本发明涉及兽药领域，尤其涉及一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备及使用方法。
背景技术：
牛至俗称止痢草、马郁兰、牛膝草，土香薷等，为唇形科牛至属多年生草本植物，主要生长于欧洲、非洲北部和亚洲等地区。在我国，牛至主要分布在四川、云南、甘肃、湖北、江西、安徽、贵州等地，生于海拔500～3600m的山坡、路旁、灌丛、草地、林下。
西方医学之父希波克拉底发现，牛至具有杀菌抗菌、缓解肠胃不适及呼吸问题等功效。在中世纪，牛至被用作抗菌剂和食品保鲜剂。17世纪牛至油被用于治疗伤风感冒。近代，牛至草被广泛应用于美食烹饪。
牛至味辛、性凉、无毒，全草可提取芳香油，也可用作香薷入药，还能作为蜜源植物使用，具有清热解表、理气化湿、利尿消肿之功效。
牛至油是从牛至草中提取的具有特殊芳香气味的挥发性油，质地透明，颜色呈淡黄色，是一种混合物。现代药理学研究表明，牛至油具有抑菌抗病毒、抗氧化、增强机体免疫力、助消化等功效。牛至油作为一种新型的天然植物抗生素，与传统抗生素相比，具有来源广泛、效果显著、不易产生耐药性、无残留等特点。牛至油是农业部(农牧发[200l]20号)批准使用的为数不多的不需要停药期的一种药物添加剂。高品质的天然牛至精油无论在国内还是在国外均会有广阔的市场前景。
但是目前国内尚没有关于牛至油产品的标准。国外牛至油产品多为纯天然提取，活性成分种类多，含量高，产品质量可靠，即可用作预防，也可用作治疗。而国内牛至精油产品大都为化工合成，活性成分单一，实际应用效果不明确。
仔猪腹泻是一种典型的多因素性疾病。引起仔猪腹泻的病原种类繁多，病性复杂。长期以来仔猪腹泻是引起仔猪生长受阻和仔猪高死亡率的重要原因。仔猪腹泻会导致饲料报酬率低，生长发育缓慢或停滞(僵猪)，仔猪成活率下降，甚至死亡。仔猪腹泻每年给养猪业带来的直接经济损失上亿元。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备及使用方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，包括以下步骤，
步骤一，称取以下重量份数的原料，牛至50-100份、黄连30-70份、艾叶30-70份、苦参20-70份、香薷100-300份，分别进行清洗，烘干，粉碎至300目，混合得到混合中药粉；
步骤二，将混合中药粉投入8-12倍量的水中浸泡，浸泡15-45min，期间以40-80hz频率的超声波进行处理，然后进行两次蒸馏，每次蒸馏2h，收集两次的蒸馏液，冷却至室温后过滤，加入1-2%重量比的吐温80，静置得到澄清蒸馏液，通过超声波的振动处理，能够使药液成分分散更均匀；
步骤三，将经过两次蒸馏后的煎煮液过滤，然后浓缩至相对密度为1.2-1.25后加入1.5倍体积的乙醇，静置24h，取上层清液，得到醇溶物；
步骤四，将澄清蒸馏液和醇溶物混合后调节ph，至ph为4.1-5.5，再加入山梨甲酸，于100℃条件下灭菌20min，灌装，得到治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液成品，冷藏备用。
进一步地，牛至的原材料取材于大别山或伏牛山的野生牛至驯化种。
进一步地，步骤一中，称取以下重量份数的原料，牛至80份、黄连50份、艾叶50份、苦参40份、香薷200份。
进一步地，步骤二中，两次蒸馏的温度均为80-100℃，两次蒸馏之间间隔15-45min，通过两次蒸馏，能够得到牛至、艾叶、香薷中的主要有效成分挥发油，在生产的过程中，将蒸馏温度设置在95℃。
进一步地，步骤三中，采用5um滤膜进行过滤。
进一步地，步骤四中，通过磷酸钠缓冲液调节ph。
进一步地，一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的使用方法，用于治疗仔猪腹泻，步骤如下：
口服给药，给腹泻仔猪口服治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液，2-4ml/头，每天给药一次。
本发明的有益效果在于：
黄连：具有清热燥湿，泻火解毒功效；
艾叶：温经止血，散寒止痛，祛湿止痒；
苦参：清热燥湿，杀虫，利尿；
香薷：发汗解表，化湿和中，利水消肿；
山梨酸钾：一种防腐剂，可以延长保质期；
吐温80：用作助溶剂。
1．中药制剂，无毒副作用，使用安全可靠，不会产生药物残留和社会公害。
2．提取了纯天然牛至精油，这在国内尚属首次。牛至精油在药理上具有抑菌抗病毒、抗氧化、增强机体免疫力、助消化的作用。牛至、黄连、艾叶、苦参和香薷五味药物协同作用，极大的提高了口服液的抑菌抗病毒作用。
3．主治仔猪的传染性腹泻和非传染性腹泻，能够加强仔猪免疫力，促进仔猪消化，提高仔猪成活率和饲料报酬，增加养殖效益。
4．本发明的整个制备过程中，所产生的废弃物不会污染环境，易于处理。
5．本发明采用中药提取的生产工艺进行生产，最大限度的提取出了中药的有效成分，并很好的去除了中药提取液中的杂质。
具体实施方式
以下通过具体实施例说明本发明的内容。
其中，牛至的原材料取材于大别山或伏牛山的野生牛至驯化种，具体为南阳市宛旗中药材种植专业合作社提供的野生牛至驯化种。
步骤二中，两次蒸馏的温度均为80-100℃，两次蒸馏之间间隔15-45min。
步骤二和步骤三中，采用5um滤膜进行过滤。
步骤四中，通过磷酸钠缓冲液调节ph。
实施例1
一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，包括以下步骤，
步骤一，称取以下重量的原料，牛至80kg、黄连50kg、艾叶50kg、苦参40kg、香薷200kg，分别进行清洗，烘干，粉碎至300目，混合得到混合中药粉；
步骤二，将混合中药粉投入8-12倍量的水中浸泡，浸泡15-45min，期间以40-80hz频率的超声波进行处理，然后进行两次蒸馏，每次蒸馏2h，收集两次的蒸馏液，冷却至室温后过滤，加入1-2%重量比的吐温80，静置得到澄清蒸馏液；
步骤三，将经过两次蒸馏后的煎煮液过滤，然后浓缩至相对密度为1.2-1.25后加入1.5倍体积的乙醇，静置24h，取上层清液，得到醇溶物；
步骤四，将澄清蒸馏液和醇溶物混合后调节ph，至ph为4.1-5.5，再加入山梨甲酸，于100℃条件下灭菌20min，灌装，得到治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液成品，冷藏备用。
实施例2
一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，包括以下步骤，
步骤一，称取以下重量的原料，牛至100kg、黄连60kg、艾叶60kg、苦参50kg、香薷250kg，分别进行清洗，烘干，粉碎至300目，混合得到混合中药粉；
步骤二，将混合中药粉投入8-12倍量的水中浸泡，浸泡15-45min，期间以40-80hz频率的超声波进行处理，然后进行两次蒸馏，每次蒸馏2h，收集两次的蒸馏液，冷却至室温后过滤，加入1-2%重量比的吐温80，静置得到澄清蒸馏液；
步骤三，将经过两次蒸馏后的煎煮液过滤，然后浓缩至相对密度为1.2-1.25后加入1.5倍体积的乙醇，静置24h，取上层清液，得到醇溶物；
步骤四，将澄清蒸馏液和醇溶物混合后调节ph，至ph为4.1-5.5，再加入山梨甲酸，于100℃条件下灭菌20min，灌装，得到治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液成品，冷藏备用。
实施例3
一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，包括以下步骤，
步骤一，称取以下重量的原料，牛至60kg、黄连60kg、艾叶60kg、苦参30kg、香薷180kg，分别进行清洗，烘干，粉碎至300目，混合得到混合中药粉；
步骤二，将混合中药粉投入8-12倍量的水中浸泡，浸泡15-45min，期间以40-80hz频率的超声波进行处理，然后进行两次蒸馏，每次蒸馏2h，收集两次的蒸馏液，冷却至室温后过滤，加入1-2%重量比的吐温80，静置得到澄清蒸馏液；
步骤三，将经过两次蒸馏后的煎煮液过滤，然后浓缩至相对密度为1.2-1.25后加入1.5倍体积的乙醇，静置24h，取上层清液，得到醇溶物；
步骤四，将澄清蒸馏液和醇溶物混合后调节ph，至ph为4.1-5.5，再加入山梨甲酸，于100℃条件下灭菌20min，灌装，得到治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液成品，冷藏备用。
实施例4
一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，包括以下步骤，
步骤一，称取以下重量的原料，牛至120kg、黄连90kg、艾叶90kg、苦参70kg、香薷270kg，分别进行清洗，烘干，粉碎至300目，混合得到混合中药粉；
步骤二，将混合中药粉投入8-12倍量的水中浸泡，浸泡15-45min，期间以40-80hz频率的超声波进行处理，然后进行两次蒸馏，每次蒸馏2h，收集两次的蒸馏液，冷却至室温后过滤，加入1-2%重量比的吐温80，静置得到澄清蒸馏液；
步骤三，将经过两次蒸馏后的煎煮液过滤，然后浓缩至相对密度为1.2-1.25后加入1.5倍体积的乙醇，静置24h，取上层清液，得到醇溶物；
步骤四，将澄清蒸馏液和醇溶物混合后调节ph，至ph为4.1-5.5，再加入山梨甲酸，于100℃条件下灭菌20min，灌装，得到治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液成品，冷藏备用。
一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的使用方法，用于治疗仔猪腹泻，将实施例1-4得到的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液对腹泻仔猪口服给药，给药量为2-4ml/头，每天给药一次。
为验证效果，设计实验如下，
患病仔猪症见：精神萎顿，排黄色浆状，黄白色水样状，灰白色浆、状糊状，腥臭粪便，肛门松弛，排粪失禁，沾污尾、会阴和后腿部，肛门和阴门呈红色。
挑选腹泻仔猪100头，日龄在28龄左右，体重接近。将腹泻仔猪平均分成a、b、c、d四组。a组为空白组，饲喂蒸馏水。b组饲喂实施例1得到的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液，c组饲喂实施例2得到的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液，d组为恩诺沙星组，按恩诺沙星使用标准饲喂仔猪。饲喂10天后，统计仔猪的体重和粪便计分，体重变化见附表1，粪便计分标准见附表2，粪便计分表见附表3。
附表1
附表1中，同列肩标小写字母相同者差异不显著（p>0.05）；同列肩标小写字母不同者，差异显著（p<0.05）；同列肩标大写字母不同者，差异极其显著（p<0.01）。
四组仔猪试验初体重无明显差异（p>0.05），表明试验的分组正确。腹泻仔猪喂药十天后，b、c、d三组的平均体重和平均增重均高于a组，且差异性极其显著（p<0.01）。其中b组仔猪的平均体重和平均增重均高于c、d两组，且差异性显著（p<0.05）。
附表2
附表3
附表3中，腹泻仔猪喂药后，喂药的b、c、d三组粪便计分均低于a组，且b组粪便计分与a组相比差异极显著（p<0.01）。b组粪便计分均低于c、d组。
同列肩标小写字母相同者差异不显著（p>0.05）；同列肩标小写字母不同者，差异显著（p<0.05）；同列肩标大写字母不同者，差异极其显著（p<0.01）。
本申请得到的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液治疗原理包括以下两点：天然牛至精油具有抗菌能力，且不易产生耐药性。考虑到植物精油含有大量不同结构的化学成分，因此其抗菌性不能归因于一种机制，而是对细胞有几个不同的靶向位点。（1）植物精油抑菌的一个重要机制是利用其疏水性，使细菌细胞壁和线粒体上的脂类分开，干扰其结构，使其渗透性增大。（2）牛至油中的主要成分酚类物质可通过使细胞膜中的蛋白质变性而改变细胞膜的通透性，或与细胞膜中的磷脂反应，破坏了蛋白质的合成，使微生物细胞的生长受到抑制。（3）牛至油中的中主要成分萜类物质也能影响细菌中的dna自我复制过程，从而抑制细菌的繁殖和生长过程，进而抑制菌体生长。
由于牛至精油是一种挥发油，因此在实际生产中的步骤二中，两次蒸馏，提取馏出液，事实上就是对牛至中牛至精油的一个提取过程。这个过程可以有效的提高牛至油的出油率。
第二：中医辩证，泄泻多为湿证，根据泄泻脾虚湿盛，脾失健运的病机特点，治疗应以运脾祛湿为原则。兼夹表邪、暑邪、食滞者，又应分别佐以疏表、清暑、消导之剂。本方剂中，黄连、艾叶、苦参三味药材均有燥湿的功效，区别在于黄连和苦参在燥湿的同时，可以泻火解毒，有应对湿热，暑邪的功效；艾叶在燥湿的同时，可温经止血，对治疗寒湿下注效果显著，亦可消导泄泻兼夹的食滞；香薷可以化湿和中，其发汗解表的功能可以很好的应对泄泻兼夹的表症。香薷和苦参还有利尿的功效，使湿从水路出。诸药协同，可有效治疗泄泻。
在药用过程中，艾叶和香薷有效成分多取其挥发油，可以通过步骤二蒸馏，取其馏出液。黄连和苦参有效成分则多在煎煮液中，可以通过步骤二提取和步骤三去杂质。挥发油和煎煮液的分别提取可以提高产率，又可以根据有效成分性质不同，最大程度的保留每种药材的有效成分。
同时，诸药的配伍也可以提高药效。
若仔猪和母猪同时腹泻，可同时服用。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
1.一种治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，
步骤一，称取以下重量份数的原料，牛至50-100份、黄连30-70份、艾叶30-70份、苦参20-70份、香薷100-300份，分别进行清洗，烘干，粉碎至300目，混合得到混合中药粉；
步骤二，将混合中药粉投入8-12倍量的水中浸泡，浸泡15-45min，期间以40-80hz频率的超声波进行处理，然后进行两次蒸馏，每次蒸馏2h，收集两次的蒸馏液，冷却至室温后过滤，加入1-2%重量比的吐温80，静置得到澄清蒸馏液；
步骤三，将经过两次蒸馏后的煎煮液过滤，然后浓缩至相对密度为1.2-1.25后加入1.5倍体积的乙醇，静置24h，取上层清液，得到醇溶物；
步骤四，将澄清蒸馏液和醇溶物混合后调节ph，至ph为4.1-5.5，再加入山梨甲酸，于100℃条件下灭菌20min，灌装，得到治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液成品，冷藏备用。
2.根据权利要求1所述的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，其特征在于，牛至的原材料取材于大别山或伏牛山的野生牛至驯化种。
3.根据权利要求1所述的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，其特征在于，步骤一中，称取以下重量份数的原料，牛至80份、黄连50份、艾叶50份、苦参40份、香薷200份。
4.根据权利要求1所述的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，其特征在于，步骤二中，两次蒸馏的温度均为80-100℃，两次蒸馏之间间隔15-45min。
5.根据权利要求1所述的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，其特征在于，步骤三中，采用5um滤膜进行过滤。
6.根据权利要求1所述的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的制备方法，其特征在于，步骤四中，通过磷酸钠缓冲液调节ph。
7.一种权利要求1得到的治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液的使用方法，其特征在于，用于治疗仔猪腹泻，步骤如下：
口服给药，给腹泻仔猪口服治疗仔猪腹泻的复方牛至口服液，2-4ml/头，每天给药一次。
技术总结