因来模仿外源ig基因座。因此，一个/多个vh基因、一个/多个dh基因、一个/多个jh基因、mu恒定区和第二恒定区(优选γ恒定区)形成用于插入动物中的构建体。该方法描述于以下中：美国专利号5,545,807(surani等人)和美国专利号5,545,806；5,625,825；5,625,126；5,633,425；5,661,016；5,770,429；5,789,650；5,814,318；5,877,397；5,874,299；和6,255,458(各自为lonberg和kay)、krimpenfort和berns的美国专利号5,591,669和6,023.010、berns等人的美国专利号5,612,205；5,721,367；和5,789,215、以及choi和dunn的美国专利号5,643,763和genpharm国际公司美国专利申请序列号07/574,748、07/575,962、07/810,279、07/853,408、07/904,068、07/990,860、08/053,131、08/096,762、08/155,301、08/161,739、08/165,699、08/209,741。参见ep0546073b1、wo92/03918、wo92/22645、wo92/22647、wo92/22670、wo93/12227、wo94/00569、wo94/25585、wo96/14436、wo97/13852和wo98/24884以及美国专利号5,981,175。还参见taylor等人(1992)和(1994)、chen等人(1993)、tuaillon等人(1993)和(1995)、choi等人(1993)、lonberg等人(1994)、以及fishwild等人(1996)。[0389]kirin还证明了从小鼠中生成人抗体，在该小鼠中通过微细胞融合已经引入了大的染色体碎片或整个染色体。参见欧洲专利申请号773288和843961。xenerex生物科学正在开发一种可能生成人抗体的技术。在这种技术中，用人淋巴细胞(例如b和/或t细胞)重构scid小鼠。然后用抗原免疫小鼠并可以生成针对抗原的免疫应答。参见美国专利号5,476,996；5,698,767；和5,958,765。[0390]人抗小鼠抗体(hama)应答已引导该行业制备嵌合抗体或其他人源化抗体。然而，预期将观察到特别是在抗体的长期或多剂量利用中某些人抗嵌合抗体(haca)应答。因此，希望提供抗体构建体，这些抗体构建体包含针对muc17的人结合结构域和针对cd3ε的人结合结构域以便消除hama或haca应答的问题和/或效应。[0391]术语“与……(选择性)结合”、“与……(特异性)结合”、“(特异性)识别”、“(特异性)针对”和“与……(特异性)反应”意指根据本发明，结合结构域与靶分子(抗原)(此处：分别为muc17和cd3ε)上的给定表位或给定靶侧端相互作用或特异性相互作用。[0392]术语“表位”是指结合结构域(诸如抗体或免疫球蛋白，或抗体或免疫球蛋白的衍生物、片段或变体)特异性地结合的抗原上的一侧。“表位”是抗原性的，并且因此术语表位在本文中有时也称为“抗原结构”或“抗原决定簇”。因此，结合结构域是“抗原相互作用侧端”。所述结合/相互作用也被理解为定义“特异性识别”。“表位”可以通过连续的氨基酸或通过蛋白质的三级折叠并置的非连续氨基酸形成。“线性表位”是这样的表位，其中氨基酸一级序列包含所识别表位。线性表位典型地包括独特序列中的至少3个或至少4个、以及更通常至少5个或至少6个或至少7个例如约8个至约10个氨基酸。与线性表位相反，“构象表位”是这样的表位，其中构成表位的氨基酸的一级序列不是所识别表位的唯一限定组分(例如，其中氨基酸的一级序列不一定被结合结构域识别的表位)。典型地，构象表位包含相对于线性表位增加数量的氨基酸。关于构象表位的识别，结合结构域识别抗原、优选肽或蛋白质或其片段的三维结构(在本发明的上下文下，一个结合结构域的抗原结构包括于靶细胞表面抗原蛋白质内)。例如，当蛋白质分子折叠形成三维结构时，形成构象表位的某些氨基酸和/或多肽骨架被并置，使得抗体能够识别表位。确定表位构象的方法包括但不限于x射线晶体学、二维核磁共振(2d-nmr)光谱和定点自旋标记以及电子顺磁共振(epr)光谱。以下描述了用于表位作图的方法：当人muc17蛋白中的区(连续氨基酸延伸)与其非人和非灵长类动物muc17(例如小鼠muc17，但其他如鸡、大鼠、仓鼠、兔等也是可能的)的相应区域交换或替换时，预期发生结合结构域结合的降低，除非结合结构域对于所使用的非人、非灵长类动物muc17具有交叉反应性。与人muc17蛋白中对应区域的结合相比，所述降低优选为至少10％、20％、30％、40％、或50％；更优选至少60％、70％或80％，并且最优选90％、95％或甚至100％，由此将与人muc17蛋白中对应区域的结合设定为100％。设想前述人muc17/非人muc17嵌合体在cho细胞中表达。还设想人muc17/非人muc17嵌合体与不同膜结合蛋白(诸如epcam)的跨膜结构域和/或细胞质结构域融合。[0393]在用于表位作图的替代性或额外的方法中，可以生成若干种截短型式的人muc17细胞外结构域以便确定由结合结构域识别的特异性区。在这些截短型式中，不同的细胞外muc17结构域/亚结构域或区从n末端开始逐步缺失。设想截短的muc17型式可以在cho细胞中表达。还设想截短的muc17型式可以与不同膜结合蛋白(诸如epcam)的跨膜结构域和/或细胞质结构域融合。还设想截短的muc17型式可以在其n末端涵盖信号肽结构域，例如衍生自小鼠igg重链信号肽的信号肽。此外设想，截短的muc17型式可以在其n末端(在信号肽后)涵盖v5结构域，这允许验证其在细胞表面上的正确表达。预期对不再涵盖由结合结构域识别的muc17区的那些截短的muc17型式发生结合的减少或丧失。结合降低优选为至少10％、20％、30％、40％、50％；更优选至少60％、70％、80％，并且最优选90％、95％或甚至100％，由此将与整个人muc17蛋白(或其细胞外区域或结构域)的结合设定为100％。[0394]确定muc17的特定残基对抗体构建体或结合结构域的识别的贡献的另一种方法是丙氨酸扫描(参见，例如morrisonkl和weissga.curopinchembiol.[化学生物学新见]2001年6月；5(3):302-7)，其中有待分析的每个残基例如经由定点诱变被丙氨酸替换。丙氨酸的使用是因为其具有非巨大的、化学惰性的甲基官能团，但仍然模仿许多其他氨基酸所具有的二级结构参考。在需要保守突变残基的大小的情形下，有时可以使用巨大的氨基酸(诸如缬氨酸或亮氨酸)。丙氨酸扫描是一项已经使用了很长一段时间的成熟技术。[0395]结合结构域与表位或包含表位的区之间的相互作用意味着结合结构域对特定蛋白质或抗原(此处：分别为muc17和cd3)上的表位和/或包含表位的区表现出可观的亲和力，并且除非另有说明，通常与muc17或cd3以外的蛋白质或抗原不表现出显著反应性。“可观的亲和力”包括以约10-6m(kd)或更强的亲和力结合。优选地，当结合亲和力为约10-12至10-8m、10-12至10-9m、10-12至10-10m、10-11至10-8m，优选地为约10-11至10-9m时，将结合视为特异性的。结合结构域是否与靶标特异性反应或结合尤其可以通过以下方式容易地测试：比较所述结合结构域与靶蛋白或抗原的反应和所述结合结构域与muc17或cd3以外的蛋白质或抗原的反应。优选地，本发明的结合结构域基本上或实质上不与muc17或cd3以外的蛋白质或抗原结合(即，第一结合结构域不能与muc17以外的蛋白质结合，并且第二结合结构域不能与cd3以外的蛋白质结合)。设想根据本发明的抗体构建体的特征为与其他hle形式相比具有优异的亲和力特征。因此，这种优异的亲和力表明体内半衰期延长。根据本发明的抗体构建体的更长的半衰期可以减少典型地有助于改善患者顺应性的施用的持续时间和频率。这是特别重要的，因为本发明的抗体构建体对高度虚弱的或甚至多重性癌症患者特别有益。[0396]术语“基本上/实质上不结合”或“不能结合”意指本发明的结合结构域不结合muc17或cd3以外的蛋白质或抗原，即与muc17或cd3以外的蛋白质或抗原不显示超过30％、优选不超过20％、更优选不超过10％、特别优选不超过9％、8％、7％、6％或5％的反应性，由此将与muc17或cd3的结合分别设定为100％。[0397]认为特异性结合受结合结构域和抗原的氨基酸序列中的特定基序的影响。因此，由于它们的一级、二级和/或三级结构以及所述结构的二次修饰的结果，实现了结合。抗原相互作用侧端与其特异性抗原的特异性相互作用可以导致所述侧端与抗原的简单结合。此外，抗原相互作用侧端与其特异性抗原的特异性相互作用可以可替代地或另外导致信号的引发，例如由于诱导抗原构象的变化、抗原的寡聚化等。[0398]术语“可变”是指抗体或免疫球蛋白结构域表现出其序列可变性并且参与确定特定抗体的特异性和结合亲和力的部分(即“一个或多个可变结构域”)。可变重链(vh)和可变轻链(vl)的配对一起形成单一抗原结合位点。可变性在整个抗体的可变结构域中并不均匀分布；它集中在重链可变区和轻链可变区中的每一个的子结构域中。这些子结构域被称为“高变区”或“互补决定区”(cdr)。可变结构域的更保守的(即非高变)部分被称为“框架”区(frm或fr)，并且为三维空间中的六个cdr提供支架以形成抗原结合表面。天然存在的重链和轻链的可变结构域各自包含四个frm区(fr1、fr2、fr3和fr4)，这四个frm区主要使用β-折叠构型，通过三个高变区连接，这三个高变区形成连接β-折叠结构的环，并且在一些情况下形成β-折叠结构的一部分。每条链中的高变区通过frm紧密靠近在一起，并与来自另一条链的高变区一起有助于抗原结合侧端的形成(参见kabat等人,上述引文)。[0399]术语“cdr”及其复数“cdrs”是指其中三个构成轻链可变区(cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3)的结合特征和三个构成重链可变区(cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3)的结合特征的互补决定区。cdr含有大部分负责抗体与抗原特异性相互作用的残基，并且因此有助于抗体分子的功能活性：它们是抗原特异性的主要决定簇。准确定义的cdr边界和长度受制于不同的分类和编号系统。因此，cdr可以通过kabat、chothia、接触(contact)或任何其他边界定义(包括本文所述的编号系统)来引用。尽管有不同的边界，但这些系统中的每一者在构成可变序列内所谓的“高变区”的方面具有一定程度的重叠。因此，根据这些系统的cdr定义可以相对于相邻框架区在长度和边界区域方面不同。参见，例如kabat(一种基于跨物种序列变异性的方法)、chothia(一种基于抗原-抗体复合物的晶体学研究的方法)和/或maccallum(kabat等人,上述引文；chothia等人,j.moi.biol[分子生物学杂志],1987,196:901-917；和maccallum等人,j.moi.biol[分子生物学杂志],1996,262:732)。表征抗原结合侧端的又另一标准是由牛津大学分子公司(oxfbrdmolecular)的abm抗体建模软件使用的abm定义。参见，例如proteinsequenceandstructureanalysisofantibodyvariabledomains[抗体可变结构域的蛋白质序列和结构分析]在：antibodyengineeringlabmanual[抗体工程化实验室手册](编辑如下：duebel,s.和kontermann,r.,springer-verlag[施普林格出版社],海德堡(heidelberg))中。就两种残基鉴定技术定义重叠区而非相同区而言，可以将它们组合以定义杂合cdr。然而，根据所谓的kabat系统进行编号是优选的。典型地，cdr形成可以分类为规范结构的环结构。术语“规范结构”是指由抗原结合(cdr)环所采用的主链构象。从比较结构研究中，已经发现六个抗原结合环中的五个仅具有有限的可用构象组库。每个规范结构可以通过多肽骨架的扭转角来表征。因此，在抗体之间的相应环可以具有非常相似的三维结构，尽管在环的大部分中具有高的氨基酸序列可变性(chothia和lesk,j.moi.biol.[分子生物学杂志],1987,196:901；chothia等人,nature[自然],1989,342:877；martin和thornton,j.moi.biol[分子生物学杂志],1996,263:800)。此外，所采用的环结构与其周围的氨基酸序列之间存在关系。特定规范类别的构象由环的长度和位于环内以及保守框架内(即，环外)关键位置的氨基酸残基决定。因此，可以基于这些关键氨基酸残基的存在来进行对特定规范类别的分配。[0400]术语“规范结构”还可以包括关于抗体的线性序列的考虑因素，例如，如通过kabat(kabat等人,上述引文)编目的。kabat编号方案(系统)是以一致方式对抗体可变结构域的氨基酸残基进行编号的广泛采用的标准，并且是本发明应用的优选方案，也如本文其他地方所提及。另外的结构考虑因素也可以用于确定抗体的规范结构。例如，kabat编号未完全反映的那些差异可以通过chothia等人的编号系统来描述，并且/或者通过其他技术(例如结晶学和二维或三维计算建模)来揭示。因此，可以将给定的抗体序列置于规范类别中，该类别尤其允许鉴定适当的基础结构(chassis)序列(例如，基于在文库中包括多种规范结构的期望)。文献中描述了抗体氨基酸序列的kabat编号和如由chothia等人(上述引文)所述的结构考虑因素以及其用于解释抗体结构的规范方面的含义。不同类别的免疫球蛋白的亚基结构和三维构型在本领域中是熟知的。有关抗体结构的综述，参见antibodies:alaboratorymanual[抗体：实验室手册],coldspringharborlaboratory[冷泉港实验室],harlow等人编辑,1988。[0401]轻链的cdr3以及特别是重链的cdr3可以构成轻链可变区和重链可变区内抗原结合中最重要的决定簇。在一些抗体构建体中，重链cdr3似乎构成抗原与抗体之间主要的接触区域。其中单独改变cdr3的体外选择方案可以用于改变抗体的结合特性或确定哪些残基有助于抗原的结合。因此，cdr3典型地是抗体结合侧端内分子多样性的最大来源。例如，h3可以短至两个氨基酸残基或多于26个氨基酸。[0402]在经典的全长抗体或免疫球蛋白中，每条轻(l)链通过一个共价二硫键与重(h)链连接，而两条h链通过一个或多个二硫键彼此连接，这取决于h链同种型。最靠近vh的ch结构域通常命名为ch1。恒定(“c”)结构域不直接参与抗原结合，但表现出各种效应子功能，诸如抗体依赖性、细胞介导的细胞毒性和补体激活。抗体的fc区包括在重链恒定结构域内，并且例如能够与位于细胞表面的fc受体相互作用。[0403]组装和体细胞突变后的抗体基因的序列高度改变，并且估计这些改变的基因编码1010种不同抗体分子(immunoglobulingenes[免疫球蛋白基因],第2版,jonio等人编辑,academicpress[学术出版社],sandiego,ca[加利福尼亚州圣地亚哥],1995)。因此，免疫系统提供了免疫球蛋白组库。术语“组库”是指完全或部分衍生自至少一种编码至少一种免疫球蛋白的序列的至少一种核苷酸序列。一个或多个序列可以通过重链的v、d和j区段以及轻链的v和j区段的体内重排来生成。可替代地，一种或多种序列可以响应于发生重排(例如体外刺激)而从细胞生成。可替代地，一种或多种序列的一部分或全部可以通过dna剪接、核苷酸合成、诱变和其他方法获得，参见例如美国专利5,565,332。组库可以仅包括一种序列或可以包括多种序列，包括遗传多样性集合中的序列。[0404]术语“fc部分”或“fc单体”关于本发明意指包含至少一个具有ch2结构域功能的结构域和至少一个具有免疫球蛋白分子的ch3结构域功能的结构域的多肽。从术语“fc单体”显而易见，包含那些ch结构域的多肽是“多肽单体”。fc单体可以是至少包含排除重链的第一恒定区免疫球蛋白结构域(ch1)的免疫球蛋白恒定区的片段，但至少保持一个ch2结构域的功能部分和一个ch3结构域的功能部分的多肽，其中ch2结构域在ch3结构域的氨基末端。在这个定义的优选方面中，fc单体可以是包含ig-fc铰链区、ch2区和ch3区的一部分的多肽恒定区，其中铰链区在ch2结构域的氨基末端。设想本发明的铰链区促进二聚化。例如但不限于，此类fc多肽分子可以通过木瓜蛋白酶消化免疫球蛋白区(当然产生两个fc多肽的二聚体)获得。在这个定义的另一方面中，fc单体可以是包含ch2区和ch3区的一部分的多肽区。例如但不限于，此类fc多肽分子可以通过胃蛋白酶消化免疫球蛋白分子获得。在一个实施例中，fc单体的多肽序列实质上类似于以下的fc多肽序列：igg1fc区、igg2fc区、igg3fc区、igg4fc区、igmfc区、igafc区、igdfc区和igefc区。(参见，例如padlan,molecularimmunology[分子免疫学],31(3),169-217(1993))。因为免疫球蛋白之间存在一些变化，并且仅为了清楚起见，所以fc单体是指iga、igd和igg的最后两个重链恒定区免疫球蛋白结构域，以及ige和igm的最后三个重链恒定区免疫球蛋白结构域。[0405]如上所提及，fc单体还可以包括在这些结构域的n末端的柔性铰链。对于iga和igm，fc单体可以包括j链。对于igg，fc部分包含免疫球蛋白结构域ch2和ch3以及前两个结构域与ch2之间的铰链。尽管fc部分的边界可以改变，但包含功能铰链、ch2和ch3结构域的人igg重链fc部分的实例可以定义为例如包含残基d231(铰链结构域的残基-对应于下表2中的d234)至ch3结构域的羧基末端的p476，分别地l476(对于igg4)，其中编号是根据kabat的。经由肽接头彼此融合的两个fc部分或fc单体定义本发明的抗体构建体的第三结构域，该第三结构域也可以被定义为scfc结构域。设想如本文披露的scfc结构域，分别地彼此融合的fc单体仅包含在抗体构建体的第三结构域中。[0406]表2：铰链区的氨基酸残基的kabat编号[0407][0408][0409]iggch2和iggcd3结构域的位置和序列可以使用表3中列出的kabat编号通过类推来鉴定：[0410]表3：iggch2和ch3区的氨基酸残基的kabat编号[0411][0412]在本发明的一个实施例中，使第一或两个fc单体的ch3结构域中粗体强调的氨基酸残基缺失。[0413]第三结构域的多肽单体(“fc部分”或“fc单体”)彼此融合的肽接头优选包含至少25个氨基酸残基(25、26、27、28、29、30等)。更优选地，这个肽接头包含至少30个氨基酸残基(30、31、32、33、34、35等)。还优选地，接头包含至多40个氨基酸残基、更优选地至多35个氨基酸残基、最优选地恰好30个氨基酸残基。[0414]在使用接头来将第一结构域与第二结构域融合或将第一结构域或第二结构域与第三结构域融合的情况下，该接头优选地具有足以确保第一结构域和第二结构域中的每一者均可以彼此独立地保留其差异结合特异性的长度和序列。对于连接抗体构建体中的至少两个结合结构域(或两个可变结构域)的肽接头，仅包含少量的氨基酸残基(例如12个氨基酸残基或更少)的那些肽接头是优选的。因此，12、11、10、9、8、7、6或5个氨基酸残基的肽接头是优选的。设想的具有少于5个氨基酸的肽接头包含4、3、2或1个氨基酸，其中富含gly的接头是优选的。用于融合第一结构域和第二结构域的肽接头的优选的实施例在seqidno:10中描绘。用于融合第二结构域和第三结构域的肽接头的优选接头实施例是(gly)4-接头，也称为g4-接头。包括不促进二级结构的所述肽接头的特征是本领域中已知的并且描述于例如dall’acqua等人(biochem.[生物化学](1998)37,9266-9273)、cheadle等人(molimmunol[分子免疫学](1992)29,21-30)以及raag和whitlow(faseb[美国实验生物学联合会会志](1995)9(1),73-80)中。此外不促进任何二级结构的肽接头是优选的。所述结构域彼此的连接可以例如通过基因工程提供，如实例中所述。用于制备融合的且可操作地连接的双特异性单链构建体并在哺乳动物细胞或细菌中表达它们的方法是本领域中熟知的(例如wo99/54440或sambrook等人,molecularcloning:alaboratorymanual[分子克隆：实验室手册],coldspringharborlaboratorypress[冷泉港实验室出版社],coldspringharbor,newyork[纽约冷泉港],2001)。[0415]根据特别优选的实施例，本发明抗体构建体的第一结构域和第二结构域是“双特异性单链抗体构建体”、更优选双特异性“单链fv”(scfv)。尽管fv片段的两个结构域vl和vh由独立的基因编码，但使用重组方法可以将这两个结构域通过合成接头接合，如上文所述，该合成接头使它们能够制得为单条蛋白质链，其中vl和vh区配对以形成单价分子；参见，例如huston等人(1988)proc.natl.acad.sciusa[美国国家科学院院刊]85:5879-5883。使用本领域技术人员已知的常规技术获得这些抗体片段，并且按照与完整或全长抗体相同的方式评价片段的功能。因此，单链可变片段(scfv)是免疫球蛋白的重链(vh)和轻链(vl)可变区的融合蛋白，通常利用约10至约25个氨基酸，优选地约15至20个氨基酸的短接头肽连接。接头通常富含甘氨酸以获得柔韧性，以及富含丝氨酸或苏氨酸以获得溶解性，并且可以连接vh的n末端和vl的c末端，或反之亦然。尽管去除了恒定区并引入了接头，但该蛋白质保留了原始免疫球蛋白的特异性。[0416]双特异性单链抗体构建体在本领域中是已知的并描述于以下中：wo99/54440；mack,j.immunol.[免疫学杂志](1997),158,3965-3970；mack,pnas[美国国家科学院院刊],(1995),92,7021-7025；kufer,cancerimmunol.immunother.[癌症免疫学免疫治疗],(1997),45,193-197；blood[血液],(2000),95,6,2098-2103；brühl,immunol.[免疫学],(2001),166,2420-2426；kipriyanov,j.mol.biol.[分子生物学杂志],(1999),293,41-56。可以采用针对产生单链抗体所述的技术(尤其参见美国专利4,946,778；kontermann和dübel(2010),，上述引文；和little(2009),上述引文)产生特异性识别一种或多种所选靶标的单链抗体构建体。[0417]二价(bivalent)(也称为双价(divalent))或双特异性单链可变片段(具有形式(scfv)2的bi-scfv或di-scfv)可以通过连接两个scfv分子(例如利用如上文所述的接头)来工程化。如果这两个scfv分子具有相同的结合特异性，则所得(scfv)2分子将优选称为二价的(即，对于相同的靶表位具有两个价)。如果两个scfv分子具有不同的结合特异性，则所得(scfv)2分子将优选称为双特异性的。连接可以通过产生具有两个vh区和两个vl区的单条肽链从而产生串联scfv来进行(参见，例如kuferp.等人,(2004)trendsinbiotechnology[生物技术趋势]22(5):238-244)。另一种可能性是产生具有接头肽的scfv分子，这些接头肽对于两个可变区来说太短以致于不能折叠在一起(例如约五个氨基酸)，从而迫使scfv二聚化。这种类型被称为双抗体(参见，例如hollinger,philipp等人,(1993年7月)pnas[美国国家科学院院刊]90(14):6444-8)。[0418]第一、第二、或第一和第二结构域可以包含单结构域抗体，其分别为单结构域抗体的可变结构域或至少cdr。单结构域抗体仅包含一个(单体)抗体可变结构域，该抗体可变结构域能够独立于其他v区或结构域而与特定抗原选择性结合。第一单结构域抗体是从骆驼中发现的重链抗体工程化而来，并且这些被称为vhh片段。软骨鱼类也具有重链抗体(ignar)，可以从这些重链抗体中获得称为vnar片段的单结构域抗体。替代性方法是将来自常见免疫球蛋白，例如来自人或啮齿动物的二聚体可变结构域分裂成单体，因此获得作为单结构域ab的vh或vl。尽管对单结构域抗体的大多数研究目前都是基于重链可变结构域，但是也已经显示衍生自轻链的纳米抗体特异性地结合靶表位。单结构域抗体的实例是所谓的sdab、纳米抗体或单可变结构域抗体。因此，(单结构域mab)2是由(至少)两个单结构域单克隆抗体构成的单克隆抗体构建体，该两个单结构域单克隆抗体单独地选自下组，该组包括：vh、vl、vhh和vnar。接头优选呈肽接头的形式。类似地，“scfv-单结构域mab”是由至少一个如上所述的单结构域抗体和一个如上所述的scfv分子构成的单克隆抗体构建体。同样，接头优选呈肽接头的形式。[0419]抗体构建体是否与另一给定抗体构建体竞争结合可以在竞争测定(诸如竞争性elisa或基于细胞的竞争测定)中测量。也可以使用亲和素偶联的微粒(珠粒)。与亲和素涂覆的elisa板相似，当与生物素化蛋白质反应时，这些珠粒中的每一个都可用作可在其上进行测定的底物。将抗原涂覆在珠粒上，并且然后用第一抗体预涂覆。添加第二抗体并且确定任何另外的结合。用于读出的可能手段包括流式细胞术。[0420]可以按多种方式测量由抗体构建体介导的细胞毒性。效应细胞可以是例如刺激的富集的(人)cd8阳性t细胞或未刺激的(人)外周血单核细胞(pbmc)。如果靶细胞是猕猴起源的或表达的或用由第一结构域结合的猕猴muc17转染，则效应细胞也应是猕猴起源的，诸如猕猴t细胞系，例如4119lnpx。靶细胞应表达muc17(例如人或猕猴muc17)(至少其细胞外结构域)。靶细胞可以是用muc17(例如人或猕猴muc17)稳定或瞬时转染的细胞系(诸如cho)。对于在细胞表面表达更高水平的muc17的靶细胞系，预期ec50值通常更低。效应细胞与靶细胞(e:t)比率通常为约10:1，但也可以改变。muc17双特异性抗体构建体的细胞毒性活性可以在51cr释放测定(温育时间为约18小时)中或在基于facs的细胞毒性测定(温育时间为约48小时)中测量。也可能对测定温育时间(细胞毒性反应)进行修改。其他测量细胞毒性的方法对本领域技术人员来说是熟知的，并且包括mtt或mts测定、基于atp的测定(包括生物发光测定)、磺基罗丹明b(srb)测定、wst测定、克隆生成测定和ecis技术。[0421]由muc17xcd3抗体构建体介导的细胞毒性活性优选地在基于细胞的细胞毒性测定中测量。其也可以在51cr-释放测定中测量。其由ec50值表示，该值对应于半数最大有效浓度(诱导在基线与最大值之间的中途的细胞毒性应答的抗体构建体的浓度)。优选地，muc17xcd3抗体构建体的ec50值≤5000pm或≤4000pm、更优选≤3000pm或≤2000pm、甚至更优选≤1000pm或≤500pm、甚至更优选≤400pm或≤300pm、甚至更优选≤200pm、甚至更优选≤100pm、甚至更优选≤50pm、甚至更优选≤20pm或≤10pm，并且最优选≤5pm。优选地，muc17xcd3抗体构建体不诱导/介导溶解或基本上不诱导/介导muc17阴性细胞诸如cho细胞的溶解。术语“不诱导溶解”、“基本上不诱导溶解”、“不介导溶解”或“基本不介导溶解”意指本发明的抗体构建体不诱导或介导超过30％、优选不超过20％、更优选不超过10％、特别优选不超过9％、8％、7％、6％或5％的muc17阴性细胞的溶解，由此将muc17阳性人细胞系的溶解设定为100％。这通常适用于浓度高达500nm的抗体构建体。本领域技术人员知道如何毫不费力地测量细胞溶解。[0422]本发明的抗体构建体的第一结合结构域和/或第二(或任何其他)结合结构域优选对于灵长类哺乳动物目的成员具有跨物种特异性。跨物种特异性cd3结合结构域例如描述于wo2008/119567中。根据一个实施例，除了分别与人muc17和人cd3结合之外，第一结合结构域和/或第二结合结构域还将与灵长类动物的muc17/cd3结合，灵长类动物包括(但不限于)新大陆灵长类动物(诸如狨毛猴(callithrixjacchus)、绒顶柽柳猴(saguinusoedipus)或松鼠猴(saimirisciureus))、旧大陆灵长类动物(诸如狒狒和猕猴)、长臂猿和非人类人亚科。[0423]如本文所用，术语“药物组合物”涉及适用于施用给患者，优选人患者的组合物。本发明的特别优选的药物组合物包含优选治疗有效量的一种或多种本发明的抗体构建体。优选地，药物组合物进一步包含一种或多种(药学上有效的)载剂、稳定剂、赋形剂、稀释剂、增溶剂、表面活性剂、乳化剂、防腐剂和/或佐剂的合适配制品。组合物的可接受成分优选在所使用的剂量和浓度下是对接受者无毒性的。本发明的药物组合物包括但不限于液体、冷冻和冻干组合物。这些组合物可以包含药学上可接受的载剂。通常，如本文所用，“药学上可接受的载剂”意指与药物施用，特别是肠胃外施用相容的任何和所有的水性和非水性溶液、无菌溶液、溶剂、缓冲液(例如磷酸盐缓冲盐水(pbs)溶液)、水、悬浮液、乳液(诸如油/水乳液)、各种类型的润湿剂、脂质体、分散介质和包衣。此类介质和药剂在药物组合物中的使用在本领域中是熟知的，并且包含此类载剂的组合物可以通过熟知的常规方法配制。在某些实施例中，药物组合物可以含有用于改变、维持或保存组合物的以下方面的目的的配制材料：例如ph、渗透压、粘度、透明度、颜色、等渗性、气味、无菌性、稳定性、溶解或释放速率、吸附性或渗透性(参见remington'spharmaceuticalsciences[雷明登氏药学全书],第18"版,(a.r.genrmo编辑),1990,mackpublishingcompany[马克出版公司])。在此类实施例中，合适的配制材料可以包括但不限于：[0424]·氨基酸，诸如甘氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、苏氨酸、脯氨酸、2-苯丙氨酸，包括带电荷的氨基酸，优选赖氨酸、乙酸赖氨酸、精氨酸、谷氨酸盐和/或组氨酸[0425]·抗微生物剂，诸如抗细菌剂和抗真菌剂[0426]·抗氧化剂，诸如抗坏血酸、甲硫氨酸、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠；[0427]·缓冲液、缓冲系统和缓冲剂，用于将组合物维持在生理ph或稍低的ph，优选4.0至6.5的较低ph下；缓冲液的实例是硼酸盐、碳酸氢盐、tris-hcl、柠檬酸盐、磷酸盐或其他有机酸、琥珀酸盐、磷酸盐和组氨酸；例如约ph7.0-8.5的tris缓冲液；[0428]·非水性溶剂，诸如丙二醇、聚乙二醇、植物油诸如橄榄油、和可注射用有机酯诸如油酸乙酯；[0429]·水性载剂包括水、醇/水性溶液、乳液或悬浮液，包括盐水和缓冲介质；[0430]·可生物降解聚合物，诸如聚酯；[0431]·增积剂，诸如甘露糖醇或甘氨酸；[0432]·螯合剂，诸如乙二胺四乙酸(edta)；[0433]·等渗剂和吸收延迟剂；[0434]·络合剂，诸如咖啡因、聚乙烯吡咯烷酮、β-环糊精或羟丙基-β-环糊精；[0435]·填充剂；[0436]·单糖；二糖；和其他碳水化合物(诸如葡萄糖、甘露糖或糊精)；碳水化合物可以是非还原糖，优选海藻糖、蔗糖、八硫酸盐、山梨醇或木糖醇；[0437]·(低分子量)蛋白质、多肽或蛋白质载剂，诸如人或牛血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白，优选地是人来源的；[0438]·着色剂和调味剂；[0439]·含硫还原剂，诸如谷胱甘肽、硫辛酸、硫代乙酸钠、硫代甘油、[α]-一硫代甘油和硫代硫酸钠[0440]·稀释剂；[0441]·乳化剂；[0442]·亲水聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮)[0443]·成盐平衡离子，诸如钠；[0444]·防腐剂，诸如抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂、惰性气体等；实例是：苯扎氯铵、苯甲酸、水杨酸、硫柳汞、苯乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、氯己定、山梨酸或过氧化氢；[0445]·金属复合物，诸如zn-蛋白质复合物；[0446]·溶剂和共溶剂(诸如甘油、丙二醇或聚乙二醇)；[0447]·糖和糖醇，诸如海藻糖、蔗糖、八硫酸盐、甘露醇、山梨糖醇或木糖醇水苏糖、甘露糖、山梨糖、木糖、核糖、肌糖(myoinisitose)、半乳糖、乳糖醇、核糖醇、肌肉肌醇(myoinisitol)、半乳糖醇、甘油、环多醇(例如肌醇)、聚乙二醇；和多元糖醇；[0448]·悬浮剂；[0449]·表面活性剂或润湿剂，诸如普朗尼克(pluronics)、peg、脱水山梨糖醇酯、聚山梨醇酯(诸如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯)、氚核、氨丁三醇、卵磷脂、胆固醇、泰洛沙星(tyloxapal)；表面活性剂可以是洗涤剂，优选分子量》1.2kd，和/或聚醚，优选分子量》3kd；优选洗涤剂的非限制性实例是吐温20、吐温40、吐温60、吐温80和吐温85；优选聚醚的非限制性实例是peg3000、peg3350、peg4000和peg5000；[0450]·稳定性增强剂，诸如蔗糖或山梨糖醇；[0451]·张力增强剂，诸如碱金属卤化物，优选地氯化钠或氯化钾；甘露糖醇山梨糖醇；[0452]·肠胃外递送媒介物，包括氯化钠溶液、林格氏右旋糖、右旋糖和氯化钠、乳酸林格氏液或不挥发性油；[0453]·静脉内递送媒介物，包括流体和营养补充物、电解质补充物(诸如基于林格氏右旋糖的那些)。[0454]设想除了本文定义的抗体构建体之外，该组合物可以包含另外的生物活性剂，这取决于组合物的预期用途。此类药剂可以是作用于胃肠系统的药物、充当细胞抑制剂的药物、预防高尿酸血症的药物、抑制免疫反应的药物(例如皮质类固醇)、调节炎症应答的药物、作用于循环系统的药物和/或本领域中已知的药剂诸如细胞因子。还设想将本发明的抗体构建体应用于共疗法中，即与另一种抗癌药物组合。在某些实施例中，最佳药物组合物将由本领域技术人员根据例如施用的预期途径、递送形式和所需剂量来确定。参见，例如remington'spharmaceuticalsciences[雷明登氏药学全书]，同上。在某些实施例中，此类组合物可以影响本发明的抗体构建体的物理状态、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。在某些实施例中，药物组合物中的主要媒介物或载剂可以是水性或非水性的。例如，合适的媒介物或载剂可以是注射用水、生理盐水溶液或人工脑脊液，其可能补充有肠胃外施用组合物中常见的其他物质。中性缓冲盐水或与血清白蛋白混合的盐水是另外的示例性媒介物。在某些实施例中，本发明抗体构建体组合物可以通过将具有所需纯度的所选组成成分与任选配制剂(remington'spharmaceuticalsciences[雷明登氏药学全书]，同上)以冻干饼或水性溶液的形式混合来制备用于储存。此外，在某些实施例中，可以使用适当的赋形剂(诸如蔗糖)将本发明的抗体构建体配制成冻干物。[0455]当考虑肠胃外施用时，用于本发明的治疗组合物可以以无热原的肠胃外可接受的水性溶液的形式提供，该水性溶液在药学上可接受的媒介物中包含本发明的所需抗体构建体。用于肠胃外注射的特别合适的媒介物是无菌蒸馏水，其中将本发明的抗体构建体配制成适当保存的无菌等渗溶液。在某些实施例中，该制备可以包括用试剂配制所需分子，该试剂诸如可注射微球、生物可侵蚀颗粒、聚合化合物(诸如聚乳酸或聚乙醇酸)、珠粒或脂质体，它们可以提供可以经由积存注射递送的产品的控制释放或持续释放。在某些实施例中，也可以使用透明质酸，其具有促进在循环中的持续时间的作用。在某些实施例中，可植入药物递送装置可以用于引入所需的抗体构建体。[0456]另外的药物组合物对于本领域技术人员将是明显的，包括涉及将本发明的抗体构建体制成持续或控制递送/释放配制品的配制品。用于配制各种其他持续或控制递送方式(诸如脂质体载剂、生物可侵蚀微粒或多孔珠粒和积存注射)的技术也是本领域技术人员已知的。参见，例如国际专利申请号pct/us93/00829，其描述了用于递送药物组合物的多孔聚合物微粒的控制释放。持续释放制剂可以包括成形制品形式的半透性聚合物基质，例如薄膜或微胶囊。持续释放基质可以包括聚酯、水凝胶、聚交酯(如美国专利号3,773,919及欧洲专利申请公开号ep058481中所披露)、l-谷氨酸与γ-乙基-l-谷氨酸的共聚物(sidman等人,1983,biopolymers[生物聚合物]2:547-556)、聚(甲基丙烯酸2-羟基乙基酯)(langer等人,1981,j.biomed.mater.res.[生物医学材料研究杂志]15:167-277以及langer,1982chem.tech.[化学技术]12:98-105)、乙烯乙酸乙烯酯(langer等人,1981,同上)或聚-d(-)-3-羟基丁酸(欧洲专利申请公开号ep133,988)。持续释放组合物还可以包括可通过本领域已知的几种方法中的任一种制备的脂质体。参见，例如eppstein等人,1985,proc.natl.acad.sci.u.s.a.[美国国家科学院院刊]82:3688-3692；欧洲专利申请公开号ep036,676；ep088,046和ep143,949。[0457]也可以将抗体构建体包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊(例如分别为羟甲基纤维素或明胶-微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊)中，包埋在胶体药物递送系统(例如脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊)中或包埋在粗滴乳状液中。此类技术披露于remington'spharmaceuticalsciences[雷明登氏药学全书],第16版,oslo,a.编辑,(1980)中。[0458]用于体内施用的药物组合物典型地以无菌制剂提供。灭菌可以通过经由无菌滤膜的过滤来完成。当组合物冻干时，可以在冻干和重构之前或之后进行使用该方法的灭菌。用于肠胃外施用的组合物可以以冻干形式或以溶液储存。肠胃外组合物通常置于具有无菌进入口的容器中，例如具有可由皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶。[0459]另一方面包括自缓冲的本发明抗体构建体配制品，这些配制品可以用作药物组合物，如国际专利申请wo06138181a2(pct/us2006/022599)中所述。有多种关于蛋白质稳定和配制材料以及在这方面有用的方法的论述，诸如arakawa等人,“solventinteractionsinpharmaceuticalformulations[药物配制品中的溶剂相互作用],”pharmres.[药物研究]8(3):285-91(1991)；kendrick等人,“physicalstabilizationofproteinsinaqueoussolution[蛋白质在水溶液中的物理稳定]”,rationaldesignofstableproteinformulations:theoryandpractice[稳定的蛋白质配制品的合理设计：理论与实践],carpenter和manning编辑pharmaceuticalbiotechnology.[药物生物技术]13:61-84(2002)，以及randolph等人,“surfactant-proteininteractions[表面活性剂-蛋白质相互作用]”,pharmbiotechnol.[药物生物技术]13:159-75(2002)，尤其参见与用于自缓冲蛋白质配制品的相同赋形剂和工艺有关的部分，特别是关于用于兽医和/或人类医学用途的蛋白质药物产品和工艺。[0460]根据某些实施例，盐类可以用于例如调节配制品的离子强度和/或等渗性和/或改善蛋白质或组合物的其他成分的溶解性和/或物理稳定性。众所周知，离子可以通过与蛋白质表面上的带电荷的残基结合并通过屏蔽蛋白质中的带电荷基团和极性基团并降低其静电相互作用、吸引和排斥相互作用的强度来稳定蛋白质的天然状态。离子还可以通过结合特别是蛋白质的变性肽键(‑‑conh)来稳定蛋白质的变性状态。此外，离子与蛋白质中带电和极性基团的相互作用还可以减少分子间静电相互作用，从而防止或减少蛋白质聚集和不溶性。离子种类对蛋白质的影响差异很大。已经开发了离子及其对蛋白质的影响的许多分类排名，这些蛋白质可以用于配制药物组合物。一个实例是hofmeister系列，其通过离子和极性非离子溶质对溶液中蛋白质的构象稳定性的影响对该离子和极性非离子溶质进行排名。稳定溶质称为“亲液的”。去稳定溶质称为“离液的”。通常使用高浓度的亲液剂(例如，》1摩尔硫酸铵)以从溶液中沉淀蛋白质(“盐析”)。通常使用离液剂来使蛋白质变性和/或溶解(“盐溶”)。离子对“盐溶”和“盐析”的相对有效性限定了其在hofmeister系列中的位置。[0461]根据各种实施例，游离氨基酸可以在抗体构建体配制品中作为增积剂、稳定剂和抗氧化剂以及其他标准用途使用。赖氨酸、脯氨酸、丝氨酸和丙氨酸可以用于稳定配制品中的蛋白质。甘氨酸可用于冻干以确保正确的饼结构和特性。在液体和冻干配制品二者中，精氨酸可以用于抑制蛋白质聚集。甲硫氨酸可用作抗氧化剂。[0462]多元醇包括糖(例如甘露醇、蔗糖和山梨醇)和多羟基醇(例如像甘油和丙二醇)以及出于本文讨论的目的，包括聚乙二醇(peg)和相关物质。多元醇是亲液的。它们是液体和冻干配制品二者中有用的稳定剂，以保护蛋白质免受物理和化学降解过程的影响。多元醇也可用于调节配制品的张力。可用于本发明的选择实施例的多元醇是甘露醇，其通常用于确保冻干配制品中饼的结构稳定性。它确保了对于饼的结构稳定性。甘露醇通常与冻干保护剂一起使用，例如蔗糖。山梨醇和蔗糖是用于调节张力的优选试剂并且用作在运输期间或制造工艺期间制备散剂期间防止冻融应力的稳定剂。还原糖(其含有游离醛或酮基团)诸如葡萄糖和乳糖可以糖化表面赖氨酸和精氨酸残基。因此，它们通常不是优选的多元醇。此外，形成这种反应性种类的糖诸如蔗糖在酸性条件下水解成果糖和葡萄糖并因此产生糖化，这种糖在这一方面也不是优选的多元醇。peg可用于稳定蛋白质和用作冷冻保护剂，并且可以用于这一方面。[0463]抗体构建体配制品的实施例进一步包含表面活性剂。蛋白质分子可能易于在表面上吸附并且易于在气-液、固-液和液-液界面处变性和随后聚集。这些效应通常与蛋白质浓度成反比。这些有害的相互作用通常与蛋白质浓度成反比，并且典型地通过物理搅动(诸如在运输和处理产品的过程生成的物理搅动)加剧。表面活性剂通常用于防止、最小化或减少表面吸附。在这一方面，本发明中有用的表面活性剂包括聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、脱水山梨醇聚乙氧基化物的其他脂肪酸酯和泊洛沙姆188。表面活性剂也常用于控制蛋白质构象稳定性。在这一方面，表面活性剂的使用是蛋白质特异性的，因为任何给定的表面活性剂典型地会稳定一些蛋白质而使其他蛋白质去稳定。[0464]聚山梨醇酯易受氧化降解的影响，并且通常如所提供的含有足够量的过氧化物以引起蛋白质残基侧链(尤其是甲硫氨酸)的氧化。因此，应小心采用聚山梨醇酯，使用时应使用最低有效浓度。在这一方面，聚山梨醇酯例证了赋形剂应以其最低有效浓度使用的一般规则。[0465]抗体构建体配制品的实施例进一步包含一种或多种抗氧化剂。在一定程度上，通过维持适当水平的环境氧和温度并避免光照，可以防止药物配制品中蛋白质的有害氧化。抗氧化赋形剂也可以用于防止蛋白质的氧化降解。在这一方面，有用的抗氧化剂是还原剂、氧/自由基清除剂和螯合剂。用于根据本发明的治疗性蛋白质配制品的抗氧化剂优选为水溶性的并且在产品的整个保质期内保持其活性。在这一方面，edta是根据本发明的优选抗氧化剂。抗氧化剂可以破坏蛋白质。例如，还原剂诸如谷胱甘肽特别可以破坏分子内二硫连接。因此，抗氧化剂除其他方面外被选择用于消除或充分降低它们自身损害配制品中蛋白质的可能性。[0466]配制品可以包含金属离子，这些金属离子是蛋白质辅因子并且是形成蛋白质配位络合物所必需的，诸如形成某些胰岛素悬浮液所必需的锌。金属离子也可以抑制一些降解蛋白质的过程。然而，金属离子也催化降解蛋白质的物理和化学过程。镁离子(10-120mm)可以用于抑制天冬氨酸异构化为异天冬氨酸。ca+2离子(高达100mm)可以增加人脱氧核糖核酸酶的稳定性。然而，mg+2、mn+2和zn+2可以使rhdnase去稳定。类似地，ca+2和sr+2可以稳定因子viii，它可以被mg+2、mn+2和zn+2、cu+2和fe+2去稳定化，并且该稳定因子的聚集可以通过al+3离子强化。[0467]配制品的实施例进一步包含一种或多种防腐剂。当开发涉及从同一容器中多于一次取出的多剂量肠胃外配制品时，防腐剂是必需的。它们的主要功能是在药物产品的整个保质期或使用期限内抑制微生物生长并确保产品无菌。常用的防腐剂包括苯甲醇、苯酚和间甲酚。虽然防腐剂与小分子肠胃外药物一起使用已经很长的历史，但包含防腐剂的蛋白质配制品的开发可能具有挑战性。防腐剂几乎总是对蛋白质具有去稳定作用(聚集)，并且这已经成为限制它们在多剂量蛋白质配制品中的使用的主要因素。迄今为止，大多数蛋白质药物仅配制成一次性使用。然而，当多剂量配制品成为可能时，它们具有使患者方便和增加适销性的附加优点。一个很好的实例是人类生长激素(hgh)的防腐剂，其中保存配制品的开发已导致更方便、多用途的注射笔呈现的商业化。目前市场上可提供至少四种含有保存的hgh配制品的这种笔装置。norditropin(液体，诺和诺德公司(novonordisk))、nutropinaq(液体，基因泰克公司(genentech))和genotropin(冻干的‑‑双室药筒，法玛西亚普强公司(pharmacia&upjohn))含有苯酚，而somatrope(礼来公司(elililly))用间甲酚进行配制。在保存剂型的配制和开发过程中需要考虑几个方面。必须优化药物产品中的有效防腐剂浓度。这需要在剂型中测试给定防腐剂的浓度范围，该防腐剂的浓度范围赋予了抗微生物有效性而不损害蛋白质稳定性。[0468]正如可以预期的那样，含有防腐剂的液体配制品的开发比冻干配制品更具挑战性。冷冻干燥的产品可以在没有防腐剂的情况下冻干，并在使用时用含有防腐剂的稀释剂重构。这缩短了防腐剂与蛋白质接触的时间，从而显著降低了相关联的稳定性风险。在液体配制品的情况下，防腐剂的有效性和稳定性应在整个产品保质期(约18至24个月)内保持。需要注意的一点是，防腐剂的有效性应在含有活性药物和所有赋形剂组分的最终配制品中证实。[0469]本文披露的抗体构建体也可以配制为免疫脂质体。“脂质体”是由各物种型的脂质、磷脂和/或表面活性剂构成的小囊泡，该小囊泡可用于将药物递送至哺乳动物。脂质体的组分通常以双层形式排列，类似于生物膜的脂质排列。含有抗体构建体的脂质体通过本领域已知的方法制备，诸如epstein等人,proc.natl.acad.sci.usa[美国国家科学院院刊],82:3688(1985)；hwang等人,proc.natlacad.sci.usa[美国国家科学院院刊],77:4030(1980)；美国专利号4,485,045和4,544,545；以及w097/38731中所述。具有延长的循环时间的脂质体披露于美国专利号5,013,556中。特别有用的脂质体可以通过反相蒸发方法用包含磷脂酰胆碱、胆固醇和peg衍生化磷脂酰乙醇胺(peg-pe)的脂质组合物生成。使脂质体挤出通过具有限定孔径的滤器以产生具有所需直径的脂质体。本发明的抗体构建体的fab'片段可以与脂质体经由二硫键交换反应缀合，如martin等人j.biol.chem.[生物化学杂志]257:286-288(1982)中所述。化学治疗剂任选地包含在脂质体内。参见gabizon等人j.nationalcancerinst.[国家癌症研究所杂志]81(19)1484(1989)。[0470]一旦配制好药物组合物，它可以作为溶液、悬浮液、凝胶、乳液、固体、晶体或作为脱水或冻干粉末储存在无菌小瓶中。此类配制品可以以即用形式或以在施用之前重构的形式(例如，冻干的)储存。[0471]本文定义的药物组合物的生物活性可以例如通过细胞毒性测定来确定，如以下实例、wo99/54440或由schlereth等人(cancerimmunol.immunother.[癌症免疫学免疫治疗]20(2005),1-12)所述。如本文所用，“功效”或“体内功效”是指使用例如标准化nci应答标准对本发明的药物组合物的疗法的应答。使用本发明的药物组合物的疗法的成功或体内功效是指组合物对于其预期用途的有效性，即组合物引起其所需效应，即耗尽病理细胞(例如肿瘤细胞)的能力。体内功效可以通过已建立的对应疾病实体的标准方法进行监测，这些方法包括但不限于白细胞计数、差异、荧光激活细胞分选法、骨髓抽吸。另外，可以使用各种疾病特异性临床化学参数和其他建立的标准方法。此外，可以使用计算机辅助断层扫描、x射线、核磁共振断层扫描(例如，用于基于美国国家癌症研究所标准的应答评估[chesonbd,horningsj,coiffierb,shippma,fisherri,connorsjm,listerta,vosej,grillo-lopeza,hagenbeeka,cabanillasf,klippenstend,hiddemannw,castellinor,harrisnl,armitagejo,carterw,hopper,canellosgp.reportofaninternationalworkshoptostandardizeresponsecriteriafornon-hodgkin'slymphomas.[标准化非霍奇金淋巴瘤应答标准的国际研讨会报告]nci赞助的国际工作组(ncisponsoredinternationalworkinggroup.)jclinoncol.[临床肿瘤学杂志]1999年4月；17(4):1244])、正电子发射断层扫描、白细胞计数、差异、荧光激活细胞分选法、骨髓抽吸、淋巴结活检/组织学、以及各种淋巴瘤特异性临床化学参数(例如，乳酸脱氢酶)和其他建立的标准方法。[0472]开发药物(诸如本发明的药物组合物)的另一主要挑战是药代动力学特性的可预测调节。为此，可以建立候选药物的药代动力学曲线，即影响特定药物治疗给定病状的能力的药代动力学参数的曲线。影响药物治疗某种疾病实体的能力的药物的药代动力学参数包括但不限于：半衰期、分布容量、肝脏首过代谢和血清结合程度。给定药剂的功效可以受到上文提及的每个参数的影响。本发明的抗体构建体的设想特征提供有它们包含的特定fc模式，例如药代动力学行为的差异。根据本发明的半衰期延长的靶向抗体构建体与所述抗体构建体的“规范的”非hle型式相比优选显示体内滞留时间令人惊讶地增加。“半衰期”意指50％的施用药物通过生物过程(例如代谢、排泄等)消除的时间。“肝脏首过代谢”意指药物在首次与肝脏接触时即在其首次通过肝脏期间代谢的倾向。“分布体积”意指药物在身体各个隔室(例如细胞内和细胞外空间、组织和器官等)中的滞留程度，以及药物在这些隔室内的分布。“血清结合程度”意指药物与血清蛋白(诸如白蛋白)相互作用并结合从而导致药物生物活性降低或丧失的倾向。[0473]药代动力学参数还包括对于施用的给定量药物的生物利用度、滞后时间(t滞后)、tmax、吸收速率、起效时间和/或cmax。“生物利用度”意指血液隔室中药物的量。“滞后时间”意指药物施用与其在血液或血浆中的检测和可测量性之间的时间延迟。“tmax”是药物达到最大血液浓度之后的时间，并且“cmax”是用给定药物获得的最大血液浓度。达到其生物效应所需的药物的血液或组织浓度的时间受到所有参数的影响。表现出跨物种特异性的抗体构建体的药代动力学参数(其可以在如上所概述的非黑猩猩灵长类动物的临床前动物测试中确定)也示于例如schlereth等人(cancerimmunol.immunother.[癌症免疫学免疫治疗]20(2005),1-12)的公开中。[0474]在优选方面中，药物组合物在约-20℃下稳定至少四周。从所附实例中清楚的是，可以使用不同的系统测试本发明的抗体构建体的质量与相应的现有抗体构建体的质量。这些测试被理解为与“ichharmonisedtripartiteguideline:stabilitytestingofbiotechnological/biologicalproductsq5candspecifications:testproceduresandacceptancecriteriaforbiotechbiotechnological/biologicalproductsq6b[ich三方协调指南：生物技术/生物产品q5c的稳定性测试和规格：生物技术/生物产品q6b的测试程序和验收标准]”一致，并且因此被选择来提供稳定性指示曲线，该曲线提供检测到产品身份、纯度和效力变化的确定性。人们普遍接受术语纯度是相对术语。由于糖基化、脱酰胺或其他异质性的效应，因此生物技术/生物产品的绝对纯度典型地应通过超过一种的方法进行评估，并且所导出的纯度值取决于方法。出于稳定性测试的目的，纯度测试应集中在确定降解产物的方法上。[0475]为了评估包含本发明的抗体构建体的药物组合物的质量，可以例如通过分析溶液中可溶性聚集物的含量(根据尺寸排阻的hmws)来分析。优选的是，在约-20℃下稳定至少四周的特征在于小于1.5％hmws、优选小于1％hmws的含量。[0476]本文所述的配制品可用作在有需要的患者中治疗、改善和/或预防如本文所述的病理医学病状的药物组合物。术语“治疗”是指治疗性治疗和预防性(prophylactic或preventative)措施两者。治疗包括将配制品应用或施用至来自具有疾病/障碍、疾病/障碍的症状或对疾病/障碍的倾向的患者的身体、分离的组织或细胞，目的是治疗、治愈、缓解、减轻、改变、补救、减轻、改善或影响疾病、疾病的症状或向疾病的倾向。[0477]如本文所用，术语“改善”是指通过将抗体构建体施用至有需要的受试者而对具有如下文所指定的疾病的患者的疾病状态的任何改善。这种改善也可以看作是患者疾病进展的减慢或停止。如本文所用，术语“预防”意指通过将抗体构建体施用至有需要的受试者来避免患有如下文所指定的肿瘤或癌症或转移性癌症的患者的发病或复发。[0478]术语“疾病”是指将受益于用本文所述的抗体构建体或药物组合物治疗的任何病状。这包括慢性和急性障碍或疾病，包括使哺乳动物易患所讨论的疾病的那些病理学病状。[0479]“赘生物”是组织的异常生长，通常但不总是形成肿块。当也形成肿块时，通常称之为“肿瘤”。赘生物或肿瘤或可以是良性的、潜在恶性(癌前)或恶性的。恶性肿瘤通常被称为癌症。它们通常侵入并破坏周围组织并可形成转移瘤，即它们扩散到身体的其他部位、组织或器官。因此，术语“转移性癌症”涵盖转移到原始肿瘤的组织或器官除外的其他组织或器官。淋巴瘤和白血病是淋巴样肿瘤。出于本发明的目的，它们也涵盖在术语“肿瘤”或“癌症”中。[0480]术语“有需要的受试者”或“需要治疗的那些”包括已经患有障碍的那些以及有待预防障碍的那些。有需要的受试者或“患者”包括接受预防性或治疗性治疗的人和其他哺乳动物受试者。[0481]本发明的抗体构建体通常将针对特定施用途径和方法、特定施用剂量和频率、特定疾病的特定治疗、生物利用度和持久性范围等来设计。组合物的材料优选以施用部位可接受的浓度配制。[0482]因此，可以根据本发明设计配制品和组合物用于通过任何合适的施用途径递送。施用途径包括但不限于：[0483]·局部途径(诸如表皮、吸入、鼻、眼、耳(auricular/aural)、阴道、黏膜)；[0484]·肠内途径(诸如口服、胃肠道、舌下、唇下部、经颊、直肠)；和[0485]·肠胃外途径(诸如静脉内、动脉内、骨内、肌内、脑内、脑室内、硬膜外、鞘内、皮下、腹膜内、羊膜外、关节内、心内、真皮内、病灶内、子宫内、膀胱内、玻璃体内、经皮、鼻内、经粘膜、滑膜内、管腔内)。[0486]药物组合物和抗体构建体可特别用于肠胃外施用，例如皮下或静脉内递送，例如通过注射诸如弹丸注射，或通过输注诸如连续输注。可以使用医疗装置施用药物组合物。用于施用药物组合物的医疗装置的实例描述于美国专利号4,475,196；4,439,196；4,447,224；4,447,233；4,486,194；4,487,603；4,596,556；4,790,824；4,941,880；5,064,413；5,312,335；5,312,335；5,383,851；和5,399,163中。[0487]如果药物组合物已经冻干，则冻干材料首先在施用之前在合适的液体中重构。可以将冻干物质在例如抑菌注射用水(bwfi)、生理盐水、磷酸盐缓冲盐水(pbs)或与冷冻干燥前蛋白质所处于的相同配制品中重构。[0488]组合物可以以合适的剂量施用至受试者，该剂量可以例如通过向非黑猩猩灵长类动物(例如猕猴)施用增加剂量的表现出本文所述的跨物种特异性的本发明的抗体构建体通过剂量递增研究来确定。如上所述，表现出本文所述的跨物种特异性的本发明的抗体构建体可以有利地以相同形式用于非黑猩猩灵长类动物的临床前测试并且作为药物用于人类中。剂量方案将由主治医师和临床因素确定。如在医学领域中熟知的，任何一个患者的剂量取决于许多因素，包括患者体型、体表面积、年龄、有待施用的具体化合物、性别、施用时间和途径、一般健康状况和同时施用的其他药物。[0489]术语“有效剂量(effectivedose或effectivedosage)”定义为足以实现或至少部分实现所需效应的量。术语“治疗有效剂量”定义为足以治愈或至少部分阻止已罹患疾病的患者的疾病及其并发症的量。对此用途有效的量或剂量将取决于有待治疗的病状(适应症)、递送的抗体构建体、治疗背景和目标、疾病的严重程度、先前疗法、患者的临床病史和对治疗剂的应答、施用途径、患者的体型(体重、体表或器官大小)和/或病状(年龄和一般健康状况)以及患者自体免疫系统的一般状态。可以根据主治医师的判断调整适当的剂量，使得其可以向患者一次施用或经一系列给药进行施用，并且目的是获得最佳治疗效果。取决于上述因素，典型的剂量范围可以为从约0.1μg/kg至高达约30mg/kg或更高。在具体的实施例中，剂量范围可以为从1.0μg/kg至约20mg/kg，任选地为从10μg/kg至高达约10mg/kg或从100μg/kg至高达约5mg/kg。抗体构建体的治疗有效量优选导致疾病症状严重程度降低、无疾病症状期的频率或持续时间增加或预防由于疾病折磨而产生的损害或残疾。对于治疗如上文所述的与muc17表达相关的疾病，相对于未经治疗的患者，治疗有效量的本发明的抗体构建体(此处：抗muc17/抗cd3抗体构建体)优选将细胞生长或肿瘤细胞生长抑制了至少约20％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、或至少约90％。可以在预测功效的动物模型中评价化合物抑制肿瘤生长的能力。[0490]药物组合物可以作为唯一的治疗剂施用，或者根据需要与其他疗法诸如抗癌疗法(例如其他蛋白质和非蛋白质药物)结合施用。这些药物可以与包含如本文定义的抗体构建体的组合物同时施用，或者在施用所述抗体构建体之前或之后以时间限定间隔和剂量分开施用。[0491]如本文所用，术语“有效且无毒的剂量”是指抗体构建体的可耐受剂量，该可耐受剂量足够高以引起病理性细胞耗尽、肿瘤消除、肿瘤缩小或疾病稳定，而没有或基本上没有主要毒性效应。这样的有效和无毒剂量可以例如通过本领域描述的剂量递增研究来确定，并且该有效和无毒剂量应低于诱导严重不良事件的剂量(剂量限制性毒性，dlt)。如本文所用，术语“毒性”是指在不良事件或严重不良事件中表现的药物的毒性作用。这些副作用可能是指施用后对药物缺乏全身性耐受性和/或缺乏局部耐受性。毒性可能还包括由药物引起的致畸或致癌作用。[0492]如本文所用，术语“安全性”、“体内安全性”或“耐受性”定义了药物的施用而在施用后未立即诱导严重不良事件(局部耐受性)以及在药物的较长施用时段期间未诱导严重不良事件。例如，可以在治疗和随访期期间以例如有规律的间隔评价“安全性”、“体内安全性”或“耐受性”。测量包括临床评估(例如器官表现)和实验室异常筛查。可以进行临床评估，并根据nci-ctc和/或meddra标准记录/编码与正常发现的偏差。器官表现可以包括诸如过敏/免疫学、血液/骨髓、心律失常、凝血等标准，如例如在不良事件的通用术语标准v3.0(ctcae)中所述。可以测试的实验室参数包括例如血液学、临床化学、凝血谱和尿液分析以及其他体液(诸如血清、血浆、淋巴或脊髓液、液体等)的检查。因此可以评估安全性，例如通过体检、成像技术(即超声、x射线、ct扫描、核磁共振成像(mri))、采用技术装置的其他措施(即心电图)、生命体征、通过测量实验室参数和记录不良事件。例如，可以通过组织病理学和/或组织化学方法检查非黑猩猩灵长类动物在根据本发明的用途和方法中的不良事件。[0493]上述术语也在以下中提及：例如preclinicalsafetyevaluationofbiotechnology-derivedpharmaceuticalss6[生物技术衍生药物的临床前安全性评价s6]；ichharmonisedtripartiteguideline[ich三方协调指南]；ichsteeringcommitteemeetingonjuly16,1997[1997年7月16日的ich指导委员会会议]。[0494]最后，本发明提供了一种诊断试剂盒，该诊断试剂盒包含本发明的或根据本发明的工艺产生的抗体。[0495]在本发明的上下文中，术语“试剂盒”意指两种或更多种组分(其中一种对应于本发明的抗体构建体)一起包装在容器、接受器或其他中。因此，试剂盒可以被描述为足以实现某一目标的一组产品和/或器具，其可以作为单一单元销售。[0496]试剂盒可以包括一个或多个具有任何适当形状、大小和材料(优选防水的，例如塑料或玻璃)的接受器(诸如小瓶、安瓿、容器、注射器、小瓶、袋)，该一个或多个接受器含有适于施用的剂量的本发明的抗体构建体或药物组合物(参见上文)。试剂盒可以另外含有使用说明(例如呈小册子或说明手册的形式)、用于施用本发明的抗体构建体的手段(诸如注射器、泵、输注器等)、用于重构本发明的抗体构建体的手段和/或用于稀释本发明的抗体构建体的手段。[0497]本发明还提供了用于单剂量施用单元的试剂盒。本发明的试剂盒还可以含有包含干燥/冻干的抗体构建体的第一接受器和包含水性配制品的第二接受器。在本发明的某些实施例中，提供了含有单室和多室预填充注射器(例如液体注射器和冻干注射器)的试剂盒。[0498]如本文所用，除非上下文另外明确指示，否则单数形式“一个”、“一种”和“该”也包括复数指示物。因此，例如，对“一种试剂”的提及包括此类不同试剂中的一种或多种，并且对“该方法”的提及包括提及本领域普通技术人员已知的可以修改或取代本文所述的方法的等效步骤和方法。[0499]除非另外指示，否则在一系列元素前面的术语“至少”应被理解为指该系列中的每一个元素。本领域技术人员仅使用常规实验便将认识到或能够确定本文所述的本发明的特定实施例的许多等效物。此类等效物旨在由本发明所涵盖。[0500]术语“和/或”在本文使用时包括“和”、“或”和“由这些术语连接的要素的全部或任何其他组合”的含义。[0501]如本文所用，术语“约”或“大约”意指在给定值或范围的±20％内、优选在±15％内、更优选在±10％内、并且最优选在±5％内。它还包括具体值，例如，“约50”包括值“50”。[0502]贯穿本说明书和权利要求书，除非上下文另有要求，否则词语“包含(comprise)”以及变型诸如“包含(comprises和comprising)”应当被理解成隐含包括所陈述的整体或步骤或者整体或步骤的组，但不排除任何其他整体或步骤或者整体或步骤的组。当在本文中使用时，术语“包含/包括”可以用术语“含有”或“包括”来取代，或者有时在本文中使用时用术语“具有”取代。[0503]当在本文中使用时，“由……组成”时，排除了在权利要求元素中未指定的任何元素、步骤或成分。当在本文中使用时，“基本上由……组成”并不排除不实质性地影响权利要求的基本和新颖特征的材料或步骤。[0504]在本文的每种情况下，术语“包含”、“基本上由……组成”和“由……组成”中的任一者都可以用另外两个术语中的任一者来替换。[0505]以上描述和以下实例提供了示例性的布置，但是本发明不限于本文描述的特定方法、技术、方案、材料、试剂、物质等，并且因此可以变化。本文所用的术语仅用于描述特定实施例，而不打算限制仅由权利要求限定的本发明的范围。在独立权利要求中提供了本发明的各个方面。在从属权利要求中提供了本发明的一些可选特性。[0506]本说明书全文中引用的所有出版物和专利(包括所有专利、专利申请、科学出版物、制造商的说明书、说明书等)，无论是上文还是下文，均通过援引以其全文并入本文。本文没有任何内容应解释为承认，由于先前发明，本发明无权先于这样的披露内容。通过引用并入的材料在一定程度上与本说明书发生冲突或不一致时，本说明书将替代任何这种材料。[0507]将从以下实例中获得对本发明及其优点的更好理解，这些实例仅用于说明目的。这些实例不旨在并且不应被解释为以任何方式限制本发明的范围。[0508]序列：[0509][0510][0511][0512][0513][0514][0515][0516][0517][0518][0519][0520][0521][0522][0523][0524][0525][0526][0527][0528][0529][0530][0531][0532][0533][0534][0535][0536][0537][0538][0539][0540][0541][0542][0543][0544][0545][0546][0547][0548][0549][0550][0551][0552][0553][0554][0555][0556][0557][0558][0559][0560][0561][0562][0563][0564][0565][0566][0567][0568][0569][0570][0571][0572][0573][0574][0575][0576]实例[0577]抗人muc17ihc试剂的生成-免疫化和杂交瘤生成[0578]生成了在免疫组织化学中选择性鉴定抗人muc17的杂交瘤。如此产生的抗体识别muc17的膜形式并且不识别其分泌形式。为此，将b6小鼠用载体(ptt5:vk1o2o12::humuc17(4131-4493)::e3k)或用瞬时表达humuc17的完整cho细胞(或293细胞)经由基因枪进行dna免疫。在瞬时表达humuc17的替代细胞上筛选产生的抗体。通过facs或cellinsight进行的表面和细胞内染色如下所述进行。[0579]将融合的杂交瘤以单克隆密度铺板，并且对瞬时表达humuc17的293细胞进行初步筛选(表面染色和固定透化测定)。通过阿尔玛蓝(alamarblue)测定鉴定阳性命中(制作子板并添加阿尔玛蓝以通过在od650下读数来鉴定具有活细胞的孔)。阿尔玛蓝测定运行两次，间隔5天，以验证没有将细胞转移到子板的小的缓慢生长菌落。通过elisa测定对humuc17分泌形式进行反筛选。重新排列阳性命中，在测定中再次确认，并使用facs染色测试与食蟹猴muc17膜形式的结合。[0580]进行常规facs染色以用抗体对细胞进行染色，这些抗体可以用于确定细胞是否在其表面上表达humuc17或食蟹猴muc17，以及抗体是否识别细胞表面上表达的特定蛋白质。以这种方式，鉴定了33个对细胞表面上的humuc17染色的杂交瘤，并且鉴定了相当数量的可以对固定透化细胞、大概是humuc17的细胞内部分染色的杂交瘤。所有表面染色命中也可以对固定表位进行染色。对这些命中全部进行没有亚克隆的大规模培养[0581]抗体序列都是通过对在ihc中选择的对humuc17具有良好特异性的抗体进行测序确定的。取消对在ihc中对内源组织具有更高程度的非特异性染色的杂交瘤衍生抗体的选择。[0582]根据本发明的抗体在ihc中对humuc17具有明显的选择性，并且对于检测肿瘤组织中的所述蛋白质有利地具有良好的特异性，而其他抗体对ihc应用的适用性较差。[0583]组织学-载玻片产生、染色和审查[0584]对于还收集了相邻的福尔马林固定石蜡包埋组织的每个人和食蟹猴组织，使用徕卡切片机从石蜡块上切下4微米的切片。将切片短暂置于温水浴中，并且然后置于显微镜载玻片上。按照表5中详述的方案，使用sakuratissue-tekprisma自动染色器和来自徕卡生物系统公司(leicabiosystems)的试剂(苏木精560、醇溶性伊红y515、define、和bluebuffer8)对载玻片进行苏木精和伊红染色。根据制造商推荐的程序，使用sakura自动封片机将盖玻片机械地应用于染色的载玻片。由委员会认证的兽医病理学家在光学显微镜下检查每个载玻片。忽略任何显示组织学上不正常的组织而不用于进一步处理。[0585]使用本发明的抗体的ihc结果在图1a至图1c中示出，证明了muc17在胃癌中高表达。免疫组织化学揭示了转移性胃癌组织切片中的多灶性、弥漫性muc17染色(棕色染色)(图1a和图1b)，而muc17表达仅限于正常肠上皮细胞中的顶膜中(图1c)。当前第1页12当前第1页12
技术特征：1.一种抗体，该抗体与如seq id no:1中描绘的人muc17结合，其中所述抗体结合细胞表面相关muc17蛋白。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含含有seq id no:4中描绘的cdr3区的可变重链。3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体进一步包含如seq id no:2和3中描绘的重链cdr1和cdr2区和/或seq id no:6、7和8中描绘的轻链cdr1、cdr2和/或cdr3区。4.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中该抗体包含如seq id no:5和/或9中包含的vh区和/或vl区。5.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中该抗体是单克隆抗体。6.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中该抗体与在免疫组织化学测定中体外使用时的人和食蟹猴muc17、荧光激活细胞分选测定中的表达muc17的细胞、以及表达muc17的固定且透化细胞特异性地结合，任选地其中该抗体不与分泌形式的humuc17结合。7.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，该抗体是igg、igd、ige、igm或iga抗体，优选地是igg抗体，诸如igg1、igg2、igg3或igg4抗体。8.一种多核苷酸，该多核苷酸编码根据前述权利要求中任一项所述的抗体。9.一种载体，该载体包含根据权利要求8所述的多核苷酸。10.一种宿主细胞，该宿主细胞经根据权利要求8所述的多核苷酸或根据权利要求9所述的载体转化或转染。11.一种用于产生根据权利要求1至7中任一项所述的抗体的工艺，所述工艺包括以下步骤：在允许表达所述抗体的条件下培养根据权利要求10所述的宿主细胞并且从培养物中回收所产生的抗体。12.一种杂交瘤，该杂交瘤产生根据前述权利要求中任一项所述的抗体。13.一种组合物，该组合物包含根据权利要求1至7中任一项所述的或根据权利要求11所述的工艺产生的抗体。14.一种检测系统，该检测系统包含根据权利要求1至7中任一项所述的或根据权利要求11所述的工艺产生的抗体或根据权利要求13所述的组合物。15.根据权利要求1-7中任一项所述的或根据权利要求11所述的工艺产生的抗体或根据权利要求14所述的检测系统在诊断方法中的用途。16.根据权利要求1-7中任一项所述的或根据权利要求11所述的工艺产生的抗体、根据权利要求13所述的组合物、或根据权利要求14所述的检测系统，该抗体、组合物、或检测系统用于在检测肿瘤性生长的方法中使用。17.用于根据权利要求16所述在检测肿瘤性生长的方法中使用的抗体或检测系统，该方法包括确定来自怀疑患有癌症的患者的样品和任选地阴性对照样品以及进一步任选地阳性对照样品中的muc17表达量。18.用于根据权利要求16和17中任一项所述在检测肿瘤性生长的方法中使用的抗体或检测系统，该方法包括确定来自怀疑患有癌症的患者的样品和阴性对照样品中的muc17表达量，进一步包括在这些样品之间比较muc17表达量，任选地其中该阴性对照和/或该阳性对照中的表达量可以衍生自在检测肿瘤性生长的方法中获得的至少一个阴性对照样品和/或至少一个阳性对照样品中的存储数据，该方法包括确定muc17表达量，进一步任选地，其
中该阴性对照样品和/或该阳性对照样品中的表达量可以衍生自包括在检测肿瘤性生长的方法中获得的多于一个阴性对照样品和/或多于一个阳性对照样品的平均表达量的存储数据，该方法包括确定muc17表达量。19.用于根据权利要求17和18中任一项所述在检测肿瘤性生长的方法中使用的抗体或检测系统，该方法包括确定样品中的muc17表达量，其中该样品是固体组织样品或液体组织样品。20.一种用于检测和/或定量样品中的muc17表达的方法，该方法包括以下步骤：(a)使用根据前述权利要求中任一项所述的或根据前述权利要求中任一项产生的抗体，或使用根据权利要求14所述的检测系统，用于确定样品中的muc17表达量；以及(b)将步骤(a)中确定的该muc17表达量与以下比较：(i)muc17表达量的预定义值，(ii)对照样品中确定的muc17表达量，或(iii)在先前时间点处从同一来源或受试者获得的样品中确定的muc17表达量。21.一种用于诊断与muc17表达量或增加的muc17表达量相关联的肿瘤性疾病的方法，该方法包括以下步骤：(a)使用根据前述权利要求所述的或根据前述权利要求产生的抗体或组合物，或使用根据权利要求14所述的检测系统，用于确定样品中的muc17表达量；以及(b)将步骤(a)中确定的该muc17表达量与以下比较：(i)指示这种疾病不存在的muc17表达量的预定义截止值，或(ii)代表这种肿瘤性疾病不存在的在阴性对照样品中确定的muc17表达量，其中与(i)的该预定义截止值或(ii)的在阴性对照样品中确定的该muc17表达量相比，步骤(a)中确定的muc17表达量更高指示存在与muc17表达或增加的muc17表达量相关联的疾病。22.一种用于监测与muc17表达或与增加的muc17表达量相关联的疾病的进展或用于监测对与muc17表达或与增加的muc17表达量相关联的疾病的治疗的应答的方法，该方法包括以下步骤：(a)使用根据前述权利要求中任一项所述的抗体，或使用根据权利要求14所述的检测系统，用于在第一个时间点处确定从被诊断患有这种疾病的受试者获得的样品中的muc17表达量；(b)使用根据前述权利要求中任一项所述的抗体，或使用根据权利要求14所述的检测系统，用于在第二个时间点处或在治疗之后确定从该受试者获得的样品中的muc17表达量；以及(c)将步骤(a)中确定的该muc17表达量与步骤(b)中确定的该muc17表达量比较；其中与步骤(b)中确定的该muc17表达量相比，步骤(a)中确定的muc17表达量更高指示该疾病正在进展，并且/或者其中与步骤(b)中确定的该muc17表达量相比，步骤(a)中确定的muc17表达量更低指示所述疾病正在进入缓解期或所述疾病对该治疗产生应答。23.用于根据权利要求15至19中任一项所述使用的用途或产物或根据权利要求20至22中任一项所述的方法，其中该样品是生物学样品，优选地是人生物学样品，诸如组织样品或包含培养细胞的样品。
24.用于根据权利要求15至19中任一项所述使用的用途或产物或根据权利要求20至23中任一项所述的方法，其中该样品获得自人受试者，优选地是怀疑患有或患有与muc17表达或增加的muc17表达量相关联的疾病的人受试者，或者已经接受与muc17表达或增加的muc17表达量相关联的疾病的治疗的受试者。25.用于根据权利要求15至19中任一项所述使用的用途或产物或根据权利要求20至24中任一项所述的方法，其中该疾病选自下组，该组包括：食管癌、胃癌、胃肠癌、胃食管癌包括胃食管结合部癌、和胰腺癌。26.一种治疗患有至少一种癌症的患者，优选地人患者的方法，该癌症选自下组，该组包括：食管癌、胃癌、胃肠癌、胃食管癌包括胃食管结合部癌、和/或胰腺癌，其中所述患者具有癌细胞，特别是结直肠癌、胃癌、胰腺癌、结肠腺癌、食管癌、胰腺腺癌、直肠腺癌和胃腺癌的细胞上增加的muc17表达。27.根据权利要求26所述的治疗方法，其中所述增加的表达在根据权利要求20至22中任一项所述的方法中确定，或者其中包括用于根据权利要求15至19、23和/或24中任一项所述使用的用途或产物。28.根据权利要求26和27所述的治疗方法，该治疗方法包括向所述患者施用药物，其中该药物选自下组，该组包括：小分子、肽类药物、抗体及其衍生物、毒素、放射疗法、和手术。29.根据权利要求26至28中任一项所述的治疗方法，其中该药物是包含至少两个结构域的抗体构建体，其中一个结构域与muc17选择性结合。30.根据权利要求26至29中任一项所述的治疗方法，其中该药物是包含至少两个结构域的抗体构建体，其中另一个结构域与cd3、人cd3、特别是人cd3ε链选择性结合。31.根据权利要求26至30中任一项所述的治疗方法，其中该药物是进一步包含第三结构域的抗体构建体，该第三结构域包含两个多肽单体，每个多肽单体包含铰链、ch2结构域和ch3结构域，其中所述两个多肽单体经由肽接头彼此融合。32.根据权利要求26至31中任一项所述的治疗方法，其中该药物是单链抗体构建体。33.根据权利要求26至32中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中所述第三结构域按氨基至羧基顺序包含：铰链-ch2-ch3-接头-铰链-ch2-ch3。34.根据权利要求26至33中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第三结构域的所述多肽单体中的每一个具有与选自下组的序列具有至少90％同一性的氨基酸序列，该组由以下组成：seq id no:22-29。35.根据权利要求26至34中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中所述多肽单体中的每一个具有选自seq id no:22-29的氨基酸序列。36.根据权利要求26至35中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该ch2结构域包含结构域内半胱氨酸二硫桥。37.根据权利要求26至36中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中(i)该第一结构域包含两个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含两个抗体可变结构域；(ii)该第一结构域包含一个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含两个抗体可变结构域；
(iii)该第一结构域包含两个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含一个抗体可变结构域；或者(iv)该第一结构域包含一个抗体可变结构域，并且该第二结构域包含一个抗体可变结构域。38.根据权利要求26至37中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第一结构域和该第二结构域经由肽接头与该第三结构域融合。39.根据权利要求26至38中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体按氨基至羧基顺序包含：(a)该第一结构域；(b)肽接头，该肽接头优选地具有选自由seq id no:10-12组成的组的氨基酸序列；(c)该第二结构域。40.根据权利要求26至39中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体按氨基至羧基顺序进一步包含：(d)肽接头，该肽接头具有选自由seq id no:10、11、12、17、18、19和20组成的组的氨基酸序列；(e)该第三结构域的第一多肽单体；(f)肽接头，该肽接头具有选自由seq id no:13、14、15和16组成的组的氨基酸序列；和(g)该第三结构域的第二多肽单体。41.根据权利要求26至40中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seq id no.526(根据uniprot q685j3编号的aa 4171至4296)的表位结合。42.根据权利要求26至41中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seq id no.527(根据uniprot q685j3编号的aa 4184至4291)的表位结合。43.根据权利要求26至42中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seq id no.528(根据uniprot q685j3编号的aa 4131至4243)的表位结合。44.根据权利要求26至43中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seq id no.529(根据uniprot q685j3编号的aa 4244至4389)的表位结合。45.根据权利要求26至44中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seq id no.528(根据uniprot q685j3编号的aa 4131至4243)的表位结合，但不与muc17内对应于seq id no.529(根据uniprot q685j3编号的aa 4244至4389)的表位结合。46.根据权利要求26至45中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该抗体构建体的第一结构域与muc17内对应于seq id no.530(根据uniprot q685j3编号的aa 4171至4390)或seq id no.531(根据uniprot q685j3编号的aa 4184至4390)的表位结合，但不与muc17内对应于seq id no.532(根据uniprot q685j3编号的aa 4291至4390)的表位或muc17内对应于seq id no.533(根据uniprot q685j3编号的aa 4341至4390)的表位结
合。47.根据权利要求26至46中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中细胞毒性与结合亲和力之间的比率(ec
50
/k
d
)*1000低于250，其中该细胞毒性在将nugc-4细胞作为靶细胞并且将hupbmc作为效应细胞中进行确定，并且其中该结合亲和力通过基于表面等离子体共振的测定来确定。48.根据权利要求26至47中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中细胞毒性与结合亲和力之间的比率(ec
50
/k
d
)*1000低于125，其中该细胞毒性在将nugc-4细胞作为靶细胞并且将hupbmc作为效应细胞中进行确定，并且其中该结合亲和力通过基于表面等离子体共振的测定来确定。49.根据权利要求26至48中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中细胞毒性与结合亲和力之间的比率(ec
50
/k
d
)*1000低于21，其中该细胞毒性在将nugc-4细胞作为靶细胞并且将hupbmc作为效应细胞中进行确定，并且其中该结合亲和力通过基于表面等离子体共振的测定来确定。50.根据权利要求26至49中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第一结合结构域包含含有选自以下的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3的vh区：(a)如seq id no.31中描绘的cdr-h1、如seq id no.32中描绘的cdr-h2、和如seq id no.33中描绘的cdr-h3；(b)如seq id no.42中描绘的cdr-h1、如seq id no.43中描绘的cdr-h2、和如seq id no.44中描绘的cdr-h3；(c)如seq id no.53中描绘的cdr-h1、如seq id no.54中描绘的cdr-h2、和如seq id no.55中描绘的cdr-h3；(d)如seq id no.64中描绘的cdr-h1、如seq id no.65中描绘的cdr-h2、和如seq id no.66中描绘的cdr-h3；(e)如seq id no.75中描绘的cdr-h1、如seq id no.76中描绘的cdr-h2、和如seq id no.77中描绘的cdr-h3；(f)如seq id no.86中描绘的cdr-h1、如seq id no.87中描绘的cdr-h2、和如seq id no.88中描绘的cdr-h3；(g)如seq id no.97中描绘的cdr-h1、如seq id no.98中描绘的cdr-h2、和如seq id no.99中描绘的cdr-h3；(h)如seq id no.108中描绘的cdr-h1、如seq id no.109中描绘的cdr-h2、和如seq id no.110中描绘的cdr-h3；(i)如seq id no.119中描绘的cdr-h1、如seq id no.120中描绘的cdr-h2、和如seq id no.121中描绘的cdr-h3；(j)如seq id no.130中描绘的cdr-h1、如seq id no.131中描绘的cdr-h2、和如seq id no.132中描绘的cdr-h3；(k)如seq id no.141中描绘的cdr-h1、如seq id no.142中描绘的cdr-h2、和如seq id no.143中描绘的cdr-h3；(l)如seq id no.152中描绘的cdr-h1、如seq id no.153中描绘的cdr-h2、和如seq id no.154中描绘的cdr-h3；
id no.374中描绘的cdr-h3；(ag)如seq id no.383中描绘的cdr-h1、如seq id no.384中描绘的cdr-h2、和如seq id no.385中描绘的cdr-h3；(ah)如seq id no.394中描绘的cdr-h1、如seq id no.395中描绘的cdr-h2、和如seq id no.396中描绘的cdr-h3；(ai)如seq id no.405中描绘的cdr-h1、如seq id no.406中描绘的cdr-h2、和如seq id no.407中描绘的cdr-h3；(aj)如seq id no.416中描绘的cdr-h1、如seq id no.417中描绘的cdr-h2、和如seq id no.418中描绘的cdr-h3；(ak)如seq id no.427中描绘的cdr-h1、如seq id no.428中描绘的cdr-h2、和如seq id no.429中描绘的cdr-h3；(al)如seq id no.438中描绘的cdr-h1、如seq id no.439中描绘的cdr-h2、和如seq id no.440中描绘的cdr-h3；(am)如seq id no.449中描绘的cdr-h1、如seq id no.450中描绘的cdr-h2、和如seq id no.451中描绘的cdr-h3；(an)如seq id no.460中描绘的cdr-h1、如seq id no.461中描绘的cdr-h2、和如seq id no.462中描绘的cdr-h3；(ao)如seq id no.471中描绘的cdr-h1、如seq id no.472中描绘的cdr-h2、和如seq id no.473中描绘的cdr-h3；(ap)如seq id no.482中描绘的cdr-h1、如seq id no.483中描绘的cdr-h2、和如seq id no.484中描绘的cdr-h3；(aq)如seq id no.493中描绘的cdr-h1、如seq id no.494中描绘的cdr-h2、和如seq id no.495中描绘的cdr-h3；(ar)如seq id no.504中描绘的cdr-h1、如seq id no.505中描绘的cdr-h2、和如seq id no.506中描绘的cdr-h3；以及(as)如seq id no.515中描绘的cdr-h1、如seq id no.516中描绘的cdr-h2、和如seq id no.517中描绘的cdr-h3；其中优选的是(c)如seq id no.53中描绘的cdr-h1、如seq id no.54中描绘的cdr-h2、和如seq id no.55中描绘的cdr-h3；(n)如seq id no.174中描绘的cdr-h1、如seq id no.175中描绘的cdr-h2、和如seq id no.176中描绘的cdr-h3；(ac)如seq id no.339中描绘的cdr-h1、如seq id no.340中描绘的cdr-h2、和如seq id no.341中描绘的cdr-h3；以及(aj)如seq id no.416中描绘的cdr-h1、如seq id no.417中描绘的cdr-h2、和如seq id no.418中描绘的cdr-h3。51.根据权利要求26至50中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第一结合结构域包含含有选自以下的cdr-h1、cdr-l2和cdr-l3的vl区：(a)如seq id no.34中描绘的cdr-l1、如seq id no.35中描绘的cdr-l2、和如seq id no.36中描绘的cdr-l3；
no.256中描绘的cdr-l3；(v)如seq id no.265中描绘的cdr-l1、如seq id no.266中描绘的cdr-l2、和如seq id no.267中描绘的cdr-l3；(w)如seq id no.276中描绘的cdr-l1、如seq id no.277中描绘的cdr-l2、和如seq id no.278中描绘的cdr-l3；(x)如seq id no.287中描绘的cdr-l1、如seq id no.288中描绘的cdr-l2、和如seq id no.289中描绘的cdr-l3；(y)如seq id no.298中描绘的cdr-l1、如seq id no.299中描绘的cdr-l2、和如seq id no.300中描绘的cdr-l3；(z)如seq id no.309中描绘的cdr-l1、如seq id no.310中描绘的cdr-l2、和如seq id no.311中描绘的cdr-l3；(aa)如seq id no.320中描绘的cdr-l1、如seq id no.321中描绘的cdr-l2、和如seq id no.322中描绘的cdr-l3；(ab)如seq id no.331中描绘的cdr-l1、如seq id no.332中描绘的cdr-l2、和如seq id no.333中描绘的cdr-l3；(ac)如seq id no.342中描绘的cdr-l1、如seq id no.343中描绘的cdr-l2、和如seq id no.344中描绘的cdr-l3；(ad)如seq id no.353中描绘的cdr-l1、如seq id no.354中描绘的cdr-l2、和如seq id no.355中描绘的cdr-l3；(ae)如seq id no.364中描绘的cdr-l1、如seq id no.365中描绘的cdr-l2、和如seq id no.366中描绘的cdr-l3；(af)如seq id no.375中描绘的cdr-l1、如seq id no.376中描绘的cdr-l2、和如seq id no.377中描绘的cdr-l3；(ag)如seq id no.386中描绘的cdr-l1、如seq id no.387中描绘的cdr-l2、和如seq id no.388中描绘的cdr-l3；(ah)如seq id no.397中描绘的cdr-l1、如seq id no.398中描绘的cdr-l2、和如seq id no.399中描绘的cdr-l3；(ai)如seq id no.408中描绘的cdr-l1、如seq id no.409中描绘的cdr-l2、和如seq id no.410中描绘的cdr-l3；(aj)如seq id no.419中描绘的cdr-l1、如seq id no.420中描绘的cdr-l2、和如seq id no.421中描绘的cdr-l3；(ak)如seq id no.430中描绘的cdr-l1、如seq id no.431中描绘的cdr-l2、和如seq id no.432中描绘的cdr-l3；(al)如seq id no.441中描绘的cdr-l1、如seq id no.442中描绘的cdr-l2、和如seq id no.443中描绘的cdr-l3；(am)如seq id no.452中描绘的cdr-l1、如seq id no.453中描绘的cdr-l2、和如seq id no.454中描绘的cdr-l3；(an)如seq id no.463中描绘的cdr-l1、如seq id no.464中描绘的cdr-l2、和如seq id no.465中描绘的cdr-l3；
(ao)如seq id no.474中描绘的cdr-l1、如seq id no.475中描绘的cdr-l2、和如seq id no.476中描绘的cdr-l3；(ap)如seq id no.485中描绘的cdr-l1、如seq id no.486中描绘的cdr-l2、和如seq id no.487中描绘的cdr-l3；(aq)如seq id no.496中描绘的cdr-l1、如seq id no.497中描绘的cdr-l2、和如seq id no.498中描绘的cdr-l3；(ar)如seq id no.507中描绘的cdr-l1、如seq id no.508中描绘的cdr-l2、和如seq id no.509中描绘的cdr-l3；以及(as)如seq id no.518中描绘的cdr-l1、如seq id no.519中描绘的cdr-l2、和如seq id no.520中描绘的cdr-l3；其中优选的是(c)如seq id no.56中描绘的cdr-l1、如seq id no.57中描绘的cdr-l2、和如seq id no.58中描绘的cdr-l3；(n)如seq id no.177中描绘的cdr-l1、如seq id no.178中描绘的cdr-l2、和如seq id no.179中描绘的cdr-l3；(ac)如seq id no.342中描绘的cdr-l1、如seq id no.343中描绘的cdr-l2、和如seq id no.344中描绘的cdr-l3；以及(aj)如seq id no.419中描绘的cdr-l1、如seq id no.420中描绘的cdr-l2、和如seq id no.421中描绘的cdr-l3。52.根据权利要求26至51中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，其中该第一结合结构域包含选自下组的vl区和vh区，该组由以下组成：(a)如seq id no.38中描绘的vl区和如seq id no.37中描绘的vh区；(b)如seq id no.49中描绘的vl区和如seq id no.48中描绘的vh区；(c)如seq id no.60中描绘的vl区和如seq id no.59中描绘的vh区；(d)如seq id no.71中描绘的vl区和如seq id no.70中描绘的vh区；(e)如seq id no.82中描绘的vl区和如seq id no.81中描绘的vh区；(f)如seq id no.93中描绘的vl区和如seq id no.92中描绘的vh区；(g)如seq id no.104中描绘的vl区和如seq id no.103中描绘的vh区；(h)如seq id no.115中描绘的vl区和如seq id no.114中描绘的vh区；(i)如seq id no.126中描绘的vl区和如seq id no.125中描绘的vh区；(j)如seq id no.137中描绘的vl区和如seq id no.136中描绘的vh区；(k)如seq id no.148中描绘的vl区和如seq id no.147中描绘的vh区；(l)如seq id no.159中描绘的vl区和如seq id no.158中描绘的vh区；(m)如seq id no.170中描绘的vl区和如seq id no.169中描绘的vh区；(n)如seq id no.181中描绘的vl区和如seq id no.180中描绘的vh区；(o)如seq id no.192中描绘的vl区和如seq id no.191中描绘的vh区；(p)如seq id no.203中描绘的vl区和如seq id no.202中描绘的vh区；(q)如seq id no.214中描绘的vl区和如seq id no.213中描绘的vh区；(r)如seq id no.226中描绘的vl区和如seq id no.225中描绘的vh区；(s)如seq id no.236中描绘的vl区和如seq id no.235中描绘的vh区；
2008/119567的seq id no:23、25、41、43、59、61、77、79、95、97、113、115、131、133、149、151、167、169、185或187，或如seq id no:13中描绘的氨基酸序列。55.根据权利要求26至54中任一项所述的治疗方法，其中该药物是根据权利要求25所述的抗体构建体，其中该抗体构建体按氨基至羧基顺序进一步包含：(d)肽接头，该肽接头具有选自由seq id no:10、11、12、17、18、19和20组成的组的氨基酸序列；(e)该第三结构域的第一多肽单体，该第一多肽单体具有选自由seq id no:22-29组成的组的多肽序列；(f)肽接头，该肽接头具有选自由seq id no:13、14、15和16组成的组的氨基酸序列；和(g)该第三结构域的第二多肽单体，该第二多肽单体具有选自由seq id no:22-29组成的组的多肽序列。56.根据权利要求26至55中任一项所述的治疗方法，其中该药物是抗体构建体，该抗体构建体具有选自下组的氨基酸序列，该组由以下组成：seq id no:40、41、51、52、62、63、73、74、84、85、95、96、106、107、117、118、128、129、139、140、150、151、161、162、172、173、183、184、194、195、205、206、216、217、227、228、238、239、249、250、260、261、271、272、282、283、293、294、304、305、315、316、326、327、337、338、348、349、359、360、370、371、381、382、392、393、403、404、414、415、424、426、436、437、447、448、458、459、469、470、480、481、491、492、502、503、513、514、524和525，或者具有与所述序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸。57.一种诊断试剂盒，该诊断试剂盒包含根据权利要求1-7、13、14、17、18和19中任一项所述的抗体或组合物和/或检测系统。
技术总结本发明涉及与人和猴粘蛋白17(MUC17)结合的抗体。此外，本发明涉及包含此类抗体的检测系统。这些抗体或检测系统可以用于检测或定量MUC17，用于诊断与MUC17相关联的疾病，用于患者分层、监测疾病进展以及评价治疗应答。监测疾病进展以及评价治疗应答。
技术研发人员：K
受保护的技术使用者：安进公司
技术研发日：2021.03.19
技术公布日：2022/12/1
