本发明涉及透明质酸及其衍生物技术领域，特别涉及注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，还涉及注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶的制备方法。
背景技术：
生物可吸收材料用于面部软组织填充的历史可以追溯到1980年早期，当时引入了牛胶原蛋白来治疗细纹，皱纹和体积缺陷。自此以后，各种非永久性的，可吸收的真皮填充剂和面部假体陆续在世界范围内得到批准和使用(透明质酸，胶原蛋白和猪小肠粘膜下层)。还开发了半永久性和永久性的皮肤填充剂。半永久材料包括羟磷灰石(radiesse)和聚l-乳酸(sculptra)。不可吸收的材料(例如pmma微球(bellafill)和ptfe面部埋线)也已用于纠正面部缺陷。
目前，真皮填充剂或用于软组织填充的产品主要由透明质酸(ha)组成。欧洲市场有110多种透明质酸填充剂(miinews)。这些ha填充剂都是交联的，主要通过浓度和ha的粒径进行区分。但是，目前的这些ha产品都不含有可以延长产品临床持久度的补充成分。本发明描述了一种透明质酸组合物的制备和应用，该透明质酸组合物包含由聚-1-乳酸，聚乙交酯和聚-1-丙交酯与聚糖脂的共聚物组成的微球或晶体。
1934年，meyer和palmer发现了透明质酸。karlmeyer从玻璃体液中分离了多糖。由于其中含有糖醛酸，meyer根据hyalos(玻璃状的意思)和糖醛酸命名该物质为透明质酸。在生理ph下，糖醛酸残基上的所有羧基均被解离，当钠离子为反离子时，该多糖被称为透明质酸钠。1986年，balazs提出了透明质酸的名称。这是目前公认的术语。在该申请中将使用缩写“ha”来表示透明质酸，其包括透明质酸及其金属盐。
ha是一种线性多糖(长链生物聚合物)，是由单位d-葡萄糖醛酸及n-乙酰基-d-葡萄糖胺组成的二糖单元，通过β.1-3和β.1-4糖苷连接。ha与其他糖胺聚糖不同，因为它没有与蛋白质和硫酸基团的共价连接。然而，它是复杂蛋白聚糖的组成部分。ha是细胞间基质的重要组成部分，是填充皮肤、腱、肌肉和软骨等各种组织细胞之间空间的物质。
ha具有粘性流动性，弹性和假塑性。此属性是ha独有的。其他糖胺聚糖(gags)只有在比ha浓度高得多的情况下才能形成粘性溶液，并且它们不能形成粘弹性聚合物网络。已证明ha在不同的活性中都很重要，例如组织的水合作用，润滑，溶质运输，细胞迁移，细胞功能，细胞分化和细胞增殖。
现有技术存在透明质酸组合物在软组织填充中的应用。另外还有一些专利和专利申请描述了聚丙交酯，聚乙二醇及其组合在药物传递中的潜在应用，在与生长因子结合时可用于组织修复，或单独(不添加透明质酸)用于软组织填充。还有其他专利和专利申请提到了含有乳酸聚合物的生物可吸收聚合物颗粒的潜在应用。但是，没有一种方法可以生产用于软组织填充的含有聚-l-乳酸微球或晶体的交联透明质酸组合物。
技术实现要素：
本发明针对上述的问题，提供一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶以及制备方法。
为了解决上述的技术问题，本发明通过如下技术方案实现：
本发明提供了一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，包括组合凝胶基质以及聚-l-乳酸，所述组合凝胶基质包括注射用水溶液、透明质酸钠以及聚-l-丙交酯球，所述聚-l-丙交酯球占注射用水溶液的重量总量的0.5％-30％，所述透明质酸钠占注射用水溶液的重量总量的0.1％-30％。
本发明进一步设置：还包括麻醉剂、多元醇类、维生素、抑菌剂、抗氧化剂、或矿物盐类中的一种或几种。
本发明进一步设置：所述麻醉剂为利多卡因，麻醉剂占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.05％-1％，所述多元醇包括山梨醇、丙三醇、甘露醇、丙二醇、丁四醇、木醣醇、麦芽糖醇、乳醣醇中的一种或多种，所述多元醇占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.1％-15％，所述维生素包括维生素c、维生素e、维生素b群，维生素占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.1mg/ml-5.0mg/ml，所述抑菌剂包括硫柳汞、苯扎溴铵、三氯叔丁醇、苯甲醇或苯甲酯类中的一种或几种，所述抑菌剂占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.01％-0.5％。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球占注射用水溶液的重量总量的10％-20％，所述透明质酸钠占注射用水溶液的重量总量的10％-20％。
本发明进一步设置：所述注射用水溶液为质量浓度为0.9％的氯化钠溶液或磷酸盐缓冲溶液。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的10％-30％。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球的平均粒径为15-100μm。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球的平均粒径为25-50μm。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球可以替换为聚乙交酯和丙交酯或l-丙交酯和乙交酯的共聚物(plga)。
本发明还提供一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:
1)将透明质酸钠以及聚-l-丙交酯球在缓慢搅拌下加入注射用水溶液中，充分润湿溶胀；
2)静置6h，得澄清透明溶液或者凝胶；
3)将聚-l-乳酸晶体加入澄清透明溶液或者凝胶中，研磨或者搅拌10min，将混合物在两个注射器之间缓慢来回抽打，得到均一的混合物，该过程可避免气泡的形成。
4)-将混合物离心，转速3500rpm，确保去除气泡，制备得到注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶。
本发明含有pla微球或晶体的化学交联的透明质酸溶液可以注射到表皮，中层或深层真皮中，以纠正面部皮肤的轮廓缺陷，也可以将此类组合物注射到唇肌周围的疏松结缔组织中或嘴唇中，以改善嘴唇外观。透明质酸/pla组合物可通过27-30号针头进行注射。该材料基本保持无色，并能提供持久的临床效果。可以将组合物预先包装在即用注射器中，该注射器包含可以体现不同等级持久度的材料。
附图说明
图1是本发明实施例的实验结果图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明涉及一种可注射的，化学交联的透明质酸溶液，该溶液含有可吸收的聚-l-丙交酯(pla)或聚乙交酯(plg)丙交酯或l-丙交酯/乙交酯共聚物-plga(直径20-50μm)，用于软组织填充和组织再生。化学交联的透明质酸可以从合作的机构购买，或者可以由生产和商业化用于软组织填充的交联透明质酸的公司提供。另外，可以使用现有的和公开的方法自己生产交联的透明质酸。可以用1,4-丁二醇二缩水甘油醚(bdde)生产交联的透明质酸。可以从包括phosphorex，carbion，polysciences或akina在内的许多制造商处购买聚l-乳酸晶体或微粉。将聚-l-乳酸晶体研磨，过筛，得到直径为20-50μm的微球或颗粒。使用伽玛射线，环氧乙烷或其他合适的灭菌方法对颗粒进行灭菌。交联的透明质酸通过高压灭菌法灭菌。最终产品是将灭菌的聚-1-乳酸球或晶体与无菌交联的透明质酸进行无菌混合，然后混合均匀并填充到最终产品注射器中。
如本文所定义，术语“可注射的透明质酸组合物”是指可注射的，化学交联的，生物相容的透明质酸组合物，这种组合物还包含生物不可吸收或可吸收的微球，当将其注射到组织中时，会有填充缺陷组织的作用，缺陷组织例如皮肤纹和褶皱。术语“生物相容”是指根据本发明交联的透明质酸在植入受试者的生物组织中时是稳定的，更具体地说，不会在植入后随时间的变化而变质，或引起免疫反应，或引起有害的组织反应。
参考了现有技术中描述了透明质酸组合物在软组织填充中的应用。另外还有一些专利文献描述了聚丙交酯，聚乙二醇及其组合在药物传递中的潜在应用，在与生长因子结合时可用于组织修复，或单独(不添加透明质酸)用于软组织填充。还有其他专利和专利申请提到了含有乳酸聚合物的生物可吸收聚合物颗粒的潜在应用。但是，没有一种方法可以生产用于软组织填充的含有聚-l-乳酸微球或晶体的交联透明质酸组合物。当前唯一的包含微粒或聚-l-乳酸晶体的软组织填充产品是sculptra，它由羧甲基纤维素，甘露醇和plla粉末组成。
为此本发明提供了一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，包括组合凝胶基质以及聚-l-乳酸，所述组合凝胶基质包括注射用水溶液、透明质酸钠以及聚-l-丙交酯球，所述聚-l-丙交酯球占注射用水溶液的重量总量的0.5％-30％，所述透明质酸钠占注射用水溶液的重量总量的0.1％-30％。
本发明进一步设置：还包括麻醉剂、多元醇类、维生素、抑菌剂、抗氧化剂、或矿物盐类中的一种或几种。
本发明进一步设置：所述麻醉剂为利多卡因，麻醉剂占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.05％-1％，所述多元醇包括山梨醇、丙三醇、甘露醇、丙二醇、丁四醇、木醣醇、麦芽糖醇、乳醣醇中的一种或多种，所述多元醇占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.1％-15％，所述维生素包括维生素c、维生素e、维生素b群，维生素占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.1mg/ml-5.0mg/ml，所述抑菌剂包括硫柳汞、苯扎溴铵、三氯叔丁醇、苯甲醇或苯甲酯类中的一种或几种，所述抑菌剂占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.01％-0.5％。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球占注射用水溶液的重量总量的10％-20％，所述透明质酸钠占注射用水溶液的重量总量的10％-20％。
本发明进一步设置：所述注射用水溶液为质量浓度为0.9％的氯化钠溶液或磷酸盐缓冲溶液。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的10％-30％。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球的平均粒径为15-100μm。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球的平均粒径为25-50μm。
本发明进一步设置：所述聚-l-丙交酯球可以替换为聚乙交酯和丙交酯或l-丙交酯和乙交酯的共聚物(plga)。
本发明还提供一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:
1)将透明质酸钠以及聚-l-丙交酯球在缓慢搅拌下加入注射用水溶液中，充分润湿溶胀；
2)静置6h，得澄清透明溶液或者凝胶；
3)将聚-l-乳酸晶体加入澄清透明溶液或者凝胶中，研磨或者搅拌10min，将混合物在两个注射器之间缓慢来回抽打，得到均一的混合物，该过程可避免气泡的形成。
4)-将混合物离心，转速3500rpm，确保去除气泡，制备得到注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶。
本发明含有pla微球或晶体的化学交联的透明质酸溶液可以注射到表皮，中层或深层真皮中，以纠正面部皮肤的轮廓缺陷，也可以将此类组合物注射到唇肌周围的疏松结缔组织中或嘴唇中，以改善嘴唇外观。透明质酸/pla组合物可通过27-30号针头进行注射。该材料基本保持无色，并能提供持久的临床效果。可以将组合物预先包装在即用注射器中，该注射器包含可以体现不同等级持久度的材料。
具体制备以及试验
实例1交联ha/pla组合物的制备
为了进行初步评估，制备了交联透明质酸的商业样品。在透明、粘稠的交联透明质酸中添加了聚-l-乳酸晶体。添加的晶体经过研磨和过筛，最终的直径分布为25-45μm。在洁净室中，将混合物在两个注射器之间缓慢来回抽打，得到均一的混合物，该过程可避免气泡的形成。将混合物离心，转速3500rpm，确保去除气泡。将ha-pla注射器置于2-8℃进行保存。
实例2交联ha/pla混合物在动物体内的评价
以市售的透明质酸为对照，进行了为期一个月的动物研究，以检查组织对ha/pla制剂和对照品的反应。实验对象为一只健康的新西兰白兔和健康的小鼠。注射部位为兔子模型的耳朵部位和小鼠模型的背部真皮。30天后，将动物安乐死，并取下植入部位以进行固定，切片和组织病理学评估。切片用h&e，trichromeblue和vongeison’s(弹性纤维网)染色。所有染色的切片由病理学家进行评估，并进行图像采集和病理报告的撰写。1个月后，ha和ha pla植入体的组织学评估清晰可见，炎症现象不明显；兔子的植入体和植入体周围纤维囊中有新胶原纤维形成。vangeison的染色未显示与植入体相关的弹性组织的生成。ha 原纤维胶原蛋白在兔耳模型中的组织学评估表明，胶原纤维分散在整个植入体中，其原因为注射液中的ha载体含有完整的胶原纤维
结论：所有植入体的炎症反应都很低。兔耳模型的结果显示，少量早期胶原纤维散布在ha和ha pla植入体中，表明某些植入的组织整合或刺激了新胶原如图1所示，
另外，在本发明实施例的描述中，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
在本发明的描述中，需要说明的是，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
最后应说明的是：以上所述实施例，仅为本发明的具体实施方式，用以说明本发明技术方案，而非对其限制，本发明的保护范围并不局限于此，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改或可轻易想到变化，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改、变化或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应所述以权利要求的保护范围为准。
1.一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：包括组合凝胶基质以及聚-l-乳酸，所述组合凝胶基质包括注射用水溶液、透明质酸钠以及聚-l-丙交酯球，所述聚-l-丙交酯球占注射用水溶液的重量总量的0.5％-30％，所述透明质酸钠占注射用水溶液的重量总量的0.1％-30％。
2.根据权利要求1所述的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：还包括麻醉剂、多元醇类、维生素、抑菌剂、抗氧化剂、或矿物盐类中的一种或几种。
3.根据权利要求2所述的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：所述麻醉剂为利多卡因，麻醉剂占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.05％-1％，所述多元醇包括山梨醇、丙三醇、甘露醇、丙二醇、丁四醇、木醣醇、麦芽糖醇、乳醣醇中的一种或多种，所述多元醇占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.1％-15％，所述维生素包括维生素c、维生素e、维生素b群，维生素占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.1mg/ml-5.0mg/ml，所述抑菌剂包括硫柳汞、苯扎溴铵、三氯叔丁醇、苯甲醇或苯甲酯类中的一种或几种，所述抑菌剂占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的0.01％-0.5％。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：所述聚-l-丙交酯球占注射用水溶液的重量总量的10％-20％，所述透明质酸钠占注射用水溶液的重量总量的10％-20％。
5.根据权利要求4所述的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：所述注射用水溶液为质量浓度为0.9％的氯化钠溶液或磷酸盐缓冲溶液。
6.根据权利要求5所述的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：所述聚-l-丙交酯球占注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶重量总量的10％-30％。
7.根据权利要求6所述的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：所述聚-l-丙交酯球的平均粒径为15-100μm。
8.根据权利要求6所述的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：所述聚-l-丙交酯球的平均粒径为25-50μm。
9.根据权利要求4所述的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶，其特征在于：所述聚-l-丙交酯球可以替换为聚乙交酯和丙交酯或l-丙交酯和乙交酯的共聚物(plga)。
10.的一种注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:
1)将透明质酸钠以及聚-l-丙交酯球在缓慢搅拌下加入注射用水溶液中，充分润湿溶胀；
2)静置6h，得澄清透明溶液或者凝胶；
3)将聚-l-乳酸晶体加入澄清透明溶液或者凝胶中，研磨或者搅拌10min，将混合物在两个注射器之间缓慢来回抽打，得到均一的混合物，该过程可避免气泡的形成。
4)-将混合物离心，转速3500rpm，确保去除气泡，制备得到注射型美容整形用面部填充剂组合物凝胶。
技术总结