本发明属于医药化工技术领域，具体的，本发明涉及一种地纽福索钠的精制方法。
背景技术：
地纽福索钠(denufosoltetrasodium)，cas号：318250-11-2，化学名为p1-(2’-脱氧胞苷5’-)p4-(尿苷5’-)四磷酸酯·四钠2'-deoxycytidine(5')tetraphospho(5')uridinetetrasodium，化学式如下所示：
地纽福索是一种p2y2受体激动剂，通过作用于p2y2受体的杯状细胞的膜和结膜上皮细胞，从而提高细胞内钙离子浓度，促进粘蛋白和水的分泌，改善角膜上皮障碍。除此之外，也可用于治疗鼻窦炎、中耳炎，鼻泪管堵塞，干眼病和视网膜脱落。
目前，关于地纽福索钠的制备方法报导较少，大多数都是使用阳离子交换柱与阴离子交换柱交替洗脱的方法，具体的：
国内专利zl200780028646.9于2012.03.14公开了一种二(嘧啶核苷5’-)多磷酸(包括地纽福索)的制备方法，在二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、甲酰胺、吡啶、二
国内专利zl00809735.6于2004.04.07公开一种地纽福索钠的结晶以及其制备方法，该制备方法通过与活性炭色谱联用的阴离子交换色谱来纯化，该方法分离收率为22％。
国内专利zl201910148349.2于2019.09.10公开了一种p1,p4-二(尿苷5’-)四磷酸盐(i)的制备方法，该方法使用金属钙盐，优选无水氯化钙，催化活化式(ⅲb)所示化合物与式(ⅲa)所示化合物反应。
地纽福索在制备过程中，容易产生up5dc和up6dc等高分子量杂质，见表1，该类杂质特点是磷酸链长，且久置易形成不溶性微粒沉淀析出。使用阳离子交换柱与阴离子交换柱交替洗脱的方法，虽能有效地去除高分子量杂质，但洗脱过程中会产生大量的水，且生产中对设备有一定的要求，操作不便，因此需要一种更加简便的方法代替传统的阳离子交换柱与阴离子交换柱交替洗脱的方法，从而克服地纽福索钠制备过程中步骤复杂，能耗损失大的问题。
表1杂质up5dc和up6dc
综上可知，开发一种操作简单且经济环保的地钮福索钠制备/精制工艺是本领域尚待解决的技术问题。本方案通过在工艺过程中加入特定比例的钙盐，实现仅使用过滤重结晶的方法，即得到高纯度的地纽福索钠原料药，且所得的地纽福索钠原料药用于制备制剂特别是液体制剂时，久置不产生沉淀以及浑浊现象。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种地纽福索钠的制备方法，该方法操作简单，能耗较低，且所得的地纽福索钠原料药符合后续制剂工艺的需要。
具体的，本发明所述的地纽福索钠的制备方法，采用特定的反应有机溶剂和钠盐成盐后，加入特定的钙盐，过滤杂质后，在特定的有机溶剂中析晶，得到高纯度的地纽福索钠精品，且所得的地纽福索钠用于制备制剂，久置不产生沉淀以及浑浊现象。
本发明的上述有益效果通过以下技术方案实现。
一种地纽福索钠的制备方法，包含以下步骤：
a)地纽福索粗品加入到第一有机溶剂溶解后，加入钠盐后加热至55～65℃，成盐反应1～3小时，加入第二有机溶剂乙醇，乙醇与第一有机溶剂的体积比为1～3:1，降温至-5～5℃析晶，过滤得到地纽福索钠粗品；
b)将地纽福索钠粗品加入水中，地纽福索钠粗品与水的质量比为1:5～10，使用浓盐酸调ph至1.5～4，加入钙盐搅拌溶解，再加入氢氧化钠调ph至6～7，过滤后加热至45～55℃，加入醇溶液析晶，得到地纽福索钠精品。
本发明中，钙盐的种类和比例，地纽福索钠粗品与水的质量比以及ph条件是实现技术效果的关键之一。具体的，当钙盐为氯化钙或葡萄糖酸钙，钙盐与地纽福索钠粗品的摩尔质量比为0.05～0.25:1时，长链磷酸杂质更容易与钙盐发生沉淀。而地纽福索钠粗品与水的质量比为1:7，浓盐酸调ph至2～3时，钙盐与磷酸杂质的结合更为充分。
更具体的，本发明所述的地纽福索钠的制备方法，所述步骤b)中，钙盐为氯化钙，钙盐与地纽福索钠粗品的摩尔质量比为0.1:1。
本发明中使用的第一有机溶剂，浓度以及钠盐的种类及比例是实现技术效果的关键之一，当第一有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺，二氧六环或四氢呋喃，第一有机溶剂与地纽福索粗品的体积质量比为5～10:1，钠盐为醋酸钠，碳酸钠或者碳酸氢钠，地纽福索粗品与钠盐的摩尔质量比为1:4～8时，有利于地纽福索的成盐反应进行，地纽福索的成盐率较高。
具体的，本发明所述的地纽福索钠的制备方法，所述步骤a)中，第一有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺，第一有机溶剂与地纽福索粗品的体积质量比为7:1，所述钠盐为醋酸钠，地纽福索粗品与钠盐的摩尔质量比为1:5。
本发明中成盐过程的温度、反应时间以及第二有机溶剂乙醇的比例也是实现技术效果的关键之一，当加热温度为60℃，成盐反应时间为2小时，加入乙醇后析晶至0℃，乙醇与有机溶剂的体积比为2:1时，成盐过程中产生的杂质含量较少，成盐后地纽福索钠的粗品纯度更高。
本发明中，析晶溶剂的种类以及浓度也是实现技术效果的关键之一，当所述步骤b)中，醇溶液为甲醇，乙醇或异丙醇，醇溶液与地纽福索钠粗品的体积质量比为10～20:1时，所得的地纽福索钠的纯度收率较高。
具体的，本发明所述的地纽福索钠的制备方法，所述步骤b)中，醇溶液为甲醇，醇溶液与地纽福索钠粗品的体积质量比为15:1。
本发明中，所述步骤b)中，加入的氢氧化钠的目的将地钮福索转为钠盐，其可以是氢氧化钠固体，也可以是不同浓度的氢氧化钠溶液；优选的，所述氢氧化钠为质量浓度为40-60％氢氧化钠水溶液；最优选的，所述氢氧化钠为质量浓度为50％氢氧化钠水溶液。
本发明的一个优选的地纽福索钠的制备方法，包含以下步骤：
a)地纽福索粗品加入到n,n-二甲基甲酰胺，n,n-二甲基甲酰胺与地纽福索粗品的体积质量比为7:1，溶解后，加入醋酸钠饱和水溶液，地纽福索粗品与醋酸钠的摩尔质量比为1:5，加热至60℃，成盐反应2小时，加入乙醇，乙醇与n,n-二甲基甲酰胺的体积比为2:1，降温至0℃析晶，过滤得到地纽福索钠粗品；
b)将地纽福索钠粗品加入水中，地纽福索钠粗品与水的质量比为1:7，使用浓盐酸调ph至2～3，加入氯化钙搅拌溶解，氯化钙与地纽福索钠粗品的摩尔质量比为0.1:1，再滴加入50％的氢氧化钠水溶液调ph至6～7，过滤后加热至50℃，加入甲醇溶液析晶，甲醇溶液与地纽福索钠粗品的体积质量比为15:1，得到地纽福索钠精品。
本发明与现有技术相比具有如下突出的优点及有益效果：
1、提供一种地纽福索钠的制备方法，克服了地纽福索钠制备过程中使用阳离子交换柱与阴离子交换柱交替洗脱步骤复杂，能耗损失大的问题。
2、使用本申请精制方法所得的地纽福索钠精品，用于后续的制剂制备，久置不产生沉淀以及浑浊现象。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但发明的实施方式不限于此。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
实施例1
采用如下步骤精制地纽福索钠：
a)将100g地纽福索粗品(纯度90％以上)加入到700mln,n-二甲基甲酰胺中，溶解后，将53.0g醋酸钠配制成饱和水溶液加入上述体系，加热至60℃，成盐反应2小时，加入1400ml乙醇，降温至0℃析晶，过滤得到地纽福索钠粗品99.8g；
b)将地纽福索钠粗品加入700ml水中，使用浓盐酸调ph至2.5，加入1.3g氯化钙搅拌溶解，再滴加入50％的氢氧化钠水溶液调ph至6～7，过滤后加热至50℃，加入1500ml甲醇溶液析晶，得到地纽福索钠精品97.5g，收率87.7％，纯度99.3％。
收率％＝地纽福索钠精品摩尔质量/地纽福索粗品摩尔质量*100％
实施例2～7以及对比例1～4
实施例2～7以及对比例1～4投料方式及操作方法与实施例1相同。反应物，反应条件及收率和纯度见表2。
表2实施例2～7以及对比例1～4实验条件与结果
由表2数据可知，实施例1所述的制备方法采用的钙盐为氯化钙时，收率以及纯度较高，而对比例3所述的制备方法采用了氯化镁时，镁盐与磷酸杂质的结合率相对较低，因此，所得的地纽福索钠精品纯度较低。由对比例2和对比例4可以看出，过高或者过低的钠盐用量不利于地纽福索钠盐的形成。由对比例1和对比例2可以看出，成盐反应后加入的乙醇量对后续所得的地纽福索钠精品收率以及纯度有一定的影响，当加入的乙醇量过低，粗品析出量较低，导致最终精品收率也较低，当加入的乙醇量过高，相关杂质会一并析出，导致最终精品的纯度会较低。由对比例1和对比例2可以看出析晶溶剂的种类以及浓度，对地纽福索钠精品的纯度收率也有一定影响，当溶剂为丙酮时，析晶效果较差，收率以及纯度较低，而析晶溶剂量较低时，地纽福索钠精品析出量较低，收率较低，析晶溶剂量较高时，相关杂质一并析出，精品纯度较低。而实施例1至7所有参数落入本发明的范围内，选择了合适的反应溶剂、盐以及反应条件，使得地纽福索钠精品的收率以及纯度得到保证，有效代替传统的阳离子交换柱与阴离子交换柱交替洗脱的方法，从而克服地纽福索钠制备过程中步骤复杂的缺点。
实施例8
以上述实施例1-3，对比例1-3以及依据专利zl200780028646.9制备所得的地纽福索钠为原料，并以相同的处方制备地纽福索钠滴眼液，将其地纽福索钠滴眼液于25℃考察3个月，采用中国药典通则(0903)不溶性微粒光阻法检测记录每个供试品容器(份)中含10μm及以上的微粒数和25μm及以上的微粒数，结果见表3所示。
表3不同地纽福索钠滴眼液的不溶性微粒检测结果
按照中国药典通则(0903)不溶性微粒结果判定(2)每个供试品容器(份)中含10μm及以上的微粒数不得过6000个，含25μm及以上的微粒数不得过600个。由表3可知，本方案制备所得的地纽福索钠与阳离子交换柱与通过阴离子交换柱交替洗脱所得的地纽福索钠，在其滴眼剂的不溶性微粒数量明显低于对比例制备得到地纽福索钠滴眼剂，显示出本方案通过钙盐与磷酸杂质结合，可以有效地将地纽福索钠原料药制备过程中产生的磷酸杂质除去。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。
1.一种地纽福索钠的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
a)地纽福索粗品加入到第一有机溶剂溶解后，加入钠盐后加热至55～65℃，成盐反应1～3小时，加入第二有机溶剂乙醇，乙醇与第一有机溶剂的体积比为1～3:1，降温至-5～5℃析晶，过滤得到地纽福索钠粗品；
b)将地纽福索钠粗品加入水中，地纽福索钠粗品与水的质量比为1:5～10，使用浓盐酸调ph至1.5～4，加入钙盐搅拌溶解，再加入氢氧化钠调ph至6～7，过滤后加热至45～55℃，加入醇溶液析晶，得到地纽福索钠精品。
2.根据权利要求1所述的地纽福索钠的制备方法，其特征在于，所述步骤a)中，第一有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺，二氧六环或四氢呋喃，第一有机溶剂与地纽福索粗品的体积质量比为5～10:1，所述钠盐为醋酸钠，碳酸钠或者碳酸氢钠，地纽福索粗品与钠盐的摩尔质量比为1:4～8。
3.根据权利要求2所述的地纽福索钠的制备方法，其特征在于，所述步骤a)中，第一有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺，第一有机溶剂与地纽福索粗品的体积质量比为7:1，所述钠盐为醋酸钠，地纽福索粗品与钠盐的摩尔质量比为1:5。
4.根据权利要求1所述的地纽福索钠的制备方法，其特征在于，所述步骤a)中，加热温度为60℃，成盐反应时间为2小时，加入第二有机溶剂乙醇后析晶至0℃，第二有机溶剂乙醇与第一有机溶剂的体积比为2:1。
5.根据权利要求1所述的地纽福索钠的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中，地纽福索钠粗品与水的质量比为1:7，浓盐酸调ph至2～3，加入钙盐搅拌溶解，再滴加入40-60％的氢氧化钠水溶液调ph至6～7。
6.根据权利要求1所述的地纽福索钠的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中，钙盐为氯化钙或葡萄糖酸钙，钙盐与地纽福索钠粗品的摩尔质量比为0.05～0.25:1。
7.根据权利要求6所述的地纽福索钠的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中，钙盐为氯化钙，钙盐与地纽福索钠粗品的摩尔质量比为0.1:1。
8.根据权利要求1所述的地纽福索钠的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中，醇溶液为甲醇，乙醇或异丙醇，醇溶液与地纽福索钠粗品的体积质量比为10～20:1。
9.根据权利要求8所述的地纽福索钠的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中，醇溶液为甲醇，醇溶液与地纽福索钠粗品的体积质量比为15:1。
技术总结