本发明属于药物化学的
技术领域：
，具体涉及一种双吲哚类化合物及其制备方法和应用。
背景技术：
：抗生素，是指由微生物(包括细菌、真菌、放线菌)或高等动植物在生命过程中所产生的具有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生物细胞发育功能的化学物质。抗生素的发现是人类药物研究史上最成功的案例之一。自从合成第一种抗菌药物磺胺以来，科学家相继发现并开发了青霉素、氨基糖苷、氯霉素、四环素、大环内酯类等一大批重要的抗生素，后来又在药物科学家的努力下，继而半合成和全合成了一系列抗菌药物：半合成青霉素、头孢菌素、新型β-内酰胺、喹诺酮类抗菌药。吲哚是含氮有机芳族杂环化合物。它是一类重要的生物碱，在自然界广泛存在。吲哚环由于其良好的生物活性和对人体的低毒性而被广泛用于医学、食品和其他领域。目前，已经从动植物中分离并提取了许多具有抗炎、止痛、抗肿瘤、抗菌和其他生物活性的吲哚生物碱天然产物。另外，人们还对吲哚生物碱进行了结构修饰并获得了许多重要的药物。因此，许多药物化学家认为吲哚类抗菌药物的开发是非常有意义的工作，特别是在迫切需要新型抗菌药物的前提下，他们已经将吲哚类抗菌药物的合成研究作为其主要研究方向。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种通式(ⅰ)所示的化合物或其外消旋体、对映异构体及其混合物形式、及其可药用的盐：其中：r1为苯基、4-三氟甲氧基苯基、2-甲基苯基、4-甲基苯基或3-甲氧基苯基；r2相同或不同，各自独立地选自氢原子、卤素、甲氧基、氰基或硝基。优选的，所述通式(ⅰ)化合物r1为苯基、4-三氟甲氧基苯基、邻甲苯基或对甲苯基；r2相同或不同，各自独立地选自卤素或氰基。一种双吲哚类化合物的制备方法，反应方程式如下：制备方法为：在0℃下，将化合物ⅱ和化合物ⅲ溶于四氢呋喃中，降温至0℃，加入tempo bf4-；保温反应6h后，浓缩反应液，残余物经柱层析纯化后得通式(ⅰ)。优选的，所述化合物ⅱ、化合物ⅲ、tempo bf4-用量的摩尔比为1:1.5:1。一种双吲哚类化合物的应用，通式ⅰ化合物在制备抗菌药物中的应用。本发明的有益效果为：本发明提供的含有双吲哚结构的化合物能够对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌均具有一定的抗菌活性，而含有卤素取代的化合物的抗菌活性尤其显著，同时含有卤素的化合物对革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌也具有一定的抗菌活性；在进行细胞存活率实验时，在有效浓度下没有表现出明显的细胞毒性。本发明的通式(ⅰ)化合物可应用于制备抗菌的药物或作为抗菌药物开发的先导化合物。附图说明为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为实施例26中化合物a、b、c、f、g、k和l的细胞毒性测试图；图2为实施例26中化合物m、q、r和v的细胞毒性测试图。具体实施方式为了使本
技术领域：
的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。本实施例中，1h和13cnmr用brukeravanceⅲhd600兆核磁共振波谱仪测定；ms用agilent6440triplequadlc/ms质谱仪测定，除注明外均为esi方式；所有溶剂在使用前均经过重新蒸馏，所使用的无水溶剂均是按标准方法干燥处理获得；除说明外，所有反应均是在氩气保护下进行并用tlc跟踪，后处理时均经饱和食盐水洗涤和无水硫酸镁干燥过程；产品的纯化除说明外均使用硅胶(200-300目)的柱色谱法；所使用的硅胶，包括200-300目和gf254为青岛海浪硅胶干燥剂有限公司生产。实施例12-(4-氟-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如下：在0℃下，将2-苯基-1h-吲哚1.932g和4-氟-1h-吲哚2.026g溶于四氢呋喃30ml中，降温至0℃，加入tempo bf4-2.440g；保温反应6h后，浓缩反应液，残余物经柱层析纯化后得化合物ⅰ2.879g，收率：84.1％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.34(s,1h),7.66(d,j＝7.8hz,1h),7.49(t,j＝7.6hz,1h),7.41-7.35(m,3h),7.28-7.21(m,4h),7.18(d,j＝8.1hz,1h),7.11(dd,j＝13.2,7.7hz,1h),6.94(d,j＝8.3hz,1h),6.83(t,j＝7.4hz,1h),6.71(dd,j＝11.1,8.0hz,1h),5.95(d,j＝3.6hz,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ199.6,160.2,156.7,155.1,140.1,139.9,139.9,137.9,128.5,127.7,126.3,125.9,124.2,123.5,123.4,119.0,118.7,114.8,114.7,113.1,113.0,112.1,107.9,107.9,105.5,105.4,70.8；esi-ms:m/z＝343.1([m h] )。实施例22-(4-氯-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和4-氯-1h-吲哚2.274g制备所得1.514g，收率：42.2％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,acetone-d6)δ10.69(s,1h),7.55(dd,j＝7.8,0.6hz,1h),7.53-7.50(m,1h),7.46(d,j＝8.1hz,1h),7.41-7.38(m,1h),7.33-7.31(m,2h),7.26-7.15(m,4h),7.10(t,j＝7.9hz,1h),7.05(s,1h),7.00-6.96(m,1h),6.84-6.79(m,1h)；13cnmr(151mhz,acetone-d6)δ200.2,161.6,142.9,140.3,138.3,128.9,127.7,127.6,127.4,127.2,125.6,125.3,124.3,123.6,121.3,119.2,114.3,113.7,111.7,72.1；esi-ms:m/z＝359.1([m h] )。实施例32-(4-溴-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和4-溴-1h-吲哚2.940g制备所得1.942g，收率：37.0％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,acetone-d6)δ10.73(s,1h),7.57-7.50(m,3h),7.44-7.40(m,1h),7.29-7.27(m,2h),7.26-7.16(m,5h),7.04(t,j＝7.8hz,2h),6.85-6.79(m,1h)；13cnmr(151mhz,acetone-d6)δ200.3,161.6,143.0,140.2,138.3,128.9,128.0,127.7,127.3,125.9,125.6,125.1,123.8,119.3,119.0,114.2,113.7,113.4,112.3,72.0；esi-ms:m/z＝403.0([m h] )。实施例42-(4-甲氧基-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和4-甲氧基-1h-吲哚2.208g制备所得3.335g，收率：94.1％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.23(s,1h),7.65(d,j＝7.8hz,1h),7.46-7.43(m,1h),7.36(dd,j＝5.2,3.4hz,2h),7.30(s,1h),7.25-7.20(m,2h),7.19-7.15(m,1h),7.11(t,j＝8.0hz,1h),7.01(d,j＝8.1hz,1h),6.88(d,j＝8.3hz,1h),6.78-6.74(m,1h),6.58(s,1h),6.49(d,j＝7.8hz,1h),3.57(s,3h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ199.9,160.1,152.9,141.2,138.9,137.6,128.1,127.0,126.3,125.8,123.6,123.2,118.7,118.2,116.6,114.0,111.8,105.4,101.3,71.3,55.6；esi-ms:m/z＝355.1([m h] )。实施例53-(3-氧代-2-苯基吲哚-2-基)-1h-吲哚-4-腈反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和1h-吲哚-4-腈2.133g制备所得1.799g，收率：51.5％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.77(s,1h),7.68(d,j＝7.8hz,1h),7.66-7.61(m,2h),7.55-7.52(m,1h),7.45(dd,j＝7.4,0.7hz,1h),7.28-7.20(m,6h),7.02(d,j＝8.3hz,1h),6.90-6.86(m,1h),6.45(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ199.8,160.7,139.2,138.3,137.6,128.9,128.1,127.7,127.5,126.6,126.3,125.9,122.2,120.9,119.6,118.4,116.9,113.7,112.6,102.3,71.2；esi-ms:m/z＝350.1([m h] )。实施例62-(5-氟-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和5-氟-1h-吲哚2.026g制备所得3.116g，收率：91.0％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.21(s,1h),7.68(d,j＝7.7hz,1h),7.54-7.50(m,3h),7.33-7.27(m,4h),7.19(s,1h),6.96-6.87(m,3h),6.79(d,j＝9.6hz,1h),5.31(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.6,160.6,158.6,157.1,139.3,137.8,133.6,128.7,128.1,126.9,126.2,126.1,125.8,125.6,119.9,119.7,116.1,116.1,113.0,112.5,112.4,111.3,111.1,105.2,104.9,71.3；esi-ms:m/z＝343.1([m h] )。实施例72-(5-溴-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和5-溴-1h-吲哚2.940g制备所得3.993g，收率：99.0％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.31(s,1h),7.68(dd,j＝7.7,0.5hz,1h),7.54-7.47(m,3h),7.33-7.27(m,4h),7.25-7.21(m,2h),7.17(d,j＝2.6hz,1h),6.95(d,j＝8.2hz,1h),6.92-6.87(m,1h),5.35(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.6,160.6,139.3,137.9,135.8,128.8,128.2,127.5,126.8,125.8,125.6,125.1,122.4,119.9,119.6,115.3,113.5,113.2,113.0,71.2；esi-ms:m/z＝403.0([m h] )。实施例83-(3-氧代-2-苯基吲哚-2-基)-1h-吲哚-5-腈的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和1h-吲哚-5-腈2.133g制备所得2.736g，收率：78.3％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,acetone-d6)δ10.85(s,1h),7.63-7.60(m,2h),7.57-7.49(m,6h),7.40(dd,j＝8.6,1.4hz,1h),7.35-7.28(m,3h),7.06(d,j＝8.3hz,1h),6.84(t,j＝7.2hz,1h)；13cnmr(151mhz,acetone-d6)δ200.5,161.8,141.0,140.0,138.6,129.2,128.6,127.6,127.4,127.2,126.8,125.7,125.2,121.0,119.3,119.3,117.4,113.9,113.2,102.9,71.8；esi-ms:m/z＝350.1([m h] )。实施例92-(5-硝基-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和5-硝基-1h-吲哚2.433g制备所得1.737g，收率：47.0％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,acetone-d6)δ10.98(s,1h),8.23(d,j＝2.1hz,1h),8.01(dd,j＝9.0,2.2hz,1h),7.65-7.51(m,7h),7.37-7.27(m,3h),7.08(d,j＝8.2hz,1h),6.85(t,j＝7.4hz,1h)；13cnmr(151mhz,acetone-d6)δ200.5,161.9,142.1,141.4,141.0,138.6,129.3,128.6,128.5,128.3,127.6,126.2,125.7,119.4,118.9,118.4,117.9,113.3,112.9,71.6；esi-ms:m/z＝370.1([m h] )。实施例102-(6-氟-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和6-氟-1h-吲哚2.026g制备所得3.390g，收率：99.0％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,acetone-d6)δ10.34(s,1h),7.59-7.50(m,4h),7.34-7.26(m,4h),7.23-7.19(m,1h),7.15(dd,j＝9.9,2.3hz,1h),7.12(dd,j＝8.8,5.4hz,1h),7.05(d,j＝8.3hz,1h),6.84-6.80(m,1h),6.70-6.67(m,1h)；13cnmr(151mhz,acetone-d6)δ200.7,161.8,161.3,159.8,141.3,138.3,129.0,128.3,127.7,125.6,123.6,122.1,122.1,119.5,119.1,116.6,113.2,108.3,108.2,98.5,98.5,98.4,98.3,71.8；esi-ms:m/z＝343.1([m h] )。实施例112-(6-氯-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和6-氯-1h-吲哚2.274g制备所得3.548g，收率：98.9％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.22(s,1h),7.68(d,j＝7.7hz,1h),7.53-7.51(m,3h),7.34-7.27(m,4h),7.14(s,1h),7.04(d,j＝8.5hz,1h),6.97-6.88(m,3h),5.30(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.6,160.5,139.5,137.8,137.5,128.7,128.1,126.9,125.8(s),124.5,124.4,120.9,120.9,119.9,119.7,116.1,113.0,111.7,71.2；esi-ms:m/z＝359.1([m h] )。实施例122-(6-溴-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和6-溴-1h-吲哚2.274g制备所得3.997g，收率：99.1％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.22(s,1h),7.68(d,j＝7.7hz,1h),7.54-7.49(m,4h),7.33-7.27(m,3h),7.12(s,1h),7.06(d,j＝8.5hz,1h),6.99(d,j＝8.5hz,1h),6.94(d,j＝8.2hz,1h),6.90(t,j＝7.4hz,1h),5.30(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.6,160.6,139.4,137.9,137.8,128.7,128.1,126.9,125.8,124.9,124.4,123.5,121.3,119.9,119.7,116.3,116.2,114.7,113.0,71.2；esi-ms:m/z＝403.0([m h] )。实施例133-(3-氧代-2-苯基吲哚-2-基)-1h-吲哚-6-腈的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和1h-吲哚-6-腈2.133g制备所得2.907g，收率：83.2％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.51(s,1h),7.69(d,j＝5.7hz,2h),7.56-7.52(m,1h),7.50-7.47(m,2h),7.40(d,j＝2.6hz,1h),7.34-7.30(m,3h),7.24-7.19(m,2h),6.96(d,j＝8.2hz,1h),6.92(t,j＝7.4hz,1h),5.28(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.4,160.4,139.3,138.0,135.9,129.0,128.8,128.4,127.5,126.8,125.8,123.1,121.3,120.3,120.2,119.7,117.1,116.5,112.9,105.4,71.1.esi-ms:m/z＝355.1([m h] ).实施例142-(6-硝基-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和6-硝基-1h-吲哚2.433g制备所得2.253g，收率：61.0％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,acetone-d6)δ11.01(s,1h),8.43(d,j＝2.0hz,1h),7.79(dd,j＝8.9,2.1hz,1h),7.65(d,j＝2.3hz,1h),7.58-7.52(m,4h),7.49(s,1h),7.36-7.28(m,4h),7.07(d,j＝8.2hz,1h),6.87-6.83(m,1h)；13cnmr(151mhz,acetone-d6)δ200.6,161.9,143.9,141.0,138.6,136.8,131.6,131.2,131.0,129.2,128.6,127.7,125.6,121.4,119.4,117.7,114.8,113.3,109.3,71.6.esi-ms:m/z＝350.1([m h] ).实施例152-(6-甲氧基-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和6-甲氧基-1h-吲哚2.208g制备所得2.250g，收率：63.5％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.12(s,1h),7.61(d,j＝7.7hz,1h),7.49-7.47(m,2h),7.45-7.39(m,1h),7.26-7.17(m,3h),6.95-6.89(m,2h),6.87-6.79(m,2h),6.74(d,j＝1.8hz,1h),6.57(dd,j＝8.7,2.1hz,1h),5.32(s,1h),3.70(s,3h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.9,160.7,156.7,139.7,137.9,137.7,128.5,127.8,126.9,125.6,122.8,120.4,119.9,119.7,119.6,115.5,113.0,110.1),95.14,71.4,55.7；esi-ms:m/z＝370.1([m h] )。实施例162-(7-氯-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和7-氯-1h-吲哚2.274g制备所得3.552g，收率：99.0％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.40(s,1h),7.69(d,j＝7.8hz,1h),7.55-7.48(m,3h),7.33-7.27(m,3h),7.23(d,j＝2.5hz,1h),7.17(d,j＝7.5hz,1h),7.06(d,j＝8.0hz,1h),6.94-6.89(m,3h),5.35(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.4,160.5,139.5,137.8,134.4,128.7,128.0,127.2,126.9,125.8,124.4,122.1,121.0,119.9,119.7,118.7,117.2,117.1,112.9,71.3；esi-ms:m/z＝359.1([m h] )。实施例172-(7-溴-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和7-溴-1h-吲哚2.941g制备所得3.985g，收率：98.8％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.36(s,1h),7.69(d,j＝7.8hz,1h),7.55-7.49(m,3h),7.34-7.27(m,4h),7.23(d,j＝2.3hz,1h),7.10(d,j＝7.9hz,1h),6.93(d,j＝8.2hz,1h),6.90(t,j＝7.4hz,1h),6.86(t,j＝7.8hz,1h),5.35(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.4,160.5,139.4,137.8,135.7,128.6,128.0,126.9,126.9,125.8,125.0,124.4,121.4,119.9,119.7,119.3,117.2,112.9,105.3,71.3；esi-ms:m/z＝403.0([m h] )。实施例182-(7-甲氧基-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和7-甲氧基-1h-吲哚2.208g制备所得3.491g，收率：98.5％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.37(s,1h),7.70(d,j＝7.7hz,1h),7.59-7.54(m,2h),7.51-7.48(m,1h),7.33-7.25(m,3h),7.14(d,j＝2.2hz,1h),6.94-6.87(m,3h),6.75(d,j＝8.0hz,1h),6.63(d,j＝7.7hz,1h),5.39(s,1h),3.93(s,3h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.6,160.7,146.5,139.8,137.6,128.5,127.8,127.6,127.1,126.9,125.7,123.3,120.7,119.8,119.7,116.2,113.0,112.4,102.4,71.4,55.4.esi-ms:m/z＝355.1([m h] ).实施例192-(7-硝基-1h-吲哚-3-基)-2-苯基吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-苯基-1h-吲哚1.932g和7-硝基-1h-吲哚2.433g制备所得3.413g，收率：86.1％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ9.88(s,1h),8.11(d,j＝8.0hz,1h),7.69(d,j＝7.8hz,1h),7.57-7.52(m,2h),7.50-7.48(m,2h),7.40(d,j＝2.5hz,1h),7.35-7.30(m,3h),7.06(dd,j＝11.2,4.8hz,1h),6.97(d,j＝8.2hz,1h),6.93(t,j＝7.4hz,1h),5.29(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.3,160.3,139.5,137.9,133.2,130.6,129.6,128.9,128.4,126.9,126.2,125.8,120.2,119.8,119.7,119.6,117.9,112.9,71.0；esi-ms:m/z＝370.1([m h] )。实施例202-(1h-吲哚-3-基)-2-(对甲苯基)吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-对甲苯基-1h-吲哚2.073g和1h-吲哚1.758g制备所得1.127g，收率：33.3％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.31(s,1h),7.69(d,j＝7.7hz,1h),7.51-7.47(m,1h),7.43(d,j＝8.2hz,2h),7.33(d,j＝8.2hz,1h),7.20-7.14(m,2h),7.09(dd,j＝13.1,5.2hz,3h),6.98(t,j＝7.5hz,1h),6.90-6.86(m,2h),5.40(s,1h),2.32(s,3h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ201.1,160.7,137.6,137.6,137.1,136.6,129.3,126.8,125.8,125.7,123.9,122.5,120.0,119.9,119.7,119.1,115.6,112.9,111.8,71.3,21.2；esi-ms:m/z＝339.1([m h] )。实施例212-(1h-吲哚-3-基)-2-(4-(三氟甲氧基)苯基)吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-(4-三氟甲氧基苯基)-1h-吲哚2.772g和1h-吲哚1.758g制备所得1.352g，收率：33.1％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.30(s,1h),7.70(d,j＝7.7hz,1h),7.61(d,j＝8.8hz,2h),7.55-7.50(m,1h),7.37(d,j＝8.2hz,1h),7.19(t,j＝7.4hz,1h),7.13(d,j＝8.8hz,4h),7.01(t,j＝7.5hz,1h),6.95-6.90(m,2h),5.39(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.4,160.7,148.9,148.9,138.4,137.9,137.1,128.1,125.7,125.5,123.9,122.8,120.8,120.3,120.2,119.6,119.6,115.3,113.,111.94,70.9；esi-ms:m/z＝409.1([m h] )。实施例222-(1h-吲哚-3-基)-2-(邻甲苯基)吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-邻甲苯基-1h-吲哚2.073g和1h-吲哚1.758g制备所得1.113g，收率：32.9％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.20(s,1h),7.69(d,j＝7.5hz,1h),7.49-7.45(m,1h),7.39-7.32(m,3h),7.23-7.15(m,3h),7.09-7.06(m,2h),7.03-6.99(m,1h),6.89-6.85(m,2h),5.39(s,1h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.9,159.8,137.8,137.4,137.3,137.2,132.3,129.5,128.2,125.9,125.9,125.4,123.5,122.6,120.8,120.6,120.1,119.6,115.1,112.8,111.8,72.9,21.2；esi-ms:m/z＝339.1([m h] )。实施例232-(1h-吲哚-3-基)-2-(3-甲氧基苯基)吲哚-3-酮的制备反应方程式如下：制备方法如实施例1所述，由2-(3-甲氧基-苯基)-1h-吲哚2.233g和1h-吲哚1.758g制备所得1.191g，收率：33.6％。产物检测结果如下：1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.30(s,1h),7.69(d,j＝7.7hz,1h),7.51-7.47(m,1h),7.33(d,j＝8.2hz,1h),7.23-7.14(m,5h),7.09(d,j＝2.3hz,1h),6.98(t,j＝7.5hz,1h),6.89(dd,j＝13.8,7.7hz,2h),6.84-6.80(m,1h),5.40(s,1h),3.71(s,3h)；13cnmr(151mhz,cdcl3)δ200.5,160.6,159.8,141.3,137.7,137.1,129.6,125.8,125.7,123.9,122.6,120.2,119.8,119.8,119.7,119.5,115.6,113.0,112.9,111.8,71.3,55.4；esi-ms:m/z＝355.1([m h] )。实施例24将实施例1～实施例23所制备的23个化合物以及阳性对照(头孢菌素)进行编号，具体编号如下表1；实施例25和实施例26均沿用此编号：表1-化合物编号将实施例1～实施例23所制备的23个化合物进行金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性试验，试验方法如下：使用革兰氏阳性细菌(金黄色葡萄球菌atcc25923和枯草芽孢杆菌atcc633)对化合物进行体外抗菌活性测试。本发明以头孢菌素作为阳性对照，lb培养基作为空白对照。每个测试重复三遍。化合物与菌液的配置：首先将待测化合物和头孢菌素用dmso配置，得到浓度为20mm的储备液，然后通过麦氏比浊法将细菌溶液调整至108cfu/ml，然后用培养基稀释至105cfu/ml。抑菌率的测定：在96孔板上，把配置好的20mm的化合物和阳性对照用稀释好的菌液稀释成最终浓度为50μm，3个复孔，然后将其置于恒温培养箱中于37℃条件下培养12h，用酶标仪在波长λ＝600nm下测试并计算抑制率。ic50值的测定：ic50值也同样通过倍比稀释法在96孔板上测定。ic50定义为与空白对照相比导致微生物培养物数量减少50％的化合物浓度。具体测试结果如下表2表2-测试结果从表2的测试结果可以看出，除了化合物j之外，其它化合物对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)均具有明显的抗菌活性，这表明电子云密度不是影响抗菌活性的唯一因素。而且无论取代基的取代位置如何，所有含卤素的化合物都比其他不含卤素的化合物表现出更好的抑菌活性。此外，在卤代化合物中，具有溴原子取代的化合物(c，g，m和r)表现出了最佳的抑菌活性，测试的ic50值在2.59-3.82μm范围内。通过测试数据进一步分析取代位置对抑菌活性的影响，发现4′-位是结构修饰的最佳位点。而含有卤素原子的化合物对于枯草芽孢杆菌也具有明显的抑菌活性。实施例25对映异构体对抑菌活性的影响为了确认这些化合物在对映异构体水平上是否能表现出明显的生物学活性差异，本发明选取了部分化合物，利用手性色谱柱进行了分离，并对分离后的产物进行了金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抗菌活性测试。具体测试结果如下表3和表4：表3-分离的对映异构体在甲醇中的旋光度值化合物[α]d28化合物[α]d28化合物[α]d28( )-c547( )-f427( )-g323(–)-c–553(–)-f–457(–)-g–314( )-l361( )-m313( )-q345(–)-l–343.(–)-m–289(–)-q–382( )-v410(–)-v–411//表4-对映异构体对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性通过表4可以看出，大多数对映异构体与其相应的消旋体相比，其抑菌活性略有提高。但大多数的一对对映异构体之间的抑菌活性差异不是很明显。但是，化合物m与化合物q的对映异构体之间确实表现出了显著的抑菌活性差异，化合物m的对映异构体对枯草芽孢杆菌的抗菌活性具有明显的差别，化合物q的对映异构体对金黄色葡萄球菌的抗菌活性具有明显的差别。另外，在这两对对映异构体之间，都是(–)对映体表现出较好的抑菌活性。实施例26化合物对正常细胞系(人类包皮成纤维细胞，hff)的影响使用mtt法进行化合物和头孢菌素对hff细胞系的细胞毒性测试。本发明对部分化合物进行了细胞毒性试验，分别为化合物a、b、c、f、g、k、l、m、q、r和v。该方法的操作步骤如下：将hff细胞以100μl/孔的量接种到96孔板中(每孔5×103个细胞)。孵育24小时后，用指定浓度的测试样品代替培养基，然后在37℃下将细胞置于湿润的环境(含5％co2)中进一步孵育。24小时后，将10μl溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑(mtt)溶液(5mg/ml)加入每个孔中，并将96孔板在37℃下再孵育4小时。然后除去上清液，并向每个孔中加入100μldmso。最后用酶标仪在波长λ＝600nm下测试吸光度。具体测试结果详见图1和图2；通过图1和图2可以看出，大多数化合物的细胞存活率均在可接受范围之内，通过与阳性对照药物头孢菌素相比，他们表现出了相当或更好的结果。并且当测试浓度增加到40μm时，仍然有一部分化合物没有明显的细胞毒性(>70％的细胞存活率)。所得到的这些结果都表明这些化合物有可能进一步发展成为非细胞毒性的抗菌药物。尽管通过参考附图并结合优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本
技术领域：
的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以权利要求所述的保护范围为准。当前第1页1 2 3
技术特征：1.一种双吲哚类化合物，其特征在于，表示为下述通式ⅰ：
或其外消旋体、对映异构体及其混合物形式、及其可药用的盐；
其中：r1为苯基、4-三氟甲氧基苯基、2-甲基苯基、4-甲基苯基或3-甲氧基苯基；r2相同或不同，各自独立地选自氢原子、卤素、甲氧基、氰基或硝基。
2.如权利要求1所述的一种双吲哚类化合物，其特征在于，所述通式ⅰ化合物r1为苯基、4-三氟甲氧基苯基、邻甲苯基或对甲苯基；r2相同或不同，各自独立地选自卤素或氰基。
3.一种双吲哚类化合物的制备方法，其特征在于，具体制备方法为：
在0℃下，将化合物ⅱ和化合物ⅲ溶于四氢呋喃中，降温至0℃，加入tempo bf4-；保温反应6h后，浓缩反应液，残余物经柱层析纯化后得通式ⅰ；
其中，化合物ⅱ为：化合物ⅲ为
4.如权利要求3所述的一种双吲哚类化合物的制备方法，其特征在于，所述化合物ⅱ、化合物ⅲ、tempo bf4-用量的摩尔比为1:1.5:1。
5.一种双吲哚类化合物的应用，其特征在于，所述通式ⅰ化合物在制备抗菌药物中的应用。
技术总结本发明涉及一种双吲哚类化合物及其制备方法和应用，属于药物化学的技术领域。化合物结构如通式(Ⅰ)所示。本发明提供的含有双吲哚结构的化合物对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均具有抗菌活性，可应用于制备抗菌的药物或作为抗菌药物开发的先导化合物。
技术研发人员：张华;闫薛;鲍洁;于淑娟
受保护的技术使用者：济南大学
技术研发日：2020.03.30
技术公布日：2020.06.09
