本发明涉及脂溶性化学成分提取技术领域，尤其涉及一种红豆杉枝叶中紫杉醇的提取方法。
背景技术：
东北红豆杉是红豆杉科，其果实、树皮和枝叶的提取物中具有多种药用价值的有效成分，其中紫杉醇等紫杉烷二萜类次生代谢产物具有独特机理的抗癌作用，紫杉醇有效成分还可用于治疗慢性炎症性疾病。以紫杉醇制作的注射液具有非常著名的抗乳腺癌作用，对卵巢癌及非小细胞肺癌均有治疗作用。
传统的提取方法包括浸渍法、渗漉法、索式提取法等。浸渍法所需设备简单，易于操作，但浸取时间长、工作强度大，有效成分提取不完全。渗漉法适宜对热不稳定且易分解的成分提取，方法简单，提取效率较高，但溶剂用量大造成不必要的浪费。索式提取法操作简单，但是提取的时间过长，提取过程中需要乙醇等易挥发的有机溶剂提取有效成分，获得有效成分的同时也含有多种杂质成分为后期的分离造成困难，同时也不利于环境友好发展。
传统的提取方法不仅在提取工艺操作上工作复杂，且存在提取效率低的缺点。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种红豆杉枝叶中紫杉醇的提取方法。本发明提出一种超高压辅助胶束提取红豆杉的枝叶中紫杉醇成分的方法，操作简单，且提取效率高。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种红豆杉枝叶中紫杉醇的提取方法，包括以下步骤：
将红豆杉枝叶粉碎，得到红豆杉枝叶粉末；
将所述红豆杉枝叶粉末与胶束提取溶剂混合进行浸泡，得到混合液，所述胶束提取溶剂为n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液；
将所述混合液进行超高压破碎提取，得到紫杉醇提取液，所述超高压破碎提取的压力为25～300mpa。
优选地，所述胶束提取溶剂中n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵的体积分数为0.4～2％。
优选地，所述红豆杉枝叶粉末的粒度为40～200目。
优选地，所述红豆杉枝叶粉末与胶束提取溶剂的用量比为1g:10～50ml。
优选地，所述浸泡的时间为6～24h。
优选地，所述混合液置于真空包装袋密封后再进行超高压破碎提取。
优选地，所述超高压破碎提取的时间为1～15min。
优选地，所述超高压破碎提取的温度不高于室温。
优选地，所述超高压破碎提取后还包括将所得提取液离心，得到所述紫杉醇提取液。
优选地，所述离心的转速为5000rpm，时间为10min。
本发明提供了一种红豆杉枝叶中紫杉醇的提取方法，包括以下步骤：将红豆杉枝叶粉碎，得到红豆杉枝叶粉末；将所述红豆杉枝叶粉末与胶束提取溶剂混合进行浸泡，得到混合液，所述胶束提取溶剂为n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液；将所述混合液进行超高压破碎提取，得到紫杉醇提取液，所述超高压破碎提取的压力为25～300mpa。本发明以超高压辅助胶束提取技术实现了红豆杉枝叶中紫杉醇的高效提取，n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵为绿色环保的表面活性剂，在常温高压条件下使胶束提取溶剂与红豆杉枝叶粉末通过狭窄的缝隙时受到强大的剪切力、撞击力和湍流作用以及因静压力的突升与突降而产生的空穴爆炸力等作用，使原始粗大的颗粒的悬浮液加工成细小颗粒稳定存在的混悬液，使得紫杉醇迅速扩散到溶剂中，从而实现快速低温提取，且操作简单，提取效率高，对热敏性有效成分起到一定的保护作用，适用于大规模工业化提取生产。实施例的数据表明，本发明的提取方法的提取率高达88.3％。
具体实施方式
本发明提供了一种红豆杉枝叶中紫杉醇的提取方法，包括以下步骤：
将红豆杉枝叶粉碎，得到红豆杉枝叶粉末；
将所述红豆杉枝叶粉末与胶束提取溶剂混合进行浸泡，得到混合液，所述胶束提取溶剂为n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液；
将所述混合液进行超高压破碎提取，得到紫杉醇提取液，所述超高压破碎提取的压力为25～300mpa。
本发明将红豆杉枝叶粉碎，得到红豆杉枝叶粉末。在本发明中，所述红豆杉枝叶粉末的粒度优选为40～200目，更优选为80～100目。
得到红豆杉枝叶粉末后，本发明将所述红豆杉枝叶粉末与胶束提取溶剂混合进行浸泡，得到混合液。
在本发明中，所述胶束提取溶剂中n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵的体积分数优选为0.4～2％，更优选为0.8～1.6％，最优选为1.2％。本发明对所述n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的制备方法制得即可。
在本发明中，所述红豆杉枝叶粉末与胶束提取溶剂的用量比优选为1g:10～50ml，更优选为1g:20～40ml，最优选为1g:30ml。
在本发明中，所述浸泡的时间优选为6～24h。
得到混合液后，本发明将所述混合液进行超高压破碎提取，得到紫杉醇提取液，所述超高压破碎提取的压力为25～300mpa。
在本发明中，所述混合液优选置于真空包装袋密封后再进行超高压破碎提取。
在本发明中，所述超高压破碎提取的时间优选为1～15min，更优选为5～7min，压力优选为100～150mpa。
在本发明中，所述超高压破碎提取的温度优选不高于室温。在本发明中，所述超高压破碎提取的次数优选为1次。
在本发明中，所述超高压破碎提取后优选还包括将所得提取液离心，得到所述紫杉醇提取液。
在本发明中，所述离心的转速优选为5000rpm，时间优选为10min。
为了进一步说明本发明，下面结合实例对本发明提供的红豆杉枝叶中紫杉醇的提取方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过100目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为0.8％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的20倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为150mpa，提取次数为1次，提取时间为7min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为66.7％。
实施例2
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过80目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为1.2％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的30倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为100mpa，提取次数为1次，提取时间为5min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为88.3％。
实施例3
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过40目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为1.6％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的40倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为150mpa，提取次数为1次，提取时间为7min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为83.3％。
实施例4
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过100目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为1.2％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的50倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为100mpa，提取次数为1次，提取时间为5min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为56.7％。
实施例5
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过80目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为1.2％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的30倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为100mpa，提取次数为1次，提取时间为5min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为80％。
实施例6
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过100目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为1.6％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的20倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为150mpa，提取次数为1次，提取时间为7min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为70.6％。
实施例7
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过80目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为1.6％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的20倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为150mpa，提取次数为1次，提取时间为3min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为55.6％。
实施例8
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过40目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为1.6％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的40倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为50mpa，提取次数为1次，提取时间为3min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为67.8％。
实施例9
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过100目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为2％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的10倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为25mpa，提取次数为1次，提取时间为7min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为43.7％。
实施例10
首先，以干燥的红豆杉的枝叶为原料，粉碎，过100目筛，称取5g红豆杉的枝叶粉末。向原料粉末中加入体积分数为0.4％胶束提取溶剂(n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液)，胶束提取溶剂的加入体积(ml)为红豆杉的枝叶粉末质量(g)的50倍。然后，将上述混悬液置于真空包装袋内密封投放到高压破碎提取装置内，提取压力为300mpa，提取次数为1次，提取时间为7min。最后，将高压破碎后的提取液在5000rpm转速下离心10min，将滤液与滤渣分开，所得滤液即为紫杉醇提取液。通过高效液相色谱检测分析，根据红豆杉枝叶中紫杉醇的含量以及提取液中紫杉醇的含量，计算出紫杉醇的提取率为69.3％。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，并非对本发明作任何形式上的限制。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
1.一种红豆杉枝叶中紫杉醇的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
将红豆杉枝叶粉碎，得到红豆杉枝叶粉末；
将所述红豆杉枝叶粉末与胶束提取溶剂混合进行浸泡，得到混合液，所述胶束提取溶剂为n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵溶液；
将所述混合液进行超高压破碎提取，得到紫杉醇提取液，所述超高压破碎提取的压力为25～300mpa。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述胶束提取溶剂中n-(3-氢化松香酸酰-2-羟基)丙基-n,n,n-三乙醇基氯化铵的体积分数为0.4～2％。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述红豆杉枝叶粉末的粒度为40～200目。
4.根据权利要求1或2或3所述的提取方法，其特征在于，所述红豆杉枝叶粉末与胶束提取溶剂的用量比为1g:10～50ml。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述浸泡的时间为6～24h。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述混合液置于真空包装袋密封后再进行超高压破碎提取。
7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述超高压破碎提取的时间为1～15min。
8.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述超高压破碎提取的温度不高于室温。
9.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述超高压破碎提取后还包括将所得提取液离心，得到所述紫杉醇提取液。
10.根据权利要求9所述的提取方法，其特征在于，所述离心的转速为5000rpm，时间为10min。
技术总结